中药蟾甘口服液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒研究

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药蟾甘口服液对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共分4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药蟾甘口服液混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度5log2。第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度9log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。结果表明,中药蟾甘口服液对鸡胚无毒性作用。中药蟾甘口服液与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城病毒在鸡胚中增殖。     

中药金丝桃素注射液对鸡新城疫病毒抑制作用研究

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药金丝桃素注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共分4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药金丝桃素混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度5log2。第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度9log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。结果表明,中药金丝桃素注射液对鸡胚无毒性作用。中药金丝桃素与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城病毒在鸡胚中增殖。     

中药虎杖注射液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒研究

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药虎杖注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药虎杖混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度4log2。第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度7log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。结果表明,中药虎仗注射液对鸡胚无毒性作用。中药虎杖与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中增殖。     

中药炎康注射液对伪狂犬病病毒的抑制试验

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药炎康注射液对伪狂犬病病毒的抑制作用。试验共分4组:第Ⅰ组同时接种病毒尿囊液与中药炎康混合液,HA滴度为0。第Ⅱ组同时接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度为4 log2。第Ⅲ组同时接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度为7 log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度为0。结果表明,中药炎康注射液对鸡胚无毒性作用;中药炎康与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制伪狂犬病病毒在鸡胚中增殖。     

中药泽漆注射液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒研究

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药泽漆注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用.试验共分4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药泽漆混合液,HA滴度为0;第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度为4loga;第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度为8log2;第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度为0.结果表明,中药泽漆注射液对鸡胚无毒性作用.中药泽漆与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城病毒在鸡胚中增殖.     

中药"金不换"注射液在鸡胚中对鸡新城疫病毒的抑制试验

用鸡胚培养法和红血球凝集（HA）试验,测定中药“金不换”注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共分4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药金不换混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度3log2。第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度9log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。结果表明,中药“金不换”注射液对鸡胚无毒性作用,与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城病毒在鸡胚中增殖。     

中药蟾酥注射液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒的试验研究

采用鸡胚培养法和血凝抑制试验,测定了2种中药配方对新城疫病毒的抑制作用。试验共5组,第1组接种病毒尿囊液与中药1号混合液,HA滴度0。第2组接种病毒尿囊液与中药2号混合液,HA滴度2 log2。第3组接种病毒尿囊液与金刚烷胺,HA滴度2 log2。第4组接种病毒尿囊液与生理盐水,HA滴度7.5log2。第5组不接种病毒尿囊液,不用药,HA滴度0。结果表明,中药1号配方好于2号配方,中药2号配方与金刚烷胺效果相同。     

苗药复方在鸡胚中抗新城疫病毒的试验观察

用鸡胚培养法和红细胞凝集试验(HA)观察苗药复方提取液在鸡胚中对新城疫病毒的抑制作用。第1组接种病毒尿囊液与苗药复方提取液混合液,鸡胚72 h后存活率为88.9%,HA滴度为0;第1I组接种利巴韦林和病毒尿囊液混合液,鸡胚72 h存活率为47.1%,HA滴度为4log_2;第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,鸡胚72 h后存活率为0,HA滴度为91og_2;第1V组只接种生理盐水,鸡胚72h存活率为100%,HA滴度0。第1组与第1II组差异极显著(P<0.01),第Ⅰ组与第II组差异显著(P<0.05)。试验表明,苗药复方提取液对鸡胚接种的新城疫病毒有较强的抑制作用。     

鹅禽Ⅰ型副粘病毒病的快速鉴别诊断

用禽流感免疫胶体金试验诊断一发病率高、死亡快、疑似禽流感或禽Ⅰ型副粘病毒感染的鹅病例,结果为禽流感阴性;取病鹅肝、脾混合病料进行病毒分离,分离鸡胚尿囊液能凝集鸡红细胞(RBC),HA滴度为6 log2,并可被康复鹅血清、抗鸡新城疫(NDV)阳性血清所抑制,而不能被禽流感(H5、H9)标准阳性血清抑制。分离病毒人工感染易感雏鹅,引起100%的发病和死亡,并有与自然病例相似的症状和病变;人工感染42日龄SPF鸡出现100%的发病和死亡。根据临床症状和病变情况、免疫胶体金试验以及病毒分离和鉴定,证明该鹅群患禽Ⅰ型副粘病毒病。说明用禽流感免疫胶体金试验可以实现对禽流感、禽Ⅰ型副粘病毒病的快速鉴别诊断。     

紫锥菊注射液鸡胚内抗新城疫病毒作用研究

为研究紫锥菊注射液的抗病毒作用,用鸡胚培养法和血凝试验(HA)测定了紫锥菊注射液及对照药液对感染新城疫病毒鸡胚的保护作用.结果显示,紫锥菊注射液对鸡胚无毒.试验Ⅰ组(紫锥菊注射液和新城疫病毒液混合接种组)对鸡胚保护率达75%,其尿囊液HA滴度为0.试验Ⅱ组(利巴韦林注射液和新城疫病毒液混合接种组)对鸡胚的保护率为37....     

