鸡新城疫活疫苗（Lasota株）生产种毒的保存期试验

对3批置-70℃超低温冰箱的鸡新城疫(Lasota株)生产种毒进行保存期试验，检测结果表明，种毒在-70℃保存5年，病毒含量、免疫原性、安全性均达到规程要求，分别用该3批种毒生产9批鸡新城疫抗原病毒含量检测均≥108.83EID50/0.1ml，高于国家标准(国标>107.0EID50/0.1ml)，因此鸡新城疫(Lasota株)生产种毒在-70℃存放保存期至少为5年。     

鸡新城疫CS_2株与4株疫苗毒株有关性能的比较

对鸡新城疫病毒 (NDV)中等毒力毒株 CS2 株、ND 系、Rokin、Komerov和低毒力La Sota株病毒的脑内致病指数 (ICPI)、鸡胚的半数感染量 (EID50 )等指标进行了测定 ,结果是 ICPI分别为 1 .2 7～ 1 .52、1 .66～ 1 .70、1 .46、1 .43和 0 .2 9～ 0 .5;EID50 分别为 1 0 7.5、1 0 7.5、≥ 1 0 8.5、1 0 7.9和≥ 1 0 8.5/0 .1 ml。用 1 0倍剂量的 CS2 株病毒注射 1月龄和 1 .5月龄 SPF雏鸡 ,均安全无不良反应。测定 CS2 株病毒保存期 ,结果在 - 2 0℃保存 6年的鸡胚 2代 (E2 )、鸡胚 6代 (E6)、鸡胚 1 0代 (E10 )毒的 EID50 均≥ 1 0 7.5/0 .1 ml。ND CS2 株病毒的各项指标均在中等毒力范围内 ,对鸡胚的半数感染量仍保持原毒 ( 系 )的特性 ,ICPI比原毒有所下降。与 NDV Rokin、Komerov毒株相比 ,0 .1 ml鸡胚液中病毒含量较低 ,对鸡胚的毒力较强 ,ICPI没有明显差别     

重组N蛋白间接ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体

用纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白作为包被抗原，建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的间接ELISA方法，并确定了ELISA最佳工作条件：抗原包被浓度为0．27μg/ml，37C1h加4C过夜，血清(1：40)和酶标免抗猪IgG(1：400)分别在37℃温育30min，底物溶液37℃显色15min。经重复性试验、交叉试验、阻断试验等试验结果表明该方法重复性好、特异性强、灵敏度高；与美国IDEXX试剂盒相比较，特异性和敏感性分别为97．6％和92．1％，无显著性差异。用已建立的方法检测临床血清样本187份，总阳性率为30．5％。     

口蹄疫（续）

①乳鼠中和试验(1)用已知血清鉴定未知病毒法将病畜水泡皮或肌肉、脏器等组织以生理盐水或磷酸盐缓冲液制成1.5～1:10的悬液,于4℃冰箱浸毒过夜,3 000r/min离心10min,上清液为被检病毒液.用FMDV和O、A、C、AsiaⅠ型标准毒株制备豚鼠抗血清,以1:5稀释,与等量被检病毒液混合,37℃孵育1h.后分别接种3～4 日龄乳鼠,颈背皮下注射0.2ml/只.每组接种4只,同时设健康乳鼠、生理盐水和血清对照组.每窝鼠以1只母鼠哺乳.接种后观察7d,每天记录2次.     

水貂病毒性肠炎细小病毒无血清细胞培养灭活铝胶疫苗的安全性试验(摘要)

将水貂病毒性肠炎细小病毒(MEV)无血清细胞培养灭活铝胶疫苗接种6只小鼠(腹腔0.5ml/只)、6只豚鼠(皮下1～2ml/只.1～2次)、6只家兔(皮下1～3ml/只,2～3次).4只貉子(皮下3ml/只)和32只水貂(皮下或肌肉1～2ml/只,1～2次),以5只未注苗貂为阴性对照、3只人工感染 MEV 强毒貂为阳     

犬传染性肝炎病毒提纯及其部分物理化学特性的分析

用聚乙二醇提纯犬传染性肝炎病毒(ICHV)。对提纯病毒,测定其完整粒子和不完整粒子的浮密度分别为1.336g/ml和130g/ml,沉降系数分别为747S和285S;用PAGE分析病毒蛋白质,含12种多肽,用SDS—PAGE测定其分子量,分别为11.5、7.8、7.0、6.4、5.8、5.4、3.2、2.7、2.4、1.8、1.6和1.3KD;提纯病毒核酸,测定其沉降系数为28S,分子量为18.77×10~6D,解链温度约为82℃,病毒核酸为线状双链DNA,核酸含量为12.5％。     

