重金属镉螯合物人工抗原的合成与鉴定

[目的]合成并鉴定重金属镉螯合物抗原。[方法]以乙二胺四乙酸(EDTA)或二乙烯三胺五乙酸(DTPA)为双功能螯合剂,合成了半抗原,并将半抗原与载体蛋白钥孔戚血蓝素(KLH)或卵清蛋白(OVA)偶联制备完全抗原,对其进行浓度测定、紫外分光光度计扫描、SDS-PAGE电泳定性鉴定和石墨炉原子吸收光谱法检测。[结果]利用二喹啉甲酸(BCA)法检测分离纯化后的的Cd-DTPA-OVA、Cd-EDTA-KLH、DTPA-OVA和EDTA-KLH中蛋白的实际浓度依次为1.862±0.038、5.121±0.024、25.155±0.014和8.459±0.018mg/m l,紫外扫描和电泳鉴定证明,抗原合成成功;用吸收光谱法检测的上述抗原中的镉离子含量依次为34.6±0.3、96.5±0.5、0和0μg/m l,表明半抗原确实偶联到蛋白质上,进一步证明抗原合成成功。[结论]该研究为重金属螯合物单克隆抗体的制备和建立快速检测方法奠定基础。     

Cu^2＋·Zn^2＋·SDS·DBS对凡纳滨对虾仔虾的毒性试验

[目的]研究Cu^2＋、Zn^2＋和SDS、DBS对凡纳滨对虾仔虾的毒性,为对虾人工育苗用水的水质管理提供参考依据。[方法]用Cu^2＋、Zn^2＋ 2种重金属离子和十二烷基硫酸钠（SDS）、十二烷基苯磺酸钠（DBS）2种阴离子表面活性剂对720尾凡纳滨对虾仔虾进行96h急性毒性试验。[结果]结果表明,Cu^2＋、Zn^2＋、SDS、DBS对凡纳滨对虾仔虾的毒性大小依次为Cu^2＋〉Zn^2＋〉SDS〉DBS;对凡纳滨对虾仔虾的安全浓度分别为0．014、0．028、0．320、0．800ms／L。[结论]Cu^2＋、Zn^2＋、SDS、DBS对凡纳滨对虾的毒性均随着处理浓度升高、处理时间延长而增强。     

重金属镉离子人工抗原的合成与鉴定

选用螯合剂Isothioeyanobernzy-EDTA(ITCBE)络合重金属镉离子,再分别与载体蛋白BSA和KLH相连接,初步制备免疫抗原Cd-ITCBE-KLH和检测抗原Cd-ITCBE-BSA.通过BCA法测定完全抗原浓度,并利用SDS-PAGE电泳、紫外分光光度法及石墨炉原子吸收法对所合成抗原进行初步鉴定;BCA法测出Cd-ITCBE-BSA、Cd-ITCBE-KLH及ITCBE-BSA的实际蛋白浓度依次为1.426,1.504,0.890 mg/mL.SDS-PAGE电泳和紫外分光光度法定性的说明抗原合成成功,石墨炉原子吸收法测得完全抗原中镉离子含量最高可达44.56μg/mL,其他无金属抗原、载体蛋白和Hepes中镉离子含量几乎为0,定量地说明了抗原合成成功.     

Fe·Zn对上海青白菜种子萌发和幼苗生理生化的影响

[目的]研究Fe、Zn对上海青种子萌发和幼苗生理生化的影响。[方法]以上海青为材料,研究不同浓度的Fe、Zn污染对上海青种子萌发、幼苗生长、叶绿素含量和过氧化氢酶活性的影响。[结果]低浓度（≤0．05mmoL／L）的Fe^2＋、Zn^2＋对上海青白菜萌发率、鲜重、叶绿素含量无明显影响;浓度过高就会产生一定的抑制作用。随着Fe^2＋、Zn^2＋浓度增大,上海青白菜的鲜重、叶绿素含量呈逐渐下降趋势。随Fe^2＋浓度的增高,上海青白菜植株内的过氧化氢酶活性逐渐升高;Zn^2＋表现出先促进后抑制,在浓度为0．25mmol／L处酶活性最大。[结论]Fe、Zn胁迫对上海青种子的萌发影响不大,对幼苗的生长影响较大。     

