实验动物设施环境检测方法探讨

正实验动物设施竣工投入生产(实验)以后,都需要进行性能测定及工程验收,在系统维修或更新时也要进行全面的测试,目前国内各级实验动物管理机构在审发设施条件合格证时,也注重对实验动物(或动物实验)设施的环境进行检测。对实验动物设施环境检测内容大体上可分为两个部分,即外环境条件的检查和内环境条件的检测。供参考。1外环境条件的检查作为实验动物设施的外环境,主要包括:地理位置,地形特点与毗邻建筑(实验室)的关系,必要的公用设施——水、     

猴中暑的防治

1 病因 造成实验猴中暑的主要原因:(1)室外温度在40℃以上.(2)猴舍内通风不良,温度大,闷热.     

广东等五省区猴场实验猴血清T淋巴细胞趋向性病毒1型抗体检测分析

为调查广东等地实验猴养殖场猴T淋巴细胞趋向性病毒1型(Simian T-lymphotropic virus 1,STLV-1)的流行情况,通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)对采集自广东、广西、云南、海南以及河南境内主要猴场的752份实验猴血清样本进行...     

CMS使用于乳牛饲料添加之研究

本实验使用味丹企业已生产之 CMS与糖蜜作不同比例之混合 ,(10 0 % CMS;80 % CMS 2 0 % mol;5 0 % CMS 5 0 % mol;10 0 % mol)以上四种混合液各以 6%添加于蛋白质含量为 18.5 %的泌乳牛精料配方中 ,进行乳牛动物实验 ,实验组别为 (一 )对照组 (实验第 0组 ) :6% m ol添加 ;(二 )实验组 :5 0 % CMS 5 0 m ol(实验第一组 ) ;80 % CMS 2 0 mol(实验第二组 )及 10 0 % CMS(实验第三组 ) ,均各以 6%添加于 18.5 %粗蛋白乳牛精料中 ,各实验组除了此液态原料外 ,其它饲料、原料组成比例均为一致。本实验之主要目的乃在于 (1)评估及比较四组实验精料之采食时间及适口性。及 (2 )评估及分析乳牛之泌乳性状如产乳量 ,乳脂率 ,乳蛋白量 ,乳糖量 ,非脂乳固形物 ,总固形物量 ,体细胞数等 ,并据以推断 CMS及 mol之最佳使用比例。实验结果显示出 CMS之添加除 80 CMS/2 0 mol组外 ,均无适口性之问题 ,纯 CMS组采食时间为最短 ,80 CMS/2 0 mol组之适口性低下原因则有待探讨 ;另外 ,CMS添加对乳性状如乳脂率 ,乳蛋白量 ,乳糖量 ,乳总固形物量等主要指标均无负面影响 ;对牛之乳房健康 (体细胞数值分析 )亦无不良作用 ;当 CMS添加浓度增加时 (80 CMS/2 0m ol,10 0 CMS)对乳蛋白之提升则有正面之效果     

哈兽研动物实验部

正哈兽研动物实验部成立于2016年9月,是主要从事感染性动物实验的支撑与技术服务机构。动物实验设施总建筑面积16000m~2,由动物生物安全二级(ABSL-2)和动物生物安全三级(ABSL-3)实验室两部分组成。ABSL-2实验室于2017年5月获得实验动物使用许可证(SYXK(黑)2017-009),具备同时开展啮齿类、兔、豚鼠、禽类及中大型动物实验的条件和资质,可承接根据用户科研需求、个性化设计的动物实验。此外,作为哈尔滨兽医研究所科技支撑与技术服务中心的一部分,可与中心各平台合作承接科研、药物、生物制品临床     

实验性瘘管技术体系的研究概况

瘘管法(cannulation technique)是慢性动物实验研究的主要方法,是用无菌手术给动物造成不同的人造瘘管以收集各种体液进行动物实验,用于胃肠消化代谢及器官血流量测定的研究技术.     

