英国薰衣草愈伤再生体系的建立

[目的]建立英国薰衣草愈伤再生体系,为薰衣草规模化快繁和开展转基因工作奠定基础.[方法]以英国薰衣草(Lavandula angusti folia Mill.) 为材料,建立了以叶片为外植体的愈伤再生体系.[结果] 以MS +2,4-D 0.10 mg/L + KT 0.30 mg/L为培养基诱导愈伤组织效果好; 把经过2～3次继代的淡黄色愈伤组织在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.50 mg/L培养基上继续培养,30 d后形成大量的丛生芽.待小芽长至1～2 cm后放入MS+6-BA 1.0 mg/L扩繁培养基中扩繁1～2代. 扩繁后的小芽放入1/2 MS+IAA 1.0 mg/L 培养基上进行生根培养,20 d后生根率达 93.33;.[结论]得到完整再生植株,能大量快繁英国薰衣草.     

翠菊品种库蕾娜叶片和叶柄及茎段的再生研究

为加速翠菊新品种的培育和扩繁,研究利用种子消毒接种获得的无菌苗作为外植体,以MS、1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA依次进行愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽生根。结果表明:茎段为再生体系的最佳外植体,愈伤诱导培养基为MS+2.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.1mg·L-1 NAA,不定芽最佳生根培养基为1/2MS。叶片、叶柄最佳愈伤诱导培养基MS+4.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,愈伤分化培养基只分化不定根。     

黑果枸杞(Lycium ruthenicum)组织培养与再生体系的建立

为了探索野生黑果枸杞组织培养与再生体系建立的适宜环境条件,以采自青海省格尔木地区野生黑果枸杞浆果的种子为供试外植体材料,通过制备一系列不同激素与浓度的培养基组,以诱导黑果枸杞组织分化与再生植株的建立。结果表明:(1)黑果枸杞浆果的种子经由8%的次氯酸钠浸种7 min,无菌水泡洗2次,再用浓度为75%的消毒酒精浸种2 min,无菌水泡洗2~3次后浸种后,接种在M3(6-BA 0.0 mg/L+2,4-D 0.0 mg/L+MS)培养基中出苗率为85%。(2)无菌苗茎和叶剪短至3~5 cm后,经过杀菌消毒处理后接种到Y4(6-BA 0.3 mg/L+IAA 5.0 mg/L+MS)最适愈伤组织培养基上,出愈率为86.7%。(3)愈伤组织丛生芽诱导的最适宜培养基为C3(6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.05 mg/L+MS),不定芽分化率为80%;不定芽剪段后继续在C3上进行壮苗扩繁培养,成活率为92%。(4)壮苗扩繁后组培苗最适宜生根培养基为G3(NAA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+1/2MS),植株生根率为41.6%。上述研究结果可为野生黑果枸杞组织苗的工厂化繁育提供参考依据。     

巨峰葡萄外植体愈伤组织的诱导和植株再生

选取了栽培品种巨峰作为试材,进行了外植体愈伤组织诱导和植株再生的研究．通过葡萄品系巨峰无菌外植体的获得,叶片的愈伤组织诱导、再分化,以器官发生途径实现植株再生．结果表明：外植体消毒灭菌过程中,用1g／L汞处理7min,外植体污染率和茎尖褐变的比率适中,而且茎尖被诱导分化的成活率最高,可达30．0％．最适的分化培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．01mg／L;叶片愈伤组织诱导的培养基选择MS附加5．0mg／L6-BA和0．5mg／LNAA较为适宜;MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．05mg／L最适宜巨峰葡萄愈伤组织再生不定芽;将所得的不定芽继代增值诱导生根,1／2MS＋IBA0．2mg／L为理想的生根培养基,根长适中,根数较多．初步建立了巨峰葡萄栽培品系的再生体系．     

拂子茅组培再生体系的建立

为建立拂子茅植株再生体系,以茎尖为外植体,对拂子茅花叶灭菌方式以及愈伤组织诱导和植株再生培养条件进行分析与筛选。结果表明:用75%乙醇灭菌30 s,再用0.1%升汞灭菌12 min,灭菌效果最佳,去污染率达到90%;在MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L的培养基上进行愈伤组织诱导,诱导率达33.4%;用MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L培养基诱导不定芽再生,诱导率最高、可达76.9%;用MS基本培养基诱导不定芽生根,生根率达到100%。     

甜魔芋芽鞘分化及植株再生条件的研究

以甜魔芋芽鞘为外植体,进行愈伤组织诱导、芽分化及植株再生的研究.结果表明:芽鞘在培养基MS +6-BA0.6 mg/L + NAA 0.1 mg/L+蔗糖 30g/L上愈伤组织诱导率最高,达92.3 %;芽分化最适培养基是MS +6-BA 1.5 mg/L + NAA 0.5 mg/L+蔗糖 30g/L,分化率达93.8 %;切割后的芽在生根培养基1/2MS +NAA 0.1mg/ L+蔗糖 30g/L上,能100%形成完整植株.     

