白头翁散、苍术香连散中非法添加喹乙醇、乙酰甲喹检查法——高效液相色谱法检测限的测定

对白头翁散、苍术香连散中非法添加喹乙醇、乙酰甲喹检查方法-高效液相色谱法进行了检测限的测定,采用Rp18色谱柱,流动相为乙腈-0.01mo1/L磷酸二氢钾溶液(1∶9)(用三乙醇胺调节pH 6.0),二极管阵列检测器,采集波长范围200～400 nm,分辨率1.2nm,提取色谱波长365nm.白头翁散、苍术香连散中非法...     

HPLC-PDA法测定3种兽药中非法添加非泼罗尼

建立了3种兽药中非法添加非泼罗尼的HPLC-PDA检查方法。采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以水-乙腈为流动相,梯度洗脱;二极管阵列检测器,提取波长为220 nm。通过液相色谱保留时间、峰纯度检查和光谱相似度检查对非法添加物进行确证。结果表明,该色谱条件下非泼罗尼与其他物质分离良好。非泼罗尼在阿维菌素粉、甲基吡啶磷可湿性粉、环丙氨嗪预混剂中的平均回收率分别为100.0%(RSD=1.6%)、108.7%(RSD=1.1%)、109.3%(RSD=1.2%)。本方法简便、准确、可靠,可用于检查以上3种兽药中非法添加的非泼罗尼。     

氟苯尼考注射液中非法添加多西环素检查方法的建立

为建立氟苯尼考注射液中非法添加多西环素高效液相检查方法,研究使用C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以醋酸盐缓冲液[0.25 mol/L醋酸铵溶液-0.1 mol/L乙二胺四醋酸二钠-三乙胺(100∶10∶1),调节p H值至8.8]-乙腈(85∶15)为流动相,采用二极管阵列检测器,波长采集范围为200~400 nm,记录色谱图波长为269 nm,流速为1 m L/min,进样量为10μL。结果表明,多西环素进样浓度在0.015~0.96 mg/m L范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=1.0000);平均回收率为99.4%(n=9),RSD为0.3%。本方法简便、准确、可行,适用于氟苯尼考注射液中非法添加多西环素的检测。     

HPLC-PDA法检测17种兽药中非法添加氨茶碱、二羟丙茶碱的研究

建立了17种兽药中非法添加氨茶碱和二羟丙茶碱的高效液相色谱法,以十八烷基键合硅胶为填充剂,0.025mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇为流动相,二极管阵列检测器全波长(200～400nm)扫描,270nm进行测定,并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。在此液相色谱条件下,氨茶碱和二羟丙茶碱与其他物质峰能很好的分离,两种药物在0.5～200μg/m范围内线性关系良好,相关系数r均为1.0000。按外标法以峰面积计算,氨茶碱和二氢丙茶碱的平均回收率为92.6%～108.3%,RSD为0.05%～3.7%。结果表明,该方法适合兽药中氨茶碱和二羟丙茶碱的检测。     

高效液相色谱-二极管阵列检测器用于兽药非法添加物质检查的优劣性分析

阐述了高效液相色谱-二极管阵列检测器在兽药非法添加物质检查应用中的优势与局限:其优势在于方法特异性强、仪器普及面广、操作简单;局限在于无法鉴别光谱图库外的未知化合物,部分化合物在不同色谱条件下光谱图差异大难溯源,无法检出无紫外吸收的化合物。另外,进一步对应用该法的发展趋势进行了展望,以期对兽药非法添加打击治理工作提供参考。     

超高效液相色谱-二极管阵列法测定清肺止咳散中非法添加的4种解热镇痛药

建立超高效液相色谱-二极管阵列检测法(UPLC-PDA法)测定清肺止咳散中非法添加对乙酰氨基酚、氨基比林、安替比林、安乃近4种药物。采用反相超高效液相色谱法,用带有二极管阵列检测器的高效液相色谱仪(UPLC-PAD)对对乙酰氨基酚、氨基比林、安替比林、安乃近4种解热镇痛药进行色谱分离和快速筛查。以ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱为分离柱,柱温35℃;流动相体系为0.05 M醋酸铵水溶液(A项)、甲醇(B项),进行梯度洗脱;流速0.4 mL/min;进样量5μL;检测波长为245 nm。通过保留时间、光谱图、峰面积等参数对对乙酰氨基酚进行定性定量检测。结果显示,对乙酰氨基酚、氨基比林、安替比林在2～100μg/mL的范围内线性关系良好(R~20.999),安乃近在4～200μg/mL的范围内线性关系良好(R~20.999);添加对乙酰氨基酚、氨基比林、安替比林各2 mg/g,添加安乃近4 mg/g,信噪比(S/N)3,确定为方法的检测限;添加对乙酰氨基酚、氨基比林、安替比林各5 mg/g,添加安乃近10 mg/g,信噪比(S/N)10,确定为方法的定量限;清肺止咳散在3个添加水平的回收率为90%～105%,批内批间变异系数均小于10%,准确度和精密度良好,完全满足检测需求。该方法色谱分离较好,分析速度较快,前处理简单,适用于清肺止咳散中非法添加对乙酰氨基酚等4种解热镇痛药物的定性定量检测。     

