应用鸡胚培养试验检验鸡病毒病(Ⅲ)

4.5 鸡传染性支气管炎病料呼吸道分泌物,有病变的气管、肺。制成5—10倍悬液。接种途径经绒毛尿囊膜接种8—10日龄鸡胚。培养结果检查即便病料中含有鸡传染性支气管炎病毒,初次接种鸡胚时,亦缺乏显著病痕。然而,当用接种鸡胚尿囊液,经鸡胚连续继代2～3次后,再接种鸡胚时,便可出现本病特征性病变。鸡胚的死亡率,随继代次数的增加而增高,死亡时间亦随着提前。本病在鸡胚的特征性病变为,出现僵胚(侏儒胚)其大小有时仅为正常胚的     

腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及免疫试验

从山东省某鸡场发生的以腺胃肿大为特征病变的病鸡群中分离获得了 1株具有冠状病毒特性的病毒。该分离毒株在电镜下可见到直径为 80～ 14 0 nm、有囊膜及纤突呈冠状排列的病毒粒子。感染鸡胚的尿囊液没有血凝活性 ,经1%胰酶处理后能凝集鸡红细胞 ,其血凝活性可被传染性支气管炎部分毒株的阳性血清所抑制 ;经 SPF鸡胚传代时 ,可使胚胎发生规律性死亡 ,胚体卷缩 ,呈现明显的侏儒胚特征 ;接种于 10日龄 SPF雏鸡 ,从具有相似病变特征的病鸡腺胃组织中可再分离到该病毒。血清中和试验表明 ,部分传染性支气管炎病毒株阳性血清对其具有不同程度的中和作用。据此 ,确定该分离株为可导致鸡腺胃肿大的传染性支气管炎病毒。用具有腺胃肿大病变的病鸡脏器制备的组织灭活疫苗和用传代鸡胚尿囊液制备的油乳剂灭活疫苗 ,可使鸡获得较好的免疫力 ,能有效地预防本病的发生     

鸡传染性支气管炎病毒的分离和鉴定

为掌握发病鸡场的致病原,将临床病料接种SPF鸡胚分离得到一株病毒,通过胚体病变特征、血凝试验、RT-PCR检测、动物回归试验等对该病毒进行了鉴定,结果显示:病料处理接种鸡胚后48~144 h内鸡胚全部死亡,剖检死亡鸡胚可见胚体存在蜷缩、发育矮小等特异性病痕,收获的鸡胚尿囊液无血凝性,RT-PCR检测为鸡传染性支气管炎病毒阳性,动物回归试验中接种的SPF雏鸡可复制出现鸡传染性支气管炎的典型症状。     

腺胃病变型IBV豫北株的分离鉴定及灭活苗的研制

1998年 9月豫北地区发生了以腺胃肿大为特征的传染病 ,采集腺胃组织进行病原分离 ,鸡胚传至 8代以上 ,鸡胚开始出现典型侏儒化和规律性死亡 ;鸡胚尿囊液 (YBXD)经磷钨酸负染后电镜下可以看到有囊膜和纤突、圆形、直径 90～ 1 60nm的病毒粒子 ;未经处理的YBXD毒株不能凝集鸡红细胞 ,经卵磷脂酶C处理后能凝集鸡红细胞 ,此凝集能特异地被抗YBXD高免血清所抑制。用所分离毒株制备油佐剂灭活苗预防传染性支气管炎取得良好效果     

腺胃型鸡传染性支气管炎病毒的初步分离与鉴定

为了获得更多的腺胃型鸡传染性支气管炎病毒分离株并研究其生物学特性,试验从黑龙江省某鸡场发生的以腺胃肿大为特征的病死鸡中分离到1株具有冠状病毒特性的病毒,通过鸡胚传代、血凝性测定、电镜观察、RT-PCR检测和动物回归试验对其进行了初步鉴定。结果表明:该病毒分离株在SPF鸡胚上传至第5代开始出现死亡或典型的侏儒胚;病毒不能直接凝集鸡红细胞,经1%胰酶处理后表现出血凝活性,血凝效价达28;透射电镜下可见有囊膜和纤突,直径为80～120nm的病毒粒子,具有冠状病毒的典型形态特点;分离株病毒第5代尿囊液经N基因特异性RT-PCR获得大小约438bp的目的片段;分离株病毒第5代尿囊液接种于14日龄SPF雏鸡,复制出与临床中相似的病理变化,同时从肿大的腺胃中能重新分离到该病毒。初步确定所分离病毒为腺胃型鸡传染性支气管炎病毒。     

