棉花黄萎病种子带菌检查及分离方法

 (1)在陝西关中所采的黄萎病病株棉籽內部,常带有一些真菌和細菌,虽經用浓硫酸脫絨,这些菌类仍能从棉籽本身的組織內向培养基伸展。有时用低倍鏡直接检查虽亦能見到輪枝菌从棉籽內露出,但由于其他菌类的生长速度較快,以致輪枝菌常被干扰,无从在洋菜上发展,故用一般方法很难分离和检查到棉籽所带的輪枝菌。     

棉花黄萎病种子内部带菌的研究

1964—1966三年共分离采自严重黄萎病株下部的尚未开裂成铃种子11505粒,平均内部带菌率<0.026%。系统分离棉铃各部位,其带菌率的趋势为:铃柄>铃托>胎座。从已吐絮的成熟铃内种子内部带菌分析结果看:1964年共分离外部带菌率约为5%的种子1557粒,全部未长微菌核。1966年分离病铃内成熟种子4049粒,只有一粒在种壳上长出了微菌核,带菌率为0.025%。用浓胞子液在田间灌注接种初裂铃,依受病程度不同,种子内部带菌率为0.93—2.4%。青铃注射接种的内部带菌率为10.40—70.40%。新吐絮铃喷洒接种,虽保湿1—2天,种子内部未分离到病菌。说明在菌量大,营养及温、湿度条件非常适宜时,病菌也可自种壳侵入内部,使有相当高的带菌率。通过三年的试验,作者肯定在自然情况下黄萎病菌主要附着在棉籽短绒上。内部带菌率极低。在轻病或无病棉株上选收正常吐絮铃内种子,内部基本不带菌。     

土壤棉花黄萎病菌分离方法研究

 棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)在土壤中主要以微菌核的形状存在。研究病菌在土壤中的消张动态,急需解决简便可行的分离方法。     

棉花黄萎病种籽带菌检验

黄萎病菌生长缓慢,使用普通方法作带菌分析,常因镰刀菌茂密生长而不易看到,仇元等的种子检验法操作程序复杂,我们在现有方法的基础上,进行了一些探索。由于病原菌能以棉籽上生活,如果具备一定温湿度,利用种子内的养分使其生长估计有一定的可能性。据此我们设计了用流水直接冲洗棉籽、湿室进行培养的方法。试验方法:1963年4月22日取1962年在当地采得的黄萎病株种籽50粒,放入500毫升三角瓶中,瓶口用纱布罩紧,流水(系用本所自流井)冲洗24小时后,放入无菌室内,再用灭菌水振洗三次,以备接种。     

棉花黄萎病接种方法研究初报

抗(黄)萎性已成为棉花品种选育工作的主要指标之一。而抗病育种要求准确可靠的鑑定方法。为寻找能准确地反映出品种抗病性,又符合自然侵染情况并达到一定发病株率的鑑定方法,我们根据该病侵染与传播的特点,并参照一些有关资料,进行了各种接种方法效果比较的试验。试验处理分四种途径、10种接种方法: 一、通过土壤接种的方法有:1.施病棉杆:播种前3星期将碎病棉杆施入5—8厘米深的土层里,每盆施用20克,对照为施健康棉杆;2.施带菌大麦粉培养物:播种前每盆施带菌大麦粉培养物150克,对照为不带菌的大麦粉培养基;3.浇灌孢子悬浮液:于子叶期棉苗根际处每盆浇灌10％的孢子悬浮液100毫升,对照为同量灭菌水。     

棉花黄萎病带菌籽的消毒技术研究简报

对棉籽所携带的黄萎病病原菌在真空减压条件下进行检疫消毒处理,为植物病害的检疫工作开辟了一条安全有效简便易行的途径。 方法 1.真空熏蒸消毒机 ZX-350型真空熏蒸消毒机真空容量0.35立方米(见示意图),抽气5分钟可达750毫升汞柱的真空度。真空泵经水流冷却,施药量由定量阀、定量瓶和施药阀严密控制,操作安全。     