HPLC-PDA法测定氟苯尼考注射液、柴胡注射液中非法添加培氟沙星、洛美沙星

建立了氟苯尼考注射液、柴胡注射液中非法添加培氟沙星、洛美沙星的HPLC-PDA检查方法。采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸溶液-乙腈-甲醇(85.5∶7.0∶7.5)为流动相;二极管阵列检测器,提取波长为277 nm。通过液相色谱保留时间、峰纯度检查和光谱相似度检查对非法添加物进行确证。结果表明,该色谱条件下培氟沙星、洛美沙星与其他物质分离良好。培氟沙星在氟苯尼考注射液、柴胡注射液中的平均回收率分别为101.4%(RSD=0.2%)、100.0%(RSD=0.4%),洛美沙星在氟苯尼考注射液、柴胡注射液中的平均回收率分别为101.2%(RSD=0.1%)、99.8%(RSD=0.5%)。本方法简便、准确、可靠,可用于检查氟苯尼考注射液、柴胡注射液中非法添加的培氟沙星、洛美沙星。     

HPLC-DAD法测定兽药恩诺沙星注射液中非法添加呋塞米

建立了兽药恩诺沙星注射液中非法添加呋塞米的HPLC-DAD检查方法。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以水-四氢呋喃-冰醋酸(70∶30∶1)为流动相;柱温30℃;流速1.0 mL/min;进样量20μL;二极管阵列检测器检测,采集波长范围为190～400 nm,提取波长为272 nm。通过液相色谱保留时间、紫外吸收光谱和峰纯度分析对非法添加物进行确认。结果表明,呋塞米与其他组分在色谱条件下分离情况良好。呋塞米在2.0～100.0μg/mL范围内线性关系良好,R²=0.9999。回归方程为：Y=1.0629X+0.0685,R²=1.0000。按高、中、低三个浓度水平添加呋塞米,每个浓度水平各平行配制3份阳性添加样品溶液进行测定,每个平行进样2次,测得平均回收率为100.8%,RSD=1.0%。方法的检测限为1.0μg/mL。方法准确,可靠,可以用于检查兽药恩诺沙星注射液中非法添加呋塞米。     

高效液相色谱-四级杆/线性离子阱质谱法筛查兽药中非法添加物的研究

建立了一整套利用高效液相色谱-四级杆／线性离子阱质谱对兽药中非法添加物进行筛查的方法。首先,通过比较样品与阴性对照的差异,采用Q3全扫描方式获取靶目标化合物的母离子质荷比（214．2Da）,再对该化合物的质谱参数、色谱分离条件等进行逐一优化,最后利用线性离子阱质谱的“多反应监测触发增强子离子扫描”功能对靶目标化合物与相应标准物质进行谱库匹配分析。综合靶目标化合物的保留时间（6．92min）、离子质荷比、特征碎片离子及谱库匹配度（93．2）等参数,确证了该品牌的部分兽药中非法添加了氯丙那林。本研究为兽药中非法添加物筛查及定性确证提供了一个有效的思路与方法。     

HPLC-PDA法测定17种兽药中非法添加多西环素

建立了17种兽药中非法添加多西环素的HPLC-PDA法。采用十八烷基键合硅胶为填充剂,以醋酸盐缓冲液-乙腈(80:20)为流动相,二极管阵列检测器进行全波长(200~400 inia)扫描,检测波长为280 nm,并通过液相色谱保留时间、紫外光谱信息和峰纯度检查,对非法添加物质进行定性鉴别和定量测定。结果表明,该色谱条件下,多西环素与其他物质峰分离良好。多西环素在5~500μg/mL浓度范围内线性良好,回收率在86.5%~118.1%之间,RSD为0.2%~4.5%,检测限为0.5 mg/g。本方法准确、可靠、重现性好,可用于兽药制剂中多西环素的定性和定量检测。     

