虹鳟鱼传染性造血器官坏死病防控技术

正传染性造血器官坏死病(IHN)是由弹状病毒科传染性造血器官坏死病毒(IHNV)引起的病毒感染,已被列为国家二类疫病。在甘肃省已发现虹鳟、金鳟、七彩鲑感染了该病毒,虹鳟、金鳟苗种培育场发生急性爆发导致死亡率高达90%,损失惨重。本文主要介绍了虹鳟鱼传染性造血器官坏死病的防控技术,以供参考。1发病情况2009年10月20日左右,位于永昌县焦家庄乡红庙墩村的1户养殖户养殖的鲑鳟鱼出现突     

传染性造血组织坏死病病毒(IHNV)的危害、检疫及防治

传染性造血组织坏死病病毒(Infectious Hematopoietic NecrosisVirus,IHNV)属弹状病毒科(Rhab-doviridae)诺拉弹状病毒属(Novirhabdovirus),是传染性造血组织坏死病(Infectious HematopoieticNecrosis,IHN)的病原体,主要感染鲑鱼科的各种鱼类,常造成鱼苗或幼鱼70%-90%的死亡率,在某些病例中甚至接近100%,对世界鲑鱼的水产养殖业造成了巨大的经济损失。IHNV是口岸鱼类的第一类检疫对象。随着我国进口鲑鱼和养殖鲑鱼的发展,成品鲑鱼及鱼苗、鱼卵的引进可能造成IHNV的传入和传播。1990年,辽宁本溪某养殖场首次报道了我国第一例IHN,…     

传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)分离株病原学研究及全基因组序列分析

为初步了解东北地区某虹鳟养殖场的一株传染性造血器官坏死病病毒株的病原学特征,将该病毒株进行虹鳟鱼苗人工回接感染试验。结果显示,一周内人工感染试验鱼均出现明显的临床症状。将病死虹鳟鱼苗研磨过滤除菌后接种到胖头鱼肌肉细胞系(FHM),出现了特征性病变(CPE),用传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)4组水生动物病毒的6对特异性引物对该毒株进行race-PCR,扩增其全长。结果显示,该病毒基因组全长为11 132 nt,基因组序列中4种核苷酸G、A、T、C含量分别为24.28%、28.67%、19.46%、27.59%。将序列与多株GenBank中已发表的IHNV毒株相应基因进行比较。结果显示,分离株G基因与韩国株ChYa07和PcKw11同源性较高,分别为97.8%和97.5%,其进化树分析结果显示,CJ-13株与韩国株和日本株在遗传进化关系上较近。     

流行性造血器官坏死病的传入风险分析

为确定导致流行性造血器官坏死病(EHN)进入我国的各种可能因素,通过病原学和流行病学分析,逐一评估可能产生的不同程度的风险。分析认为,EHN传入的主要威胁是来自疫区的活虹鳟和鲈鱼,其次是冰冻和冰鲜的虹鳟和鲈鱼。分析指出,只有根据感染特点,采取不同的检疫措施,才能有效控制进口鱼携带病毒传入我国。     

传染性法氏囊病病毒对法氏囊淋巴细胞形态及其功能的影响

本试验利用透射电镜连续观察了传染性法氏囊病病毒变异 Ｅ 株人工感染雏鸡后不同时期法氏囊细胞的超微结构变化,并对法氏囊内 Ｓ Ｉｇ Ｍ , Ｓ Ｉｇ Ｇ, Ｓ Ｉｇ Ａ 三种抗体生成阳性细胞数量和血液中 Ｉｇ Ｍ , Ｉｇ Ａ, Ｉｇ Ｇ 抗体水平进行了检测。观察结果表明, Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ 感染后法氏囊淋巴细胞出现了严重变性、坏死,表现为核染色质浓缩、碎裂、溶解,线粒体溶解呈空泡样结构,其 他细胞器坏死溶解,在法氏囊淋巴细胞、巨噬细胞、网状上皮细胞等细胞的胞浆中可见不同类型和排列方式的病毒粒子。 Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ 感染后法氏囊内抗体阳性细胞数量和血清中抗体水平均呈现不同程度的下降,揭示雏鸡机体体液免疫功能严重抑制。     

J亚群禽白血病骨髓组织与外周血病理学研究

用已分离鉴定的 J 亚群禽白血病病毒内蒙株IMC10200回归实验肉鸡胚,结合自然发病病例禽骨髓组织结构、细胞形态、分布,对实验感染发病鸡的骨髓内嗜酸中、晚幼粒细胞的病理发生、增殖及数量变化进行了分析研究。结果显示,自然发病病例和实验感染IMC10200的肉鸡,其骨髓组织各系细胞数量均有所变化,尤其是嗜酸中、晚幼粒细胞数量明显增多,转化为瘤细胞,使骨髓组织结构发生改变。同时对外周血细胞的观察结果表明,在典型骨髓细胞白血病病鸡血液中可以见到上述幼稚的髓细胞,提示这些瘤细胞是在骨髓组织中异常增殖后进入血液,再向体内其他组织转移形成肿瘤。     

