5-氮胞苷介导的转基因crylAb的阶段复活及其对水稻的生物学效应

用不同浓度的5-氮胞苷溶液配合不同时间处理了发生在转录水平的转基因cry1Ab沉默水稻。结果表明，5-氮胞苷处理能使8%～30%转基因水稻植株的转基因cry1Ab恢复表达活性，复活转基因表达的Cry1Ab蛋白含量最高可达0.147%，45mg/L5-氮胞苷处理1d可使转基因cry1Ab的复活率及Cry1Ab蛋白含量达最高。同时，5-氮胞苷处理使转基因水稻植株出现矮化，分蘖数、单株粒重下降，穗长减小及开花期延迟等发育异常现象。5-氮胞苷作为一种弱诱变剂在克服转基因沉默及创造具优良农艺性状的转基因植物中具有一定的应用价值。     

转cry1Ab基因水稻对拟水狼蛛捕食作用间接影响的评价

室内评价了拟水狼蛛(Pirata subpiraticus)对取食转[i]cry1Ab[/i]基因水稻的稻纵卷叶螟([i]Cnaphalocrocis medinalis[/i])幼虫和褐飞虱([i]Nilaparvata lugens[/i])若虫的捕食量及功能反应。结果表明,拟水狼蛛对这2种猎物的捕食功能反应均符合HollingⅡ型圆盘方程。该蜘蛛对取食转[i]cry1Ab[/i]基因水稻的稻纵卷叶螟幼虫的捕食量和处理时间低或短于取食对照的,但差异未达显著水平,而瞬时攻击率显著低于对照。该蜘蛛对以转[i]cry1Ab[/i]基因水稻为食的褐飞虱若虫的捕食量、瞬时攻击率和处理时间与取食对照的相比有一定的变化,但差异均不显著。综合考虑,认为转[i]cry1Ab[/i]基因水稻对拟水狼蛛捕食作用无明显的负作用。     

转cry1Ac和CpTI双基因抗虫水稻对二化螟和大螟的致死效应及田间螟虫构成的影响

 就转cry1Ac＋CpTI双基因抗虫水稻不同生育期对二化螟Chilo suppressalis和大螟Sesamia inferens的室内致死特性及田间螟虫的构成进行了研究。室内测定结果表明，不同生育期转基因水稻对二化螟、大螟都表现明显的致死效应，但水稻生长后期的致死效果降低。转基因水稻对大螟的致死效应显著弱于对二化螟的，其中，二化螟除在齐穗期和成熟期有少量幼虫（0.5%~6.4%）存活到第4天外，其余均在第4天死亡；大螟在两种转基因水稻上的存活率高于二化螟，且少量个体（<1.6%）还能化蛹、羽化，但化蛹率和羽化率均明显低于在非转基因对照上的。早、晚两季水稻的田间调查结果表明，转基因水稻上两种螟虫虫口数量均显著低于相应的非转基因对照品种，转基因水稻上二化螟虫口减退率>99％；大螟虫口减退率相对较低，早、晚稻上有所不同，其中早稻 >93％，晚稻仅44％～64％。转基因水稻上残存螟虫中，大螟所占比例明显上升，推测转基因水稻对两种螟虫致死效应差异可能是其主要原因。     

转cry1Ac和CpTI双基因抗虫水稻对二化螟和大螟的致死效应及田间螟虫构成的影响

就转cry1Ac＋CpTI双基因抗虫水稻不同生育期对二化螟Chilo suppressalis和大螟Sesamia inferens的室内致死特性及田间螟虫的构成进行了研究。室内测定结果表明,不同生育期转基因水稻对二化螟、大螟都表现明显的致死效应,但水稻生长后期的致死效果降低。转基因水稻对大螟的致死效应显著弱于对二化螟的,其中,二化螟除在齐穗期和成熟期有少量幼虫（0.5%~6.4%）存活到第4天外,其余均在第4天死亡;大螟在两种转基因水稻上的存活率高于二化螟,且少量个体（<1.6%）还能化蛹、羽化,但化蛹率和羽化率均明显低于在非转基因对照上的。早、晚两季水稻的田间调查结果表明,转基因水稻上两种螟虫虫口数量均显著低于相应的非转基因对照品种,转基因水稻上二化螟虫口减退率>99％;大螟虫口减退率相对较低,早、晚稻上有所不同,其中早稻 >93％,晚稻仅44％～64％。转基因水稻上残存螟虫中,大螟所占比例明显上升,推测转基因水稻对两种螟虫致死效应差异可能是其主要原因。     

转反义Wx基因水稻颖果的发育及物质积累

以转反义Wx基因粳稻和籼稻品系为材料,研究其颖果的发育和物质积累。结果表明,直链淀粉含量降低后的转基因水稻品系籽粒的粒重会有所下降,而且直链淀粉含量下降越多,粒重的下降幅度也越大。单个颖果胚乳细胞的数目也有不同程度的下降,但在籽粒发育早期（花后6 d前）,转基因水稻的胚乳细胞增殖速率明显高于其亲本。直链淀粉降低后的转基因品系籽粒可溶性糖含量在发育初期（花后9 d前）低于其同时期的亲本,而花后9 d后则明显高于其亲本。转基因水稻籽粒中的总淀粉含量有不同程度的下降,而支链淀粉的含量却相对增加,从而改变了籽粒中淀粉的组成,但对籽粒中蛋白质的积累没有显著影响。     