分离土壤棉花黄萎病菌选择性培养基的筛选

 采用土壤检测稀释法、水筛法和不同土样接种量,对5种土壤浸提液改良培养基进行了比较研究。结果表明,土壤水筛法对土壤棉花黄萎病菌的检测效果优于稀释法,其菌落检测数增加4~10倍。培养基每皿0.25 g土样接种量的检测效果高于0.5 g和1g。5种测试培养基中,培养基D对分离土壤棉花黄萎病菌的选择性表现最好,其土壤接种体检测回收率达63.5%~83.3%.培养基D的组份为:土壤浸提液25 ml,KH₂PO₄ 1.5 g,K₂HPO₄ 4 g,尿酸钠0.2 g,半乳糖醛酸钠(果胶)1g,山梨糖1g,Dox盐2 ml,Tergitol NP-101ml,PCNB0.1g,琼脂17g,蒸馏水1000 ml,pH6.4~6.7。每1000ml融化培养基倒皿前加抗菌素液50 ml (含氯霉素0.05 g,链霉素0.05 g,青霉素-G盐0.05 g)。     

河南商丘地区棉花黄萎病菌分离鉴定和致病力分析

为探讨河南商丘地区棉花黄萎病菌的致病型群体变异,对该地区棉花上分离的8株单孢菌株的菌落形态、显微结构、致病力、ITS序列、系统进化及菌体蛋白等方面进行了研究。结果表明:这些菌株均属于棉花黄萎病菌Verticilliumdahliae;系统进化树显示8株菌株并没有聚在同一进化枝上;8株黄萎菌菌株存在致病力差异,SQ4菌株致病力最强,属于落叶型,而其它致病力较弱的7个菌株属于非落叶型;不同致病力的菌株间蛋白谱带存在差异。     

拮抗茄子黄萎病菌土壤放线菌的分离筛选和鉴定

为了研究土壤拮抗性放线菌对茄子黄萎病的生防价值,从陕西省延安市宝塔区与汉中地区土壤中分离、纯化获得154株具有纤维素降解活性的放线菌。采用平板对峙培养法进行初筛,用生长速率法对抑菌效果较好的菌株ZX-10-4进行抑菌谱的测定,并进行盆栽试验验证其对茄子黄萎病的防治效果,通过形态、培养特征及16S rDNA序列分析研究其分类地位。结果显示,有17株放线菌对茄子黄萎病菌抑菌效果较好且抑菌活性稳定,其中菌株ZX-10-4的抑菌活性最高,抑菌率达90.15%;活性菌株ZX-10-4发酵原液对茄子黄萎病的保护和治疗作用分别为70.00%和60.33%,稀释5倍液的防效也在50%以上。根据形态、培养特征、生理生化指标和16S rDNA序列分析,初步确定菌株ZX-10-4为白网链霉菌Streptomyces albireticuli的近似种。     

消毒土壤防治棉花黄萎病和枯萎病试验

根据試驗結果,用氯化苦进行土壤消毒对防治棉花黄萎病和枯萎病均有较好的效果。药剂消毒的有效距离与用药量成正相关,用药量每穴5毫升,其水平方向的有效距离为10—20厘米,10毫升为20—30厘米,作用范围可达土深30—40厘米。施药后覆盖土面,可以消灭土表的病菌,不覆盖则对土面的病菌无效。田間防治試驗的初步結果表明,应用氯化苦进行成片的土壤消毒,处理区黄、枯萎病株均低于前一年的发病基数及同年的对照区。用氧化苦消灭大田零星发病地点,效果可达89.3％。     

我国棉花黄萎病研究现状与方向

作者综述了我国棉花黄萎病发生与为害损失的概况、病害消长规律与气候因素、土壤中微菌核数量的动态关系及其病原菌致病性,生理分化类型,寄主范围,致病机理与品种抗病性机制及防治技术等方面的研究进展,并根据当前黄萎病猖獗为害、北方棉区出现成片病株严重落叶等阻碍棉花生产的突出问题,提出了加强对黄萎病的基础与分子生物学研究以及加速棉花抗病品种选育与有效药剂筛选等综合防治技术研究。     

棉花黄萎病生物防治试验续报

 棉花黄萎病(Verticililum albo-aturm)在我国北部棉区分布很广,为害至烈^[1,4,5]。选育抗病品种并将它繁殖推广须有十年以上的过程,而最后尚有失去抗病力的可能^[1,7]。因此有必耍找寻新的防治途径。     

棉籽带枯萎病菌检验方法的研究

棉籽带菌是远距离传病的主要途径。病棉株种子带菌率0.01—46.8%。带菌部位以种壳为主,但子叶、胚均带菌。棉籽上除带枯萎病菌外,还带有半棵、串珠、茄病、木贼等几种镰刀菌及其他杂菌,干扰检验。文中介绍一种选择性培养基,其成分为:甲基纤维素1克、KH_2PO_4克、蛋白胨5克、MgSO_4·7H_2O0.5克、K_2S_20.2克、KCl 0.6克,NH_4NO_30.3克、五氯硝基苯0.1克、蔗糖20克、链霉素0.1克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。应用其进行分离培养棉籽,可根据菌落形态特征及颜色反应,较容易地检验出棉花枯萎病菌。     

