反向间接血凝诊断水貂肉毒中毒

<正> 为快速、特异诊断水貂肉毒中毒,我们进行了水貂实验性肉毒中毒的反向间接血凝诊断试验.一、实验性水貂肉毒中毒(一)C型肉毒毒素:为内蒙兽医生物制品厂提供的冻干C型肉毒素.因水貂对C型毒素特别敏感,且在肉毒中毒中C型占绝大多数,所以采用C型肉毒素作实验性的水貂肉毒中毒.(二)实验水貂:选择临床健康的水貂15只分成3组(每组5只),其中一个组为对照组.(三)接种霉素:将C型毒素用灭菌生理盐水稀释,试验前测定C型毒素对水貂的最小致死量:腹腔注射为10~(-3)稀释1毫升.分别以1个和0.5个致死量腹腔注射各1组,余下的1组腹腔注射生理盐水     

肉毒梭菌毒力以其毒素灭活疫苗的效力试验

肉毒梭菌毒素毒力强,可以作为灭鼠的药物,现将肉毒梭菌C株菌液上清适当稀释,进行小鼠毒力试验。结果表明,肉毒梭菌C株菌液上清对小鼠的最小致死量为5.0×10~4MLD/ml,可以作为草原、牧场、其他养殖场灭鼠的参考依据。将毒素灭活制备疫苗,进行免疫小鼠,对小鼠具有保护力,可以抵抗致死量毒素的攻击。     

C型肉毒梭菌透析培养菌苗区域(安全性)试验

据Sterne等报导用透析培养法制备C型肉毒梭菌类毒素,其抗原效价比常法可提高500—1,000倍(结合力测定)。三年来青海兽医生物药品厂用“青透型培养器”制备C型肉毒梭菌透析菌液获得成功,在相同菌种与培养基的条件下,透析培养毒素毒力比常法提高30倍,毒素纯度提高115倍。以透析菌液制成的透析菌苗对绵羊最小免疫量为0.008ml(可耐10个MLD的C型毒素攻击);对豚鼠注射0.1ml作安全试验,其结果轻于常规法菌苗的反应。将本透析培养菌苗以生理盐水稀释,使每ml含菌苗0.02ml,每批四只绵羊作1ml皮下接种免疫。经六批效力检验为100％保护。本菌苗已于1984年4月     

貂源伪狂犬病毒DL14/08株免疫原性及其保护效果的研究

为研制貂源伪狂犬病(PR)灭活疫苗,本实验室从疑似患PR的水貂脑组织中分离到一株PR病毒(PRV)DL14/08株(10~(7.10)TCID_(50)/m L),采用甲醛灭活以铝胶为佐剂制备了水貂源PR灭活疫苗。采用水貂和家兔对疫苗进行安全性检验和最小免疫剂量测定,结果显示水貂和家兔的最小免疫剂量均为5×10~(5.6)TCID_(50)/m L;采用研制的PR灭活疫苗和商品化猪用PR灭活疫苗免疫水貂,免疫21 d后平均中和抗体分别为1∶516和1∶348,用相当于100倍半数致死量毒力的分离株病毒攻毒,自制灭活疫苗组保护率为100%,商品化疫苗组保护率为80%。实验结果表明,制备的水貂源PR灭活疫苗抗体水平及攻毒后保护率明显高于商品化疫苗,能够有效保护强毒株对水貂的攻击,可以作为水貂伪PRV预防和控制的候选疫苗株。     

基于地方分离B型诺维氏梭菌的产毒试验及羊羔疫菌苗的研制

以分离自青海省海晏县病死羊脏内的一株B型诺维氏梭菌株为研究对象,通过不同培养基、不同p H及不同培养时间等进行产毒比较试验证明,该菌在含1.0%葡萄糖培养基,p H 8.0~8.4,37℃培养72h产毒达最高点,平均可达2万MLD/m L,最高可达4万MLD/m L;利用该菌株制成羊黑疫单价疫苗,并以标准菌株菌苗作为对照,完成了家兔免疫攻毒、血清抗体测定;羊免疫血清抗体测定及高免血清的制备等试验。试验结果表明,该疫苗0.1m L免疫家兔21d,可抵抗200MLD(家兔最小致死量)毒素的攻击,是现用疫苗的2倍,0.1m L家兔免疫血清可中和300MLD(小白鼠最小致死量)的毒素,是现用疫苗的3倍,羊免疫14d,血清0.1m L可中和400 MLD(小白鼠最小致死量)的毒素,180d时血清0.1m L可中和50MLD的毒素,用此疫苗免疫家兔制备的抗血清每m L可中和160000MLD毒素。该菌株在筛选的培养基上具有良好的产毒性能,制备的羊黑疫疫苗免疫效果明显优于标准菌株菌苗,可作为羊黑疫疫苗生产用菌株。     