车前不定芽直接诱导及再生体系的建立

[目的]建立车前高效离体植株再生体系,为车前快速扩繁奠定基础。[方法]以车前无菌苗的下胚轴和子叶为外植体,以MS为基本培养基,研究了6-BA、NAA不同配比的培养基对车前下胚轴和子叶不定芽诱导的影响。[结果]MS培养基添加6-BA2 mg/L,5～7d的下胚轴不经过愈伤组织诱导阶段便可直接形成不定芽,不定芽诱导率为80%,每个外植体可产生7～8个不定芽。培养基中添加NAA促进不定根的分化,但影响不定芽的诱导。6-BA与NAA配合使用时,外植体易分化愈伤组织。在添加NAA的MS培养基上,再生苗诱导生根频率为100%。将再生植株移栽于盆土中,可获得100%存活率,且生长良好。[结论]6-BA促进车前下胚轴直接分化不定芽,而NAA则影响不定芽的诱导,在不定芽诱导培养基中应避免添加NAA。     

菘蓝组培再生体系的建立

以菘蓝(Isatis indigotica)无菌苗的叶片和叶柄为外植体,分别接种到添加不同生长调节剂浓度的MS培养基上,研究不同生长调节剂配比对菘蓝愈伤组织诱导与分化的影响,建立菘蓝组培再生体系。结果表明,叶片是菘蓝愈伤组织形成的最佳外植体,菘蓝愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L。以1/2MS培养基添加0.1 mg/L NAA可使再生植株的生根率达到92.3%。     

大同黄花菜幼叶诱导再生组织培养初探

以经过越冬后刚发芽的大同黄花菜幼叶为材料,进行愈伤组织的诱导和分化。结果表明,幼叶用0.1% HgCl₂灭菌8 min外植体污染率、死亡率均为0。幼叶在MS+2 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA培养基观察到最高的出愈率,为41.67%;在MS + 2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA培养基愈伤组织分化率达到65%,平均每块愈伤组织不定芽个数为1.48。生根培养基为不添加植物激素的MS培养基,平均每个芽苗生根数为3.21,组培苗炼苗移栽后成活率达到85.42%。该技术经济实用、简单易操作,可应用于大同黄花菜的快速繁殖。     

福建柏组织培养体系的建立及优化

【目的】探究福建柏不同外植体再生过程中最适激素配比,为建立福建柏组织培养体系提供技术支持。【方法】以福建柏鳞叶和茎段作为外植体,在饱和洗衣粉液浸泡20 min和体积分数75%酒精浸泡30 s条件下,研究体积分数0.1% HgCl₂浸泡不同时间(5,8,10,12,15 min)后的消毒效果;以福建柏鳞叶和茎段为材料,通过单因素试验,研究生长素（NAA和2,4-D）对不同外植体愈伤组织诱导的影响,再通过正交试验研究NAA、2,4-D、6-BA不同配比对外植体愈伤组织诱导的影响;以福建柏愈伤组织为材料,采用正交试验研究NAA、2,4-D、6-BA、KT对愈伤组织继代增殖的影响;以福建柏带芽茎段为材料,研究细胞分裂素6-BA对芽诱导和萌发的影响;以福建柏分化苗为材料,采用正交试验研究6-BA、2,4-D、KT对分化苗继代生长的影响;以福建柏无根苗为材料,研究无根苗扩增繁殖的效果。【结果】（1）福建柏鳞叶最适消毒配方为体积分数75%酒精30 s+体积分数0.1% HgCl₂ 10 min,污染率为16.67%;茎段为体积分数75%酒精30 s+体积分数0.1% HgCl₂ 15 min,污染率为23.33%。（2）鳞叶愈伤组织诱导最适配方为MS培养基+NAA 2.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,诱导率为81.67%;诱导出的愈伤组织白色近透明,长势良好。而茎段为MS培养基+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L,诱导率为78.33%,诱导出的愈伤组织淡绿色,长势良好。（3）愈伤组织最适增殖配方为MS基本培养基+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L,增殖质量为1.984 g,褐化率23.33%。（4）芽诱导萌发最适配方为MS基本培养基+6-BA 2.0 mg/L,平均诱导芽数2.05个,平均萌动数1.70个,分化率100%。（5）分化苗生长和扩繁的最适配方为1/2MS基本培养基+2,4-D 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L,平均生长长度为2.241 cm,无褐化,扩繁成活率为95.50%,扩繁系数为3.18。【结论】福建柏以带芽茎段作为芽增殖再生途径外植体,鳞叶作为愈伤组织再生途径的外植体进行组织培养效果最佳,长势好且稳定。     

