TRFIA、RIA及ELISA法测定AFP的比较

目的对TRFIA、RIA与ELISA法测定AFP进行比较。方法分别进行精密度、线性、对比试验的比较。结果精密度试验中,TRFIA批内为2.3%,批间为5.3%;RIA批内为5.7%,批间为10.5%;ELISA法批内为8.6%,批间为16.1%。三种方法线性不同,TRFIA法最宽,ELISA法最窄。测定结果比较TRFIA(Y)与RIA(X1)Y=1.13X1 8.2,r=0.995;TRFIA(Y)与ELISA(X2)Y=1.30X2 16.1,r=0.980。RIA与TRFIA的结果相关性比ELISA与TRFIA的相关性好。结论TRFIA测定AFP的灵敏度、特异性比RIA及ELISA法好,且无放射性污染,结果准确可靠。     

应用ELISA间接法检测抗IBDV单克隆抗体

本文用 ELISA 间接法,研究并建立了抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体的检测体系。实验证明,该法具有简便、灵敏、迅速、特异性强、准确性高及重复性好的优点。是研究筛选抗 IBDV单抗杂交瘤细胞的可靠方法。     

间接竞争酶联免疫吸附分析法测定土壤和面粉中的异丙隆

采用自制的抗异丙隆多克隆抗体建立了测定异丙隆残留的间接竞争酶联免疫分析方法,优化的包被抗原和抗体的浓度分别为0.1和0.016mg·L^-1。结果表明,6种常用的与异丙隆结构相似的脲类除草剂的交叉反应都小于0.6%,标准曲线的线性范围为3.42～121.33ng·mL^-1,线性相关系数r^2=0.9410,方法的检测限为3.42ng·mL^-1。利用建立的间接竞争ELISA方法检测土壤和面粉样品中的异丙隆,测得土壤中异丙隆的加标回收率为100%～108%,变异系数为3%～6%;面粉中异丙隆的加标回收率为81%～84%,变异系数为5%～7%。     

用于测定多环芳烃的酶联免疫吸附分析法的研究

将芘丁酸(1-pyrenebutyricacid,PBA)通过活性酯法与牛血清白蛋白(BSA)共价结合,以PBA-BSA结合物为免疫原制备抗血清,利用该抗血清建立了测定多环芳烃类物质的间接竞争酶联免疫吸附分析法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA),并研究了10种多环芳烃与该抗血清的交叉反应。结果表明,该方法用于测定芘和芘丁酸的IC50值分别为0.132mg·L-1和0.253mg·L-1,检出限分别为0.1mg·L-1和0.01mg·L-1,该方法不受溶剂甲醇的影响,因此可以用于经过预富集的环境样品中多环芳烃类物质的测定。     

克仑特罗在猪肝脏中残留检测的ELISA法研究

本研究旨在用ELISA试剂盒建立一种简便、可靠的猪肝脏中克仑特罗残留的检测方法。添加了适量克仑特罗标准工作液的肝脏样品同 5倍 0 .1mol/L的盐酸溶液匀浆 ,冻藏、解冻后离心。上清液用正已烷萃取脂溶性杂质 ,再用氢氧化钠溶液调节pH至 1 2。用异丁醇提取待测药物 ,将提取液在 6 0℃用氮气吹干。用 1mL试剂盒中的稀释液将残渣溶解后 ,用ELISA法在 4 50nm处检测克仑特罗的含量。该方法的线性范围为 0 .1 3～ 5.3ng/mL ,回归方程为y=- 1 .80 0x 2 .2 85,相关系数r=0 .997,最低检测限为 0 .1 3ng/mL ,最低可定量限为 0 .2 5ng/g,浓度为 0 .2 7、0 .53和 1 .0 6ng/g时的回收率分别为 6 8.9%、72 .7%和 77.4 % ,CV <2 0 %。本法的可靠定量限低于克仑特罗在动物肝脏中的最高残留限量 ,且回收率和变异系数均能满足残留检测的要求 ,是一种较简便、可靠的克仑特罗在猪肝脏中残留的快速检测方法     