快速检测IBV的平板凝集试验

美国学者 Miguel Ruano等建立了一种血凝 (HA)试验，用于快速检测鸡胚尿囊液中的传染性支气管炎病毒 (IBV)。试验检测了 468份疑似传支病鸡的气管和盲肠扁桃体样品。样品经处理后接种鸡胚尿囊腔，收集尿囊液，并用神经氨酸酶处理，然后取 50μ L酶处理的尿囊液与 5％的鸡红血球悬液 (CRBCs)在陶瓷板上混合，在 1 min内判定结果，凝集者为阳性。应用本方法检测接种一种或两种其它禽病病毒的鸡胚尿囊液，以测定其特异性。该方法的敏感性与鸡胚病变及 RT— PCR检测结果作比较。试验结果表明，这种平板血凝试验不仅敏感、特异，可重复性…     

鸡腺胃型传染性支气管炎的实验病理学研究

用疑似鸡腺胃型传染性支气管炎病鸡的腺胃组织匀浆，经除菌处理，人工接种健康雏鸡，出现典型症状，继而死亡。对人工感染病例进行了系统的病理学观察。人工感染病例和自然病例的病理变化基本相同，其主要眼观病理变化为腺胃显著肿大、出血；主要组织学变化为腺胃粘膜充血、出血、炎性水肿和浅层坏死。从自然病例和人工发病病例腺胃中均可分离到传染性支气管炎病毒。     

一株鸡传染性支气管炎病毒的分离和鉴定

对枣庄市某养鸡场送检的疑似鸡传染性支气管炎病料进行分离和鉴定,通过发病鸡场病鸡临床症状观察,病理解剖,实验室PCR检测,鸡胚致病性试验、血凝实验,对鸡新城疫病毒的干扰试验、动物回归试验等,一系列试验结果表明,该病的临床症状和病理变化典型,实验室PCR检测为鸡传染性支气管炎阳性,病料处理接鸡胚后,24-48h鸡胚全部死亡,死亡鸡胚表现失水、蜷缩、发育小等特异性病痕,收获的鸡胚尿囊液无血凝性,分离毒对NDV感染有干扰作用;动物回归试验接种SPF雏鸡可复制出现鸡传染性支气管炎的典型症状。表明该鸡场确实发生了鸡传染性支气管炎病毒的感染,春季是该病的高发季节,应加强对该病的诊断和防控。     

鸡传染性腺胃炎的人工复制试验

试验采用疑似鸡传染性腺胃炎病鸡的腺胃组织匀浆,经除菌处理后人工接种健康雏鸡,并进行了系统的动态病理学观察。结果表明：人工感染病例和自然病例的病理变化基本相同,其主要眼观病理变化为腺胃显著肿大、出血,小肠充血、出血;主要组织学变化为腺胃黏膜充血、出血、炎性水肿和浅层坏死,小肠黏膜急性炎症变化,肝脏、肾脏等实质细胞变性以致局灶性坏死,胸腺及法氏囊等淋巴组织萎缩。从自然病例和人工感染病例腺胃中均可分离到传染性支气管炎病毒。因此,可以认为传染性支气管炎病毒是鸡传染性腺胃炎的一种病原。     

鸡肾型传染性支气管炎的诊断与防治

生以拉白色稀粪、严重脱水、肾脏肿大为特征的疾 接种后死亡的鸡胚尿囊液,盲传数代,鸡胚出现明病,经临床观察,结合剖检变化和实验室诊断,确 显卷曲、微缩,输尿管有细线状白色尿酸盐沉积,诊为鸡肾型传染性支气管炎,现报道如下。 肾肿大,胚体出血严重。1 发病情况 4.3 琼脂扩散试验取病毒学检查所制备的上 该场于2003 年2 月9 号自陕西商南某孵化 清液分别与标准的传染性支气管炎、传染性法氏场引进商品代雏鸡3　500 余只,按孵化场提供的 囊病阳性血清作琼脂…     

鸡胚不同接种途径对鸡安卡拉病毒徐州株增殖的影响

为了探寻鸡安卡拉病毒徐州株(FAdV-4 SN2016株)接种SPF鸡胚不同部位后的增殖规律,从而明确该病毒最为适合的接种途径及病毒收获组织,试验采用6～8日龄卵黄囊、9～10日龄尿囊腔以及9～10日龄尿囊膜3种接种途径对SPF鸡胚分别接种,培养数日后均收集接种鸡胚的尿囊液、尿囊膜及肝脏组织,采用实时荧光定量PCR方法测定尿囊液、尿囊膜及肝脏组织中的病毒载量。结果表明:FAdV-4 SN2016株在所收集的鸡胚各组织中均有病毒复制,3种接种途径获得的病毒载量最高的组织是卵黄囊途径接种后收获的肝脏组织,经尿囊腔途径接种鸡胚后在肝脏组织中的病毒载量也相对较高,而经尿囊膜途径接种鸡胚后在尿囊膜上的病毒载量也相对较高。说明不同接种途径对FAdV-4 SN2016株在SPF鸡胚中的增殖影响比较大,该病毒经卵黄囊途径接种鸡胚后在鸡胚肝脏组织中的增殖效果最好。     