原生态从江香禾糯中锌和镍的含量及其生理功能研究

[目的]测定从江香县禾糯中的锌（Zn）和镍（Ni）含量,探讨其在人体内的生理功能。[方法]以产自长寿之乡黔东南林区从江县的原生态香禾糯稻米为样品,用火焰原子吸收光谱法作测定,先采用正交试验确定Zn和M的最佳仪器测试条件,再采用微波消解FAAS法在绘制标准曲线的基础上对从江香禾糯中微量元素锌（Zn）和镍（Ni）的含量进行测定,并研究这2种元素在人体内的生理功能。[结果]标准曲线的绘制表明,Zn的线性回归方程为：c＝0．4946A＋0．0084,相关系数r=0．9996;Ni的线性回归方程为：c=0．0479A＋0．0030,相关系数r=0．99964。锌和镍含量的测定表明,从江香禾糯米含微量元素Zn和Ni分别为11．25和0．41mg／kg。[结论]黔东南林区从江县的原生态香禾糯稻米中含有适量的Zn和Ni,不但可以安全食用,而且还可以补充微量元素,达到延寿安康的效果。     

根生长法测定柳树对重金属的耐性研究

[目的]探讨柳树对单一或复合重金属的耐性大小,为木本植物修复重金属污染土壤提供理论依据。[方法]采用根生长法研究重金属Cu^2＋、Pb^2＋、Zn^2＋及3者混合液对柳树枝条不定根生长的影响。[结果]不同浓度的重金属溶液对柳树枝条不定根的生长存在显著影响。当Cu^2＋浓度高于15 mg/L、混合溶液浓度高于20 mg/L、Zn^2＋浓度高于30 mg/L时,柳树枝条均无不定根生成;溶液浓度达到40mg/L时,只有Pb^2＋处理组能长出不定根;随着溶液浓度的升高,柳树枝条不定根的数目逐渐下降;浓度为5 mg/L的Zn^2＋处理组柳树枝条不定根数目最多。其他浓度中,Pb^2＋处理组不定根数目最多、根长及平均根长最长、生根率最高。[结论]柳树枝条对Pb2＋的耐受性最强,对Cu^2＋的耐受性最弱。柳树对3种重金属及3者混合液的耐受性大小依次为：Pb^2＋〉Zn^2＋〉Cu^2＋＋Pb^2＋＋Zn^2＋〉Cu^2＋。     

非完全消化-火焰原子吸收法测定小麦中微量元素

[目的]建立快速测定小麦中微量元素的火焰原子吸收分析法。[方法]以非完全消化法处理样品,采用原子吸收光谱法测定小麦中Fe、Zn、Ca、Cu、Mn5种微量元素的含量。[结果]测定结果的相对标准偏差小于2．8％,测定结果与湿法一致,相对误差小于2．0％。[结论]该方法耗时短,酸用量少,能够快速准确的测定小麦中的铁、锌、钙、铜、锰。     

