黄喉拟水龟摩氏摩根菌的分离鉴定及系统发育分析

从广西某黄喉拟水龟(Mauremys muticaCantor)养殖场发病的黄喉拟水龟的肝、肺分离到一致病性的菌株(HX081027),经人工感染实验证实其为该病的病原菌。对该菌的形态、生理生化进行分析,试验结果与报道的摩氏摩根菌一致,表现为革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌,无荚膜及芽孢,葡萄糖产酸产气,接触酶、脲酶、苯丙氨酸脱氨酶和鸟氨酸脱羧酶阳性,氧化酶、脂酶、DNA酶和赖氨酸脱羧酶阴性,甲基红阳性,VP反应阴性,MR阳性等特征。采用扩增细菌16S rDNA的通用引物对该菌的16S rDNA基因进行PCR扩增、克隆测序,得到1条长度为1506bp的核苷酸序列(GenBank登录号为FJ858185)。以该菌16S rDNA序列和GenBank数据库内同源性较高的细菌16S rDNA序列进行同源性比对分析和构建系统发育树,结果显示分离菌HX081027与摩氏摩根菌属内相关菌株的同源性在98.8%~99.6%,且在系统发育树上与来源于鱼类的M.morganiiJCM1672聚为一支,结合形态及生理生化特点将其确定为摩氏摩根菌(Morganella morganii)。     

黄喉拟水龟摩氏摩根菌的分离鉴定及系统发育分析

从广西某黄喉拟水龟(Mauremys muticaCantor)养殖场发病的黄喉拟水龟的肝、肺分离到一致病性的菌株(HX081027),经人工感染实验证实其为该病的病原菌。对该菌的形态、生理生化进行分析,试验结果与报道的摩氏摩根菌一致,表现为革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌,无荚膜及芽孢,葡萄糖产酸产气,接触酶、脲酶、苯丙氨酸脱氨酶和鸟氨酸脱羧酶阳性,氧化酶、脂酶、DNA酶和赖氨酸脱羧酶阴性,甲基红阳性,VP反应阴性,MR阳性等特征。采用扩增细菌16S rDNA的通用引物对该菌的16S rDNA基因进行PCR扩增、克隆测序,得到1条长度为1506bp的核苷酸序列(GenBank登录号为FJ858185)。以该菌16S rDNA序列和GenBank数据库内同源性较高的细菌16S rDNA序列进行同源性比对分析和构建系统发育树,结果显示分离菌HX081027与摩氏摩根菌属内相关菌株的同源性在98.8%~99.6%,且在系统发育树上与来源于鱼类的M.morganiiJCM1672聚为一支,结合形态及生理生化特点将其确定为摩氏摩根菌(Morganella morganii)。     

黄喉拟水龟人工繁殖技术

黄喉拟水龟是经济价值较高的水栖龟类,适宜在土池、水泥池等小水体以及水缸、水盆、水箱等小容器中养殖,是当前城乡发展庭院、室内养殖的优选淡水名特优养殖品种。文章介绍了黄喉拟水龟人工繁殖的基本设施条件,对亲龟的年龄、成熟度、体重和质量要求,亲龟放养的性别比例、放养密度,亲龟培育中的投喂、水质管理、日常管理、夏冬季特别护理和病害防治,产卵场的环境条件、孵化介质要求、孵化温度、相对湿度以及孵化管理等技术。     

黄喉拟水龟稚龟的饲养及病害防治研究

黄喉拟水龟(Mauremys mutica Cantor),在两广地区俗称石金钱或石龟,因其营养丰富、味道鲜美,在安徽、江浙一带又有香乌龟之称.黄喉拟水龟集食用、药用和观赏价值于一体,深受群众喜爱.我们经多年对黄喉拟水龟繁、养殖及病害防治的研究,其中人工饲养与繁育等的结果已作了报道[1],现将黄喉拟水龟稚龟饲养及病害防治等方面的研究结果报道如下.     