应用荧光PCR诊断鸡腺胃型传染性支气管炎

应用荧光PCR试剂盒对临床表现为消瘦和腺胃肿大为特征的患鸡病料进行鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)和鸡马立克氏病病毒(MDV)核酸检测。结果显示:鸡传染性支气管炎病毒荧光RT-PCR检测为阳性,禽网状内皮组织增殖病病毒荧光RT-PCR检测为阴性,鸡马立克氏病病毒荧光PCR检测为阴性。结合患鸡精神沉郁,极度消瘦,腺胃肿大如球状等的临床表现,综合分析表明该患鸡发病主要病因为感染鸡腺胃型传染性支气管炎病毒。     

我国鸡传染性支气管炎病毒地方分离株生物学特性的研究

从我国新疆维吾尔自治区某鸡场发病症状及病理变化疑似鸡传染性支气管炎的病鸡有出血点病变的腺胃组织中分离病毒，在9－11日龄SPF鸡胚上连续传代9次，通过病毒对鸡胚的致病作用、病毒在电镜下的形态观察、病毒在鸡胚中的增殖动态变化、病毒在CEF中的增殖特性、凝集鸡红细胞的特性以及动物回归试验等来研究我国鸡传染性支气管炎病毒地方流行株的生物学特性。结果表明，该毒株的第一代尿囊液对鸡胚无肉眼可见的致病作用，当继代到第5代后，胚体严重病变；电镜观察该病毒为典型的冠状病毒；病毒在鸡胚中随着接种病毒时间的延长，其效价增高，96小时可达到48小时的1倍，该毒株可在CEF上生长，但不能形成明显的蚀斑；并且经1％胰酶处理后可疑集鸡红细胞；鸡胚的第4代尿囊液病毒回归动物体，可致鸡病变病死鸡肾脏病变尤为明显，呈典型的花斑肾，腺胃则未见肉眼可见的病变，接种鸡、同居鸡和对照鸡之间NDV疫苗免疫后其HI抗体水平无明显差异，但从发病症状来看，IBV对ND疫苗具有干扰作用。     

传染性腺胃炎病毒ZJ_(971)株的一些生物学特性

传染性腺胃炎病毒 (暂定名 )ZJ971毒株经鸡胚传代 ,可致鸡胚矮小并干扰新城疫在鸡胚中的复制。感染胚尿囊液经 1%的胰酶处理后可凝集鸡和鼠的红细胞。电镜观察可见 80～ 190nm大小的冠状病毒粒子。ZJ971毒株对热 (56℃ )、酸 (pH3)、碱 (pH12 )、乙醚和氯仿敏感 ,对反复冻融、胰酶不敏感。ZJ971毒株与传染性支气管炎病毒M4 1、T、Gray、Holte毒株病毒血清交叉中和的抗原相关R值分别为 :0 0 0 13、0 0 0 0 6、0 0 0 0 5、0 0 0 0 3。人工感染鸡生长发育障碍、胸腺萎缩 ,腺胃指数、腺肌胃指数增加 ,囊体指数下降。上述结果初步显示ZJ971毒株是不同于鸡传染性支气管炎病毒的冠状病毒 ,并首次在实验动物感染成功。     

鸡传染性支气管炎病毒HZ13株的分离与鉴定

从浙江省某肉鸡养殖场发生疑似肾型传染性支气管炎的发病鸡群中采集病料,进行病毒分离。结果显示,经1%胰酶处理后,该病毒尿囊液可以凝集鸡的红细胞,而未处理的病毒尿囊液则无此凝集活性;该分离株对新城疫病毒(La Sota)株增殖具有明显的抑制作用;对10日龄鸡胚的致病变率达100%;通过鸡胚矮小化试验和动物回归试验,发现该分离株能引起鸡胚和病鸡典型的临床症状和病理变化;RT-PCR可扩增出768 bp片段,测序比对结果证实分离获得了1株肾型鸡传染性支气管炎病毒,命名为HZ13株。     

肉仔鸡腺胃型传染性支气管炎与念珠菌病混合感染的诊治

鸡腺胃型传染性支气管炎是由冠状病毒引起的鸡传染性支气管炎的变型疾病,主要病变发生在腺胃;鸡的念珠菌病又称鹅口疮、霉菌性口炎,是由白色念珠菌引起的一种霉菌性传染病。今年 9月份,我站禽病咨询门诊接待了一起以口腔、食道、嗉囊粘膜表面覆盖一层灰白色绒毛样伪膜,腺胃肿大如球状,腺胃壁增厚,腺胃粘膜出血、溃疡为主要病变的病死鸡。经诊断为鸡腺胃型传染性支气管炎与白色念珠菌病混合感染,现将诊断与治疗等有关情况报道如下： 1发病情况 　　1999年 8月 19日,哈尔滨市太平镇聂某从本市呼兰县购进 AA肉仔鸡 2 000只,在 8日龄…     