鸡传染性喉气管炎病毒和肾型支气管炎病毒同胚增殖的研究

将鸡传染性喉气管炎(ILT)病毒悬液和鸡传染性支气管炎(IB)病毒悬液,采取不同浓度,不同时间在同一个鸡胚上进行接种,可使两种病毒之间互不干扰,并能在同一鸡胚上共同增殖。取鸡胚绒毛尿囊膜检测传染性喉气管炎病毒(ILTV),其EID50为105.5/0.2ml,取尿囊液检测传染性支气管炎病毒(IBV),其EID50为106.3/0.2ml。与单项接种对照组相同;用同胚增殖的绒毛尿囊膜和尿囊液按一定比例混合,制造二联油乳剂灭活苗,免疫后30d和6个月后分别用ILT、IB强毒进行攻毒试验,结果免疫后30d,ILT和IB的保护率均为100%,免疫后6个月,ILT和IB的保护率分别为95.3%、86.7%。本试验结果表明,用此方法增殖病毒,既降低了成本,又保证了免疫效果,为今后制造二联苗提供了科学的依据。     

关于猪繁殖与呼吸综合征的若干问题

1PRRS病原学特点猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reoproductive and respiratory Syndrome,PRRS),是有囊膜的单链RNA病毒,国际病毒分类委员会(ICTV)第七次报告将其归为套式病毒目动脉炎病毒科动脉炎病毒属。该病毒直径50～65nm,表面相对平滑,立方形核衣壳,核心直径25～35nm。PRRS在-70℃和-20℃时可长期存活;4℃时,1周内病毒感染性丧失90%,但至少1个月内仍能检测     

Dot-ELISA检测H9亚型禽流感病毒的研究

本研究采用兔抗H9亚型禽流感病毒（AIV）IgG包被于硝酸纤维素膜,酶标羊抗兔IgG作二抗,建立检测H9亚型AIV的Dot-ELISA法。经方阵试验确定兔抗AIV IgG工作浓度为1∶400,酶标羊抗兔IgG的工作浓度为1∶400。作者建立的Dot-ELISA对AIV的最小检测量为3.35×10-9g。Dot-ELISA与HA和HI、AGP及病毒分离法相比,检测63份临床疑似H9亚型AIV病料,Dot-ELISA检出32份(57.14%),HA和HI检出15份(23.81%),AGP检出11份(17.46%),病毒分离检出38份(60.30%)。用抗H9亚型AIV阳性血清可以阻断Dot-ELISA阳性反应,诊断膜片与鸡新城疫病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡传染性支气管炎病毒、产蛋下降综合征病毒不出现阳性反应,证明Dot-ELISA特异性好。分别置室温(25 ℃左右)、4 ℃和-20 ℃下保存1个月后,膜片诊断效果不变,对照反应均成立,该方法重复性好（重复符合率为93.9%）,操作简便（3 h内可完成）,不需要特殊检测仪器,结果客观,肉眼易于判断,是微生物和传染病及寄生虫病诊断标准化的新技术之一。     

关于细胞质多角体病病毒感染蚕排粪中的多角体形态

关于细胞质多角体病病毒(CPV)感染蚕排粪中多角体的检测及发病规律等,佐藤(1962)、古田(1963)等人的报告指出,粪作为2次感染源是很重要的。因此著者研究了随着CPV感染被排泄的多角体在粪中是怎样存在的。用宝钟的2龄起蚕作材料蚕供试,在桑叶上涂抹CPV(TC)10~6/ml(多角体),经口接种,定时采取粪及蚕。采取的材料用Carnoy液固定后,制作石蜡切片,脱蜡后用1N HCl60℃加水分解2～3分钟后,行吡啶染色。     

犬细小病毒病的诊断和综合治疗

犬细小病毒病是一种急性、烈性、致死性传染病。本人摸索出一套综合治疗方案,治愈率达90%以上。现报道如下:1抗病毒(1)特异性抗病毒药:早期主要使用犬细小病毒高免血清、精制犬细小病毒免疫球蛋白、犬细小病毒单克隆抗体(CPVMcAb)等药物,以及犬细小病毒痊愈犬全血,以中和抗原。(2)广泛抗病毒药:本病多伴有其他病毒混合、继发感染,常选:犬多价免疫球蛋白、犬白细胞干扰素、聚肌胞、转移因子、病毒唑、病毒灵、大青叶等。(3)用药:首用犬细小病毒单克隆抗体,以1ml/kg体重,同时配合犬五联血清以1～2ml/kg体重肌肉注射,用药3～5天;犬免疫球蛋白…     

养猪生产构建生物安全防控体系

正一、非洲猪瘟病原非洲猪瘟病毒(ASFV)是非洲猪瘟病毒科非洲猪瘟病毒属唯一成员,具有典型二十面体囊膜结构,病毒粒子大小200 nm。ASFV对低温高度耐受,加热灭活(56℃/60 min;60℃/20 min)。对乙醚和氯仿敏感,8/1 000的氢氧化钠(30 min)、次氯酸和碘化合物可将其灭活。ASFV在肉类中存活期长(表1),不利于病毒的消除。     

漳州市猪圆环病毒病血清学初步调查

笔者203年1～5月对送检的302份猪血清进行猪圆环病毒的ELISA血清学检测,并进行统计分析,以期能给养殖场提供一些参考,现报道如下:1材料与方法1.1试剂盒猪圆环病毒病—ELISA诊断试剂盒和蓝耳病—ELISA诊断试剂盒由华中农业大学牧医学院动物病毒室提供。应用酶联免疫检测仪进行检测。1.2被检血清来源于龙文、芗城、龙海、南靖等几个县(市、区)的51个集约化养猪场,共302份,其中32个养猪场193份血清同时检测蓝耳病(PRRS)抗体。2酶联免疫吸附试验(ELISA)方法2.1取预包被的微孔条板,用洗涤液洗板3次,200ul/孔,每次静置3分钟,最后一次拍…     

