猪瘟疫苗免疫哺乳前仔猪的效果观察

用邹县某猪场3头健康母猪同日所生仔猪23头,出生后立即肌肉注射1头份/头猪瘟兔化弱毒疫苗、注射后60～120分钟让仔猪吃初乳。于免疫后10、30日及2、3、4、5、6、7及8个月分别用免疫扩散法监测猪瘟抗体效价。当免疫猪266日龄时,从23头猪中任选4头,经肌肉攻击经复壮后的猪瘟血毒lml/头。结果,免疫后10天,抗体未阳转,30天时,19/23阳性,2月龄以后至8个月,抗体均23/23阳性,266日龄攻毒4/4保护(对照3/3死亡)。说明该免疫程序是可靠的,能够控制猪瘟的发生。哺乳前免疫需要饲养人员与兽医密切配合,这一工作最好在母猪     

哺乳仔猪一次接种猪瘟兔化弱毒苗后血清中和抗体的测定

对30、40、50日龄哺乳仔猪一次免疫接种猪瘟兔化弱毒苗后的血清中和抗体效价测定结果。40日龄以上仔猪的免疫效果好于30日龄,即接种后220天,6头免疫猪的血清中和抗体价均达64倍,其中一头达128倍;至注苗后304天,剩余3头的血清中和抗体价均达32倍,其中一头达64倍。而40～50日龄哺乳仔猪母源抗体价虽在8～32倍之间,但此时注苗也不影响仔猪主动免疫的建立。所以免疫母猪亲代仔猪在40日龄时免疫一次,即可维持至出栏不受猪瘟感染。我省仔猪断奶在50～60天,在40日龄注苗,因仔猪集中,既避免漏防和重复注射,又节省人力物力和时间,是提高防疫密度较为理想的方法。     

猪瘟母源抗体衰减及保护水平分析

为分析仔猪体内猪瘟母源抗体的衰减规律及母源抗体保护水平,测定了断奶时母猪和仔猪抗体水平,并监测仔猪母源抗体水平至81日龄;分别对12头81日龄仔猪（来自5头母猪）和25头35日龄仔猪（来自5头母猪）进行了攻毒试验,并用RT—nPCR进行了跟踪检测,对7头攻毒耐过猪用兔体中和法测定了中和效价。结果表明,母猪抗体水平不均衡会导致仔猪群体母源抗体水平不均衡;仔猪群体抗体到60日龄时仍然有67％（12／18）的个体用ELISA检测阻断率在50％以上：81日龄攻毒组有3头（3／12）耐过,35日龄攻毒组能全部耐过（25／25）,但有2头（2／25）在攻毒27d后仍然呈PCR阳性,此时中和抗体水平从低于1：4到1：16不等,推测中和抗体水平1：8～1：16是母源抗体保护的临界线。     

猪瘟免疫程序探讨

我们从1983年开始进行猪瘟疫苗的免疫程序接种试验、推广、研究。首先进行了不同日龄仔猪接种猪瘟兔化弱毒疫苗150个兔体感染量的试验。接种后分别在免疫后4、7、9、11、13月龄进行中和抗体效价监测。试验结果表明:母猪经过免疫所生仔猪在55日龄、60日龄注苗,免疫后8月龄监测体内中和抗体效价在16倍以上,经攻毒试验,能抵抗猪瘟强毒攻击和同居感染、然后剖检,酶标检验为阴性,无临床和剖检变化;母猪     

猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗免疫程序研究

给空怀母猪免疫接种猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗１５００个兔感染量，以ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ监测其血清抗体。结果，ＥＬＩＳＡ效价ＯＤ值保护率６～７个月为１００％，８个月为７７．５％，表明１５００个兔感染量免疫母猪，一年应免疫接种２次，才能避免非免空隙，保持坚强免疫力。给怀孕母猪免疫，所产亲代仔猪的母源抗体消失很快，ＥＬＩＳＡ效价ＯＤ值保护率，１０日龄为９６．５％，２０日龄为７１．６％，３０日龄为４０％，４０日龄为１２．５％。给３０日龄仔猪免疫接种１５００个兔感染量，以ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测其免疫后６、７、８、９、１０个月的血清抗体，结果其ＥＬＩＳＡ效价ＯＤ值保护率６～９个月均为１００％，１０个月为９４％；攻ＨＣＶ强毒，６～１０个月均１００％保护。综上试验证明，仔猪３０日龄、母猪空怀免疫接种猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗１５００个兔感染量，是最佳的免疫程序。     

猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗的应用效果

应用猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗(下称猪瘟细胞苗)1500个免疫量免疫接种2月龄以上生猪。至育肥出栏时(10个月),随机取血清样检测。结果,中和抗体滴度均在16倍以上:间接血凝抗体滴度达16倍以上者为96.9%.这表明,其免疫抗体滴度均达到抵抗猪瘟强毒的水平。全县应用猪瘟细胞苗共免疫接种生猪112万头次(注射反应为0.07%),获得了显著的预防效果。母猪免疫接种8个月后所产53～58日龄仔猪,中和抗体滴度达到8倍者为50%,4倍者为43.75%;间接血凝抗体滴度16倍者为5.3%.8倍者为42.1%.4倍者占47.36%。这表明,用猪瘟细胞苗1500个免疫量对母猪一年免疫一次,其所产仔猪在53～58日龄时的母源抗体水平不能全部保护猪瘟病毒的侵袭。     

去势同时注射猪瘟兔化弱毒疫苗预防猪瘟

为了解决生猪防疫抓猪的麻烦,我们从1977年开始,按照当地对45～60日龄仔猪去势的习惯,在去势的同时注射猪瘟兔化弱毒疫苗。通过试验证明,45日龄去势同时注射猪瘟兔化弱毒疫苗的猪,分别在免疫后3个月(3只猪)、7个月(3只猪)和10个月(2只猪)攻击石门系强毒,均获100％保护;去势同时注苗的猪与不去势注苗的对照猪产生的中和抗体效价相同(1∶128)。说明去势对抗体的产生没有影响。 10年来,全县共采用本方法免疫仔猪2610000余头。目前已有13个县、区推广这一方法,免疫仔猪3000多万头次。实践证明,此方法安全可靠,效果确实,节省时间,深受群众欢迎。     

Dot-PPA-ELISA对猪丹毒的免疫监测及抗体保护效价的测定

用猪瘟、猪肺疫、猪丹毒三联疫苗和猪丹毒1a、2型氢氧化铝吸附甲醛灭活疫苗分别免疫断奶仔猪，采用Dot-PPA-ELISA监测免疫猪血清抗体变化。结果，弱毒疫苗免疫后第7d猪丹毒血清抗体效价开始升高，第2～3周达最高值；灭活疫苗免疫后第3～4周抗体效价达最高值，且灭活疫苗免疫猪的抗体水平明显高于三联疫苗免疫猪。免疫6周后，用C43004(1a型)、C43179(1b型)和C43-12(2型)3株不同血清型的猪丹毒混合强毒同时对不同抗体效价的免疫猪和对照猪进行了皮肤内接种攻毒，并根据其皮肤和体温反应确定1：32为猪能抵抗混合强毒攻击的抗体保护效价。经对44头50～60日龄未免疫的断奶仔猪血清检测，其抗体效价在1：32以下的猪占88．36％，278头免疫猪血清的抗体效价在1：32或以上的猪占92．81％。表明Dot-PPA-ELISA适用于猪群猪丹毒的免疫监测和免疫力测定。     