4个多用途萱草品种离体快繁体系的建立

[目的]建立4个多用途萱草品种的离体快繁体系.[方法]以4个多用途萱草品种为试材,研究消毒时间对不同外植体的影响,以及不同激素配比的培养基对愈伤组织、增殖培养和生根培养的影响.[结果]消毒时间以10 min最佳,花茎是萱草组织培养的最佳外植体;愈伤组织诱导的最佳培养基为：MS＋ 1.5 mg/L 6-BA ＋0.2 mg/L IBA;在增殖培养中,MS＋ 1.5 mg/L 6-BA＋ 0.2 mg/L IBA为最佳增殖培养基.1/2MS ＋0.3 mg/L IBA和1/2MS＋ 0.3 mg/L NAA培养基为4个品种的最佳生根培养基.[结论]该方法建立了4个多用途萱草品种的离体快繁体系,为萱草的种质资源栽培提供了理论依据.     

大花萱草‘盛夏红酒’组织培养技术研究

[目的]研究大花萱草‘盛夏红酒’的组织培养技术。[方法]以‘盛夏红酒’的健壮花梗为外植体,研究不同激素配比及浓度对外植体愈伤组织诱导和生根的影响。[结果]0.1%升汞消毒10 min为最佳外植体消毒时间,成活率达82.22%;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA;最佳增殖培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA,繁殖系数达4.9;最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA,生根率达92.5%;最适移栽基质为蛭石∶草炭(V/V)=1∶1,苗成活率可达95%。[结论]该研究为‘盛夏红酒’的工厂化育苗提供了理论依据。     

苹果叶片愈伤组织的诱导培养

为获得优质的愈伤组织,以国光和富士苹果的幼嫩叶片为外植体,研究了不同的消毒方法、植物生长调节剂种类及其浓度、光照条件、叶片放置方式等因素对叶片愈伤组织诱导的影响。结果表明:(1)直接进行光培养,愈伤诱导率只有50%～55%,先暗培养14 d再光培养与先暗培养21 d再光培养叶片的愈伤组织诱导率都达100%,但前者产生的愈伤组织结构紧密呈淡黄色,后者出现白化疏松的愈伤细胞。暗培养14d为诱导叶片愈伤组织形成的有利条件。(2)未添加激素的MS基本培养基比添加激素的MS培养基有利于降低叶片的褐变率。(3)采用叶片远轴面接触培养基比近轴面接触培养基的愈伤诱导率高约25%～30%,且诱导愈伤组织形成的时间较早。(4)国光叶片在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA的培养基中,富士叶片在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA的培养基中愈伤组织的诱导效果最佳。     

“高地”截形瓦苇的组织培养与快速繁殖技术研究

利用“高地”截形瓦苇的花葶作材料,对其离体组织培养与快速繁殖技术进行研究,结果表明:花葶愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+6-BA0.5mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.1mg/L,启动速度快,而且愈伤组织质量好;诱导培养基中加入KT和低浓度的NAA比单一采用6-BA效果更好;最适的增殖培养基为MS+6-BA0.2mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.1mg/L,增殖系数达5.5以上,而且质量高,芽分化多;MS+NAA0.1mg/L是较适合的复壮与生根培养基,植株移栽成活率一般在50%左右。利用花葶作外植体,可以在不损伤原母本植株的基础上实现组织培养和快速繁殖的目的,从而实现商品化、规模化生产。     

黑麦草成熟胚离体培养技术研究

以黑麦草成熟胚为外植体材料,对外植体的灭菌、愈伤组织的诱导、继代及植株再生及其过程中部分影响因素进行了研究。结果表明:用75%酒精对外植体处理60 s后,用75%NaClO原溶液(有效氯为7%~10%)灭菌25~30 min,灭菌效果最佳。基本培养基类型、植物生长调节剂对愈伤组织诱导均有影响,采用MS为基本培养基,添加2,4-D浓度为2.0~3.0 mg/L,6-BA浓度为0.1 mg/L时最高诱导率达86.67%。     