小鹅瘟鸭胚化弱毒疫苗的研究

将从有关单位引进的小鹅瘟鸭胚化弱毒疫苗毒株连续通过8日龄鸭胚绒毛尿囊腔传5代,由此而得到VF33种毒。VF33种毒对8日龄鸭胚的半数致死量为10~(6·25)/0.2ml,中和指数为3.25,最小致死量为10~(-4)/0.2ml。将VF33弱毒疫苗作1:100稀释,每只产卵母鹅肌肉注射1ml,免疫后110天收集种卵育雏,每只以0.5ml强毒攻击,其保护率为90％;将种毒原液5ml接种产蛋母鹅,1ml接种3～6日龄雏鹅,均表现安全。     

水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养)临床安全性和免疫效力评价

为评价水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养)冻干制剂在临床应用中的安全性和免疫效果,分别在吉林、辽宁两省选择饲养规模相似的3个毛皮兽场进行疫苗安全性(10头份)和免疫效力实验(1头份)研究,接种后观察动物的临床症状,检测抗体水平并随机选择部分水貂进行攻毒试验。结果显示,超剂量接种水貂未见有明显的临床症状,对水貂的生产性能无明显影响;水貂免疫疫苗后21 d即可获得达到免疫保护的抗体水平;免疫180 d仍能维持较高水平的抗体,且能够保护动物抵抗强毒攻击。试验表明,水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养)冻干制剂具有较好的临床保护效果。     

鸡新城疫/传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告(Ⅲ)——二联苗安全性、免疫效力及保存期试验

用同胚培养的含NDV、IBV胚液制备的二联油乳剂灭活苗(简称鸡二联灭活苗),经免疫效力试验表明,用50倍稀释的鸡二联灭活苗,0.5ml/只剂量免疫18日龄鸡,4周后试验免疫鸡分别进行NDV、IBV强毒攻击,攻毒保护率均在50%以上,证明0.5ml剂量含有50个半数保护量(50个PD_(50)),NDHI抗体≥1:16,IBVN抗体≥1:8便可保护.三批疫苗免疫18日龄鸡,0.5ml/只组免疫鸡体内有效抗体可维持16周以上,0.25ml/只组有效抗体可维持到12周.疫苗在20℃保存4个月有效,4~8℃普通冰箱中保存15个月有效.以3倍免疫量免疫18日龄鸡4周内无任何毒副反应.     

重组腐败梭菌α毒素替代羊三联四防苗中腐败梭菌组分的免疫效果评价

为了评价重组腐败梭菌α毒素在联苗中的免疫效果,试验用不同含量的重组腐败梭菌α毒素替代羊三联四防苗中腐败梭菌组分制备联苗,分别免疫兔和绵羊,在免疫后的第10,14,21天分别测定血清中和效价,免疫后第25天用1个最小致死量(MLD)的腐败梭菌毒素对免疫兔和绵羊分别进行攻毒,以期得到能使动物获得足够保护的抗原含量。结果表明:对于兔和绵羊联苗中重组腐败梭菌α毒素蛋白最小免疫剂量分别为0. 3 mg、0. 25 mg时,在免疫后第14天腐败梭菌毒素血清中和效价均能达到1;免疫后第25天进行攻毒保护试验,免疫兔和绵羊攻毒保护率分别为100%、75%。说明重组腐败梭菌α毒素可以替代羊三联四防苗中腐败梭菌组分用来进行免疫。     

D型肉毒梭菌毒素海猪家兔免疫试验和高免血清效价测定试验

先用D型肉毒梭菌菌苗对海猪、家兔进行基础免疫,再用不同致死量的D型肉毒梭菌毒素加强免疫3次.采用血清中和试验,测得海猪对毒素的耐受性为40万MLD/ml(小白鼠静注),家兔对毒素的耐受性为100万MLD/ml(小白鼠静注);两种动物每ml抗血清均能中和1万MLD/ml(小白鼠静注)毒素.     

