香蕉枯萎病拮抗菌的鉴定及香蕉组培袋装苗防病试验

采用平板对峙法比较海南省土壤中分离到的5株对香蕉枯萎病有较强拮抗作用细菌,并进行形态特征及16S rDNA序列鉴定.结果表明,菌株S40为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis.不同浓度S40的发酵滤液均可抑制病原菌菌丝生长、孢子萌发和生长.该拮抗菌发酵液可明显推迟组培袋装香蕉苗发病和死亡,不同处理的相对防治效果均大于70%.     

抗番茄灰霉病菌的内生短短芽孢杆菌W4菌株发酵条件优化

为提高内生短短芽孢杆菌（Brevibacillus brevis）W4 菌株发酵液对番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）的抑菌活性，采用单因素试验与正交试验设计相结合，优化发酵培养基及发酵条件。结果表明，最佳发酵培养基为蛋白胨 2.0%、果糖 1.0%、NaCl 0.25%；最佳发酵条件为初始pH 8.0、接种种龄20 h、接种量5%、装液量50 mL（250 mL 三角瓶）、发酵温度35 ℃、摇床转速150 r·min^-1、发酵时间24 h。产生的发酵液稀释25 倍对番茄灰霉病菌的抑制率达92.8%，比未经优化得到的发酵液提高26.9 个百分点。通过培养基和发酵条件优化，显著提高了短短芽孢杆菌W4 发酵液活性，为进一步提取分离抗番茄灰霉病菌的活性成分奠定了基础。     

一株寒地高效解无机磷细菌发酵条件优化

为了探究解无机磷细菌B51-7最佳发酵培养条件,以发酵液初始pH、碳源、氮源和培养温度为研究对象,以钼蓝比色法测定发酵液中可溶性磷含量为评价指标,通过单因素试验和正交实验确定其发酵条件的最佳组合。结果表明:初始pH 4.5、30℃、10 g·L~(-1)葡萄糖、0.1 g·L~(-1)蛋白胨培养条件下,菌株B51-7发酵液中可溶性磷含量最高;菌株B51-7解磷能力的最优发酵条件组合为初始pH 4.0,葡萄糖12 g·L~(-1),蛋白胨0.05 g·L~(-1),温度30℃。该研究为菌株B51-7解磷能力的掌握以及其在微生物磷肥的开发与利用提供了重要的参考依据。     

内生细菌Mg15对西瓜枯萎病菌的拮抗作用

从生长健壮的甜瓜品种MR-1根部分离获得17株内生细菌,经与西瓜枯萎病菌对峙培养,获得有拮抗活性的细菌4株,分别为Mg2、Mg9、Mg15、Mg16。经对西瓜枯萎病菌生长速率的测定发现,Mg15菌株发酵液拮抗作用较强,抑菌率达到77.09%,并使西瓜枯萎病菌菌丝发生畸变。Mg15菌株不同稀释倍数的发酵液均对西瓜枯萎病菌孢子萌发产生一定的抑制作用,发酵原液的抑制作用最强,孢子萌发率仅为7.86%。而且对西瓜种子萌发没有太大的影响。     

三株拮抗菌对番茄灰霉病的防治效果

研究了2株拮抗细菌B9、R26和1株拮抗真菌TR-8(木霉)对番茄灰霉病的控制作用.结果表明:3株桔抗茵单独作用时发酵液原液的防治效果最好,随着发酵液浓度的降低,防效减弱,其中B9菌株的抑制效果最好,相对防效高达80.19%,细菌R26和木霉TR-8的防效分别为77.92%和76.13%.采用离体叶片和温室盆栽2种方法测定拮抗茵混合后对番茄灰霉病的联合防效,结果显示桔抗茵间有增效作用,其中三者联合的作用最好,在离体叶片和番茄苗上的防效分别为86.95%和78.17%.     

榆黄蘑发酵饮料的研制

以液体深层发酵法制备的榆黄蘑菌丝和发酵液为主要原料,制备榆黄蘑饮料。结果表明:榆黄蘑原味饮料的配方为发酵原液40%、蔗糖含量11%、柠檬酸含量0.15%;榆黄蘑果味饮料的配方为发酵原液30%、苹果原汁15%、蔗糖含量9%、柠檬酸含量0.15%。     

生防芽孢杆菌对3种杧果镰刀菌的抑菌效果评价

开展了4株生防芽孢杆菌对杧果镰刀菌的平板对峙和分生孢子萌发试验。结果表明,供试生防菌发酵液对杧果镰刀菌菌丝生长及分生孢子萌发有明显的抑制作用,其中菌株FCK抑菌活性较强,对菌丝抑制率可达66.10%,菌株5a-9、6c-5次之;菌株FCK对分生孢子萌发的最高抑制率达56.80%,菌株6a-3次之,菌株6c-5最低;生防菌的发酵灭菌液热稳定性差,高温灭菌后抑菌活性显著下降,对部分镰刀菌分生孢子萌发起到一定的促生作用;发酵灭菌液对分生孢子萌发的促生作用强于发酵滤液。     

