应用鸡源SPA直接平板协同凝集试验诊断鸡传染性囊病的研究

自葡萄球菌病鸡分离到的８株金黄色葡萄球中，筛选出一株富含ＳＰＡ的菌球，在此基础上，首次建立了一种诊断鸡传染性囊病（ＩＢＤ）的ＳＰＡ直接平板协同凝集试验，经特异性检验，敏感性试验及临床应用，表明该法具有敏感性高、特异性强、重复性好的优点，经与琼脂扩散试验及对流免疫电泳试验比较，三者间无明显差异，且方法简便、快速、节省材料，是一种ＩＢＤ早期病原诊断及流行病学调查的新技术。     

应用鸡源SPA直接平板协同凝集试验诊断鸡传染性囊病的研究

自葡萄球菌病鸡分离到的８株金黄色葡萄球中,筛选出一株富含ＳＰＡ的菌珠,在此基础上,首次建立了一种诊断鸡传染性囊病的ＳＰＡ直接平板协同凝集试验,经特异笥检验,敏感性及临床应用,表明该法具有敏感性高、特异性强、重复性好的优点,经与琼脂扩散试验及对流免疫电流试验比较,三者间无明显差异,且方法简便、快速、节省材料,是一种ＩＢＤ早期病原诊断及流行病学调查的新技术     

鸡传染性法氏囊病快速诊断试纸条的研制及特性测定

以高亲和力和高特异性IBDV单克隆抗体为基础,成功的研制出IBDV快速诊断试纸条,试验结果表明IBD试纸与鸡的NDV、ALV、EDS-76、IBV、ILTV、MDV无交叉反应。IBD试纸条具有良好的特异性和敏感性,其敏感性与琼扩试验相比,则提高了32—64倍,能够识别不同的IBDV毒株包括强毒和弱毒。与ELISA的阳性符合率为100％。对于人工感染IBDV鸡,感染后36h在感染鸡的法氏囊即可检出IBDV,从检测到获得结果仅需要1-2min,IBD试纸具有特异、敏感、快速、简单等特点,不需要任何专业技能和其他试剂,实现了鸡病诊断的一步法。     

鸡传染性法氏囊病病毒形态及免疫电镜的研究

我们对上海地区鸡传染性法氏囊病(IBD)作了流行病学的调查与诊断,为了进一步明确我们分离的该病病原形态结构及免疫电镜的特异性等,特进行本研究。试验材料 1 病毒我们分离的IBD病毒有Q、Q_1、Q_2、Q_3、J及N株。IBD的D78株病毒为荷兰引进。 2 免疫血清以D78株病毒的高免鸡制备免疫血清。方法与结果一、病毒形态观察分别取Q、Q_1 Q_2、Q_3、J及N株的鸡胚培养病毒悬液,冻融三次,3000转/分离心20     

鸡传染性支气管炎间接血凝试验方法的研究

间接血凝试验对鸡传染性支气管炎的诊断,具有高度的敏感性及特异性。对人工感染鸡在感染10天后可100％检出;血清抗体价可达512倍;感染后经60天,抗体价不见下降。经用新城疫、马立克氏病及喉气管炎等多种鸡的传染病的阳性血清鉴别试验证明有明显的特异性。因此,认为该方法可以用于鸡传染性支气管炎的血清学诊断。试验证明了从国内分离的IBV上海株及杭州株病毒与美国M-F_3-E_5株病毒的血清型相同。试验并研究了抗原的制备方法,证明抗原可以冻干保存。     

鸡传染性鼻炎平板染色诊断抗原的制备及应用

应用鸡副嗜血杆菌（HPG）A型（HPG221）和C型（HPG668）鸡传染性鼻炎（IC）的致病性血清型国际标准株,制备了IC平板凝集试验（SPA）染色诊断抗原。该抗原特异性强：不但与鸡新凤（ND）、鸡白痢、鸡支原体等9种鸡血清无交叉反应,而且可以进行鸡传染性鼻（IC）血清型的鉴定;敏感性高;SPA较琼脂免疫扩散试验（AGID）高2个滴度;稳定性好：4℃保存2年,检测效果不变;应用此抗原进行平板凝集反应检测IC抗体,操作简便,检测快速,适于普及。     

特异抗体致敏的SPA菌体浓缩新城疫病毒方法在临床诊断中的应用

为提高新城疫临床诊断的准确率,建立了新城疫病毒浓缩方法,将粪便及脑、肺等器官组织病料中的新城疫病毒经特异性抗体致敏的金黄色葡萄球菌(SPA菌)吸附浓缩后,用RT-PCR进行检测。结果表明,所建立的新城疫病毒浓缩方法应用于临床诊断后,可显著提高检测敏感性,从而提高临床诊断的准确率。     

火箭免疫电泳快速诊断鸡传染性法氏囊病的研究

建立了箭免疫电泳快速诊断鸡传染性法氏囊病(IBD)的方法。对32份被检材料进行诊断,与琼脂扩散试验(AGP)的阳性符合率为76.7%,阴性符合率为100%。火箭免疫电泳诊断 IBD 具有很高的特异性和稳定性.     

