两种方法对螺旋藻DNA和RNA含量的测定

以鄂尔多斯高原碱湖的钝顶螺旋藻S1、鄂尔多斯螺旋藻S2、引进的钝顶螺旋藻S3和极大螺旋藻S4为材料,采用两种方法分别测定了其DNA和RNA的含量。结果如下:改良二苯胺法测定的DNA含量为1.03μg/mgDW～1.68μg/mgDW;紫外分光光度法测定的为5.86μg/mgDW～10.03μg/mgDW。两种方法测定的DNA含量排列均为S2>S4>S1>S3。苔黑酚法测定的RNA含量为14.36μg/mgDW～22.56μg/mgDW;紫外分光光度计法测定的为17.67μg/mgDW～39.53μg/mgDW。两种方法测定的RNA含量排列均为S2>S1>S3>S4。无论DNA还是RNA,紫外分光光度法测定的值高。     

二氢卟吩铁对葡萄采后保鲜效果的影响

二氢卟吩铁是一种新型的、源于蚕砂的植物生长调节剂,其安全、绿色无污染,已在粮食作物、经济作物和部分园艺作物上表现出广谱的增强作物抗逆性和增产效果。本研究评估不同质量浓度的二氢卟吩铁溶液对冷藏和新鲜的白罗莎里奥葡萄保鲜效果,以烂果率、果实硬度、可滴定酸含量、可溶性固形物含量为评价指标,以水处理、1-甲基环丙烯(1-MCP)处理分别作为空白对照和阳性对照。在烂果程度方面,冷藏葡萄,0.04μg/ml和0.02μg/ml二氢卟吩铁溶液处理的烂果率低于其他处理,分别为53.5%和48.4%;新鲜葡萄,0.04μg/ml二氢卟吩铁溶液处理的烂果率最低,仅为18%。在硬度方面,冷藏葡萄在0.10μg/ml二氢卟吩铁溶液处理后,硬度值为1.07 N,显著高于其他处理;新鲜葡萄,除0.40μg/ml二氢卟吩铁溶液处理的硬度值较低外(为0.75 N),其他处理与2个对照差异不大。在可滴定酸含量方面,冷藏葡萄,所有处理的可滴定酸含量均高于空白对照,其中0.10μg/ml二氢卟吩铁溶液处理的效果最好,为0.18%;新鲜葡萄,1-MCP处理后的可滴定酸含量高于其他处理,为0.24%。在可溶性固形物含量方面,冷...     

锰-铬天青S-邻菲罗啉-溴化十六烷基三甲铵四元络合物光度法测定茶叶中的锰

[目的]探讨采用四元络合物分光光度法测定茶叶中的微量锰含量的效果与特点。[方法]通过铬天青S（CAS）、1,10-邻菲罗啉（Phen）、溴化十六烷基三甲铵（CTMAB）与锰形成四元络合物,采用分光光度法测定茶叶中锰的含量。[结果]Mn—CAS—phen-CTMAB四元络合物的最大吸收波长为618nm;锰含量在0～1．2μg/ml的范围内呈现良好的线性关系,相关系数为0．9984,摩尔吸光系数为ε618=7．4×10^4L／（mol·cm）,方法的检出限为0．062μg/ml;回收率为98．1％～103．1％,测定结果的相对标准偏差为2．0％～2．6％。[结论]该测定法加大了缓冲溶液的用量,保证了测定体系的pH值,确定最佳显色时间为35min,消除干扰离子影响的最佳掩蔽剂为5％KF2．0ml＋饱和硫脲1．0ml。该方法具有较高的选择性和灵敏度,是一种测定茶叶消化液中微量锰的准确可靠的方法。     