浅谈高致病性禽流感免疫抗体检测注意事项

禽流感(avian influenza,AI),是由禽流感病毒(avian influenza virus,aiv)引起的禽类的一种烈性传染病。由于AI具有临床症状复杂,病死率高,病原体亚型多以及容易发生抗原漂移和转换等特点,其防治难度很大。现阶段,禽流感疫病防治主要是通过疫苗接种、免疫抗体监测技术手段进行疫情防控,免疫抗体检测主要通过血凝与血凝抑制(HA-HI)实验对血清样品抗体做出准确的分析,因此,实验技术好坏对疫情的判断起着至关重要的作用。本文将通过在日常监测工作中掌握的经验、技术对血凝与血凝抑制实验技术注意事项进行阐述。     

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌FnbpB-D基因的表达及其抗血清活性

纤维素结合蛋白B(FnbpB)是金黄色葡萄球菌(S.aureus)最主要的黏附因子之一,它能够介导S.aureus结合于细胞表面的纤维连结素(Fn)和纤维蛋白原(Fg)。FnbpB基因中D区为主要活性部位。本实验利用pET-32a表达载体表达了S.aureus FnbpB-D重组蛋白(34.7ku),并通过动物实验对重组FnbpB-D蛋白的抗血清活性进行了初步研究。采用ELISA对抗血清进行抗粘附性检测,结果显示实验组与对照组差异极显著(p0.01),抗血清具有较强的抑制S.aureus黏附纤维连结素的作用。此外,调理吞噬实验结果显示,免疫兔全血对S.aureus有较强的调理作用。这些实验结果将为制备奶牛乳房炎S.aureus黏附素疫苗的研制提供参考。     

以学生为主导的创新性实验课程设计

培养和提升学生的创新实践能力是高校的主要教学目的之一,开设实验(实践)课程则是培养这种能力的主要途径。为了提高此类课程的教学质量,将其由教师为主导转变为以学生为主导,文章提出了创新性实验课程设计的思路,从实验方案的拟定到实验方案可行性分析,再到实验器材、实验材料的准备、实验的具体实施都由学生自行完成,强调学生在课程中的中心地位。教师在课程中负责制定实验目标,设定约束条件,保障实验条件,评价实验成绩等辅助作用。     

猪瘟兔体免疫交互实验中的Ⅰ型变态反应

兔体免疫交互实验是一种较为特异性的猪瘟诊断方法,也就是实验兔在猪瘟野毒(对兔无毒力,但具有抗原性)的刺激下,产生特异性抗体,从而中和注入兔体内的猪瘟兔化毒对兔的毒力,然后以兔体是否出现体温反应作出判定.若实验兔出现定型热反应(猪瘟兔化苗毒力未被中和)判定为猪瘟阴性,不出现体温反应(兔化苗毒力被中和)则判定为阳性。然而这里明显地忽略了家兔在该实验中可能出现的Ⅰ型(速发型)变态反应。我们知道,不管是病毒中和反应,还是Ⅰ型变态反应,都是抗原-抗体特异性结合的反应,只不过是参与反应的抗体种类不同而已.对前者,我们认为主要是由免疫球蛋白 IgM、IgG 参与的抗原-抗体反应,后者则主要是由 IgE(近代还证明家兔乙     