酶联免疫分析方法在有机磷农药残留检测中的应用研究进展

对近年来酶联免疫分析方法(ELISA)在有机磷农药残留检测分析中的研究进展及其前景进行了阐述。     

不同功能性寡糖组合对锦江黄牛瘤胃固相微生物多样性的影响

研究功能性寡糖组合对锦江黄牛的瘤胃固相微生物多样性的影响。选择3头健康且体重相近的安装有永久性瘤胃瘘管的锦江黄牛,采用自身对照方法,试验分3期进行,第1期:对照期,饲喂基础日粮,不添加任何寡糖;第2期:GT1添加期,饲喂基础日粮+0.8%甘露寡糖+1.0%果寡糖+0.8%大豆寡糖,第3期:GT2添加期,饲喂基础日粮+0.8%甘露寡糖+1.20%果寡糖+1.0%大豆寡糖,每期持续14 d。利用PCR-DGGE方法进行分析牛瘤胃固相微生物PCR-DGGE图谱条带数及相似性。结果发现:添加功能性寡糖组合后,对锦江黄牛瘤胃固相微生物PCR-DGGE图谱条带数影响不明显。3头牛3个试验期DGGE图谱的相似度较高。对锦江黄牛瘤胃液相微生物多样性影响有待下一步研究。     

延边黄牛与韩延牛血液Exosome对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响

[目的]从延边黄牛和韩延牛血液中分离Exosome(外胞体),研究2种外胞体对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响。[方法]通过超高速离心等方法,从延边黄牛和韩延牛血液中分离Exosome,并以100 ng/m L的浓度分别转染给原代培养的延边黄牛垂体细胞培养12、24和48 h,对细胞上清液中GH含量进行检测。[结果]电镜下延边黄牛与韩延牛血液Exosome均呈圆形或椭圆形的双层膜小囊泡,直径均为30~100 nm,膜结构完整。韩延牛Exosome处理组的延边黄牛垂体细胞GH mRNA表达显著高于延边黄牛Exosome处理组(P0.05)。韩延牛血液Exosome处理组垂体中GH的含量显著高于延边黄牛血液Exosome处理组(P0.05)。[结论]延边黄牛和韩延牛血液中的Exosome对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响有明显差异。     

Y染色体多态性与中国黄牛起源和分类研究

通过常规法、G带和C带对7个黄牛品种染色体进行系统研究所获得的资料,同时汇集了近20年来中国境内22个黄牛品种和1个大额牛种共计30个黄牛品种（其中4个外来牛品种）染色体的研究资料,分析和探讨了中国黄牛的起源、进化与分类。结果表明,中国黄牛Y染色体具有多态性,有中、亚中和近端着丝点Y染色体。中国北方黄牛多为中部和亚中部着丝点Y染色体,南方黄牛多近端丝点Y染色体,中原黄牛在品种内个体间多具有中、亚中和近端着丝点Y染色体3种类型。说明中国黄牛起源的多元性,即源于普通牛和瘤牛。在进化过程中,中国北方黄牛受普通牛的影响大,南方黄牛受瘤牛的影响大,中原黄牛同时受普通牛和瘤牛的影响,是由普通牛和瘤牛长期交汇融合形成的。根据26个黄牛品种Y染色体形态类型,绘制了中国黄牛Y染色体在中国的分布地域图。     

弗莱维赫牛改良贵州本地黄牛的效果研究

[目的]探讨弗莱维赫牛改良贵州本地黄牛的效果。[方法]以弗莱维赫牛为父本,分别与本地黄牛(♀)、西本杂(西门塔尔牛×本地黄牛,♀)杂交,测定其杂交后代的生产性能、屠宰性能及泌乳性能,并与贵州本地黄牛进行比较。[结果]F1弗莱维赫牛(♂)×西门塔尔牛(♂)×本地黄牛(♀)杂交后代的生长性能、屠宰性能及泌乳性能最优,F1弗莱维赫牛(♂)×本地黄牛(♀)杂交后代次之,本地黄牛最差。[结论]以弗莱维赫为父本杂交改良本地黄牛及生产三元杂交牛(弗×西×本),其后代具有明显的杂种优势,能显著提高肉牛养殖的经济效益。     

江西地方黄牛血红蛋白和血清白蛋白多态性研究

应用电泳技术研究了３个江西地方黄牛品种（广丰、吉安、高安）的血红蛋白（Ｈｂ）和血清白蛋白（ＡＩｂ）的多态性。计算了各自的基因型和基因频率；检测到它们各自有６种和４种基因型，且分别受３个等显性等位基因的控制；并发现３个品种黄牛在血红蛋白和血清白蛋白上各基因型的分布与构成没有显著性差异。     

提高地方杂种黄牛移植冷冻奶牛胚胎效果的研究

本试验共选用77头地方杂种黄牛作为受体，进行高产奶牛冷冻胚胎移植。对其中的70头受体牛进行同期发情处理，经过两次PG处理后有58头牛发情，同期发情率为82．9％，移植前经直肠检查有68．6％的受体牛黄体合格。但由于子宫炎症，最后移植了33头受体牛，并达到了51．5％的妊娠率。因此在不存在子宫炎症的情况下，我们已达到比较好的胚胎移植效果。     