利用土壤拮抗性微生物防治棉花枯萎病

从棉株根围土壤中分离到２００多株土壤微生物。通过土壤微生物－棉枯萎病菌平板对峙培养,筛选出抑菌效果较好的７个菌株,即绿色木霉Ｔ－０３,芽孢杆菌Ｂ－０１、Ｂ－０３,放线菌Ａ－０３、Ａ－０６、Ａ－０７、Ａ－１９。用上述７个土壤拮抗菌进行棉花枯萎病田间小区防效试验的结果表明,Ｔ－０３对棉花枯萎病的防效最高,达７６．５％;４个放线菌株的防病效果在６０．５％～６５．１％之间,其中Ａ－０３对棉花出苗有一定抑制作用;Ｂ－０１、Ｂ－０３的防效分别是３６．４％和５４．０％。     

棉花凝集素的分离纯化及其对棉花枯萎病菌的影响

 通过几丁质柱层析和Sephadex G-75过滤,得到SDS-PAGE电泳显一条蛋白带,专性结合甘露糖和葡萄糖,能凝集兔血红细胞的棉花凝集素,分子量为13400。利用电镜和凝集素探针检测棉花枯萎病菌分生孢子表面结构,发现分生孢子壁的骨架成份是几丁质,甘露糖和葡萄糖位于分生孢子壁外层,半乳糖被甘露糖和葡萄糖复盖。分子量为13,400的棉花凝集素能凝集枯萎病菌分生孢子,并抑制分生孢子萌发。     

水稻白叶枯病稻种的带菌和检验

试验结果证明发生白叶枯病的病区稻种内有白叶枯病菌存活,同时也存在大量的能寄生消解病原细菌的噬菌体。病原细菌和噬菌体都存在于颖壳内;噬菌体的存活期比病原细菌为长,但病原细菌至少可以存活半年以上,作为下年初次侵染的来源。稻种内的细菌侵染秧苗的途径,目前尚不清楚,侵染以后有一个较长的潜育期是非常可能的。无病田的稻种内没有噬菌体或存活的病原菌,因此,检查稻种内噬菌体和活的细菌是很可靠的检验方法,已经在生产实践中得到证明。测定噬菌体是最简便的方法,灵敏度也高。由于吸附噬菌体的活细菌可在琼脂平板上形成噬菌斑,故测定噬斑菌的数目也是很好的检验方法,灵敏度虽不如测定游离噬菌体的方法简便,但它可以测出有活细菌的存在和它的数量。测定噬菌体的增殖也能准确检验是否有活细菌存在,但是方法还有待改进和简化。     

多菌灵对荧光假单胞杆菌的正向调控作用及其应用

报道了多菌灵对荧光假单胞杆菌Ｐ３２的正向调控作用。多菌灵和Ｐ３２均能大一定程度上防治棉花黄萎病,但单独使用的效果不理想。试验表明,Ｐ３２在培养条件下对多菌灵不敏感,而多菌灵可以提高Ｐ３２在棉花根际及土壤中的定殖存活量。用于土壤处理时,多菌灵最多可以分别使土壤和根际的Ｐ３２群体提高到１２．６和１３．８倍,用于种子处理时,则对土壤中Ｐ３２的群体影响较小,但仍能显著地提高根际Ｐ３２的群体数量。     

聚合草青枯病的发生规律及病原菌的研究

 高产优质饲料聚合草的青枯病,是七十年代发现的一种细菌性病害,分布在我国南方诸省,六至七月份为流行期,发病率一般为10~30%;严重地区高达90%以上,可形成毁灭性病害。该病侵害植株的维管束,使叶片青枯萎蔫和根部腐烂而死亡。对分离自病根的细菌,经形态、培养特征、生理生化特性、血清学反应及致病性等的鉴定,确认为青枯假单孢菌(Pseudomonas Solanacearum Smith),属于生理小种1(Race 1),生物型Ⅲ(BiotypeⅢ)。所致病害为聚合草青枯病。     

棉枯萎病菌在茎内生存力的研究

1953年6月12日,把采得的病株悬挂室内,每隔一月分离测定一次,直到同年10月27日的最后一次,枯萎病菌丛生长仍很繁茂。因此,为了继续探索病菌究竟在棉茎内的生存时间,从1953年起,历年均采回一部分感病棉株,悬挂室内,作分离测定材料。