鸭圆环病毒与鹅细小病毒混合感染病例的实验室诊断

为确诊贵州省三穗县某规模化养鸭场40日龄花边鸭出现发病死亡的原因,剖检4只病死鸭并采集心脏、肝脏、脾脏病料,根据发病情况、临床症状、病理变化、细菌分离培养和相关病毒核酸检测进行诊断。结果:(1)病鸭主要以神经症状为主,鸭群发病4 d死亡率为17.24%;典型病理变化为腹膜呈灰白色、心脏有坏死灶、肝脏不同程度受损。(2)病料在不同营养琼脂培养基上培养24 h后均未见菌落生长。(3)病料中检测出鸭圆环病毒、鹅细小病毒特异性核酸片段,未检出禽流感病毒、新城疫病毒、鸭瘟病毒特异性核酸片段。结论:综合诊断养鸭场病例为鸭圆环病毒与鹅细小病毒混合感染。     

人参提取液体外抑制IHNV作用效果研究

探究人参提取液体外抑制CCB细胞感染IHNV的能力,构建体外CCB细胞模型,运用RTCA技术和MTT法测得不同浓度人参提取液对IHNV抑制作用曲线,并从阻断病毒复制和杀灭病毒两方面讨论人参提取液作用效果。结果表明,4%人参提取液对IHNV具有明显抑制作用,能够在16 h内保护细胞不受IHNV病毒的侵染,其中2 h时对病毒灭活抑制率最高达到51.5%,1~12 h内对病毒复制有持续抑制作用。研究可为IHVN防治药物的研发提供新的思路及参考。     

1株传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)的分离与鉴定

将虹鳟鱼苗研磨过滤除菌后接种到胖头鱼肌肉细胞系(FHM)后出现了特征性病变(CPE),电镜下观察到IHNV病毒粒子。用传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)和传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)等水生动物病毒特异性引物对该毒株进行RTPCR试验,结果显示,用IHNV的引物能扩增出阳性片段。将分离株暂时命名为CJ-13。应用DNAStar和MEGA5.2软件,将CJ13的N基因与多株GenBank中已发表的IHNV毒株相应基因进行同源性比对和构建系统树。核苷酸同源性显示CJ-13株与HV7601株的N基因同源性高达97.1%,推导出的氨基酸序列同源性为95.2%。系统进化树表明,CJ-13分离株与HV7601株遗传进化关系较近,属于同一分支。     

虹鳟Ⅰ型干扰素e7在胖头鳜肌肉细胞中的表达及其抗传染性造血器官坏死病毒活性检测

为表达虹鳟Ⅰ型干扰素e7(IFNe7),并检测其抗传染性造血器官坏死病毒(IHNV)的活性,本实验采用RT-PCR从虹鳟肾脏组织中扩增虹鳟IFNe7基因,克隆至p MD19-T载体,测序分析后构建重组真核表达载体p EGFP-IFNe7,并转染至胖头鳜肌肉细胞(FHM)检测其抗病毒活性。结果显示,虹鳟IFNe7基因序列为561 bp,编码186个氨基酸,与大西洋鲑Ⅰ型干扰素(IFN-I)亲缘关系最近。通过荧光观察、RT-PCR及western blot方法鉴定显示,真核表达载体p EGFP-IFNe7能在FHM细胞中表达49 ku的重组蛋白;采用细胞病变抑制法表明IFNe7具有抗IHNV的活性。本研究为进一步研究虹鳟病毒性疾病奠定基础。     

鸭瘟病毒强毒株感染SPF鸭后动态病理组织学变化

用鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)人工感染2月龄SPF鸭,定期剖杀,经聚合酶链反应(PCR)检测为鸭瘟后,对各组织器官的病理组织学变化进行观察,并进行血常规和血液生化指标检测.结果显示,人工感染后24 h,试验鸭中枢免疫器官胸腺、法氏囊表现为淋巴细胞数量减少,组织间隙增大;肝脏、脾脏组织病变较为严重,大部分组织器官均出现程度较轻的病理变化.感染后48～96 h,中枢免疫器官的淋巴细胞极度减少、网状细胞增生、组织器官结构模糊不清,严重充血、出血;其余组织器官出现细胞变性、出血等不可逆病理变化.感染后120 h,组织细胞变性、坏死,出现大片坏死区.点眼滴鼻组鸭感染DPV后组织学变化与皮下注射组相似,只是发生的时间偏后约24～48 h.对照组鸭病理组织学观察未见损伤.WBC、HGB、AST、ALT等发生显著变化.结果表明,接种DPV强毒感染鸭的组织器官严重受损,特别是免疫器官,甚至会引起免疫抑制.     