鸽Ⅰ型副粘病毒的分离与鉴定

采用鸡胚接种的方法从病死鸽中分离到了一株病毒，其血凝效价（HA）平均为2^8，该病毒株能凝集鸡红细胞的作用可被新城产凤标准阳性血清所抑制，所分离的病毒株Ⅰ型副粘病毒，该病毒对1日龄雏鸡脑 内致死指数（ICPI）为0.39,肌肉注射1日龄雏鸡不发病，该毒株对雏鸡和鸡胚来说为弱毒力株。用30日龄的幼鸽做人工发病试验时可复制此病，并使其HI平均抗体滴度由第15d的2.9log2上升到第25d的7.25log2。     

鹅副粘病毒的分离和鉴定

采集疑似鹅副粘病毒病的鹅病料,通过鸡胚接种传代分离到1株病毒(HZ株).该分离病毒经鸡红细胞凝集(HA)试验、凝集抑制(HI)试验、电镜形态学观察等,结果表明与NDV极为相似,属禽Ⅰ型副粘病毒.经动物回归试验,结果说明分离到的副粘病毒为临床疫病病原,毒力较强,能使15日龄的鹅、鸡、番鸭等禽类感染发病,发病率与死亡率均为100%.     

鸡新城疫病毒与传染性支气管炎病毒同胚培养的试验研究

将鸡新城疫病毒（NDV）和鸡传染性支气管炎病毒（IBV）按一定的稀释比例等量混合接种9~10日龄SPF鸡胚,让其在同一鸡胚中增殖（简称同胚培养）。试验结果表明,用5倍稀释的ND-Lasota病毒液与 5000倍稀释的IBH₁₂₀病毒液等体积混合后尿囊腔接种鸡胚,能在同一鸡胚中正常增殖,接种后96 h收毒,用红细胞凝集试验（HA）测得NDV、IBV两种病毒的血凝价分别为11 log2和12 log2,不低于各自病毒单独增殖的HA滴度,病毒的增殖基本趋于平衡。同时也证实了在合适的培养条件下,IBV对NDV的复制不会产生干扰。     

十种单味中药汤剂抗贵州鸭源N6亚型禽流感病毒的筛选

为了筛选出抗N6亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)效果较好的中药,试验用鸡胚培养方法确定桂枝、黄芩、防风、金银花等10种中药汤剂的安全性;用RT-PCR扩增方法检测鸡胚试验扩增病毒是否成功;用鸡胚培养试验和RT-PCR方法确定N6亚型AIV的鸡胚半数感染量(EID_(50));中药汤剂与AIV等量混合后进行鸡胚尿囊腔接种培养试验,培养72 h后收集尿囊液,再对收集的尿囊液进行血凝素(HA)效价测定。结果表明:0.2 mL浓度为250 mg/mL的中药汤剂为安全剂量。贵州鸭源N6亚型AIV EID_(50)为1×10~(-7.66)/0.2 mL。中药汤剂与100EID_(50)等量混合后进行鸡胚尿囊腔接种,黄芩组、防风组、金银花组、荆芥组、鱼腥草组、大青叶组、川芎组、桂枝组、苍术组、地黄组的HA效价分别为2.83,3.58,4.43,4.50,5.00,5.00,5.17,6.20,6.40,6.80 lb。说明在试验选用的十味中药中,单味黄芩汤剂在鸡胚中抗贵州鸭源N6亚型AIV效果最佳,地黄效果最差。     