腐败梭菌类毒素抗原含量与免疫效果之间的关系试验

为了确定腐败梭菌类毒素抗原含量与免疫效果之间的关系,将不同剂量的类毒素分别接种家兔和绵羊,免疫17日后测定血清中和效价,并用1MLD的毒素进行攻毒。测毒结果表明,1个家兔MLD的毒素含量为小鼠MLD的30倍,1个绵羊MLD的毒素含量为小鼠MLD的600倍。血清中和试验和免疫攻毒保护结果表明,类毒素含量与免疫效果在一定的范围内呈正相关,在家兔和绵羊上能提供保护的最小免疫剂量分别为100个小鼠MLD和300个小鼠MLD的类毒素。本试验结果为腐败梭菌疫苗的研制提供了重要的参考数据。     

禽流感高免球蛋白的制备及应用研究

应用H9N2亚型禽流感病毒(AIV)油乳剂灭活苗6个不同剂量免疫30周龄SPF蛋鸡,通过血凝抑制(HI)和琼脂免疫扩散(AGP)试验监测血清及卵黄抗体消长规律,确定2.0 mL为最适免疫剂量。首免后第18天血清与卵黄中抗体同时升至第一高峰,此时加强免疫。二免后1周,效价达到第二高峰,用常规抽提法从高抗体滴度卵黄中提取高免球蛋白(IgY)。中和试验(NT)表明:IgY具有中和病毒感染的作用,且中和抗体滴度随HI滴度的降低而降低;给鸡肌肉注射后6 h能检测出血清的HI抗体,24 h达到峰值,维持7 d,第13天血清中HI抗体消失。104个EID50的AIV(H9N2)攻毒,同时用HI价为214的IgY的10倍系列稀释物分5组进行保护试验,确定HI价为214的IgY保护范围在100倍稀释与10倍稀释之间。IgY系列保护试验表明HI价28为完全保护的最低滴度;在攻毒的前1天及至攻毒后第5天接种IgY均能100%保护。攻毒保存期试验证明,所制得的高免球蛋白4 ℃可以保存6个月,-20 ℃可保存1年。     

仔猪水肿病标准菌株对小鼠和仔猪免疫原性的测定试验

分别以仔猪水肿病标准菌株C83684、C83905、C83527制备的灭活疫苗免疫小鼠和仔猪,14天后分别攻以致死量的强毒菌液及毒素,攻毒试验表明,疫苗免疫效果良好,三株菌株具有良好的免疫原性。     

牛羊肉毒梭菌(C型)灭活苗的研制及免疫效果观察

采用我所分离并保存的对本地区牛羊肉毒梭菌病具有良好免疫原性的菌株Nb6514研制成功牛羊肉毒梭菌(C型)灭活苗。用免疫牛、羊血清作小白鼠体外中和试验来测定抗体效价,结果表明:结果显示,免疫10d的牛羊均可抗10个小鼠最小致死量/m L;30d分别可抗30~280和20~240个最小致死量/m L血清;180d达到高峰,分别可抗300~1600和200~1200个小白鼠最小致死量/m L血清;至550(一年半)仍可抗10个最小致死量/m L血清。结果表明研制的牛羊肉毒梭菌(C型)灭活苗具有良好的免疫效果,能有效预防牛羊肉毒梭菌(C型)病。     

新生水貂肠炎病毒母源抗体消长规律及其亚单位疫苗免疫效果研究

本研究旨在探索水貂肠炎病毒（mink enteritis virus,MEV）的母源抗体消长规律及其亚单位疫苗免疫效果。以免疫母貂所生仔貂为研究对象,采集21、30、45、60日龄仔貂血清,测定水貂病毒性肠炎母源抗体HI效价（MEV HI）;选取25只47~52日龄健康水貂接种制备MEV基因工程亚单位疫苗,免疫前后14 d采血测定MEV HI效价;免疫后14 d进行水貂肠炎病毒攻毒临床症状观察,并测定粪便HA效价;攻毒后14 d对濒死和存活水貂安乐死,采集十二指肠、空肠和回肠进行病理组织学观察和免疫组化检测。结果显示,免疫母貂所产仔貂的MEV HI效价随着日龄的增加逐渐降低,在21日龄时较高,45日龄时少部分仔貂MEV HI效价<1：32,60日龄时大部分仔貂HI效价≤ 1：4;使用制备合格疫苗免疫后14 d对照组水貂的MEV HI效价均不高于1：4,免疫组MEV HI效价升高至1：64~1：512;攻毒保护试验表明,免疫组水貂100%抵抗水貂肠炎病毒强毒的攻击,水貂的精神、饮食、粪便等均未见异常,且攻毒后粪便HA效价为1：8~1：16;病理组织学和免疫组化检测结果表明,MEV基因工程亚单位疫苗能够很好地阻止病毒在肠黏膜上皮细胞的复制和对肠黏膜上皮细胞的损伤。因此,免疫母貂所生仔貂21日龄时体内抗体效价最高,制备的疫苗免疫50日龄左右的水貂时能够突破母源抗体干扰并产生高水平的抗体,能够抵抗水貂肠炎病毒强毒株的攻击。     