氟苯尼考注射液中非法添加二氧丙嗪的检测方法研究

建立氟苯尼考注射液中非法添加的二氧丙嗪的检测方法。对1批氟苯尼考注射液照《中国兽药典》2010版HPLC法进行含量测定时,发现未知物质峰。采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱（UHPLC-Q/TOF MS）对该批检品进行筛查,发现该添加物疑似二氧丙嗪,并采用高效液相色谱-二极管阵列检测法（HPLC-DAD）对二氧丙嗪进行定性和定量检测。结果显示,高效液相色谱法二氧丙嗪在1 ~ 100 μg/mL浓度范围内的线性良好(r=1.0000),平均回收率为99.5％,RSD为0.3％。本方法专属性强,灵敏度高,重现性好,适用于氟苯尼考注射液中非法添加二氧丙嗪的检测。     

HPLC-QTOF和HPLC-MS/MS筛查与确证兽药中非法添加氧氟沙星等15种喹诺酮类药物

采用高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(HPLC-QTOF)筛查并确证1批监督抽检的兽药硫酸黏菌素注射液中的未知添加物,并建立液相色谱-三重四级杆质谱法(HPLC-MS/MS)定量检测20种兽药中15种该类化合物的方法。采用HPLC-QTOF筛查兽药非法添加物时,发现1批硫酸黏菌素注射液中含有未知添加物,与建立的一级谱库中氧氟沙星匹配分数很高,疑似为氧氟沙星。通过二级质谱碎片离子的推导及与对照品二级质谱比对,确证其为氧氟沙星。采用HPLC-MS/MS建立了定量检测20种常见兽药中非法添加氧氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、达氟沙星、依洛沙星、洛美沙星、麻保沙星、诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星、司帕沙星、二氟沙星、奥比沙星、恶喹酸、氟甲喹共15种喹诺酮类化合物的方法,15种喹诺酮类化合物在各自的线性范围内均呈现良好的线性关系,添加回收率为85.0%～100.0%,相对标准偏差(RSD,n=3)均不高于15.0%。通过检查该样品中的非法添加物,建立了简便、快速、灵敏的定性定量检测方法,为打击当前兽药中非法添加化合物建立技术标准提供参考,为兽药处方外非法添加筛查与确证提供思路。     

氟喹诺酮类药物粉剂中非法添加四种喹噁啉类药物的UPLC检测方法研究

建立了超高效液相色谱法测定氟喹诺酮类药物粉剂中非法添加喹乙醇、乙酰甲喹、卡巴氧及喹烯酮的方法。采用purospher RP-18色谱柱(2.1 mm×100 mm,粒径2.0μm)分离四种喹噁啉类药物,以磷酸溶液和甲醇-乙腈(7.5∶7.0)为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 m L/min,二极管阵列检测器检测,采集波长范围为200~400 nm,分辨率为1.2 nm,记录光谱图和365 nm波长处的色谱图。结果显示,四种喹噁啉类药物的浓度在0.2~100μg/m L范围内的线性良好,相关系数r均为0.9999,回收率在98.0%~100.2%范围内,RSD在0.27%~0.89%之间,检测限200 mg/kg。本方法快速、准确,可用于氟喹诺酮类粉剂中非法添加喹噁啉类药物的定性和定量检测。     

麻杏石甘口服液、杨树花口服液中非法添加黄芩苷HPLC-PDA检测方法的建立

为建立麻杏石甘口服液、杨树花口服液中非法添加黄芩苷的测定方法,采用十八烷基键合硅胶为填充剂,甲醇-水-磷酸(V∶V∶V=45∶55∶0.2)为流动相,等度洗脱,流速为1.0 mL/min,二极管阵列检测器,提取波长为278 nm。采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。在此液相色谱条件下,黄芩苷与其他物质峰分离良好。按外标法以峰面积计算,黄芩苷在麻杏石甘口服液和杨树花口服液中的平均回收率分别为99.6%和100.2%,RSD分别为0.6%和0.8%。结果表明该检测方法简便、准确、可靠,可用于测定麻杏石甘口服液、杨树花口服液中非法添加的黄芩苷。     

HPLC-PDA法测定恩诺沙星注射液中非法添加乙酰甲喹和水杨酸

建立了高效液相色谱法测定恩诺沙星注射液中非法添加乙酰甲喹、水杨酸含量的方法。试验采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱,以0.025 moL/L磷酸溶液-乙腈(85∶15,V/V)为流动相,流速为1.0 m L/min,二极管阵列检测器进行全扫描和232 nm波长测定。结果表明乙酰甲喹在0.5～20μg/m L范围内线性良好,R~2=1.000,平均回收率为99.62%;水杨酸在1.0～50μg/m L范围内线性良好,R~2=1.000,平均回收率为99.51%;RSD在0.07%～3.44%之间。本方法准确、可靠、重现性好,可用于恩诺沙星注射液中非法添加乙酰甲喹、水杨酸的定性和定量检测。     