促卵泡素和促黄体生成素对儋州鸡生殖激素调控规律的研究

为研究促卵泡素（FSH）和促黄体生成素（LH）对儋州鸡体内其他生殖激素的调控规律,本试验通过改变FSH和LH在儋州鸡血液中的浓度,并采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）对处理前后儋州鸡血液中FSH、LH、催乳素（PRL）、孕酮（P）、雌二醇（E₂）的浓度进行测定。结果发现,注射外源性FSH和LH分别能提高儋州鸡血液中FSH和LH浓度;当儋州鸡血液中FSH或LH浓度显著升高时则均能引起PRL浓度显著降低（P < 0.05）,但当FSH和LH浓度同时显著升高时,PRL浓度显著升高（P < 0.05）;当儋州鸡血液中FSH浓度显著升高时,E₂及P浓度显著提升（P < 0.05）,且在高浓度LH的协同下提升幅度更大;当儋州鸡血液中LH浓度显著升高时E₂及P浓度升高但不显著（P > 0.05）。本研究结果表明,儋州鸡血液中FSH或LH浓度的提高均能降低PRL的浓度,并能不同程度的提升E₂及P的浓度,但FSH与LH浓度同时提高则能通过协同作用刺激E₂及P浓度的大幅提升,当E₂及P浓度过高时能通过刺激PRL的释放,负反馈调节血液中FSH与LH,并恢复血液中E₂及P浓度。     

Study on Regulation of Reproductive Hormones in Danzhou Chicken by FSH and LH

To investigate the regulation of reproductive hormones in Danzhou chicken by follicle-stimulating hormone (FSH) and luteotropic hormone (LH),the concentration of FSH and LH in Danzhou chicken blood were changed by different treatments and the concentration of FSH,LH, prolactin (PRL), progesterone (P), and estradiol (E₂) in the blood were determined using the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).The results showed that exogenous FSH and LH could improve the concentrations of FSH and LH,respectively. When one of FSH and LH increased alone,the concentration of PRL was significantly decreased (P < 0.05),while it was significantly increased when FSH and LH were both increased (P < 0.05).The high level of the FSH could result the significant increase of E₂ and P (P < 0.05),and it would expand the increasing effect in cooperation with the high concentration of LH. While the high level of the LH could elevate the concentration of E₂ and P,but effect was not significant (P > 0.05).In conclusion,the study suggested that the increase level of FSH or LH could reduce the concentration of PRL in Danzhou chicken,meanwhile,it could increase the concentration of E₂ and P in varying degrees. However,both of the FSH and LH increase in the blood could result the significant increase of E₂ and P as the synergy. When the concentration of E₂ and P were too high,it could stimulate the release of PRL which could adjust the concentration of FSH and LH,and rebalance the concentrations of E₂ and P in the blood.     

2015年山东省肉鸡饲料原料中重金属污染情况调查及风险评估

本试验旨在调查2015年山东省肉鸡饲料原料中砷、铅、镉、铬和汞元素的污染情况,评估饲料原料的污染风险。试验收集烟台市莱阳、威海市文登、青岛市莱西、潍坊市诸城、日照市莒县、临沂市沂水、德州市夏津等地不同饲料生产厂家使用的8种饲料原料,包括玉米、豆粕、麸皮、花生粕、棉籽粕、玉米蛋白粉、干酒糟及其可溶物( DDGS)和微量元素预混料,应用电感耦合等离子体原子发射光谱法( ICP-AES)检测镉、铅和铬元素的含量,应用原子荧光光谱法( AFS)检测砷和汞元素的含量,计算检出率、平均含量、超标率、最高含量与平均含量比值( HC/AC)和离散系数。结果表明：饲料原料中砷、铅、镉、铬和汞元素的检出率分别为32.29%、7.29%、12.50%、100.00%和100.00%;阳性样品中平均含量分别为0.21、1.27、2.12、3.48和0.02 mg/kg,超标率分别为0.00、1.04%、1.19%、54.76%和9.52%;微量元素预混料中砷、铅和镉元素,棉籽粕中铬元素及花生粕中汞元素的HC/AC最大,微量元素预混料中镉元素、花生粕中汞元素、豆粕中砷元素及棉籽粕中铅和铬元素离散系数最大。综上所述,肉鸡饲料原料中铬和汞元素污染严重;微量元素预混料中砷、镉、铬和铅元素、棉籽粕中铬和铅元素、花生粕和豆粕中汞元素易出现严重污染,因此建议制定预混料和饼粕类饲料中多种重金属元素的限量标准。     