猪乙型脑炎病毒灭活疫苗(A6株)的制备及免疫保护研究

为了制备猪乙型脑炎病毒(A6株)灭活疫苗,并研究其免疫保护效果,试验将猪乙型脑炎病毒(A6株)在Vero细胞上培养增殖,用β-丙内酯灭活,将检验合格的抗原与206疫苗佐剂乳化制备成猪乙型脑炎病毒灭活疫苗(A6株)。将制备的猪乙型脑炎病毒灭活疫苗(A6株)用PBS稀释成1∶5、1∶50、1∶500 3个稀释度免疫小鼠后攻毒,后备母猪肌肉注射猪乙型脑炎病毒灭活疫苗(A6株)后间隔14 d后加强免疫1次,对免疫后备母猪及所产仔猪的中和抗体效价进行测定。同时,进行后备母猪免疫攻毒试验,分为疫苗免疫组和攻毒对照组,母猪妊娠30 d后用猪乙型脑炎病毒(A6株)进行攻毒,攻毒后记录各组母猪临床症状及所产仔猪的健康状况,发病仔猪剖检,观察病变。结果表明：猪乙型脑炎病毒灭活疫苗(A6株)1∶50倍稀释免疫小鼠进行攻毒,保护率可达到80%。后备母猪间隔14 d免疫两次可以产生高水平的中和抗体,而且所产仔猪的中和抗体效价可以维持到30日龄。对妊娠30 d母猪进行攻毒,疫苗免疫组妊娠母猪均正常产仔,仔猪全部健活,全部保护;攻毒对照组妊娠母猪发生流产,产出死胎、木乃伊胎和弱胎,全部发病。发病胎儿剖检,可见脑积水...     

猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)对兔与猪免疫攻毒保护平行关系的研究试验

用研制的连续3批猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)分别以不同剂量免疫健康兔和断奶仔猪,检测其免疫28 d后的血清抗体,采用血清中和试验法测定血清中和指数,并对免疫28 d后的兔和断奶仔猪分别进行攻毒,统计各组兔和断奶仔猪免疫后攻毒保护率。结果表明,兔免疫28 d后的血清抗体中和指数为794～1258时保护率为60%～80%,血清抗体中和指数≥1479时可获得100%保护;仔猪免疫28 d后的血清抗体中和指数为229～269时保护率为60%～80%,血清抗体中和指数≥331时可获得100%保护。兔与仔猪对猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)均产生良好的免疫应答反应,抗体值较高者获得保护率相对较高,兔与猪免疫与攻毒保护呈现平行关系。     

PCV2和PRRSV对猪瘟疫苗的免疫抑制作用和预防控制试验

PCV2和PRRSV是影响猪瘟防疫中最重要的免疫抑制因素。以1∶32为免疫抗体合格率,两毒自然感染猪,用2倍量的猪瘟脾淋苗,于30日龄首免、44日龄二免,72日龄时用4倍量强免,经87日龄、102日龄采血检测,其抗体合格率仍为零。若以PCV 2型灭活疫苗和猪蓝耳病灭活疫苗对仔猪进行免疫保护,即可明显提高猪瘟免疫合格率至90﹪以上。基于两病毒对猪瘟弱毒疫苗的免疫抑制作用,设计以猪瘟免疫抗体反应为指示系统:用免疫球蛋白PCV2-PRRSV-RRPSV-Ig G和猪瘟苗对仔猪进行免疫,在猪瘟疫苗末免3周后采血检测,其抗体合格率达到100%。     

猪瘟病毒低毒力毒株FJFQ株的分离鉴定

从福建某猪场分离到 1 株病毒,其在PK 15细胞上的毒价为 106.5 TCID50/mL,该病毒能被猪瘟病毒高免血清所中和(效价为1∶8)。通过 RT -PCR 扩增出猪瘟病毒约250 bp的E2蛋白主要抗原编码区序列,其与几株已发表毒株序列的核苷酸及氨基酸同源性分别为79.9%~87.9%,77.7%~86.6%,与Alfort 株同属于基因二群。经本动物传3代均不表现明显的临床症状。用猪瘟兔化弱毒疫苗免疫后以此分离毒作强攻进行免疫保护相关实验,结果免疫组猪在攻毒前及攻毒后扁桃体 HCFA检测均为阴性,对照组猪扁桃体HCFA于攻毒后1周开始出现阳性结果,且一直持续到试验结束。用分离株免疫本动物后再攻石门毒, 2 头试验猪中 1 头死亡,1头出现临床症状。初步说明,所分离的病毒为猪瘟病毒(命名为CSFV- FJFQ株),可能是一株低毒力毒株,且其免疫原性不好。     

