春石斛试管增殖研究初报

以春石斛试管苗为材料,探讨春石斛试管苗增殖的技术和方法。实验结果表明：1/2MS+6-BA1.5mg/L+KT1.5mg/L+NAA0.2㎎/L+80g/L加香蕉泥对不定芽增殖效果最好,增殖率可达340%,且母株长势健壮,叶色浓绿,植株无黄化现象。     

不同培养基成分对铁皮石斛组织培养的影响

以铁皮石斛无菌苗的茎段作为外植体,讨论MS培养基中添加不同浓度的激素对铁皮石斛的诱导、增殖、分化以及生根的影响。结果表明：最适合铁皮石斛原球茎诱导的培养基为MS+ 6-BA 0.5 mg/L+ NAA 1.5 mg/L,原球茎诱导率为95%;最适合原球茎增殖的培养基为MS+ 6-BA 1 mg/L+ NAA 1 mg/L;最适合原球茎分化的培养基为MS+ 6-BA 5 mg/L+ NAA 1 mg/L,其分化率达80%;最适合铁皮石斛根诱导的培养基为MS+IBA 1.5 mg/L+香蕉泥100 g/L,其生根率为100%。     

环草石斛离体培养的研究

环革石斛当年生带腋芽茎段是获得再生植株的较佳材料,消毒处理以4-6 min效果最好,腋芽在MS培养基上萌发生长最好,芽的继代增殖培养基为Ms+6-BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L,芽的增殖系数达到3.8;1/2MS培养基中添加NAA0.5 mg/L有利于生根壮苗,生根率达100%.     

海州常山组培再生体系的建立

为建立高效的海州常山组培再生体系,以海州常山扦插苗的叶片为外植体,对叶片愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、壮苗培养及生根培养过程的主要因素进行探讨。研究结果表明,叶片愈伤组织诱导和分化的最适培养基为1/2MS+0.5 mg/L TDZ+0.05 mg/L NAA,诱导率为86.67%,不定芽增殖系数为2.34,苗高增长量为1.41。壮苗的最适培养基为1/2MS+0.2 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA,不定芽增殖系数为1.84,苗高增长量为1.82;诱导试管苗生根的最适培养基为：1/2MS+1.6 mg/L IBA,生根率为100.00%,平均每株试管苗生根7.86条,平均根长2.22 cm,并且植株生长良好,利于后期栽培。     

大花蕙兰与墨兰种间杂交种子无菌播种繁殖技术研究

建立杂交兰无菌播种和再生体系,获得一定数量的杂交后代群体,为新品种的选育提供基础材料。以大花蕙兰‘肯尼’为母本和墨兰‘太平洋’进行种间远缘杂交,取其成熟种子进行无菌播种,探讨不同基本培养基、植物生长调节剂和添加物对其种子萌发、根状茎增殖与分化及壮苗生根等的影响。结果表明:种子萌发最适配方为:1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+活性炭1.0 g/L;根状茎增殖与分化培养基最适配方为1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,培养70天分化成苗率达88.6%。适宜的壮苗生根培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L+香蕉泥90 g/L+活性炭2.0 g/L。室外闭瓶炼苗30~40天,再开盖炼苗3~5天后,以发酵的树皮加碎石子为基质,60天左右种苗成活率达98.62%。     

药用石斛种子非共生萌发比较与增殖培养基筛选研究

通过对细叶石斛、流苏石斛以及鼓槌石斛种子进行非共生萌发试验,探讨同样的培养条件对3种石斛种子萌发率以及幼苗生长的影响.结果表明,3种石斛萌发率都高达90％以上,流苏石斛的种子萌发率最高,细叶石斛的萌发时间最短,但在幼苗整体的表现方面,鼓槌石斛幼苗的长势最好.增殖培养基为MS+6-BA 10 mg/L+NAA 0.5 mg/L+琼脂6.5 g/L+蔗糖30 g/L,pH值为5.8.     

驱蚊香草快繁体系的建立及工厂化育苗主要影响因素研究

以驱蚊香草的幼嫩叶片作外植体,在含不同激素的不同培养基上进行丛生芽的诱导、芽的继代增殖、芽生根与移栽研究,以快速获得再生植株。结果表明,丛生芽诱导培养基以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L较好,诱导率为96%;增殖培养基以MS（B5）+6-BA0.5mg/L +NAA0.1mg/L较好,增殖系数达8倍以上,且增殖芽生长好;壮苗培养基为MS（B5）+6-BA0.1mg/L+NAA0.2mg/L为好;生根培养基以1/2MS+NAA0.1 mg/L和MS+IBA0.2 mg/L为最佳,生根率达100%,幼苗生长势旺。影响工厂化育苗的主要因素有激素浓度、继代次数和移栽管理     