黄喉拟水龟幼龟的常见病害防治

黄喉拟水龟俗名石龟、石金钱，是华南地区主要的养殖龟种。其南方种群因生长快、病害少、个体大等优势而深受广大养殖户的喜爱。     

黄喉拟水龟致病菌——松鼠葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验

从患病的黄喉拟水龟Mauremys mutica肝、肾中分离得到一株革兰氏阳性菌株,经人工感染试验证实,该菌为致病菌。对该菌的生理生化指标进行了分析,结果表明:该菌具有氧化酶、触酶、葡萄糖呈阳性,凝固酶、鸟氨酸脱羧酶、密二糖呈阴性,M-R为阳性,VP反应为阴性等特征,与报道的松鼠葡萄球菌特征一致。采用BIOLOG自动微生物鉴定系统对该菌进行鉴定,将适当浊度的细菌悬液接种GP2板条培养16²4 h后读出结果,并将结果输入计算机,经Biolog Microlog2 4.2软件分析鉴定,结果显示为松鼠葡萄球菌Staphylococcus sciuri,可能性为99%,相似性和位距分别为0.913和1.30。结合形态和生理生化特点,将其鉴定为松鼠葡萄球菌。纸片扩散法药敏试验结果表明,该菌仅对头孢拉定和阿米卡星敏感,对头孢哌酮中度敏感,对其他抗生素均存在不同程度的耐药性。     

黄喉拟水龟致病菌——松鼠葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验

从患病的黄喉拟水龟Mauremys mutica肝、肾中分离得到一株革兰氏阳性菌株,经人工感染试验证实,该菌为致病菌。对该菌的生理生化指标进行了分析,结果表明：该菌具有氧化酶、触酶、葡萄糖呈阳性,凝固酶、鸟氨酸脱羧酶、密二糖呈阴性,M—R为阳性,VP反应为阴性等特征,与报道的松鼠葡萄球菌特征一致。采用BIOLOG自动微生物鉴定系统对该菌进行鉴定,将适当浊度的细菌悬液接种GP2板条培养16—24h后读出结果,并将结果输入计算机,经Biolog Microlog24．2软件分析鉴定,结果显示为松鼠葡萄球菌Staphylococcus sciuri,可能性为99％,相似性和位距分别为0．913和1．30。结合形态和生理生化特点,将其鉴定为松鼠葡萄球菌。纸片扩散法药敏试验结果表明,该菌仅对头孢拉定和阿米卡星敏感,对头孢哌酮中度敏感,对其他抗生素均存在不同程度的耐药性。     

黄喉拟水龟白眼病病原菌分离鉴定及药敏试验

【目的】明确黄喉拟水龟白眼病的病原菌及其药敏特性,为该病的防控提供参考依据。【方法】对患白眼病的黄喉拟水龟进行无菌解剖、划线培养、分离筛选,对分离获得的菌株进行培养特征、生理生化特性鉴定、16S rDNA序列分析及同源性比对分析,通过动物致病性试验鉴定致病性,并采用药敏试验检验其耐药性。【结果】从患白眼病黄喉拟水龟稚龟肝脏、肺脏及脾脏中分离获得的优势菌株对小白鼠和黄喉拟水龟均有强的致病性,为兼性厌氧、产酸、产气、发酵型、无运动能力的革兰氏阴性杆菌,其16S rDNA序列(GenBank登录号KU855372)与肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)的同源性达99.1%。分离菌株对恩诺沙星、头孢噻吩、头孢噻肟、氧氟沙星等高度敏感,但对链霉素、新霉素、青霉素、卡那霉素、四环素、克林霉素、强力霉素、阿莫西林、复方新诺明等已产生耐药性。【结论】肺炎克雷伯菌是引起黄喉拟水龟白眼病的主要病原菌,生产中可选用恩诺沙星、氧氟沙星等沙星类或头孢噻吩、头孢噻肟等头孢类药物进行防治。     

低温处理对黄喉拟水龟胚胎发育的影响

【目的】研究低温对黄喉拟水龟Mauremys mutica胚胎发育的影响.【方法】将黄喉拟水龟受精卵在14、18、20℃条件下分别保存30、60、90 d,然后移至29℃孵化,测量相关性状.【结果和结论】在14、18℃条件下,黄喉拟水龟受精卵质量减少,20℃条件下卵质量变化不显著;卵移至29℃孵化后,质量基本都增加;卵的受精斑随低温保存时间延长而变得模糊,受精斑环带宽度进展受抑制;3个温度处理组均有幼体孵出,孵化成功率低,最高只有33.33%;在成功孵出幼体的试验组中,卵在29℃的孵化期随保存温度升高或保存时间延长而缩短,幼体畸形率随保存时间延长而升高.因此,长期暴露在低温条件下,不利于黄喉拟水龟胚胎的发育,甚至会导致其胚胎死亡.     