雏鸭人工感染鸭肝炎病毒后血液生化指标的变化

鸭病毒性肝炎是由鸭肝炎病毒引起雏鸭的一种高死亡率传染病。为探究该病的致病机理，本实验用患鸭病毒性肝炎死亡的鸭肝脏制成病毒组织液，并用该组织液人工感染3日龄健康雏鸭。对感染雏鸭的临床症状、发病情况进行观察，并测定了部分健康雏鸭和濒临死亡时的感染雏鸭的血糖、谷草转氨酶、谷丙转氨酶等13项血液生化指标。结果表明：血液葡萄糖、血液淀粉酶、胆碱脂酶含量在病发后显著下降；谷草转氨酶、谷丙转氨酶、肌酐、尿酸、碱性磷酸酶的含量显著升高；总蛋白、白蛋白、球蛋白含量在病发时略微下降。上述的试验结果提示：雏鸭患鸭病毒性肝炎后肝脏受损最明显，同时胰腺、肾脏也受损严重。     

传染性造血器官坏死病诊断及防控的研究进展

传染性造血器官坏死病(infectious hematopoietic necrosis,IHN)是一种严重危害冷水鱼养殖的病毒病,被列为国家二类动物疫病。作者就国内外对传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)的生物学特征、感染的临床症状及流行特点、病毒基因组及其结构蛋白特征、检测诊断技术及防控等方面的研究进行探讨与综述, 旨在为该病的预防与控制提供资料。     

感染鲤浮肿病毒镜鲤的组织病理变化及病毒分布规律研究

【目的】 研究感染鲤浮肿病毒（Carp edema virus,CEV）镜鲤的组织病理特征及CEV在各组织中的分布规律,以期为鲤浮肿病的诊断和防控提供参考。【方法】 利用HE染色观察发病镜鲤心脏、肝脏、皮肤、脾脏、肾脏、脑、鳃组织的病理变化情况;用免疫组织化学法检测CEV在镜鲤各组织的分布和蛋白表达情况;利用CEV P4a基因保守区域设计3条探针,于5'-端标记FAM进行原位杂交,检测CEV在镜鲤各组织的核酸分布情况;实时荧光定量PCR检测感染镜鲤各组织的病毒载量。【结果】 HE染色观察发现,患病镜鲤的鳃丝肿胀、充血,鳃丝间有脱落堆积的红细胞和炎性细胞,肝脏细胞深染萎缩,胆小管出血,脾脏组织出现明显间隙并伴有出血,肾脏组织充血明显,肾小管有明显闭合现象。免疫组织化学结果显示,在患病鱼的鳃和肝脏组织中大量表达CEV P4a蛋白,在其他组织中也有少量表达。原位杂交结果显示,CEV核酸大量存在于鳃组织中,在心脏、脾脏和肾脏中均有少量阳性信号。实时荧光定量PCR结果显示,鳃组织病毒载量极显著高于心脏、肝脏、皮肤、脾脏、肾脏、脑组织（P<0.01）。【结论】 感染CEV后,镜鲤内脏组织出现不同程度充血、出血,病毒主要分布在鳃,说明鳃是CEV增殖的最主要靶器官。     

传染性法氏囊病病毒人工感染鸡病理学观察

应用组织病理学和电子显微镜技术对以传染性法氏囊病病毒不同毒株人工感染后不同感染时间鸡的法氏囊、肾脏、脾脏进行了检查。结果显示:法氏囊淋巴滤泡髓质首先被破坏,滤泡之间水肿,整个淋巴滤泡前B淋巴细胞崩解、坏死,网状细胞和巨噬细胞增生。72小时后,几乎见不到前B淋巴细胞。168小时法氏囊萎缩,上皮增生。脾脏和肾脏仅出现轻微变化。超微结构变化特征是淋巴样组织坏死,法氏囊组织中的前B淋巴细胞、巨噬细胞和网状细胞内有大量约60nm的病毒颗粒,呈结晶状排列,有的细胞中可见到多个病毒结晶体。     