野生重瓣大花萱草的选育Ⅱ. 组织培养快速繁殖

为了快速繁殖野生重瓣大花萱草，分别以心叶、带生长点的茎段及成熟叶等为外植体，在MS培养基中分别添加不同质量浓度的2，4－D和6－BA进行愈伤组织培养，结果表明：在MS＋2，4－D 2mg/L 6-BA 1mg/L培养基上，心叶的愈伤组织诱导率最高，为32．7％；带生长点的茎段愈伤组织诱导率为7．3％；成熟叶的愈伤组织诱导率最低，几乎为O；诱导愈伤组织培养基中2，4－D2mg/L 6-BA1mg/L的组合效果最好。再生植株以球状体愈伤组织的分化苗效果最好。     

马槟榔组培快繁技术研究

[目的]探讨不同灭菌剂对外植体的灭菌效果及不同激素组合对马槟榔芽诱导和增殖的影响,建立马槟榔的组培快繁体系.[方法]用马槟榔一年生的幼嫩茎段及幼苗作为外植体,以MS为基本培养基,附加不同的激素组合对外植体进行芽诱导和增殖培养.[结果]相对于10％次氯酸钠,0.1％升汞对马槟榔外植体灭菌效果更理想,灭菌率达到90％,且外植体的生长状况良好.在芽诱导培养中,随着6-BA的增加,马槟榔芽的诱导数呈先增后减的变化趋势;当6-BA为1.0 mg/L时,诱导率最高;当NAA为0.5 mg/L时,诱导率相对较高.在增殖培养中,当6-BA用量大于NAA时,增殖系数较低;当6-BA用量小于NAA时,增殖系数较高,最高可达3.8,且丛芽长势好,芽苗粗壮,叶片颜色正常.[结论]升汞对马槟榔外植体的灭菌效果优于次氯酸钠;芽的最佳诱导培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L,芽增殖最佳培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 1.0 mg/L.     

双色茉莉叶片初代培养物的建立及愈伤组织诱导

以双色茉莉的叶片为外植体,探讨外植体取材时期、消毒时间、不同植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导的影响,结果表明:取材时期对双色茉莉叶片诱导愈伤组织的影响较为显著,4月份和10月份是双色茉莉叶片取材的最佳时期;不同消毒时间对双色茉莉叶片愈伤组织诱导影响不同,其中在0.1%的氯化汞中消毒5~6 min污染率较低,且诱导产生的愈伤组织生长状况最优;培养基中6-苄氨基嘌呤(6-BA)质量浓度/萘乙酸(NAA)质量浓度影响了双色茉莉叶片愈伤组织的诱导,当6-BA质量浓度/NAA质量浓度为1/4~1时有利于愈伤组织的诱导,形成的愈伤组织质量较好;添加激动素(KT)则不利于双色茉莉叶片愈伤组织的诱导。该研究以双色茉莉叶片为外植体,培养获得了愈伤组织,其中愈伤组织诱导的适宜培养基有MS+1.0 mg·L^-16-BA+1.0 mg·L^-1 NAA、MS+1.0 mg·L^-16-BA+2.0 mg·L^-1 NAA、MS+1.0 mg·L^-16-BA+4.0 mg·L^-1 NAA和MS+2.0 mg·L^-16-BA+2.0 mg·L^-1 NAA,这为双色茉莉离体繁殖再生体系的建立奠定了基础。     

黑色马铃薯的组织培养及快繁技术研究

[目的]研究黑色马铃薯的组织培养及快繁技术。[方法]以黑金刚马铃薯的块茎为外植体,于附加不同激素配的MS培养基中诱导愈伤组织、不定芽和不定根,探讨增殖培养和植株再生的条件。[结果]适宜块茎外植体愈伤组织诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L GA,诱导率可达95%以上;适宜丛生芽诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率达92%以上;1/2MS培养基易于诱导生根,部分外植体可产生紫黑色小块茎,生根率达100%。[结论]该研究可为人工规模化生产黑色马铃薯种苗提供技术资料。     

不同浓度激素对蕨菜愈伤组织诱导与增殖的影响

以蕨菜[Pteridium aquilinum(L.)kuhn]幼嫩根状茎为外植体,在愈伤组织诱导和增殖培养基中设置不同的6-BA和IBA浓度,研究6-BA和IBA对蕨菜愈伤组织诱导及增殖的影响。结果表明,1/2MS+0.2mg/L 6-BA+0.4 mg/L IBA为愈伤组织的最佳诱导培养基,诱导率为82%;1/2MS+0.2 mg/L IBA+0.2mg/L 6-BA为愈伤组织的最佳增殖培养基,增殖倍数为8.07。该研究结果为6-BA和IBA在蕨菜愈伤组织培养中的合理使用提供了参考。