黄喉拟水龟一龄龟生长的研究

对黄喉拟水龟（Mauremys mutica Cantor)一龄龟长生的研究表明，在自然温度，人工饲以鱼肉的条件下，黄喉拟水龟生长418d，体重由9．8g增加到100.1g,平均日增重0.22g,成活率为93．4％，体重，背甲长，背甲完与日龄呈正相关，背甲长与宽正相关，背甲长，背甲宽与体重同样呈正相关，黄喉拟水龟一龄龟在50g 以下时生长缓慢，50g以上时生长速度明显加快，在相同环境条件下，个体间的生长速度差异较大，一龄龟最大个体可为同龄最小个体的4倍。     

石龟嗜水气单孢菌的分离鉴定及药敏特性研究

从患病石龟上分离获得1株革兰氏阴性杆菌,菌体细长、无芽孢和荚膜,在山羊血琼脂平板上能形成明显的β-溶血圈。经小白鼠致病性试验、生理生化鉴定及16SrRNA序列分析,确定该分离株为致病性嗜水气单孢菌。经同源性及遗传进化分析发现,该菌株与嗜水气单孢菌B27、HSO2（Genbank登录号：FJ494900．1、FJ562211．1）同源性高达99．5％。而药敏试验表明,该分离株除了对赛福欣（复方恩诺沙星）、肠清（复方乳酸环丙沙星）2种药物高度敏感外,对大部分抗菌素均不敏感。     

黄喉拟水龟松鼠葡萄球菌16S rDNA的序列测定和系统进化分析

从患病的黄喉拟水龟肝脏、肾脏分离到1株葡萄球菌（YLD81101）,经人工感染实验证实其为该病的病原菌。为了从分子水平上对其进行分类学鉴定,采用扩增细菌16S rDNA的通用引物对该菌的16S rDNA进行PCR扩增、克隆及序列分析。结果扩增出长约1．5kp的目的片段,测序得到1条长度为1515bp的核苷酸序列（GenBank登录号GQ261178）。核苷酸相似性分析表明,所得序列与GenBank公布的松鼠葡萄球菌（Staphylococcus sciud,S．sciuri）CTSP9菌株16S rDNA核苷酸序列相似性最高（99．9％）。同时,用与该序列相关性较高的S．sciuri及常造成动物葡萄球菌病的S．aureus S、saufeuss．bsp．anaerobius、S.gallinarum、S.hyicus代表菌株构建的系统发育进化树显示,菌株YL081101与S.sciuri代表株聚为一簇。上述研究证实,分离菌株YL081101为松鼠葡萄球菌。     

青椒疫病发生流行因素及防治对策

通过三年的调查研究,基本明确了蔚县青椒疫病的发生流行因素灌水、降水是传播病原种的主要动力,高湿、高温、品种抗性差、栽培方法不当等是造成严重发病的主要原因.由此提出了一套综合防治措施.     

豫西山楂锈病病原鉴定·病害流行规律及发病条件研究

对豫西山楂锈病的病原鉴定、病害流行规律及发病条件进行了研究。结果表明：山楂锈病病原菌有2种,一种为梨胶锈菌山楂专化型（Gymnosporangium haraeamum Syd.F.sp.Crataegicola）,另一种为珊瑚胶锈菌[Gymnosporangium clavariiforme（Jacq） DC.],优势种为梨胶锈菌山楂专化型,其冬孢子萌发适温为10-25℃,担孢子萌发适温为15-25℃;该病菌以菌丝体在桧柏针叶、小枝及主干上部组织上的菌瘿中越冬,以担孢子借风雨和气流传播侵染危害;早春降雨有利于山楂锈病病菌的传播与侵染。