文摘

猪瘟弱毒湿苗200倍稀釋对免疫8个月的猪的动力測定这次試驗在10～11月份进行,共計8头猪,5头猪是于2月份接受了猪瘟弱毒湿苗200倍稀釋液预防注射的試驗猪,另3头猪作对照用。全部猪先經11天的健康观察,然后进行猪瘟强毒皮下注射一毫升。猪瘟强毒系由江西省兽医生物藥品制造厂駐厂监察室供給。試驗結果,对照猪先后于接种后第6、7、10日死亡,而免疫猪仅于接种后5～9日体溫稍高,达40℃以上,然稽留时間甚短,精神稍差,食慾略減,至第10日全部恢复。結論認为,200倍稀釋的猪瘟免化弱毒苗对已免疫了8个月的猪能維持其坚强的免疫效果,比較目前应用的100倍稀釋度可降低成本。     

猪瘟病毒持续感染对母猪繁殖性能及仔猪猪瘟疫苗免疫效力的影响

宁宜宝等选择北京顺义区某猪场的2头猪瘟病毒(HCV)持续感染的带毒经产怀孕母猪,1头母猪产仔11头,全部存活且发育正常,其中5头HCV阳性;另1头母猪产仔14头,瘦弱,且有3头死胎,其中12头HCV阳性。2头母猪各自为1组,将各自所产活仔按产仔顺序隔头组合分成2组,1组零时免疫接种猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV),1组不免疫作对照,每窝仔猪和相应的母猪混合饲养,并放入2头60日龄阴性对照猪(共6头,4头用于水平传播试验,2头用于攻毒试验)进行水平传播试验,观察63天。结果表明,HCV垂直传播可导致仔猪死亡;吃初乳和接种HCLV不能阻止带毒仔猪的死亡,零时免疫…     

断乳前仔猪三联苗增强猪瘟免疫试验研究

猪瘟兔化弱毒疫苗安全有效,对控制猪瘟流行起了显著作用。但乳猪由于母源抗体的存在,常规免疫剂量不能获得有效主动免疫。本试验采用先进监测抗体手段,采取实验室攻毒等办法,对20—60日龄的乳猪用4头剂量三联苗免疫,结果获得对猪瘟坚强的免疫力,有效免疫期可达7个月以上。本试验还证明,60日龄前乳猪依赖母源抗体能抵抗猪瘟感染的只占6.7%;乳猪1头免量剂疫,对猪瘟的免疫力不坚强。建议在防疫实践中,对20—60曰龄的乳猪进行4头剂量免疫,可以避免因母源抗体理论的影响所造成的仔猪猪瘟免疫上2个月乃至几个月的无效期空档,利于彻底杜绝隐性感染,而且具猪小、易抓、省力、防疫密度高的特点,是控制和消灭猪瘟传染病的一个新的有效途径。     

猪瘟病毒持续感染对母猪繁殖性能及仔猪猪瘟疫苗免疫效力的影响

利用来源于同一猪场的2头猪瘟病毒(HCV)持续感染的带毒母猪及所产35头仔猪(包括13头死胎)和6头阴性对照猪,观察母猪的胎儿发育成活状况、仔猪HCV带毒率及HCV垂直传播对仔猪猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)免疫效力的干扰作用,同时进行水平传播试验和观察HCV持续感染对母猪繁殖功能的影响。结果表明：HCV持续感染对其中1头母猪的胎儿发育和成活有明显影响,而对另1头母猪的胎儿发育没有明显影响;HCV持续感染母猪可经过胎盘垂直传播病毒给仔猪,传播率达45％～86％;吃初乳和接种HCLV不能阻止带毒仔猪的死亡,9头带毒仔猪在45d内死亡4头;免疫HCLV不能使带毒仔猪产生免疫保护力。5头猪在强毒攻击后死亡4头;HCV垂直传播的带毒猪可发生水平传播,并引起3／4感染猪死亡;HCV持续感染可引起母猪生殖系统病理变化。导致繁殖障碍。     