UPLC-PDA法测定麻杏石甘口服液中非法添加物盐酸溴己新

目的:建立超高效液相色谱-二极管阵列检测法(UPLC-PDA法)测定麻杏石甘口服液中非法添加物盐酸溴己新的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,用带有二极管阵列检测器的高效液相色谱仪(HPLC-PAD)对盐酸溴己新进行色谱分离和快速筛查。以ACQUITY UPLC C18色谱柱为分离柱,柱温:35℃;流动相体系:流动相A为5%冰醋酸,流动相B为甲醇,进行梯度洗脱;流速:0.3 m L/min;进样量:10μL;检测波长为248 nm。通过保留时间、光谱图、峰纯度等参数对盐酸溴己新进行定性定量检测。结果:盐酸溴己新在1.0～100.0μg/mL的范围内线性关系良好(R2=0.999);麻杏石甘口服液中添加盐酸溴己新1.5 mg/mL,信噪比(S/N)3,确定为方法的检测限;添加5 mg/mL,信噪比(S/N)10,确定为方法的定量限;麻杏石甘口服液在5 mg/mL、10 mg/mL、20 mg/mL盐酸溴己新添加水平的回收率为95%～105%,批内批间变异系数均小于10%,准确度和精密度良好,完全满足检测需求,而且峰纯度角与阈值符合要求。结论:该方法色谱分离较好,分析速度较快,前处理简单,适用于麻杏石甘口服液中非法添加盐酸溴己新的定性定量检测。     

HPLC-DAD法测定复方麻黄散中非法添加喹烯酮

建立了复方麻黄散中非法添加喹烯酮的HPLC-DAD检查方法。以C₁₈柱为固定相,甲醇-水(60∶40,V∶V)为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温30℃,二极管阵列检测器检测,采集波长范围为190～400 nm,提取波长为314 nm。通过液相色谱保留时间、紫外吸收光谱和峰纯度分析对非法添加物进行确认。结果表明,该色谱条件下喹烯酮与其他物质分离良好。喹烯酮在2.0～100.0μg/mL范围内线性关系良好,R²=0.9999。喹烯酮在复方麻黄散中的平均回收率为101.4%,RSD为0.5%;方法的检测限为0.25 g/kg。该方法简便,准确,可靠,可以用于检查复方麻黄散中非法添加喹烯酮。     

液相色谱紫外-可见光检测器与光电二极管阵列检测器在饮料中合成着色剂测定中应用对比

本文综述高效液相色谱中普通紫外-可见光检测器与光电二极管阵列检测器的结构原理,通过实验人工合成色素的测定,同时用两种检测器串联,通过光谱吸收图分析对比的方法,发挥日常检测中定性的应用。     

HPLC-PDA法测定柴胡注射液中非法添加利巴韦林的研究

本试验建立了柴胡注射液中非法添加抗病毒药利巴韦林的高效液相色谱－二极管阵列检测器(HPLC-PDA)检测方法。色谱条件：采用Waters Atlantis T3 5μm,4.6×250mm的色谱柱;以水(用稀硫酸调节pH值至2.5±0.1)为流动相;柱温：30℃;进样量：10μl。采用二极管阵列检测器,采集波长范围为190nm~400nm,分辨率为1.2nm。结果显示,利巴韦林的线性范围为0.64μg/ml ~200μg/ml,;线性方程为Y=3305.68X 30933.7,r₂=0.9999, 利巴韦林平均回收率105.2%,RSD为2.7%。结果表明,本方法准确可靠,适用于柴胡注射液中非法添加的利巴韦林违禁药物进行检测。     

HPLC-PDA法测定黄芪多糖注射液中非法添加利巴韦林的试验

为了快速检测黄芪多糖注射液中非法添加的化学物质,本试验建立了黄芪多糖注射液中非法添加抗病毒药利巴韦林的高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA)检测方法.色谱条件;氢型阳离子交换树脂,碘化交联的苯乙烯-二乙烯基共聚物为填充剂,以水(用硫酸调节pH值至2.5±0.1)为流动相;流速为0.3 mL/min;采用二极管阵列检测器,采集波长范围为200 nm～400 nm,分辨率为1.2 nm,记录207 nm波长处的色谱图;进样量20 μL.理论板数按利巴韦林峰计算应不低于3 000.结果显示,利巴韦林平均回收率100.3％;线性方程为y=46 083x+106,相关系数R2 =0.999 9.本文建立的测定方法简便、灵敏、准确、快速、重现性好,可对黄芪多糖注射液中非法添加的利巴韦林违禁药物进行定性和定量检测.