铜、铅、锌对黄芪生长及其DNA损伤的影响

【目的】探究重金属铜、铅、锌胁迫对药用植物黄芪植物种子萌发、生根、叶片叶绿素含量和DNA损伤的影响,为黄芪无公害栽培和药材基地环境评价提供理论依据。【方法】以内蒙特色药用植物黄芪为材料,设置不同浓度重金属（0-300mg／L）单一和复合污染（Zn200／Cu200、Zn200／Pb200、Pb200／Cu200mg／L）,观察黄芪生长状况及其叶片叶绿素含量的变化,并利用单细胞凝胶电泳技术检测黄芪DNA损伤情况。【结果】在0-100mg／L时,Cu^2＋、pb^2＋、Zn^2＋单一胁迫可促进黄芪种子萌发,大于100mg／L时则抑制种子萌发。随着黄芪培养时间的延长和重金属离子处理浓度的升高,Ph^2＋处理的黄芪根生长受抑制逐渐增强,黄芪根长变短;Cu^2＋、Zn2＋处理的黄芪根长呈先升高后降低的趋势,在不同时期内两者最长根长出现的处理浓度分别为60和100mg／L。3种重金属Cu^2＋、Ph^2＋、Zn^2＋单一处理后,黄芪总叶绿素含量呈先增后降的变化趋势,当Cu2＋@理浓度高于100mg／L、Zn^2＋处理浓度高于200mg／L、pb^2＋处理浓度高于60mg／L时,黄芪叶片叶绿素含量最高,随后不断降低。Cu／Zn、Zn／Pb复合胁迫,会降低彼此的毒害作用;cu与zn复合胁迫,对彼此毒害作用影响不大。随着重金属Zn^2＋、Pb^2＋、Zn^2＋浓度的增加,对黄芪DNA的伤害程度不断加大,Pbz抛理造成的损伤最大,Cun处理次之,Zn^2＋处理最小。【结论】一定含量的Ph^2＋、Cu^2＋、Zn^2＋对药用植物黄芪种子萌发、生根、叶绿素含量具有一定毒害作用,且随重金属浓度的增加,毒害程度加深。3种重金属离子的毒性大小排序为Pb^2＋〉Cu^2＋〉Zn^2＋。     

根生长法测定柳树对重金属的耐性研究（摘要）

[目的]探讨柳树对单一或复合重金属的耐性大小,为木本植物修复重金属污染土壤提供理论依据。[方法]采用根生长法研究重金属Cu^2＋、Pb^2＋、Zn^2＋及3者混合液对柳树枝条不定根生长的影响。调查项目包括柳树枝条不定根的数目及长度,并由此计算生根率、抑制率和耐性指数。[结果]不同浓度的重金属溶液对柳树枝条不定根的生长存在显著影响。当Cu^2＋浓度高于15mg/L、混合溶液浓度高于20mg/L、Zn^2＋浓度高于30mg/L时,柳树枝条均无不定根生成;溶液浓度达到40mg/L时,只有Pb^2＋处理组能长出不定根;随着溶液浓度的升高,柳树枝条不定根的数目逐渐下降;浓度为5mg/L的Zn^2＋处理组柳树枝条不定根数目最多。其他浓度中,Pb^2＋处理组不定根数目最多、根长及平均根长最长、生根率最高。[结论]柳树枝条对Pb^2＋的耐受性最强,对Cu^2＋的耐受性最弱。柳树对3种重金属及3者混合液的耐受性大小依次为Pb^2＋〉Zn^2＋〉Cu^2＋＋Pb^2＋＋Zn^2＋〉Cu^2＋。     

基于微波消解-原子吸收光谱法进行土壤重金属检测方法的研究

[目的]选择微波消解来进行土壤样品前处理,原子吸收光谱法测定重金属元素,以期提高土壤重金属检测效率。[方法]对三种标准土样进行检测,并对农田土壤样品进行三个水平的添加回收试验。[结果]结果表明,微波消解-原子吸收光谱法测定土壤铜、锌、锰、镍、铬以及镉时,标准土样的回收率为94%-107.69%,农田土壤添加回收率为87.08%-104.34%。[结论]该方法可以用作土壤重金属检测。     

氯化锌法制备木质素活性炭的研究

[目的]优化氯化锌制备高性能活性炭的操作参数。[方法]以从棉浆黑液中提取的酸析木质素为原料,采用氯化锌活化法制备木质素活性炭,并以得率和碘吸附值为考察指标,选择氯化锌浓度等4个因素进行正交试验,确定最佳工艺条件。[结果]4因素对氯化锌制备活性炭的影响依次为:陈放温度>陈放时间>浸渍比>氯化锌浓度;最佳工艺条件为:陈放时间12 h、陈放温度120℃、浸渍比1∶3、氯化锌溶液浓度40%、活化温度600℃、活化时间70 min、升温速率10℃/min;制备的活性炭得率为46.39%、碘吸附值839.68 mg/g、亚甲基蓝吸附值5.5 ml/0.1g、A法焦糖脱色率120%、水分4.81%、灰分5.29%。[结论]用氯化锌活化法制备棉浆木质素活性炭方法简单,节约资源,减少环境污染,具有广泛的应用前景。     