完成牛沙门氏菌病保护免疫的方法

静注或口服非致死量感染的都柏林沙门氏菌或长期接触排沙门氏菌动物的牛,经静脉攻毒后只有一半残存。灭活菌两次皮内注射的免疫牛,攻毒后得到较好的保护;同一方法免疫的犊牛,能抵抗口服感染并优于用灭活苗皮下注射的牛。如皮内注射灭活苗,3周后再静注都柏林沙门氏菌所制的活菌苗,能抵抗强菌剧烈的静脉攻毒。     

猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联冻干苗研究 第二报 影响猪三联苗免疫力的几个因素的探讨

对影响猪三联苗免疫力因素的试验结果。用20％铝胶盐水稀释疫苗,免疫断奶15天以内的小猪,人工攻击猪瘟强毒后保护率平均52.27％,免疫断奶2个月左右的大猪,保护率100％,攻击猪肺疫强毒组平均保护66.6—71.8％;用生理盐水稀释疫苗,免疫猪不论月龄大小,攻击猪瘟强毒后均全保护,但是攻击猪肺疫强毒的猪,仅保护38.9％;表现对猪瘟免疫力低的原因,与小猪受母源抗体干扰有关,以铝胶盐水稀释者更明显,但如免疫猪改用接触感染攻毒法,免疫的大小猪均能获得良好的保护,不影响疫苗的使用效果。     

水貂犬瘟热的诊断及蜂胶组织灭活苗的研制与应用

通过临床症状、病理剖检、包涵体检查和胶体金诊断等方法对疑似犬瘟热的水貂进行诊断,并研制水貂犬瘟热蜂胶组织灭活苗。以弱毒苗为对照,进行免疫试验、攻毒试验、临床应用试验和紧急接种防治试验。结果表明:水貂犬瘟热蜂胶组织灭活苗安全、可靠,能使水貂产生与弱毒苗同等效力的免疫力,在8个月内,对水貂的保护率达100%。在紧急接种防治犬瘟热暴发流行时,其防治效果显著优于弱毒苗。     

限饲有效减缓肉鸡坏死性肠炎

正希腊塞萨洛尼基农场动物诊所研究人员开展了限饲对肉鸡肠道生态系统及试验性坏死性肠炎发病机制影响的研究。为诱导亚临床症状坏死性肠炎,试验攻毒模型采用特定日粮配方,常规接种传染性法氏囊病疫苗、10倍剂量口服接种抗球虫弱毒苗、口服接种产气荚膜梭菌菌株。240只1日龄科宝500肉鸡随机分为限饲、产气荚膜梭菌攻毒、限饲攻毒和阴性对照组。在21~24日龄,收集所有试验鸡肠、肌胃和肝脏,肉眼观察器官损伤程度并进行评分,测定肠道消化物pH值和黏度,每只鸡取盲肠用于微生物指标分析。结果表明,     

猪细小病毒病弱毒疫苗免疫效力评价及临床免疫试验

为制定猪细小病毒病弱毒疫苗效力检验的标准,用3批猪细小病毒病弱毒疫苗进行接种猪与接种豚鼠的平行试验;同时进行临床免疫试验。3批疫苗接种豚鼠和猪后定期进行PPVHI抗体检测;猪于免疫后攻毒,并进行病毒分离。免疫母猪在怀孕早期进行强毒攻击,40d扑杀进行病毒分离。用3批疫苗免疫后备母猪统计产仔成绩。结果显示,豚鼠接种后21d、猪接种后7d全部产生抗体反应。免疫攻毒的猪均未从血浆和内脏中分离到病毒,而从对照猪分离到病毒;怀孕母猪强毒攻击后扑杀,胎儿病毒分离均为阴性,而对照猪胎儿病毒分离为阳性;统计数据表明免疫猪的产仔成绩比未免疫猪高,平均每窝多产活仔1.85头,少产死胎木乃伊胎0.65头。结果表明,当免疫豚鼠PPV HI≥64时,免疫猪能抵抗PPV强毒攻击,两者呈正相关;免疫母猪的攻毒试验表明免疫母猪能抵抗PPV经胎盘感染;临床免疫试验证明疫苗具有良好的免疫原性和安全性。