ELISPOT检测技术在结核病诊断中的应用

结核病(tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌复合群所引起的一种人兽共患传染病,关于结核病的防治,难题之一依然是诊断问题。酶联免疫斑点试验是在酶联免疫吸附试验的基础上发展的一种检测技术,能够在单细胞水平上定量检测低频细胞亚群,具有高灵敏度、高特异性和高通量等特点,在肿瘤疫苗评价试验、免疫监测及免疫学研究中发挥重要作用。目前,该检测技术在结核病诊断中已实现临床检验,并且已有商品化的T-SPOT.TB试剂盒应用于人结核病诊断。本文对ELISPOT检测技术在结核病诊断中的应用作一综述。     

奶牛结核病实验室诊断技术研究进展

牛结核病(Bovine Tuberculosis)是由牛分枝杆菌引起的一种慢性传染病 [1].该病传染性强,且能通过奶制品传染给人和其他动物,危害严重,被世界动物卫生组织(OIE)列为B类动物疫病,我国将其列为二类动物疫病.牛结核病的诊断大体上可归为两类:一是临床症状诊断;二是实验室诊断,包括细菌学检测,如涂片镜检、细菌培养、动物实验等;免疫学检测;分子生物学诊断技术等.传统的细菌学方法由于繁琐费时、检出率低、灵敏度差.已不能满足当前疫病诊断的需要.目前世界各国都在致力于研究开发牛结核病的快速诊断方法,并已经建立了一些快速、准确、可靠的新型检测技术,有些技术已经在生产实践中得到了广泛的应用.本文对奶牛结核病临床诊断方法不再作赘述,只重点综述其实验室检测方法的研究进展.     

γ干扰素体外释放试验在人和动物结核病诊断中的研究进展

结核病是给人类和动物健康造成严重影响的主要人兽共患传染病。早发现、早诊断、早干预对于有效地预防和控制结核病流行至关重要。γ干扰素是一种参与宿主抗结核感染的细胞免疫反应的细胞因子，基于其开发的γ干扰素体外释放试验可用于结核病诊断。鉴于目前酶联免疫吸附试验检测γ干扰素的方法存在诸多缺陷，例如耗时长、灵敏度低、无法区分潜伏性和活动性结核感染等，生物传感器正被尝试用于γ干扰素检测，以进一步提高诊断的灵敏性和特异性。本文归纳了将γ干扰素作为结核病生物标志物的多种检测技术，并讨论其适用范围和效果，以期为完善结核病诊断技术及开发新型诊断方法提供理论和技术参考。     

牛结核病诊断技术的研究进展

牛结核病主要是由牛分枝杆菌引起的人畜共患慢性传染病.人畜结核病的交叉传播是造成结核病广泛流行的重要原因.随着分子生物学技术的迅速发展,结核菌诊断技术已取得了很大进展.文章对目前国内外结核病诊断技术的研究进展综述如下.     

两种牛结核病检测方法的比较

牛结核病是由牛分支杆菌和结核分支杆菌引起的一种人畜共患的慢性传染病,严重威胁人类生命健康和畜牧业的发展.目前一些发达国家已经消灭和控制了牛结核病.而更多国家,尤其是第三世界国家,牛结核病还在广泛流行. 净化牛结核病的主要手段之一是检测后淘汰阳性牛.目前世界动物卫生组织推荐的牛结核病的检测诊断方法仍是结核菌素(PPD)变态反应试验.另外一种是近年来国际上畜牧业发达国家刚刚流行的血清学诊断试验-IEN-γ干扰素方法.本文是结合临床病例就两种检测方法的相关性、实用性等做比较,报告如下.     

奶牛结核病的实验室诊断技术

<正>奶牛结核病,是感染牛分支杆菌的慢性传染病,具有传染性强的特点,可经由奶制品,传染至人类、其他动物,易造成严重危害,被世界列入B类动物疫病,我国将其归为二类动物疫病范畴。临床症状与实验室检测是诊断奶牛结核病的主要方式。近几年,在科技发展的推动下,实验室诊断技术不断发展,在诊断奶牛结核病方面,取得了一定成就。在此,笔者将奶牛结核病实验室诊断技术作将如下综述。1细菌检测涂片镜检与细菌培养是细菌检测的基本方式。临床上,     

牛结核病检疫方法研究进展

牛结核病主要是由牛分枝杆菌引起的一种慢性消耗性疾病,在许多国家尤其是发展中国家仍然广泛流行,该病不仅给畜牧业造成巨大的经济损失,而且严重威胁着人类的健康。因此,牛结核病的检疫意义重大。细菌学检测、免疫学检测及分子生物学诊断为牛结核病检疫的研究奠定了基础。然而,目前迫切需要研究快速、灵敏、特异的牛结核病诊断方法。牛结核病血清学诊断技术研究一直是研究热点之一,但至今仍存在许多问题。作者就这些诊断检疫方法进展作一简要介绍。     