鸡新城疫与鸡痘二联活疫苗的研究

目前,我国各兽药生物制品厂所生产的鸡痘活疫苗一般分为两种,一种是鸡痘组织苗,即在鸡胚绒毛尿囊膜上接种鸡痘种毒,接种后120小时收获其增厚、水肿和有痘斑的全部绒毛尿囊膜制备的鸡痘苗,另一种则是鸡痘细胞苗,在免疫原性上前者要好于后者.鸡胚在接种鸡痘种毒后,不但绒毛尿囊膜产毒,而且其尿囊液和出现充血的胎儿中也会有很高浓度的鸡痘病毒.而制造鸡新城疫疫苗主要是收取尿囊液.     

鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

为对某鸡场发生的呼吸道疫病进行确诊,并对致病原进行分离和鉴定,本研究进行了发病鸡场临床诊断、病毒分离、分离毒株血凝试验、分离毒株RT-PCR检测以及序列分析等系列试验。试验结果显示,该病的临床特征疑似鸡传染性支气管炎病毒感染,临床病料样品接种鸡胚后可引起鸡胚死亡以及"侏儒胚"等典型症状,分离毒株无血凝性,分离毒株经传染性支气管炎病毒特异性引物检测为阳性,且序列分析显示RT-PCR扩增产物为鸡传染性支气管炎病毒特异性核苷酸序列,表明引起鸡场此次疫病的致病原为鸡传染性支气管炎病毒。     

鸡传染性腺胃炎病原分离及鉴定

１９９８ 年６ 月～７ 月，河北省玉田县某个体户蛋种鸡场孵化出的海赛商品蛋鸡连续７ 批共６ 万余羽，在３０～８０ 日龄时发生一种以极度消瘦、腺胃肿大为特征的疾病。采集发病鸡的腺胃制成匀浆乳剂，接种 Ｓ Ｐ Ｆ鸡胚，可引起典型的鸡胚矮小。卷曲、僵化、中肾尿酸盐沉积等鸡胚病变。电镜观察鸡胚分离物可见大量冠状病毒粒子；分离物能与标准 Ｉ Ｂ Ｖ 阳性血清（ Ｍ４１ 株抗血清）中和呈现阳性反应；分离物经浓缩后用魏氏梭菌滤液处理，可呈现血凝活性；分离物对氯仿敏感；实验结果表明，分离物为传染性支气管炎病毒。将发病鸡的腺胃匀浆乳剂及第５ 代分离物（腺胃匀浆乳剂在鸡胚中盲传５ 代的培养物），接种１ 日龄及７日龄 Ｓ Ｐ Ｆ鸡，结果用鸡腺胃匀浆乳剂接种 的鸡出现了极度消瘦、腺胃肿大等与自然病鸡相同的临床症状及剖检变化，而用第５代分离物接种鸡后，鸡只正常生长发育，未出现任何症状。分别取２ 个组鸡的血清进行１７ 种相关病原检测，结果接种腺胃匀浆乳剂的鸡只检出了网状内皮组织增生病病毒（ Ｒ Ｅ Ｖ） 抗体， 表明腺胃内可能存在 Ｒ Ｅ Ｖ；另外，２ 个组的鸡 Ｉ Ｂ Ｖ 抗体均为阳性，除此之外其他病原抗体监测结果均为阴性。初步的试验结果证实，我们从发病鸡腺胃内分离的     

一株肾型鸡传染性支气管炎病毒的初步分离鉴定

从哈尔滨市某肉鸡养殖场疑似传染性支气管炎的病死鸡中分离到1株肾型IBV,并对其进行鸡胚矮小化、血凝性、电镜下特征、新城疫干扰试验、致病性等生物学鉴定和N基因的RT-PCR鉴定。结果表明,该病毒分离株在鸡胚上传至第四代(F)4开始出现死亡或侏儒胚;病毒不凝集鸡红细胞;透射电镜下可见多呈球形、直径约80～120nm的病毒粒子,具有冠状病毒的典型形态特点;该病毒可干扰新城疫LaSota株在鸡胚中的增殖;将分离毒第4代尿囊液接种于6日龄雏鸡,7d后开始出现死亡,死亡率高达67%(6/9),病死鸡剖解后可见肾脏明显肿大、苍白,具有传染性支气管炎的典型病变;分离毒第5代尿囊液经N基因特异性RT-PCR获得大小约438bp的目的片断。初步确定所分离病毒为肾型IBV。