中性红染色法检测人参皂苷及其衍生物对CEF增殖的影响（摘要）

[目的]为体外研制人参皂苷及其衍生物的抗MDV作用机制提供理论依据。[方法]分别吸取各试验药物（人参皂苷、人参皂苷衍生物1～8,阳性对照盐酸吗啉胍）溶液0.5 ml至24孔细胞培养板第1孔中,然后1～10孔每孔加入0,5 ml细胞维持液,再将第1孔内液体混匀,吸取0.5ml至第2孔内,再混匀,吸取0.5ml至第3孔内,如此反复至第10孔。则药物的稀释倍数分别为2~1～2~（10）。其浓度分别是3.000 mg/ml,1.500 mg/ml,0.750 mg/ml,0.375 mg/ml,187.500μg/ml,93.750μg/ml,46.880μg/ml,23.440μg/ml,11.720μg/ml,5.860μg/ml。采用中性红染料吸收法,检测人参皂苷及其衍生物对鸡胚成纤维细胞（CEF）体外培养中增殖活性的影响。试验中必须结合细胞病变观察法,通过在光镜下观察细胞的CPE,确定进行测定的最佳时间,以保证结果的准确性。具体操作如下：测定前2 h各孔加入50μl中性红染液,测定时倒掉孔内液体,用PBS洗细胞3次,每孔加入200μl脱色液,置微量振荡器上振荡10 min,使结晶溶解。然后用酶联免疫检测仪测定OD（570）值,作为细胞增殖的指标。OD值与活细胞的增殖呈正比,OD值越大,表明细胞增殖越旺盛。[结果]人参皂苷在大于750μg/ml浓度下对细胞有毒性,在5.86～46.88μg/ml浓度下对细胞有促增殖作用。毒性作用在72 h下降,而促增殖作用在给药24 h后就表现出来。衍生物1在高浓度的4组均有毒性,OD值显著低于细胞对照组,但衍生物1的促增殖作用不明显。衍生物2在48～72 h分别有5～6组高浓度的OD值显著低于细胞对照组。衍生物3在高于187.5μg/ml的浓度时,OD值低于细胞对照组,并且在72 h时,有2组OD值（11.72和5.86μg/ml）高于细胞对照组,表现出促增殖作用。衍生物4的毒性较高,大部分孔的OD值显著低于正常对照组。衍生物5在浓度高于187.5μg/ml时,OD值低于正常细胞对照组（P〈0.05）,在24和72 h,分别有一组的OD值显著大于细胞对照组。衍生物6的毒性较大。衍生物7的促增殖作用较明显,从浓度93.75μg/ml开始以后的OD值都大于细胞对照组,且在48 h有2组,72 h有3组显著大于细胞对照组。衍生物8在72 h时,低浓度表现出促增殖作用。盐酸吗啉胍没有促增殖作用,3 000μg/ml浓度下与细胞对照组的OD值差异显著。可见,各药物的促增殖作用不完全相同,低毒性的药物促增殖作用更明显。从药物对CEF细胞的不同作用时间点来看,以72 h的OD值和正常对照的差异最大,在24 h和正常对照组差异不显著。[结论]人参皂苷及其衍生物在中、低浓度能够促进CEF细胞的增殖,且药物作用具有时间依赖性。     

中性红染色法检测人参皂苷及其衍生物对CEF增殖的影响

[目的]为体外研制人参皂苷及其衍生物的抗MDV作用机制提供理论依据.[方法]分别吸取各试验药物(人参皂苷、人参皂骨衍生物1～8,阳性对照盐酸吗啉胍)溶液0.5 ml至24孔细胞培养板第1孔中,然后1～10孔每孔加入0.5 ml细胞维持液,再将第1孔内液体混匀,吸取0.5 ml至第2孔内,再混匀,吸取0.5 ml至第3孔内,如此反复至第10孔.则药物的稀释倍数分别为21～210.其浓度分别是3.000 mg/ml,1.500 mg/ml,0.750 mg/ml,0.375 mg/ml,187.500μg/ml,93.750μg/ml,46.880μg/ml,23.440 μg/ml,11.720 μg/ml,5.860 μg/ml.采用中性红染料吸收法,检测人参皂苷及其衍生物对鸡胚成纤维细胞(CEF)体外培养中增殖活性的影响.试验中必须结合细胞病变观察法,通过在光镜下观察细胞的CPE,确定进行测定的最佳时间,以保证结果的准确性.具体操作如下:测定前2 h各孔加入50μl中性红染液,测定时倒掉孔内液体,用PBS洗细胞3次,每孔加入200μl脱色液,置微量振荡器上振荡10 min,使结晶溶解.然后用酶联免疫检测仪测定DD570值,作为细胞增殖的指标.OD值与活细胞的增殖呈正比,OD值越大,表明细胞增殖越旺盛.[结果]人参皂苷在大于750μg/ml浓度下对细胞有毒性,在5.86～46.88 μg/ml浓度下对细胞有促增殖作用.毒性作用在72 h下降,而促增殖作用在给药24 h后就表现出来.衍生物1在高浓度的4组均有毒性,OD值显著低于细胞对照组,但衍生物1的促增殖作用不明显.衍生物2在48～72 h分别有5～6组高浓度的OD值显著低于细胞对照组.衍生物3在高于187.5 μg/ml的浓度时,OD值低于细胞对照组,并且在72 h时,有2组OD值(11.72和5.86 μg/ml)高于细胞对照组,表现出促增殖作用.衍生物4的毒性较高,大部分孔的OD值显著低于正常对照组.衍生物5在浓度高于187.5 μg/ml时,OD值低于正常细胞对照组(P＜0.05),在24和72 h,分别有一组的OD值显著大于细胞对照组.衍生物6的毒性较大.衍生物7的促增殖作用较明显,从浓度93.75 μg/ml开始以后的OD值都大于细胞对照组,且在48 h有2组,72 h有3组显著大于细胞对照组.衍生物8在72 h时,低浓度表现出促增殖作用.盐酸吗啉胍没有促增殖作用,3 000 μg/ml浓度下与细胞对照组的OD值差异显著.可见,各药物的促增殖作用不完全相同,低毒性的药物促增殖作用更明显.从药物对CEF细胞的不同作用时间点来看,以72 h的OD值和正常对照的差异最大,在24 h和正常对照组差异不显著.[结论]人参皂苷及其衍生物在中、低浓度能够促进CEF细胞的增殖,且药物作用具有时间依赖性.     