江西地方黄牛Tf,Pa,与AKp多态性研究

应用混合淀粉平板电泳法及聚丙烯酰胺垂直板电泳法测定了３个江西地方黄牛品种的转铁蛋白（Ｔｆ）、后白蛋白（Ｐａ）与碱性磷酸酶（ＡＫｐ）的多态性。计算了各自的基因型和基因频率，发现它们分受５，２，２个等位基因的控制。在Ｔｆ与Ｐａ位点上，３品种的基因型和基因频率分布皆处于Ｈａｒｄｙ－ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡状态；且各基因型的构成与分布在品种间没有显著性差异。     

牛卵泡酶活性染色效果观察

本试验应用组织化学手段对牛卵巢中卵泡葡萄糖 6 磷酸酶(G 6 P酶)和碱性磷酸酶(AKP酶)进行酶活性反应显示。旨在探讨不同染色方法对酶活性反应显示效果,以便更好的观察不同发育时期的卵泡内酶的定位和酶活性反应的强弱.结果:对G 6 P酶检测效果以实验Ⅱ组好于实验Ⅰ组和对照组。其卵巢组织结构及卵泡形态较清晰;切片背景为浅粉色,酶活性处呈现棕色沉淀,酶活性反应显示较好;对AKP酶检测效果以实验Ⅰ组好于实验Ⅱ组和对照组,其卵巢组织结构及卵泡形态非常清晰,切片背景为兰色,酶活性处呈现黑色沉淀,各级卵泡上酶的反应显示较好。结论:不同染色方法对酶活性反应观察效果不同;牛卵巢卵泡不同发育时期、不同的结构部位,酶的活性具有强弱不同的反应性     

不同融合液对延边黄牛体细胞核移植效率的影响

[目的]探寻适宜延边黄牛体细胞核移植的最佳融合液。[方法]用延边黄牛颗粒细胞为供体细胞。试验1,比较3种浓度(0.25、0.280、.30 mol/L)3种融合液(蔗糖、D-山梨醇、甘露醇)对核移植胚胎融合率及重组胚体外发育的影响。试验2,比较3种0.28 mol/L融合液对核移植效率的影响。[结果]3种浓度的蔗糖、D-山梨醇、甘露醇融合液的融合率和卵裂率差异均不显著,但0.28 mol/L融合液处理的重组胚后期发育相对较好。3组融合液融合率(88.44%、86.83%、86.85%)差异不显著,蔗糖、甘露醇融合液卵裂率(87.98%、86.06%)差异不显著,在0.05水平上显著高于D-山梨醇融合液(78.64%);蔗糖、甘露醇融合液囊胚发育率(22.16%、19.91%)差异不显著,在0.05水平上显著高于D-山梨醇融合液(10.14%)。[结论]适宜延边黄牛体细胞核移植的最佳融合液为0.28 mol/L蔗糖融合液。     

延边黄牛转铁蛋白受体2基因克隆与序列分析

【目的】克隆延边黄牛转铁蛋白受体2（transferrin receptor 2,TFR2）基因,并分析该基因在不同组织器官中的表达分布。【方法】通过提取肝脏组织总RNA,采用RT-PCR及RACE方法克隆延边黄牛TfR2基因,采用生物信息学软件进行序列分析,用半定量PCR（SqRT-PCR）方法分析TfR2基因在不同组织器官中的表达分布规律。【结果】①成功克隆出了延边黄牛TfR2基因完整ORF区及3′UTR区（GenBank登录号：GU553087）,该基因全长2 901 bp,ORF区2 412 bp,编码803个氨基酸;②延边黄牛TfR2基因核苷酸序列与其它物种的同源性在80%以上,不同物种间TfR2基因氨基酸序列,尤其是影响其功能的关键氨基酸位点高度保守;③各物种TfR2蛋白功能结构域同样高度保守;④牛TfR2基因主要在肝脏中表达,其它组织,如脾脏、心脏、肾脏和肠道（十二指肠）中也存在少量表达。【结论】不同物种间TfR2基因具有高度同源性,功能结构域及组织分布规律具有高度保守性。     

最小二乘分析和主成份分析在黄牛体型特征差异性分析方面的应用

本研究借助于 APPLE—Ⅱ型电子计算机,运用最小二表分析和主成份分析法处理了秦川牛、晋南牛、南阳牛和延边牛的十三项体尺和体重资料,以主成份值构成了复合性状,用来分析我国黄牛在体型上存在的差异性。研究结果与现实情况基本相符,为目前研完黄牛品种间体型差异性分析提出了一个比较合理的方法。