特异抗体致敏的SPA茵体浓缩新城疫病毒方法在临床诊断中的应用

为提高新城疫临床诊断的准确率,建立了新城疫病毒浓缩方法,将粪便及脑、肺等器官组织病料中的新城疫病毒经特异性抗体致敏的金黄色葡萄球菌(SPA菌)吸附浓缩后,用RT-PCR进行检测.结果表明,所建立的新城疫病毒浓缩方法应用于临床诊断后,可显著提高检测敏感性,从而提高临床诊断的准确率.     

阿克苏地区鸡病流行与防治情况

1　概况我所 1990年～ 1997年共化验诊断鸡送检病料 2 48批次 ,查出阿克苏地区的鸡病种类有 :鸡新城疫 ( ND)、鸡传染性法氏囊病( IBD)、鸡马立克氏病、鸡传染性喉气管炎、鸡传染性支气管炎、鸡传染性鼻炎、鸡痘、大肠杆菌病、沙门氏菌病、葡萄球菌病、禽霍乱、禽伤寒、禽副伤寒、曲霉菌病、蛔虫病、球虫病、腹水症、中毒及代谢性疾病等 2 0余种。在鸡病中 ,危害较为严重的 ND、IBD、大肠杆菌病、沙门氏菌病、葡萄球菌病、曲霉菌病 ,分别占送检鸡病料的 2 2 .18%、12 .5 0 %、34 .6 8%、15 .32 %、3.2 3%、1.6 1%。2　主要鸡病流行情况2…     

海藻硫酸多糖和中药复方对鸡胚接种H9N2亚型禽流感病毒的作用

为探讨海藻硫酸多糖（sulfated polysaccharide from algae,SPA）及中药复方提取液（compound extracts of Chinese medicine,CECM）对H9N2亚型禽流感病毒（avian influenza virus,AIV）的作用,将SPA及CECM以3种不同加药方式作用于接种了H9N2亚型AIV的10日龄SPF鸡胚中,无菌收集鸡胚尿囊液,测定血凝效价,检测2种药液对H9N2亚型AIV的预防、治疗及直接灭活作用。结果显示,SPA及CECM的最大安全浓度分别为50和200 mg/mL;3种不同加药方式下,不同浓度SPA及CECM均能极显著降低鸡胚尿囊液中H9N2亚型AIV的血凝效价（P<0.01）,以直接灭活作用组的血凝效价降低幅度最大,预防作用组和治疗作用组次之。预防作用组,CECM高剂量组（200 mg/mL）的抗病毒效果显著优于SPA各剂量组（12.5、25和50 mg/mL）及CECM低、中剂量组（50和100 mg/mL）（P<0.05）;治疗作用组,SPA高剂量组（50 mg/mL）及CECM中、高剂量组（100和200 mg/mL）抗病毒效果显著优于SPA低剂量组（12.5 mg/mL）（P<0.05）;直接灭活作用组,SPA及CECM的抗病毒效果均佳,CECM各剂量组的抗病毒效果与SPA各剂量组差异极显著（P<0.01）。结果表明,SPA和CECM对10日龄鸡胚几乎无毒副作用;SPA及CECM均能显著抑制H9N2亚型AIV在鸡胚尿囊液中的增殖,以直接灭活作用组的抗病毒效果最佳,其抗H9N2亚型AIV作用的强弱与药物浓度、用药和病毒的感染时间顺序密切相关。     

雏鸡脑软化症免疫功能的研究

用人工复制VE缺乏症患病雏鸡模型 ,研究脑软化症患雏血液白细胞数 (WBC)、T淋巴细胞酸性非特异性α -醋酸荼脂酶 (ANAE )、血清IgG含量J及新城疫血凝抑制抗体滴度 (HI)的变化。结果表明 ,患雏的WBC数、T淋巴细胞ANAE 、血清IgG含量及新城疫血凝抑制抗体滴度 (HI)明显低于健康对照组雏鸡。上述结果说明 ,VE缺乏对雏鸡免疫功能有明显的抑制作用     

肉鸡腹水综合症的防治

肉鸡腹水综合征(Ascites sydrome in broilers，ASB)是危害快速生长幼龄肉鸡、以大量浆液性液性液体蓄积在腹腔为特征的非传染性疾病，该病给肉鸡饲养业造成很大的经济损失。近年来，西昌市肉鸡腹水综合症时有发生，我们先后对30多万只肉鸡进行该病的综合防制取得了满意的效果。     

鸡肝脏和肌肉组织中常山酮残留的ELISA检测

将常山酮进行人工改造,制备了半抗原常山酮琥珀酸衍生物（Hal-suc）.采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法将半抗原与牛血清白蛋白（BSA）、卵清白蛋白（OVA）偶联,制备免疫原和包被原.动物免疫6次后采血制备抗血清,以间接ELISA法测定血清效价,测得抗血清的最佳工作浓度为1∶102 400.建立了常山酮在鸡肝脏和肌肉组织中检测的ELISA法,该方法在50、100、500 ng/g 的添加浓度水平下,在鸡肝脏和肌肉组织中测得的平均回收率范围分别为74.2%～96.8%和74.3%～90.0%,检测限分别为28和19 ng/g.     