立枯丝核菌拮抗菌的分离鉴定及其生理特性研究

通过平板对峙试验,从67份土样中分离筛选出对立枯丝核菌抑菌带宽度超过10 mm的3株放线菌和5株细菌,对其中的强拮抗菌株B1和B4进行了生理生化反应鉴定,结合其菌落特征,初步将细菌B1确定为环状芽孢杆菌,细菌B4确定为多粘芽孢杆菌;同时研究发现细菌B1生长适温在34~38℃之间,B4生长适温在28~32℃之间,B1和B4生长的最适pH值分别为6.5、7左右,细菌B1最高可耐5%的盐度,细菌B4的最高可耐盐度为3%。     

一株链霉菌对猕猴桃溃疡病的防效

以猕猴桃溃疡病菌为试菌,采用液体共培养法和含菌抑菌圈法,研究了链霉菌SYL12对猕猴桃溃疡病菌的生长抑制作用,并测定链霉菌发酵液对猕猴桃溃疡病的盆栽防效。结果表明:链霉菌SY-L12在培养24h后其发酵液原液对病原菌的生长抑制率达94.0%,在28℃、150r·min~(-1)培养8~9d条件下最利于活性物质的生产,发酵产物对猕猴桃溃疡病的盆栽防效为85.4%,优于氢氧化铜对照药剂。表明链霉菌SY-L12能够有效抑制猕猴桃溃疡病菌生长,作为生物农药具有开发应用前景。     

植物内生放线菌防治西葫芦白粉病的初步研究

以西葫芦白粉病为对象,通过温室盆栽试验和叶盘筛选试验,从50个内生放线菌菌株中筛选出2个防病效果较好的菌株,叶盘筛选试验发现菌株GKSHJA和PR1-8的无菌滤液原液在接种病菌的同时使用防治效果最佳,分别达到60.98%和63.22%。温室人工接种白粉病菌的盆栽试验发现,GKSHJA无菌滤液原液在接种前、接种后24 h喷雾,相对防治效果分别达55.22%和16.44%;菌株PR1-8的相对防效分别为51.94%和24.39%,且GKSHJA和PR1-8无菌滤液的5倍稀释液在接种病菌的同时使用也有一定的防病效果,其病情指数分别比对照降低了27.81%和30.19%。在自然感病的田间试验中,菌株GKSHJA和PR1-8无菌滤液的5倍稀释液对西葫芦白粉病的相对防效分别达到56.33%和69.88%。这些结果表明,菌株GKSHJA和PR1-8作为防治瓜类白粉病的生防菌株,具有开发应用潜力和前景。     

枯草芽孢杆菌LF17与甲基硫菌灵协同防治苹果树腐烂病的效果研究

通过室内测定枯草芽孢杆菌LF17与3种化学药剂对苹果树腐烂病菌(Valsa mali)的毒力,而后将菌株LF17的菌悬液与化学药剂进行复配,探讨复配剂对苹果树腐烂病菌的室内毒力及其田间防治效果。结果表明:枯草芽孢杆菌LF17与甲基硫菌灵生物相容性最好;LF17的菌悬液与甲基硫菌灵复配剂(浓度为1.36×10⁷ cfu/mL+1.0271μg/mL,按体积比5∶5配制)对苹果树腐烂病菌的抑菌率为81.36%、毒性比率为1.66、表现为增效作用,离体枝条的防治效果为74.05%,显著高于2个单剂的防治效果,且复配剂中甲基硫菌灵的使用量减少约60%。     

黄瓜枯萎病拮抗放线菌筛选及其生防作用鉴定

 通过高效筛选法从不同环境采集的土样中分离出44株对黄瓜枯萎病菌有拮抗作用的菌株,通过平板对峙法初筛和复筛得到一株具有较高拮抗活性的放线菌XF-7。研究了菌株XF-7发酵液对黄瓜枯萎病病原菌孢子萌发、菌丝生长及黄瓜种子发芽的影响,以及对苗期枯萎病的生防效果。结果表明：菌株XF-7发酵液对黄瓜枯萎病菌的菌丝生长及孢子萌发均有明显的抑制作用,可促进黄瓜种子发芽,且对黄瓜苗期枯萎病的防治效果显著,防效达79.57%。经16S rDNA序列分析,发现菌株XF-7与毒三素链霉菌（Streptomyces toxytricini）的16S rDNA序列同源性达100%。结合形态特征和生理生化特性,将菌株XF-7鉴定并命名为Streptomyces toxytricini XF-7,在GenBank中该菌株的序列登录号为JN315670。     