广东一株猪伪狂犬病毒野毒的分离鉴定和致病性初步研究

为了证实广东阳江某猪场存在猪伪狂犬病毒(PRV)强毒力野毒感染,试验采用病毒分离鉴定及仔猪攻毒试验的方法,对该猪场保育猪群病料中存在的病毒进行分离鉴定,以及用15日龄含有母源抗体(中和效价水平为1∶16)的仔猪进行毒株致病性的初步研究。结果表明:从病料中成功分离出1株PRV野毒株GD-1406株;经滴鼻攻毒,试验Ⅰ组(病毒攻毒效价为1×106TCID50/m L)仔猪攻毒后第5天全部死亡,试验Ⅱ组(病毒攻毒效价为1×104TCID50/m L)仔猪攻毒后第4天死亡率达80%,第6天全部死亡;病理剖检显示,分离的PRV对试验组仔猪的多种组织器官造成肉眼可见的损伤,对照组正常。说明该猪场保育猪群中有PRV野毒强毒株存在。     

猪α干扰素对猪圆环病毒2型亚单位疫苗免疫效果的影响

为了评估酵母表达的PCV2 Cap蛋白在猪体的免疫特性以及猪α干扰素对其的免疫佐剂效果,将酵母表达的PCV2 Cap蛋白配比适量的铝胶或重组猪α干扰素制成亚单位疫苗.30日龄仔猪分别接种铝胶佐剂亚单位疫苗和猪α干扰素佐剂亚单位疫苗,同时设攻毒对照与空白对照,首免后21 d加强免疫,二免后14 d用PCV2 JS株攻毒.铝胶佐剂亚单位疫苗免疫猪体后产生了PCV2特异性中和抗体.猪α干扰素佐剂亚单位疫苗组仔猪免疫后产生的ELISA抗体和中和抗体都显著高于铝胶亚单位疫苗组仔猪.攻毒对照组的4只仔猪攻毒后全都产生了病毒血症,并有较长时间的发热;铝胶亚单位疫苗组4头仔猪中只有1头仔猪产生病毒血症,添加猪α干扰素亚单位疫苗组的仔猪攻毒后都没有产生病毒血症.综合分析试验猪的病毒感染、临床表现和生产性能等情况表明Cap蛋白亚单位疫苗具有免疫保护效果,猪α干扰素可显著增强Cap蛋白亚单位疫苗接种仔猪的体液免疫反应,提高PCV-2 Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护效果.     

DOT—ELISA检测猪瘟免疫抗体的研究

本文成功地建立了Dot—ELISA(斑点酶联免疫吸附试验)检测猪瘟免疫抗体,经猪丹毒、猪巴氏杆菌高免血清对照及猪瘟强毒攻毒试验证实;Dot—ELISA检测猪瘟免疫抗体是特异的。Dot—ELISA、ELISA和兔体中和三种方法比较,Dot—ELISA法具有简便、快速、敏感性高,特异性强。用Dot—ELISA法检测115头免疫猪血清抗体,免疫抗体在效价1:2—1:128之间,1:32—1:64以上滴度占95％。猪瘟攻毒试验结果:免疫猪的猪瘟免疫抗体保持在1:32以上,均能抗过猪瘟强毒的攻击。     

猪瘟不同顺序零天免疫的免疫效果比较

以猪瘟免化弱毒细胞苗分别免疫5组初生仔猪，每头1．5头剂。第1组20头先免疫，1小时后吸初乳。第2组15头，吸初乳后1小时免疫。第5组15头，吸初乳后半小时免疫。75日龄，以猪瘟弱毒单抗酶联方法测定1组动物的平均抗体（OD值）分别为0．25、0．25及0．21。80日龄，每组各随机抽出4头猪，连同非免疫对照猪6头以猪瘟石门系强毒攻击后，对照猪全死，第1组100％保护，第2组75％保护，第5组50％保护。第1组的免疫效果明显优于其他两组。