鸡贫血因子病全身免疫功能变化的研究

用鸡贫血病毒（ＣＡＶ）感染１日龄ＡＡ雏鸡,以未感染同龄ＡＡ雏鸡为对照,感染后不同时间检测其外周血液Ｔ、Ｂ细胞数量和ＩｇＧ,ＩｇＭ,ＩｇＡ含量,胸腺,法氏囊,脾脏ＩｇＧ,ＩｇＭ,ＩｇＡ抗体生成细胞和Ｔ细胞数量以及Ｔ、Ｂ细胞增殖功能;胸腺和脾脏白细胞介素２（ＩＬ－２）和干扰素（ＩＦＮ）诱生活性等的动态变化。     

SR92A系黄羽肉鸡与萧山鸡及其杂种后代的DNA指纹分析

本文以EAV(禽内源性反转录病毒片段 )为探针 ,EcoRI为限制性内切酶 ,对萧山鸡、SR92A系及其杂交后代进行了DNA指纹图谱的研究。结果表明 :EAV探针适合于鸡的DNA指纹分析 ,能产生清晰可辩的图谱。平均条带总数为11.384± 0 .84 4 ,两品种间、公母间条带总数均无显著差异。萧山鸡和SR92A系品种内相似系数分别为 0 .5 81、0 .5 11,高于品种间相似系数 (0 .2 31)。杂交后代相似系数为 0 .30 1。     

鸡志贺氏菌感染的血清流行病学调查

利用研制的鸡志贺氏菌平板凝集抗原及微量平板凝集试验，对我国河南、山东等不同地区35家鸡场具有拉稀病史的670只鸡血清灭活样品进行了检测。通过检测对鸡志贺氏菌病的发病率、流行地区、品种，日龄及其混合感染等进行血清流行病学调查。结果表明：我国部分地区存在有鸡志贺氏菌感染，其血清抗体阳性率较高，达28．3％（155／547）～33．7％（226／670），已远远超过鸡白痢鸡伤寒（1．4％）。目前该病在我国部分地区已广泛流行，不同品种和日龄的鸡均可发生，但血清阳性率存在显著差异，其中固始鸡和罗曼鸡血清阳性率高于其他品种，幼雏血清阳性率高于成鸡。鲍氏血清型阳性率高于痢疾型，并以二者混合感染为主，而该病与鸡白痢鸡伤寒的混合感染很少发生。     

鸡胚胎干细胞的分离和培养

实验从鸡第X期胚胎中分离胚盘,以鸡成纤维细胞为饲养层,用添加了10%的胎牛血清、2%的鸡血清、2mmol/LL-谷氨酰胺、1mmol/L丙酮酸钠、5.5×10-5mol/Lβ-巯基乙醇、10μL/mL非必需氨基酸以及含1000IU/mL白血病抑制因子(LIF)、10ng/mL碱性成纤维生长因子(bFGF)和5ng/mL干细胞生长因子(SCF)的高糖DMEM对细胞进行培养和传代,可以获得传至5～6代的鸡胚胎干细胞(ES)。通过对传代培养后的鸡ES细胞进行AKP染色鉴定和SSEA-1的鉴定,证实细胞未发生分化,具有胚胎干细胞的特征。同时通过不同分离胚盘方法和不同消化时间的比较得出药勺法提取胚盘简单易行,原代消化5～8min的ES细胞适合于传代培养。     

雏鸡脑软化症模型的建立

为了进一步探讨雏鸡脑软化的发病机理,实验设计了建立雏鸡脑软化的新方法,并成功地复制出雏鸡发生脑软化症模型,发病率为36.7％,发病日龄在30～60天。同时对实验条件下获得的脑软化症的临床症状和病理变化进行了观察,并测定了体重、大脑重、小脑重和血清中维生素E含量的变化。结果表明,控制饲料中维生素E的含量和添加过量不饱和脂肪酸（鱼油）,其它营养成分保持不变的情况下,能成功复制雏鸡脑软化模型。同时还表明维生素E缺乏和过量不饱和脂肪酸能影响机体和大、小脑的发育。     

川楝子治疗鸡球虫病的药效研究

选用川楝子治疗鸡球虫病及其对机体免疫力影响的研究,通过测定用药前后球虫虫卵数量的变化,以及测定用药前后血清和胸腺、脾脏、法氏囊组织匀浆中NO、NOS、SOD、MDA含量,结果为川楝子组血清和胸腺、脾脏、法氏囊组织匀浆中NO、NOS、SOD、MDA含量都较球虫感染对照组差异显著(P0.05)或差异极显著(P0.01);川楝子组对鸡免疫器官胸腺、脾、法氏囊指数指数均较球虫感染对照组差异显著或差异极显著。说明川楝子治疗鸡球虫病效果明显,且能够促进鸡免疫器官的发育和增强机体的免疫力,为研究驱杀球虫中药对免疫功能的影响提供了一种可行性的方法。