锌对根霉和酵母生长的影响

[目的]选出最适合根霉与酵母生长的锌浓度,为含锌根霉及酵母的生产提供理论依据。[方法]分别从4个酒曲厂的酒曲中分离纯化得到根霉和酵母菌种,用不同锌浓度的液体培养基培养,观测其菌落的生长情况并对其生物量进行统计分析。[结果]来自后山湾的酒曲的根霉生长最好,来自金子坝的酒曲的酵母生长最好。不同浓度锌时根霉与酵母生长的影响有较大的不同,当锌浓度在0-1mg／L范围内时,孢子长势较好,孢子数增加了1倍;当锌浓度超过5mg／L时,孢子数下降,且锌浓度越高孢子数越少。锌浓度为1mg/L时最适合两株菌生长。当锌浓度在0～1mg／L范围内时,菌落生长良好,1mg／L锌浓度的菌落重量为无锌菌落的两倍。[结论]低浓度锌促进根霉与酵母的生长,高浓度锌抑制其生长。     

玉米蛋白水解物螯合锌的工艺研究

[目的]优化玉米蛋白水解物与锌的螯合工艺。[方法]以玉米蛋白粉为材料,氯化锌作为锌源,通过单因素试验研究玉米蛋白水解物的制备方法、玉米蛋白水解物与锌质量比、pH值对螯合反应的影响,并采用正交试验对螯合工艺进行优化,化学方法对螯合物进行初步鉴定。[结果]最佳的螯合工艺条件为：玉米蛋白水解物的制备方法为木瓜蛋白酶结合中性蛋白酶法,pH值8.0,玉米蛋白水解物与锌质量比3∶1;该条件下螯合物得率和螯合率分别为77.8%和97.7%;该试验制备的螯合物是一种不同于玉米蛋白水解物和锌的新物质。[结论]为玉米蛋白水解物与锌的螯合物的生产提供技术支持。     

鸡传染性贫血病胶体金快速诊断试纸条的研制——鸡传染性贫血血清抗体的制备、纯化及检测

[目的]为建立鸡传染性贫血病(CIA)诊断方法奠定基础。[方法]对15周龄SPF鸡进行4次免疫后,制备鸡传染性贫血病血清抗体并对其进行纯化,测定抗原最佳包被浓度和血清的最佳稀释度,研究纯化后血清抗体的蛋白含量和效价。[结果]阳性血清和阴性血清的最佳稀释度为1∶100,病毒包被抗原最佳包被浓度为5μg/ml。血清抗体蛋白含量为13.2 mg/ml,血清抗体效价为1∶12 800。[结论]该研究为制备CIA胶体金快速诊断试纸条奠定了基础。     

几种微量元素和维生素对灵芝多糖及灵芝酸含量的影响

[目的]明确液体培养时添加微量元素及维生素对灵芝多糖和灵芝酸含量的影响。[方法]在灵芝培养液中添加不同浓度的硫酸亚铁、硫酸锌、VB1,和复合VB,采用液体浅层静置培养法时神芝和泰芝进行培养,并测定芝培养液和菌丝体中的灵芝多糖和灵芝酸含量。[结果]灵芝多糖含量以添加1．0‰VB1最高,其培养液中为6．00mg/m1,菌丝体中为552．5mg／g,分别是空白对照的5．45倍和2．58倍;灵芝酸含量也以添加1．0‰VB1最高,其菌丝体中为23．56mg／g,而各处理培养液的灵芝酸含量均很低;添加0．1‰～0．2‰硫酸锌和1．0‰复合VB,也能显著提高灵芝多糖和灵芝酸含量。不同灵芝菌株的灵芝酸含量有很大差异,神芝的灵芝酸含量为泰芝的2倍。[结论]添加适量的铁、锌、VB1及复合VB能显著提高灵芝多糖和灵芝酸含量。     