补饲醋酸甲羟孕酮基础上分别进行前列腺素、N-甲基-D-天冬氨酸和来曲唑处理对母羊血浆繁殖激素水平的影响

试验旨在研究醋酸甲羟孕酮（medroxyprogesterone acetate,MPA）与前列腺素（prostaglandin,PG）、N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartate,NMDA）和来曲唑（letrozole,LE）的不同配伍对母羊血浆繁殖相关激素水平的影响。选取3岁经产萨福克母羊39只,平均体重（75.51±11.55） kg,随机均分为3组,试验Ⅰ组饲喂基础日粮+34 mg/（d·只） MPA+1 mL/只PG,试验Ⅱ组饲喂基础日粮+34 mg/（d·只） MPA+600 mg/（d·只） NMDA,试验Ⅲ组饲喂基础日粮+34 mg/（d·只） MPA+14 mg/（d·只） LE,试验期18 d。结果发现,补饲MPA基础上进行PG处理,母羊血浆中FSH水平呈极显著升高（P<0.01）;补饲MPA基础上进行NMDA处理,母羊血浆中E2、MLT、FSH和LH水平均呈极显著升高（P<0.01）;补饲MPA基础上进行LE处理,母羊血浆中MLT、LH和T水平均呈极显著升高（P<0.01）。综合比较各生殖激素之间的关系及变化规律,在本试验条件下,建议MPA与NMDA和LE分别结合使用,可作为调控母羊繁殖性能的药品;且通过比较激素水平得出,MPA与NMDA组合效果最佳。     

Effects of Prostaglandin,N-methyl-D-aspartate and Letrozole on Ewes Plasma Levels of Reproductive Hormones were Evaluated on the Basis of Medroxyprogesterone Acetate Supplementation

This study was aimed to investigate the effects of the different compatibility of medroxyprogesterone acetate (MPA) with prostaglandin(PG), N-methyl-D-aspartate (NMDA) and letrozole (LE) on plasma related hormones levels of reproductive ewes. Thirty-nine and 3-year-old multiparity Suffolk ewes with average weight (75.51+11.55)kg were selected,and assigned into 3 groups,test group Ⅰ:Basis diet+34 mg/d MPA+1 mL/ewe PG, test group Ⅱ:Basis diet+34 mg/d MPA+600 mg/d NMDA, test group Ⅲ:Basis diet+34 mg/d MPA+ 14 mg/d LE, respectively, the trial period lasted for 18 days. The results showed as follows:On the basis of supplemental feeding MPA with PG treated,the levels of FSH in plasma of ewes were extremely significantly increased (P<0.01); Treated with NMDA, the levels of E₂, MLT,FSH and LH in plasma of ewes were extremely significantly increased (P<0.01), respectively;Treated with LE, the levels of MLT,LH and T in plasma of ewes were extremely significantly increased (P<0.01), respectively. This study suggested that MPA+NMDA and MPA+LE could be used as medicines for regulate and control oestrus of ewes, and the effect of MPA+NMDA was the best.     

MDV对雏鸡血浆MDA含量与SOD活性的影响

为探讨丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)在雏鸡马立克病(MD)发病过程中的作用,研究了雏鸡在人工攻毒后血浆MDA含量与SOD活性的动态变化.结果表明,攻毒组接种马立克病病毒(MDV)后第14天,血浆中MDA的含量显著高于对照组(P＜0.05),第7天和第28天高于对照组,第56天时基本接近;血浆中SOD活性在第7天时对照组显著高于攻毒组(P＜0.05),第14天和第28天高于攻毒组,但差异不显著.表明雏鸡在感染MDV后血浆中MDA含量显著升高,SOD活性明显降低,对雏鸡MD的发病诊断有重要的指导作用.     