富农生物菌肥对水稻生长、产量及品质的影响

对生物菌肥与化肥两种肥料处理对水稻发育、产量、品质的影响进行了比较研究。结果表明,施用富农生物菌肥可以缩短水稻生育期4~5 d,降低植株高度2 cm,增强抗倒伏能力,保证安全成熟,增加每穗粒数和实粒数,使水稻增产9.2%。施用富农生物菌肥还能提高糙米率、整精米率和胶稠度,降低垩白粒率、垩白度,改善稻米食味。     

生物壮秧剂作用效果研究初报

目前在黑龙江省长期大面积使用的水稻壮秧剂杀菌成分较为单一,已经使苗床主要病原菌出现了严重的抗药性。为解决这一问题,笔者采用大区对比的方法,比较了水稻生物壮秧剂与普通壮秧剂对水稻秧苗素质、苗床病害、土壤中致病菌的数量及本田植株生物学性状等的影响。结果表明,生物壮秧剂对水稻秧苗的生长具有促进作用,并且能较好的控制病害。     

转sck/cry1Ac 双基因抗虫水稻对二化螟和稻纵卷叶螟的抗虫效果

通过室内测定和田间观察 ,就转sck/cry1Ac双基因抗虫水稻MSB和MSA对我国主要水稻害虫二化螟和稻纵卷叶螟的抗虫效果进行了研究。室内离体植株测定结果表明 ,MSB、MSA高抗两种害虫 ,抗性水平受水稻苗龄影响。 6 5～71d苗龄水稻上害虫校正死亡率达 98.9%～ 10 0 % ,10 5～ 10 9d时抗性水平有所降低 ,但除MSB对二化螟的校正死亡率 (仍达 79.3% )降低明显 (P <0 .0 5 )外 ,MSA对二化螟及MSB、MSA对稻纵卷叶螟的校正死亡率 (92 .8%～ 98.1% )均无明显下降(P>0 .0 5 )。选取MSB进行的田间实验进一步明确 ,MSB对两种害虫有显著控虫效果 ,抗性水平与抗虫对照克螟稻 1号(含cry1Ab)无明显差异(P >0 .0 5 ) ,且略优于施药亲本明恢 86。相对于未施药明恢 86 ,MSB对两种害虫的防治效果分别为 92 .6 %、97.3% ,施药明恢 86则分别为 87.7%、89.8%。     

Development and Substance Accumulation of Caryopsis in Transgenic Rice with Antisense Wx Gene

China is one of the leading nations in production as well as consumption of rice. Almost more than half of Chinese people live on rice. But most of the widely grown rice is of low quality, especially with high amylose content [1]. The higher level of amyl…     

根癌农杆菌介导的水稻转化系统的优化及转反义Wx基因植株的获得

以具不同直链淀粉含量的籼粳稻品种为受体材料,试验了适宜于根癌农杆菌介导转化的水稻愈伤组织诱导培养基及其诱导培养的时间。结果表明,一种基于MS基本培养基的商品培养基较适合作为籼粳稻幼胚愈伤组织的诱导培养基;对于籼型杂交稻亲本协青早B,转化前幼胚较适合的愈伤组织诱导培养天数为8 d左右。在此基础上,将反义蜡质（Wx）基因分别导入上述受体亲本中,获得了一批转基因水稻植株。PCR和Southern杂交分析表明反义Wx基因已经整合进了转基因水稻的基因组中。遗传分析表明外源基因在转基因水稻后代中的分离符合3∶1的理论比例。     

Development of Marker-Free Transgenic Cry1Ab Rice with Lepidopteran Pest Resistance by Agrobacterium Mixture-Mediated Co-transformation

Cry1Ab gene was transformed into four rice varieties, Zhejing 22, Zhejing 27, Jiahua 1 and Xiushui 63 mediated by Agrobacterium-mixture co-transformation. Rice genotype had an important effect on callus induction and transformation efficiency. Different mixtures of Agrobacterium strains (EHA105 and EHA101) contained Hpt and Cry1Ab genes resulted in different frequencies of resistant calli. There was no correlation between the frequency of transformants with the ratio of the Agrobacterium strain mixture contained Hpt and Cry1Ab genes. A total of 509 transgenic plants were obtained from the four rice varieties, and 272 T₂ progenies were analyzed for Cry1Ab and Hpt genes. PCR analysis revealed that 412 regenerated plants were Hpt positive (80.94%), 62 plants were also Cry1Ab co-transformants (15.05% in total frequency), and 42 plants among the 272 T₂ progenies were Cry1Ab positive but Hpt negative. This suggests that marker-free transgenic plants could be produced by co-transformation mediated by mixed Agrobacterium strains with the selectable marker gene and target gene. Southern blot analysis of five independent marker-free T₂ transgenic lines co-transformed from Zhejing 22 showed that Cry1Ab gene had been inserted into rice genome with a single copy. The transgenic plants showed significantly stronger resistance to lepidopteron than the non-transgenic plants under no application of insecticides against lepidopteron.