金黄色葡萄球菌B型肠毒素的酶联免疫检测

[目的]为细菌毒素的检测提供理论依据。[方法]以BALB/c小白鼠为免疫对象,以自制的高纯度金黄色葡萄球菌B型肠毒素(SEB)为免疫抗原,研究其抗体的产生过程和效价,并建立SEB的间接竞争ELISA检测方法。[结果]自制SEB纯度较高,能较好地刺激动物产生抗体。以自制SEB为免疫抗原注射BALB/c小白鼠,其最高效价为1∶100 000。SEB浓度在1~1 000 ng/ml范围内,竞争抑制率与SEB浓度的对数值呈显著线性关系。当SEB的浓度为5~500 ng/ml时,随样品中SEB浓度的增加,污染样品的回收率变异系数减小,检测准确度提高。[结论]对不同污染程度的牛奶样品,利用间接竞争ELISA法检测其SEB残留的灵敏度远远高于生化法。     

微波辅助法提取荠菜中总黄酮的工艺研究

[目的]研究微波辅助法提取荠菜中总黄酮类化合物的工艺。[方法]采用微波辅助法提取荠菜中总黄酮,利用均匀设计实验方法,研究微波辐射时间、乙醇浓度、料液比、乙醇溶液中NaOH浓度对总黄酮提取率的影响。[结果]各因素对总黄酮提取率的影响依次为:微波辐射时间>料液比>乙醇溶液中NaOH浓度>乙醇浓度,说明微波辐射时间对总黄酮提取率的影响最大,乙醇浓度的影响最小。在微波功率400 W的条件下,微波辅助法提取荠菜中总黄酮的最佳工艺为:乙醇为提取剂,微波辐射时间7 min,乙醇浓度65%,料液比1∶25(g∶ml),乙醇溶液中NaOH浓度2%。[结论]在最佳工艺条件下,微波辅助法提取荠菜中总黄酮的提取率达2.30%。     

Cu^2＋对草履虫体内多糖含量的影响

[目的]研究Cu^2＋对草履虫体内多糖含量的影响。[方法]通过用含不同质量浓度Cu^2＋的稻草液培养大草履虫,提取其体内多糖．用蒽酮一硫酸法进行检测,研究Cu^2＋对大草履虫体内多糖含量的影响。[结果]0．05mg/L可能是大草履虫适应Cu^2＋的临界质量浓度,低于此浓度时,大草履虫体内的多糖含量随着Cu^2＋质量浓度增大而呈现小幅度的增高,大草履虫的生长繁殖得到增强,高于此浓度时．大草履虫体内的多糖含量随着Cu^2＋质量浓度增大而显著地降低,大草履虫生长繁殖开始明显受到抑制,且浓度越高受毒害越明显。[结论]草履虫对Cu^2＋表现出较高的敏感性,是一种对水体卫生质量评价的较理想指示生物。     

适于TAIL-CR模板的水稻基因组DNA提取方法的优化

[目的]筛选适合作为TAIL-PCR模板的水稻基因组DNA提取方法。[方法]采用5种方法提取水稻叶片基因组DNA,筛选出DNA纯度及浓度较高的、适合作为TAIL-PCR模板的水稻基因组DNA提取方法。[结果]改良的SDS法及CTAB法提取的基因组DNA纯度及浓度较高,效果明显优于脲法及简易法。以TAIL-PCR技术对选择的同一个含Ds元件的样品的5种提取方法的基因组DNA作为模板进行Ds侧翼序列的扩增,改良的SDS法及CTAB法得到的条带特异,这些产物经回收、纯化后可直接用于序列的测定。但考虑到CTAB价格比较昂贵,毒性较大,一般不主张采用。[结论]改良的SDS法提取的水稻基因组DNA最适作为TAIL-PCR的模板。