虫克星对犬疥螨病的疗效试验

1 材料与方法 1.1 试验药物及用法虫克星注射液为含有1%阿维菌素的棕色液体,商品名又叫阿力佳,玻璃瓶装,每瓶5ml,是北京中农华威公司提供,批号:宁兽药字(1998)X045063号.按每公斤体重0.02ml用量,用注射器分别在第1天和第7天皮下注射.     

禽肺病毒活疫苗的试验和现地应用

美国研究人员用细胞培养物进行63次连续传代(7次鸡胚成纤维细胞和56次Vero细胞)使一株禽肺病毒(APV)分离物(APV/MN/火鸡/1-a/97)减毒并测定了用其作为火鸡活减毒疫苗的效力。在2周龄时用两种剂量减毒病毒(104.5半数组织培养感染剂量(TCID50)/ml和102.5TCID50/ml)给火     

用免疫荧光技术诊断牛呼吸道的呼吸道合胞病毒感染

作者对用1·9Pfu×10~5/ml呼吸道合胞病毒(RSV)悬液实验感染牛14头,用抗RSV病毒高免牛血清与异硫氰荧光素的结合物直接着染鼻咽涂片与病毒分离进行了比较,使用荧光抗体(FA)方法从107份试验样品中检出24份样品为阳性,21份病料分离到RSV病毒。81％(19/21)阳性牛是在病毒感染的第9天后才能检测出来,80％(17/21)的感染牛于感染病毒后     

口服磺胺嘧啶钠注射液防治幼禽白痢病

从1989年4月至1991年6月,笔者用磺胺嘧啶钠注射液利用口服,治疗幼禽白痢病,效果很好.治愈率达98％以上。一、用法与剂量 (一)治疗:5日龄至20日龄的幼禽,口服磺胺嘧啶钠注射液0.1ml至0.2ml;3周龄至4周龄的,服0.3ml至0.4ml;5周龄至6周龄以上的,服0.5ml至0.6ml.1日2次,连服3～4天.一般2～3次就可以治愈. (2)预防:对新孵出的3～5日龄的幼禽,用磺胺嘧     

两种方法检测雏番鸭细小病毒抗体效价的比较

本文对检测雏番鸭细小病毒抗体效价的LPAISN两种方法进行比较,现报道如下:1材料与方法1.1病毒和血清:番鸭细小病毒福州株(MPV-F),鸭细小病毒阳性血清、阴性血清和单抗致敏的胶乳由本室提供。雏番鸭细小病毒活疫苗也由本室提供。1.2试验鸭及疫苗免疫1日龄雏番鸭45羽购自田县,分别腿部肌肉注射2001、2003和2005批号疫0.2ml。每批号疫苗注射15羽。隔离饲养15天后,心采血,分离血清。每批次随机抽取5份血清,56℃水灭活30min后供测试。1.3胶乳凝集抑制试验(LPAI):参照程由铨的方法取被检血清50μl加入第一孔(4单位抗原孔)中,混后取50μl加入…     

格利特对模拟鸡舍环境中禽流感病毒的杀灭效果

为验证在有机物存在下格利特消毒剂杀灭禽流感病毒的能力,试验模拟鸡舍和周围环境的消毒实际情况,在鸡粪中混入H9亚型禽流感病毒,研究格利特消毒剂(20%戊二醛溶液)杀灭禽流感病毒的效果,结果:1∶100、1∶200和1∶400稀释的格利特消毒剂在4℃或25℃下作用20 min,均能100%杀灭混入鸡粪中的H9N2禽流感病毒;1∶200稀释的格利特消毒剂25℃下作用20 min,能杀灭存在于鸡粪和清洁剂中的100%H9N2禽流感病毒。1∶100、1∶200、1∶400、1∶800、1∶1 600稀释的格利特消毒剂25℃下作用20 min,均能100%杀灭无鸡粪保护的H9N2禽流感病毒。结论:格利特消毒剂能杀灭有鸡粪保护的禽流感病毒。     

分泌抗犬细小病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

将用犬细小病毒(CPV)免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP2/0细胞在聚乙二醇作用下融合,用血凝抑制试验(HI)筛选,以有限稀释法克隆3次,得到6株分泌抗CPV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,其中4株分泌IgG_1,2株分泌IgM;6株杂交瘤细胞染色体数目介于96—103之间;在半年传代期间(45代),均能稳定地分泌McAb。将杂交瘤细胞注射BALB/C小鼠诱生腹水,其HI效价介于1:128—1:512之间,置-20℃保存1年,其效价不变。用交又HI法对2株单克隆抗体作特异性分析,该McAb只特异地与CPV发生反应,而不与猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)、水貂肠炎病毒(MEV)发生反应。