番茄组织培养与试管苗繁育

[目的]建立番茄的高效再生体系,为下一步进行番茄叶绿体遗传转化研究奠定基础。[方法]通过培养经无菌处理的番茄种子获得无菌苗,切取无菌苗的叶片置于附加有激素组合为3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA的MS培养基中诱导愈伤组织产生,再利用愈伤组织,比较不同浓度激素组合对番茄愈伤组织分化不定芽与不定芽生根的影响。[结果]MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+30 mg/L蔗糖培养基对诱导愈伤组织分化不定芽的效果最佳;1/2MS+1.0 mg/L IAA培养基对生根最好。[结论]适宜激素浓度的选择是番茄高效再生体系建立的关键。     

雪樱子组织培养及植株再生体系的研究

以雪樱子无菌苗叶片及茎段为外植体,研究了不同激素及不同浓度激素配比的培养基对雪樱子愈伤组织的诱导、不定芽分化及其生根的影响。结果表明,愈伤组织诱导以及芽分化最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L,出愈率为87.5%,分化率为65.0%;生根最适培养基为MS+IAA 0.2 mg/L。     

番茄高效离体再生体系的建立

以中蔬四号番茄子叶和下胚轴为外植体进行离体培养,研究了不同激素及不同浓度的组合对愈伤诱导、不定芽分化及生根的影响。结果表明,MS+2,4-D0.2 mg/L+6-BA1.0 mg/L+蔗糖30 g/L诱导所得愈伤最好,MS+IAA0.2 mg/L+6-BA1.0 mg/L+蔗糖30 g/L诱导分化不定芽效果最佳,1/2 MS+蔗糖20 g/L是诱导不定芽生根的理想培养基。建立起高效番茄离体再生体系。     

秘鲁番茄高效再生体系的研究

以秘鲁番茄的叶片和茎段为外植体,研究不同外植体种类、激素配比对秘鲁番茄愈伤组织诱导、分化和不定芽生根的影响,以期建立秘鲁番茄组织培养高效再生体系。结果表明:秘鲁番茄的叶片较茎段更适宜愈伤组织诱导与分化,以叶片为外植体时,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,愈伤组织诱导率高达100.0%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,不定芽的分化率高达92.4%。以茎段为外植体时,最佳诱导愈伤培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA,愈伤组织诱导率高达95.8%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,不定芽的分化率高达86.5%。不定芽最适宜的生根培养基为MS+1.0 mg/L NAA,生根率达100.0%。采用草炭土+珍珠岩(体积比1∶1)的混合基质作为移栽基质,移栽成活率可达90%以上。     

番茄耐低温材料离体再生体系的建立

以筛选出的耐低温番茄TTI1103B-2为材料,以下胚轴为外植体进行离体培养,通过不同激素组合处理,诱导愈伤组织、不定芽及不定根的形成,建立其高效再生体系。结果表明,6-BA、IAA与愈伤组织的诱导和不定芽的分化有极显著差异性,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+3.0mg/L 6-BA+0.2mg/L IAA,诱导不定芽分化的最佳培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA,最适宜生根培养基为MS+IAA0.2mg/L。     

黑莓叶片组织培养及植株再生的初步研究

以美国黑树莓叶片作为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA或IAA进行愈伤组织诱导及植株再生试验.结果表明:树莓叶片外植体在培养基MS+6-BA 2.0～ 4.0 mg/L+NAA(IAA)0.01～0.5 mg/L都能不同程度地形成愈伤组织 ,但以MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L愈伤组织的诱导率最高,诱导率可达100%;所试验的各种不定芽分化培养基,都能不同程度地诱导愈伤组织分化出不定芽,在添加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的MS培养基上,愈伤组织分化不定芽的比例最高,达49.7%的;所产生的不定芽在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L的培养基上的生根率可达89.3%.     