黄瓜靶斑病药剂防治持效期的离体研究

离体条件下研究了7种杀菌剂对黄瓜靶斑病病菌防治的持效性。结果表明,不同药剂对病菌菌丝生长抑制的持效期不同。福美双对病菌的抑制效果最好,持效期达15 d以上,15 d后抑菌率仍达85%以上;溴菌腈、苯醚甲环唑、异菌脲对病菌菌丝生长也有较好的抑制效果,持效期也可达15 d;腈苯唑、烯肟菌酯对病菌的抑制效果较差,持效期为7 d;甲基托布津的抑菌效果最差,对病菌菌丝生长几乎没有抑制作用。     

果树内生拮抗细菌的筛选鉴定及其生防作用研究

通过组织分离法,在不同健康果树的木质部中分离到235株内生细菌。通过平板对峙法对所得菌株进行了初筛和复筛,得到6株拮抗作用较强的菌株。用过滤和高温灭菌得到的菌株发酵液进行抑菌谱试验,最终获得拮抗作用较强的内生细菌X8。对X8菌株在植物体内定殖、分类鉴定和防治作用的深入研究。结果表明：X8菌株可以在杏、辣椒等植物中定殖。X8菌株发酵液对辣椒疫霉病菌（Phytophthora capsici）抑制作用最强,达80.3%,对3种链格孢菌（Alternaria）病原菌的抑制作用达到75%以上,对番茄灰霉病和辣椒疫病的防效达到75.4%和79.3%,显著高于50%腐霉利和25%甲霜灵的防效。经16S rDNA序列分析,X8菌株与枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis的16S rDNA序列的同源性达99%。综合形态特征、生理生化特性,最终将X8鉴定为B. subtilis,在GenBank中序列登录号为HQ647257。     

黄瓜枯萎病拮抗芽孢杆菌A7-3-14的筛选及鉴定

以从敦煌地区盐碱土壤中分离获得的19株细菌为试材,采用平板对峙法和菌丝生长速率法进行筛选,通过菌株形态特征、生理生化试验和16S rDNA序列分析进行鉴定,并采用盆栽试验测定所筛选的拮抗菌,研究了其对黄瓜枯萎病病原菌Fusarium oxysporum的防效,以期得到对黄瓜枯萎病病原菌具有较强拮抗作用的芽孢杆菌。结果表明:从敦煌地区盐碱地土壤中共分离出19株拮抗细菌,其中菌株A7-3-14拮抗作用最强,抑制率为79.22%,菌株鉴定为内生芽孢杆菌Bacillus endophyticus,盆栽防效结果表明该菌株发酵液对黄瓜枯萎病具有显著的防治效果,其处理后的黄瓜苗病情指数为28.14,防治效果达到69.77%。表明分离到的芽孢杆菌菌株A7-3-14可以用于黄瓜枯萎病的生物防治,且具有良好的效果。     

Effects of ischemic preconditioning on hepatocyte apoptosis induced by hepatic ischemia-reperfusion in cirrhotic rats

AIM:To investigate the protective effect of ischemic preconditioning (IPC) on hepatic ischemia-reperfusion(I/R) injury in cirrhotic rats and its possible mechanism. METHODS:Hepatic I/R was induced by Pringle maneuver. The cirrhotic rats were randomized into three groups: Group A: before 30 min of ischemia, a short period of 5 min ischemia and 5 min reperfusion were given; Group B: before 30 min of ischemia, a short period of 10 min ischemia and 10 min of reperfusion were given; Group C: 30 min ischemia only. The serum alanine transferase (ALT), hepatic Fas-mRNA, caspase-3 activity and hepatocyte apoptosis were analyzed. RESULTS:The 7-day survival rate in the group A and B were 100%, respectively. However, it was only 62.5% in the group C. After 6 h of reperfusion, the ALT levels in both group A and B were significantly lower than that of in group C, P＜0.01. The ALT level of group A was also lower than that of group B, P＜0.01. The hepatic Fas-mRNA expression, caspase-3 activity and apoptotic hepatocyte in group A were significantly lower than those of in group C, P＜0.01. CONCLUSIONS:IPC has significant protective effect against hepatic I/R injury. An IPC with 5 min of ischemia and 5 min of reperfusion has the maximal protective effect. The protective mechanism of IPC against hepatic I/R injury is via down-regulation of Fas-mRNA expression, inhibiting caspase-3 activity and subsequently inhibiting hepatocyte apoptosis.     