牛结核病诊断技术研究进展

牛结核病是严重危害人类健康和畜牧业发展的人兽共患传染病,尚无有效的疫苗预防。快速、准确诊断对于控制该病、保护人类健康和促进畜牧业稳定发展具有重要意义。近年来,随着牛结核病新型诊断方法和技术的不断涌现,使该病检测的敏感性和特异性得到提高。文章主要针对结核菌素皮肤试验(TST)、γ-干扰素释放试验(IGRA)、酶联免疫吸附试验(ELASE)、序列扩增技术、全基因组测序法(WGS)等牛结核病诊断技术的研究进展进行综述,以期为牛结核病的临床检测提供科学依据。     

短期内进行牛型结核分支杆菌PPD皮内变态反应复检试验的结果变化观察

牛型结核分支杆菌PPD皮内变态反应试验,是当前国际国内普遍使用的牛结核病诊断方法.我国农业部《牛结核病防治技术规范》将牛型结核分支杆菌PPD皮内变态反应试验规定为牛结核病确诊方法之一.GB/T 18645-2002(《动物结核病诊断技术》)规定,用牛型结核分支杆菌PPD皮内变态反应试验检出的结核病可疑牛,应立即在对侧颈部用同一批号试剂再进行一次试验.在实际生产中,因为检出结核病阳性牛必须扑杀,为慎重,除可疑牛外,多数情况下阳性牛也同时进行了再次试验(复检)以再次确认.根据往年检测结果,我们发现这种短期内复检通常都可弱化首次试验结果.为研究这种变化发生的原因及评价其对检测结果判定的影响,2012年我们对新疆南疆阿克苏地区的4个奶牛场和北疆昌吉地区的1个奶牛场使用该方法进行结核病检测的情况进行了观察分析.     

牛结核病免疫学诊断研究进展

牛结核病是一种严重危害养牛业、食品安全和公共卫生的人兽共患传染病。由于检疫和扑杀是目前控制牛结核病的基本策略,检测技术成为影响牛结核病控制效果的重要因素。理想的检测方法应具有准确、简便、高效、成本低、对动物干扰小、结果可追溯等特点。当前的法定检疫方法为结核菌素皮内变态反应,该方法具有受环境分枝杆菌干扰、诊断特异性低、费时费力、对动物干扰大、结果判断主观性强、不可回溯等缺陷。一些牛结核实验室诊断技术克服了以上缺点,可与皮试法联用或单独使用。新型诊断抗原仍在不断被发掘,新型材料也被不断用于牛结核病诊断技术中。现对相关进展进行了归纳和综述,以期为牛结核病免疫学诊断的合理应用及深入研究提供参考。     

两种奶牛结核病检测方法的比较试验

<正>牛结核病(bovine tuberculosis)是一种人畜共患的慢性传染病,该病的传播流行直接影响着畜牧业生产发展和人类身体健康。要消灭和有效控制牛结核病,就要对该病进行准确的检测。近年来建立在现代分子生物学基础上的PCR技术,在结核病病原检测上得到了广泛应用,并成功地解决了人医临床上所面临的一些棘手问题〔1〕。本文通过结核菌素皮内注射法和牛结核病PCR快速诊断试剂盒对牛结核病进行检测,并将两种检测方法进行比较试     

牛结核病诊断技术研究进展

牛结核病(Bovine Tuberculosis, TB)是由牛结核分枝杆菌等引起的一种慢性消耗性人兽共患传染病,该病不仅会对畜牧业造成严重经济损失,还会对人类身体健康造成威胁,我国将其列为二类动物疫病,该传染病是国内外迫切需要解决的严重公共卫生安全问题之一。目前,牛结核病在世界各地均有流行,其通用的诊断方法是采用牛型结核菌素PPD皮内变态反应试验,根据测量的皮厚差进行结果判定,在基层应用较为广泛,也是国家检测牛结核病的行业标准,但该方法的缺点是试验操作时间长达72 h,要2次抓牛测量其皮厚度,对试验牛的应激反应和生产干扰较大,且检测人员的操作易对检测结果造成影响。因此,在实际生产当中应用不同诊断方法进行牛结核检测对克服试验误差具有重要意义。随着牛结核新型诊断方法和技术的不断发展,IFN-γ释放试验(IGRA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、序列扩增技术(NASBA)、全基因组测序法(WGS)以及聚合酶链式反应(PCR)法等被广泛应用于兽医临床结核病诊断,使该病检测的敏感性和特异性均得到很大提高。但现实中需要从价格、实用性等生产角度出发,选择出最佳诊断方法。在实际生产应用中,由于结核病存在细胞免疫和体液免疫分离现象,无论是牛型结核菌素PPP皮内变态反应试验、γ-干扰素体外释放试验还是聚合酶链式反应(PCR)法都难以准确无误地诊断牛结核病,因此确诊牛结核病比较理想的方法是2种或2种以上方法的联合使用。     