苜蓿自交不亲和性研究

实验中探讨了苜蓿自交不亲和性和遗传特征。结果得出:1.苜蓿自交结荚百分率为0～92％,平均为27.6％。苜蓿自交不亲和性在群体中呈连续、偏态分布。2.苜蓿自交不亲和性反应主要发生在雌蕊组织下部(子房及子房腔)。3.确定自交不亲和或自交亲和性的判别函数方程为Y=-0.0804x_1—0.5228x_2+0.6117_3。4.苜蓿自交不亲和性受单位点、复等位基因控制,并具有CSI遗传特点。5.S基因与过氧化物同工酶基因(Prxl)为连锁,两者间重组值为27％。6.PSC的遗传力h~2=62％,选择无论对亲和性和不亲和性均为有效。根据本试验结果讨论了苜蓿SI的测度指标、授粉方式及不亲和性的数量差异问题,并探讨了紫花苜蓿与黄花苜蓿种的分类差异,认为两者理应属同一种或种内不同生态型。     

我国部分地区蛋鸡群ALV-J及与REV、MDV、CAV混合感染检测

为了解J亚群禽白血病病毒(ALV-J)及其与禽网状内皮细胞增生症病毒(REV)、马立克氏病病毒(MDV)和鸡传染性贫血病病毒(CAV)的混合感染现象,本研究从宁夏、湖北、广东、山东、辽宁、吉林、黑龙江7个省的39个蛋鸡群收集临床表现和剖检病理变化疑似禽白血病的病料样品184份,采用PCR、病毒分离和IFA检测样品中ALV-J、REV、MDV和CAV。结果表明,7个省蛋鸡场均存在ALV-J感染,病料样品阳性率为60.9%,检测鸡群阳性率为82.1%,与REV、MDV、CAV的混合感染率分别为13.6%、24.5%、22.8%,其中存在较为严重的双重感染(29.0%)和3重感染(18.8%),甚至4重感染(1.7%)。研究结果表明,我国蛋鸡群中普遍存在ALV-J感染,而且与REV、MDV、CAV混合感染严重;提示ALV-J已经可以引起蛋鸡群发病,在临床诊断和致病性研究中,应考虑到多重感染的影响。     

鬼臼多糖对免疫功能低下小鼠自由基产生酶活性的影响

采用环磷酰胺腹腔注射(50mg/kg)小鼠建立免疫抑制模型,观察鬼臼多糖(PEP)不同剂量(50,100,200mg/kg和400mg/kg)配合环磷酰胺应用后,对小鼠脾脏中黄嘌呤氧化酶(XOD)、髓过氧化物酶(MPO)及一氧化氮合成酶(NOS)水平的影响。结果表明,PEP能显著降低免疫抑制小鼠脾脏XOD、MPO的活性;对脾脏总NOS活性无显著影响,但400mg/kg多糖可降低小鼠脾脏诱导型NOS活性,提示PEP可通过降低免疫抑制小鼠体内自由基产生酶水平而起到抗氧化作用。     

Detection and Genetic Evolution of Diarrhea-related Viruses in Chongqing Beef Cattle

In order to investigate the pathogen prevalence of bovine viral diarrhea in Chongqing, this study carried out an investigation of bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine coronavirus (BCV), bovine rotavirus (BRV) and bovine astrovirus (BAstV) on a total of 81 diarrhea samples of beef cattle which were collected from Chongqing by RT-PCR. After the PCR products were sequenced, phylogenetic analysis was performed with Mega 6.0 software. From 81 samples, the positive rate of BRV,BAstV and BVDV were 66.7%,8.6% and 7.4%, respectively,BCV was not detected.Phylogenetic analysis showed that 5 strains of BRV sequences were clustered into a small branch, which had significant genetic distance with other VP6 sequences in GenBank; 5 strains of BVDV, Chinese and Denmark strains were clustered into one branch,genetic relationship were close; 5 strains of BAstV clustered into a branch with Hongkong strain, but there was still an obvious genetic distance. The result showed that calves under the age of half year were the main group of beef cattle with diarrhea in Chongqing. BRV was an important cause of diarrhea in Chongqing, the genetic diversity of BRV,BAstV and BVDV could be reference to further concern.