测定痕量金的高灵敏度显色反应的研究

本文较详细研究了在阿拉伯树胶存在下,Au(Ⅲ)—SCN~-—罗丹明B显色体系水相光度法测定痕量金的新方法。缔合物的最大吸收峰在584nm处,表现摩尔吸光系数为2.11×10~5L·mol~(-1)·cm~(-1),Sandell灵敏度为9.33×10~(-4)μgAu/cm~2。金含量在0—5μg/25ml范围内遵守比尔定律。方法用于岩石矿物中痕量金的测定,结果较为满意。     

锗在马铃薯—土壤体系内的迁移转化规律研究

[目的]研究锗在马铃薯—土壤体系内的迁移和转化规律。[方法]用0、0.01、0.30、0.60、0.80、1.00、1.50μg/ml的GeO2溶液对不同品种马铃薯进行浸种处理,研究锗对马铃薯幼苗生长发育的影响;通过小区模拟试验,探索锗在马铃薯—土壤体系内的迁移和转化规律。[结果]各个品种的马铃薯幼苗对锗毒性的抵抗能力存在差异。0.60μg/ml的锗对东农303号、延薯4号的农艺性状没有影响,但对克新2号幼苗的生长发育具有促进作用;1.00μg/ml的锗对马铃薯幼苗的生长发育具有毒害作用。锗进入土壤后,能够迅速且大量地被马铃薯吸收并运往地上部分,其在马铃薯体内的积累规律为:叶>块茎。[结论]马铃薯对锗是主动吸收过程,锗在马铃薯中的最高允许浓度为0.60μg/ml。     

蛋白质纳米铁共振光散射探针的研究

[目的]探索定量测定核酸和蛋白质等生物大分子的方法。[方法]采用Fe(OH)3纳米粒子作为共振光散射探针,研究纳米铁-BSA反应体系测定生物大分子的最优条件及效果。[结果]纳米铁-BSA体系的最佳反应条件是pH值为7.4,纳米铁溶液的加入量为0.5ml,定量测定时选择吸收波长和发射波长均为477 nm。将配好的溶液放置35 min后再进行测定稳定性较好。在上述优化条件下,用该体系测定BSA的线性范围在0.07~0.60μg/ml,线性方程为IRLS=38.0+1583.3C(μg/ml),相关系数为0.99712,检出限为10.2 ng/ml。控制误差在5%以内,该体系对较高浓度的金属离子以及从1.0~100.0μg/ml浓度范围内的氨基酸有很强的抗干扰能力。[结论]该方法简便、快速、可靠且灵敏度高,可用于实际样品的测定。     

植物源调节剂成分分析

[目的]研究植物源调节剂中可能起作用的成分。[方法]将300 ml某植物源调节剂提取液分成150 ml有机层溶液和150 ml水层溶液,测定植物激素、总黄酮、游离氨基酸、蛋白质含量,分析植物源调节剂的成分。[结果]植物源调节剂有机层溶液中含有GA3286.1μg/ml,3-IAA 121.6μg/ml,ABA 29.5μg/ml,总黄酮251.00μg/ml,游离氨基酸130.3μg/ml,蛋白质1.001×103μg/ml;水层溶液中含有总黄酮19.72μg/ml,蛋白质12.32μg/ml,氨基酸忽略不计。[结论]该研究为新型植物源调节剂的研制和开发奠定了基础。     

紫外分光光度法测定海产品中的硒

建立了一种海产品中硒的分析方法。以4-硝基邻苯二胺为衍生剂,在pH值2.0、20℃下反应50 min,使Se4+与4-硝基邻苯二胺反应生成苤硒脑,反应后用甲苯萃取,用紫外分光光度计在波长349.5 nm下测定吸光值。该方法在硒浓度1~10μg/ml范围内线性关系良好(r2=0.997 8),检测限为0.6μg/ml,RSD为1.33%。用该方法测定海产品中的硒,操作简便,成本低廉,可满足各类海产品中硒的含量测定。