牛结核病诊断方法研究进展

牛结核病是一种严重的人畜共患病,给奶牛业造成了巨大的损失,还与人们的生命安全息息相关。结核病的早期诊断仍然是控制疫情的重要因素。近年来随着分子生物学和免疫技术的快速发展,在改善原有诊断技术的基础上也引入了多种新的结核病诊断技术。新型培养技术缩短了细菌学检查和结核菌药敏试验的时间;分子生物技术的应用(比如PCR)使得快速诊断成为可能;血清学方法的改善以及噬菌体测定、γ-干扰素试验等新技术的引入给临床诊断带来了新的希望。本文就结核病的诊断技术进行综述。     

奶牛结核病两种诊断方法的比较研究

牛结核病是一种人畜共患传染病,近年来发病率有所上升,给养殖业造成巨大损失。目前牛结核病的诊断仍然以传统的PPD皮内变态反应为主,缺乏快速、敏感、特异和准确的诊断方法。世界各国皆在研究新型的诊断技术。本试验主要针对怀柔区300头奶牛采用固有的PPD皮内变态反应和新型诊断技术IFN-γ体外释放检测法进行诊断对比。结果表明,采用IFN-γ体外释放试验检测出结核阳性数5头,采用PPD皮内变态反应检测出结核阳性数4头;IFN-γ体外释放试验与PPD皮内变态反应符合性高达98%,其敏感性和特异性高于PPD皮内变态反应。     

奶牛结核病两种检测方法的比较试验

采用自制的牛结核病PCR快速诊断试剂盒,对某奶牛场100头份奶牛奶样进行检测,检出阳性牛16头;采用结核菌素皮内注射法（PPD）检出阳性牛17头,结果符合率为94.11％.用牛结核病PCR快速诊断试剂盒检测所需时间为6h,显示其快速、特异等优点,为今后牛结核病的检疫工作提供了1个新方法.     

应用对流免疫电泳诊断奶牛结核病

选用39头PPD皮试法阳性结核病牛进行对流免疫电泳试验.结果.32头出现阳性反应.占试验数82.05％. 对流免疫电泳(简称CIE)在人群结核病血清学诊断的研究上已取得了一定进展,而用以诊断奶牛结核病的研究却甚少。为此,在前人研究基础上,利用CIE技术对奶牛结核病血清学诊断进行粗浅的试验研究,观察CIE对奶牛结核病的诊断或免疫监察等方面有无实用意义。     

牛结核病诊断方法研究进展

牛结核病是一种严重的人畜共患病。给奶牛业造成了巨大的损失,还与人们的生命安全息息相关。结核病的早期诊断仍然是控制疫情的重要因素。近年来随着分子生物学和免疫技术的快速发展,在改善原有诊断技术的基础上也引入了多种新的结核病的诊断技术。新型培养技术缩短了细菌学检查和结核菌药敏试验的时间;分子生物技术的应用（比如PCR）使得快速诊断成为可能;血清学方法的改善以及噬茵体测定、γ-干扰素试验等新技术的引入给临床诊断带来了新的希望。本文就结核病的诊断技术进行综述。     

单分子免疫阵列技术在传染病诊断中的应用

单分子免疫阵列(single molecule array,Simoa)技术,又称"数字ELISA",是近年来新开发的一种数字免疫分析方法,将单分子计数用于蛋白质生物标记物的检测。该方法可测量各种不同基质(血清、血浆、脑脊液、尿液、细胞提取物等)中的蛋白质,检测限可达飞摩尔(fg/mL)数量级,灵敏度较传统ELISA提高约1 000倍。目前,该技术在一些重大传染病,如新冠肺炎、结核病、艾滋病、朊病毒病诊断中的优势逐渐凸显。Simoa技术可帮助监测新冠病毒感染进程,有望实现早期高灵敏度诊断,以区分新冠肺炎轻症和重症患者;有望帮助诊断活动性结核病,并可以监测结核病治疗效果;可更准确检测人免疫缺陷病毒(HIV)免疫相关蛋白含量变化,提高早期诊断的灵敏性;可在羊瘙痒病临床症状出现前检测活体动物血清,提高痒病早期检测能力,从而有望用于人类克雅氏症诊断。未来,通过开发相关病种的检测试剂盒,有望利用Simoa技术提高疫病的综合诊断能力,还可进行疫苗免疫效果评价,为疫病防控提供依据。     

结核杆菌诊断抗原的研究进展

结核病是一种人畜共患慢性传染病,该病的发病率近年来呈上升趋势,对人类健康及畜牧业发展造成严重威胁。及早诊断并加以有效治疗是防控结核病蔓延的关键。结核病的诊断有多种方法,其中免疫学诊断方法应用最为广泛,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对结核抗体进行检测在临床上应用较为普遍。但目前使用的结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)抗原成分复杂,检测效果不够稳定,影响了检测的特异性和敏感性。因此寻找结核杆菌新的诊断抗原就具有十分重要的意义。本文对近年来用于ELISA诊断的结核杆菌诊断抗原及其研究进展进行综述,力求为结核病的防控及相关产品开发提供一定的参考。     

也论牛结核病流行病学与诊断技术研究进展

牛结核病是一种人畜共患的慢性消耗性传染病,其传播流行影响畜牧业的持续发展和人类的健康.阐述了牛结核病流行病学和诊断技术方面的研究进展,以期为该病的诊治与防控提供依据.