止痢草提取物对患病罗非鱼组织器官的影响

嗜水气单胞菌是淡水鱼流行性败血症的主要致病菌。在采用添加150 mg/kg剂量的止痢草提取物饲料投喂3周后,对罗非鱼腹腔注射嗜水气单胞菌,在其攻毒168 h后,采用常规石蜡切片技术和电镜超薄切片技术,设阳性对照和阴性对照,对经人工感染嗜水气单胞菌后发病并具典型症状的罗非鱼进行病理学观察。结果表明:人工感染嗜水气单胞菌后发病与自然发病的病理变化相似。患病罗非鱼的肝脏、鳃等组织器官发生了不同程度的病变,其病理特征主要表现为:细胞浊肿、变性、坏死,某些细胞的细胞核固缩、碎裂或崩解;超薄切片电镜下可见细胞内线粒体内嵴受损严重。病变最严重的区域,组织细胞坏死崩解成一片无结构的物质。推测肝脏、肾和鳃是病原体感染罗非鱼的主要靶器官,具有重要生理功能的肝脏、鳃发生了严重病变。线粒体是罗非鱼的重要产能结构,其功能也遭到破坏,这些可能是导致罗非鱼发病死亡的病理学基础。但从病理切片中可以看到,饲料中补充止痢草提取物后,其病症有明显缓解或减轻的趋势。     

自由基在鸭病毒性肝炎发病过程中的作用

用不同毒力的鸭肝炎病毒株人工感染雏鸭，建立了鸭病毒性肝炎病理模型。于感染后1、3、5、7d剖杀雏鸭，采集血液和肝脏样品，测定血浆和肝组织中的一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)，研究了自由基在鸭病毒性肝炎发病过程中的作用。结果表明：雏鸭感染不同毒力株鸭肝炎病毒后1d，血浆NO含量开始上升，3d显著或极显著高于对照组，并持续至试验结束；肝组织NO含量在感染后1d便显著升高。不同毒力株感染组雏鸭血浆和肝组织中SOD活性在感染后1d便低于或显著低于对照组，而不同毒力株感染组雏鸭血浆和肝组织中的MDA却高于或显著高于对照组。提示，雏鸭感染鸭肝灸病毒后产生的自由基在鸭病毒性肝炎的发病过程中起重要作用。     

大肠杆菌病对鸡肝脏和脾脏组织结构的影响

为了阐明大肠杆菌病对鸡肝脏和脾脏组织结构的影响,本试验采集来自洛阳市周边县区规模化养鸡场自然发病的鸡(30~150日龄)50例,经临床症状和实验室检测最终确诊为大肠杆菌感染,收集其肝脏和脾脏,经10%的福尔马林溶液固定,常规石蜡包埋,切片,制片,HE染色,观察,分析肝脏和脾脏组织结构的病理变化。病鸡临床上表现为精神萎靡,产蛋停止,排出绿白色稀粪,粪便中混有蛋清,具有恶臭味,并短期死亡;剖检可见肝脏实质内有白色坏死灶,有时呈铜绿色,纤维素性肝周炎,脾脏肿大;显微镜下可见肝脏严重淤血,肝细胞素紊乱,窦状隙扩张,充满红细胞,肝细胞发生脂肪变性,部分细胞发生凝固性坏死。脾脏淤血,出血严重,脾小体结构消失,局部坏死,淋巴细胞减少,网状细胞增生。     

鸡包涵体肝炎的诊断与防治

鸡包涵体肝炎是由禽腺病毒引起鸡的急性传染病,以病鸡死亡突然增多,严重贫血、黄疸、肝脏重大出血和坏死灶,可见肝细胞核内有包涵体为特征。该病又称贫血综合征。1流行特点本病可发生水平和垂直传播,在自然感染时,病毒可通过消化道、呼吸道、眼结膜感染发病。     

A型产气荚膜梭菌感染绿壳蛋鸭的病理发生学研究

为了探究A型产气荚膜梭菌感染鸭后的病理变化情况。选取37日龄健康绿壳蛋鸭灌喂A型产气荚膜梭菌进行人工感染,观察不同时间的临床症状和病理变化。结果:感染72 h后病鸭开始出现腹泻症状,随着时间的增加,临床症状表现越来越明显。96 h后出现褐色粪便,剖检可见部分组织间有纤维素性渗出液。120 h后剖检可见部分组织有出血点。144 h后鸭出现死亡,剖检可见以十二指肠、空肠、回肠的出血点及坏死最为严重,该时期的病理切片观察结果主要为:十二指肠肠腔充满变性、脱落、坏死的上皮细胞,肠绒毛发生崩解脱落并有血细胞和少量炎性细胞浸润,间杂大量淋巴细胞;回肠绒毛总体结构较为完整,部分肠绒毛发生断裂,并伴有充血现象;空肠肠腔充满变性、脱落、坏死的上皮细胞,肠绒毛发生崩解脱落,并有血细胞和少量炎性细胞浸润,肌纤维间隙较大、断裂、密度明显减小。