岩白菜内酯对柑桔病原真菌抑制作用研究

采用生长速率法测定了岩白菜内酯对柑桔青霉菌、柑桔绿霉菌、柑桔炭疽病菌、柑桔褐腐病菌、褐色蒂腐病菌、柑桔黑腐病菌和柑桔黑斑病菌等7种常见柑桔病原菌的抑制活性,通过显微观察和生长量测定研究了岩白菜内酯抑制柑桔炭疽病菌的机理,采用夏橙果实贮藏试验研究了岩白菜内酯用于柑桔保鲜的效果。结果表明,岩白菜内酯能够抑制7种病原菌的生长,随着浓度的增加,抑制率增大,其中对柑桔青霉菌的抑制效果最好,EC50为0.399 6mg/L。20μg/mL岩白菜内酯处理引起柑桔炭疽菌形态发生明显变化,菌丝隔膜大部分消失,菌丝扭曲畸形,菌丝壁粗糙、不对称,分生孢子畸形;菌丝生长受到明显抑制,第3天时抑制率达61.74%,随后抑制作用迅速减弱,第6天时仅2.31%。0.006g/mL岩白菜粗提物对通风库贮藏90天夏橙的青霉病的防治效果达到100%;贮藏60天的总防治效果为50%,好于450g/L咪鲜胺水乳剂1 500倍液(27.27%)。岩白菜内酯抑菌作用很好,可作为柑桔保鲜剂进行开发利用。     

马铃薯真菌病害拮抗菌株鉴定及初步应用

针对马铃薯真菌病害发生严重、多种病害混合发生、缺乏安全有效防治方法的问题，对前期筛选出的高效拮抗 菌株BA-26 进行分类鉴定，研究其胞外代谢产物的稳定性，明确防病促生作用。通过形态特征、生理生化特性鉴定以及 16S rDNA 序列分析，BA-26 菌株为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens），该菌株对8 种马铃薯病原真菌均表现出 较强的拮抗作用，对茄链格孢菌（Alternaria solani）、茄病镰刀菌（Fusarium solani）、燕麦镰刀菌（Fusarium avenaceum） 的抑菌率大于80%；胞外代谢产物经100 ℃处理30 min、紫外照射8 h、pH 2～10 酸碱处理、蛋白酶处理1 h 后，相对抑菌 率均维持在80% 以上；室内抑菌活性测定结果表明BA-26 滤液对茄病镰刀菌的抑制率为91.3%；盆栽试验中，每盆施用 20 mL 浓度为4.0×10⁹ cfu · mL^-1 的BA-26 发酵液使马铃薯根长、须根数、株高、叶片中叶绿素含量分别显著增加32.07%、 111.94%、48.0%、19.6%。表明解淀粉芽孢杆菌BA-26 对马铃薯真菌病害抑菌谱宽，胞外代谢产物稳定性强，有较强的防病 促生作用，具有开发为马铃薯专用生防菌剂的潜力。     

解淀粉芽胞杆菌防治番茄果实灰霉病及其抑菌物质分析

通过对峙培养法筛选对灰葡萄孢菌有显著拮抗性的产芽胞细菌,利用番茄果实检测拮抗菌及其发酵上清液对灰霉病的防治效果,采用ESI-MS检测拮抗菌发酵上清液粗提取物中主要抑菌物质并利用PCR检测合成抑菌物质的相关基因,通过菌体菌落形态观察、生理生化试验、16S rDNA及gyrB分析对拮抗细菌进行种属鉴定。结果表明,分离筛选的拮抗菌fqhm-13及其发酵上清液对番茄果实灰霉病防治效果分别达到69.0%和78.1%。fqhm-13发酵上清液粗提取物中主要抑菌物质为脂肽抗生素C14 ~ C16的surfactin A和C15 ~ C17的iturin A。fqhm-13基因组中含有脂肽抗生素合成基因ituC、ituD、fenD和srfAB。fqhm-13菌株为解淀粉芽胞杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。该研究为利用芽胞杆菌及其代谢产物防治番茄果实灰霉病奠定了材料基础。     

几种杀菌剂对鹤首葫芦枯萎病菌的室内抑菌试验

采用含药培养基法、抑菌圈法测定生菌素、多菌灵、如特克利、甲霜(嗯)霉灵、(嗯)霉灵5种供试杀菌剂对鹤首葫芦枯萎病菌的室内抑菌作用.结果表明:80％多菌灵WP 1 300倍液、54.5％如特克利WP 800倍液对该菌的抑制效果最好,抑菌率分别为100％、91.88％,抑菌圈平均直径分别为16.50、31.00mm,药剂间差异极显著.