鹅禽I型副粘病毒病的快速鉴别诊断

用禽流感免疫胶体金试验诊断一发病率高、死亡快、疑似禽流感或禽I型副粘病毒感染的鹅病例，结果为禽流感阴性；取病鹅肝、脾混合病料进行病毒分离，分离鸡胚尿囊液能凝集鸡红细胞（RBC），HA滴度为6log2，并可被康复鹅血清、抗鸡新城疫（NDV）阳性血清所抑制，而不能被禽流感（H5、H9）标准阳性血清抑制。分离病毒人工感染易感雏鹅，引起100％的发病和死亡，并有与自然病例相似的症状和病变；人工感染42日龄SPF鸡出现100％的发病和死亡。根据临床症状和病变情况、免疫胶体金试验以及病毒分离和鉴定，证明该鹅群患禽I型副粘病毒病。说明用禽流感免疫胶体金试验可以实现对禽流感、禽I型副粘病毒病的快速鉴别诊断。     

中药复方口服液体外抗鹅副粘病毒的试验研究

笔者采用鸡胚培养法和血球凝集试验测定了中药复方制剂对鹅副粘病毒的抑制作用。结果表明,中药配方对鸡胚无毒性作用;在药物与病毒同时接种情况下,能抑制鹅副粘病毒在鸡胚中的增殖。     

鹅副粘病毒冻融前后EID50比较

病毒在分离培养过程中,常需要冻融使病毒从组织中充分释放,但反复冻融可能使许多病毒很快灭活。为此,本人利用鹅副粘病毒分离株进行了冻融前后效价对比,以探索其变化规律,现报告如下:1材料和方法1.1种毒鹅副粘病毒YG97株,由扬州大学畜牧兽医学院王永坤教授惠赠。1.2SPF鸡胚本中心SPF鸡场提供。1.3鸡胚半数感染量的测定YG97种毒1押1000稀释,尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚,每胚0.1ml,37℃继续孵化,分别收集正常死亡鸡胚的尿囊液、尿囊膜和胚体作为试验材料。每种试验材料均分成2组,第一组冻融一次,第二组不冻融,然后按常规方法,每种材料10倍…     

一株鹅副粘病毒Ⅰ型野毒株的分离及其致病性测定

用SPF鸡胚从江苏省某一患病鹅群的肝、脾混合病料组织悬液中分离到一株病毒，该毒株能凝集(HA)鸡红细胞(RBC)，HA为2^6，并可被康复鹅血清、抗鸡新城疫(NDV)阳性血清、抗鸽NDV阳性血清所抑制，而不能被禽流感(H5、H9)标准阳性血清抑制。人工感染易感雏鹅，引起100％的发病和死亡，并有与自然病例相似的症状和病变；人工感染42日龄SPF鸡出现100％的发病和死亡。对该分离株作致病性测定，按照国际上规定的NDV毒力型判定标准，测定了该毒株最低致死量致死鸡胚的平均死亡时间(MDT)为39h，1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)为1．6，6周龄雏鸡静脉接种致病指数(ICPI)为2．67。试验结果表明，该分离株为强毒力型禽副粘病毒Ⅰ型(MPV-1)，命名为鹅副粘病毒Ⅰ型(GPMV-1)HC99株。     

鸡新城疫诊断抗原制备方法的研究

将疑似新城疫病料无菌采集后进行RT-PCR鉴定,将阳性病料研磨后接种SPF鸡胚,收获的阳性尿囊液进行血凝试验(HA)及血凝抑制试验(HI)检测病毒效价,病毒效价达到2~7~2~8,病毒凝集效价达到10log2。使用10%蔗糖溶液及18-25k Da透析袋对阳性尿囊液进行浓缩,浓缩至原体积的1/5;10%福尔马林灭活诊断抗原,经过6h后灭活达100%;诊断抗原效价测定:血凝效价为2~(10);血凝抑制效价为10log2。利用制备的鸡新城疫诊断抗原和鸡新城疫标准诊断抗原与鸡新城疫标准检测抗体进行血凝试验(HA)与血凝抑制试验(HI),对比结果:鸡新城疫诊断抗原病毒效价为2~(10),高于鸡新城疫标准诊断抗原的2~9,鸡新城疫诊断抗原凝集效价为10log2,等同于鸡新城疫标准诊断抗原,证明所制备鸡新城疫诊断抗原符合要求,可以应用到生产实践中。     

禽流感检测方法

将病料以尿囊腔途径接种9-11日龄的SPF鸡胚,收集死亡鸡胚尿囊液。将收获的鸡胚尿囊液进行血凝价检测,当血凝滴度达1：16以上时。确定病毒分离为阳性。若初次传代获得的尿囊液未检测到血凝性,需再盲传两代．若仍未检测到血凝性则认为病毒分离阴性。将收获的鸡胚尿囊液进行血凝抑制试验,若被AIV标准阳性血清抑制,