甜瓜红心脆和早皇后再生体系的建立

为了初步筛选出适宜诱导甜瓜红心脆、早皇后子叶和下胚轴愈伤组织和不定芽的培养基,以及筛选适宜其不定芽伸长和生根的培养基,采用组织培养的方法,以甜瓜红心脆和早皇后种子为材料、子叶和下胚轴为外植体,进行添加不同浓度6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、吲哚乙酸(IAA)激素组合的MS培养基诱导愈伤组织和不定芽、不定芽伸长、芽生根的研究。试验结果表明,MS+0.5 mg/L IAA、MS+1.0 mg/L IAA培养基不利于红心脆子叶愈伤组织的诱导,其余培养基均有利于其子叶和下胚轴愈伤组织的形成;MS和MS+0.3 mg/L IAA培养基不利于早皇后子叶愈伤组织的形成,MS培养基不利于其下胚轴愈伤组织的诱导,其余培养基均有利于其愈伤组织的形成;适宜诱导红心脆子叶不定芽的培养基是MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IAA、MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA,适宜诱导早皇后子叶不定芽培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA;适宜诱导红心脆、早皇后下胚轴不定芽的培养基分别为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA、MS+0.3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA;MS+0.5 mg/L 6-BA、MS+1.0 mg/L IAA培养基分别适宜红心脆、早皇后不定芽伸长;2个品种适宜的生根培养基均是1/2MS+1.0 mg/L IBA。研究初步建立了甜瓜红心脆、早皇后的再生体系,为其遗传转化研究作了准备。     

小玉竹组织培养及无性系的建立

以小玉竹根茎为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的6-BA,2,4-D,IAA,NAA,诱导根茎形成愈伤组织,并使愈伤组织分化形成不定芽,培养成生根试管苗,建立起小玉竹无性系。结果表明,MS+6-BA 0.4 mg/L+NAA 1.0 mg/L是根茎愈伤组织诱导的理想培养基;MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L是愈伤组织和不定芽分化培养的理想培养基;1/3MS+IAA 0.4 mg/L是试管苗生根培养的理想培养基。     

川芎的组织培养技术研究

探索川芎的不同组培条件,优化其诱导和分化培养基。以川芎根、茎段和叶片作外植体进行组织培养,获得了大量的组培苗,建立了相应的植株再生系统。川芎根诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 1.2 mg/L;茎段及叶片诱导愈伤组织的最佳培养基均为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L;根愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.2 mg/L+IAA 0.3 mg/L;茎段及叶片愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+KT 2.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L。根外植体在愈伤组织、分化不定芽和生根方面的诱导率分别为84%、86%和87%;茎段和叶片愈伤组织的诱导率达到92%和96%,其不定芽分化率为98%,生根率为93%。经炼苗后,获得的组培苗的移栽成活率达98%。提出了优化激素搭配的培养基,得到了高效的诱导率、分化率和生根率。     

甜瓜黄醉仙子叶再生体系的初步建立

[目的]选出最适宜诱导甜瓜黄醉仙子叶愈伤组织和不定芽的培养基,以及适宜其不定芽伸长和生根的培养基。[方法]以甜瓜黄醉仙子叶为外植体,研究添加不同浓度BA和IAA激素组合的MS培养基对其愈伤组织和不定芽诱导及不定芽伸长的影响,以及添加不同浓度IBA激素组合的MS培养基对其生根的影响。[结果]最适宜诱导甜瓜黄醉仙子叶愈伤组织培养基是MS+0.5 mg/L BA+2.0mg/L IAA和MS+1.0 mg/L BA+2.0 mg/L IAA,最适宜其子叶不定芽诱导的培养基是MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L IAA,不定芽伸长的最适宜培养基是MS+1.0 mg/L IAA,生根的适宜培养基是1/2MS+1.0 mg/L IBA。[结论]初步选出一套完整适宜甜瓜黄醉仙子叶再生体系建立的培养基。     

黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖

【目的】建立黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖体系。【方法】以黄芩的幼茎、幼叶及叶柄为外植体,在MS培养基上添加不同质量浓度的6-BA、2,4-D与NAA诱导愈伤组织及再生芽;在1/2 MS培养基上添加IAA、IBA或NAA激素,单独或者组合使用,诱导黄芩试管苗生根。【结果】幼叶和叶柄容易褐化死亡,而幼茎显示很好的脱分化和再分化效果;BA与NAA组合可以诱导幼茎外植体脱分化与再分化,而BA与2,4-D组合只能诱导愈伤组织发生。IAA诱导生根率最高,但是茎基部会形成愈伤组织,后期无法驯化成活;IBA及NAA均可以诱导根的发生,但是以IBA效果为佳。【结论】幼茎为最佳外植体,MS+BA0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织诱导及再生芽的分化培养基。1/2MS+IBA 0.1mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率为70.3%。     

毛地黄优良变异植株组织培养及无性系的建立

研究了毛地黄优良变异植株嫩茎愈伤组织的诱导、分化及无性系的建立。结果表明:MS+1mg/L BA+0.6 mg/L 2,4-D是毛地黄嫩茎愈伤组织诱导的理想培养基;MS+0.5 mg/L BA+0.1 mg/LNAA是愈伤组织分化的理想培养基;MS+0.2 mg/L BA+0.2 mg/LIAA是不定芽壮苗培养的理想培养基;1/3 MS+0.3 mg/LIAA是生根培养的理想培养基;炉灰渣、河沙是生根试管苗移栽的理想基质。     

老虎须的组织培养与植株再生

以老虎须茎段为试验材料,采用不同激素组合对其进行愈伤组织诱导和分化、芽增殖与生根研究。结果表明:老虎须茎段愈伤组织诱导和分化的最适培养基分别为MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;芽增殖的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L;生根的最适培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L。     

蕨菜组织培养技术的研究

[目的]以蕨菜叶柄为外植体研究蕨菜的组织培养技术。[方法]在1/2 MS培养基中设置不同的6-BA和IBA浓度,研究6-BA和IBA对蕨菜叶柄组织培养的影响。[结果]1/2 MS+0.2 mg/L 6-BA+0.4 mg/L IBA为愈伤组织的最佳诱导培养基,诱导率为82%;1/2MS+0.2 mg/L IBA+0.2 mg/L 6-BA为愈伤组织的最佳增殖培养基,增殖倍数为8.07;1/2 MS+0.4 mg/L IBA为最佳生根培养基,生根率达100%,根数多、根长且健壮。[结论]结果为蕨菜植物的组培繁殖提供参考。     

花蔺无性系建立的研究

以花蔺根茎为材料,进行了愈伤组织的诱导和继代、不定芽分化、试管苗生根、移栽定植的研究,建立起根茎无性系。结果表明：根茎愈伤组织诱导培养和继代培养的理想培养基是MS＋BA 0.5 mg/L＋2,4-D2.0 mg/L;愈伤组织颗粒团分化培养的理想培养基是MS＋BA0.5~1.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L;试管苗生根培养的理想培养基是1/2 MS＋NAA0.1 mg/L＋IAA0.2 mg/L。试管苗定植容易成活,且长势旺盛,并保持了野生植株的所有生物性状。     

番茄子叶、下胚轴植株再生体系的建立

本研究以番茄(Lycopersicon esculentumM ill.)栽培品种“中杂9号”、“毛粉802”和“合作908”为试材,通过对番茄子叶、下胚轴的离体培养,研究不同基因型以及不同激素配比对植株再生的影响。结果表明:以下胚轴为外植体时3种材料均可诱导再生植株,其中中杂9号和毛粉802最适宜诱导愈伤组织和芽分化的培养基为MS 6-BA2.0mg/L IAA0.5mg/L,合作908最适宜诱导愈伤组织和芽分化的培养基为MS 6-BA2.0mg/L IAA0.4 mg/L。以子叶为外植体时毛粉802和合作908均可诱导出再生植株,其中毛粉802诱导愈伤组织及芽分化的最适宜培养基为MS 6-BA1.0mg/L IAA0.2mg/L和MS 6-BA1.0mg/L IAA0.5mg/L,合作908诱导愈伤组织及芽分化的培养基为MS 6-BA0.5mg/L IBA0.5mg/L。两种外植体适宜的生根培养基均为MS IAA0.5 mg/L。