铁皮石斛与钩状石斛杂交及种子无菌播种快繁研究

以铁皮石斛和钩状石斛为研究对象,通过人工辅助杂交获得杂交种子,诱导种子离体萌发,开展无菌播种技术研究.结果表明,铁皮石斛与钩状石斛杂交容易成功,杂交坐果率可达到80％;适宜的种子萌发培养基为MS+ 6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,培养30 d时的萌发率为89.7％;培养基MS+6-BA 1.5 mg/L+ NAA0.1 mg/L+香蕉100 g/L+ AC 1.0 mg/L对原球茎的增殖最好;培养基MS+ 6-BA 1.5 mg/L+ NAA 0.1mg/L+马铃薯200 g/L+ AC 1.0 g/L对原球茎的分化最好;壮苗生根培养基配方为1/2 MS+ NAA 0.6 mg/L+香蕉100 g/L+AC 1.0 g/L,植株生长健壮,生根率100％,移栽成活率达95％以上.     

秋石斛原球茎途径再生体系的建立

为建立秋石斛原球茎途径的再生体系,本研究以秋石斛‘088’新生侧芽为外植体,探索不同BA和NAA浓度对原球茎诱导、原球茎增殖分化以及生根壮苗的影响。结果表明:秋石斛原球茎诱导的适宜培养基为1/2MS+2.0 mg/L BA+1.0 mg/L NAA,存活外植体的诱导率达到90%以上;原球茎增殖分化的适宜培养基为MS+3.0 mg/L BA+1.0 mg/L NAA,增殖系数达到13.15;生根壮苗的适宜培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA,生根率高,根系发达,植株健壮。本研究建立了秋石斛原球茎途径的再生体系,为种苗繁育和遗传转化提供了技术支持。     

总状绿绒蒿组织培养再生体系的建立

本研究以总状绿绒蒿(Meconopsis racemosa)的种子、无菌苗的根及生长点为材料,以2,4-D、NAA、6-BA设置不同的激素配比,以建立其组织培养快繁体系。结果显示,用0.1%升汞溶液为消毒剂,5.5 min为最佳的消毒时间,此时的种子发芽率为56.7%;愈伤组织诱导培养：以种子为外植体诱导愈伤,MS+0.6 mg/L 2,4-D为最佳的培养基。以无菌苗的根为外植体诱导愈伤,进行暗培养,MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA为最佳的诱导培养基。以无菌苗的生长点为外植体诱导愈伤,并进行光培养,MS+2.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA为最佳的诱导培养基;愈伤增殖培养：由种子诱导愈伤的最佳增殖培养基为MS+0.6 mg/L 2,4-D。MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA是无菌苗的根诱导愈伤的最佳增殖培养基。MS和MS+2.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA为生长点诱导愈伤的最佳增殖培养基;生根培养：由种子、生长点诱导并增殖愈伤的最佳生根培养基为MS。本研究为总状绿绒蒿的快速繁殖和分子育种提供了基...     

粗肋草‘中国红’植株再生体系的建立

为建立相对稳定、高效的‘中国红’粗肋草植株再生体系,本研究以‘中国红’粗肋草的嫩茎腋芽原基、嫩叶为外植体,对诱导愈伤组织的初代培养基、芽增殖分化培养基的激素种类和配比以及生根培养方法等进行筛选优化。结果表明:适宜建立‘中国红’粗肋草体细胞胚发生途径再生体系的外植体为腋芽原基;最佳诱导愈伤组织的初代培养基为1/2MS+2,4-D 0.2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,愈伤组织诱导率分别为:腋芽原基83.3%,嫩叶为23.9%;适合腋芽原基愈伤组织分化培养基的激素配比为6-BA/IAA组合,愈伤组织分化率为65.7%~67.6%、主要以体细胞胚性途径形成再成芽、芽增殖系数5.3~5.8;适宜的生根接种、培养方式为体细胞胚植株断根促根培养,生根苗生根率99.2%。本研究已初步建立和优化以腋芽原基为外植体的稳定‘中国红’粗肋草体细胞胚发生途径的植株再生体系,可进一步改良优化,为今后‘中国红’粗肋草工厂化及规模化生产提供理论和技术指导。     

药用植物裸花紫珠的组织培养与快速繁殖研究

以种子为外植体,MS为基本培养基,通过比较不同植物生长调节剂种类和浓度配比、培养条件以及生根苗的移栽基质,建立裸花紫珠组织培养快速繁殖体系。结果表明：外植体表面消毒以75%酒精预处理10 s,再用0.1% HgCl2浸泡10 min,效果最好;种子在MS基本培养基上萌发;丛生芽继代增殖的最适温度为28℃,最适光照强度为1500 lx;培养基MS+ 6-BA 2.00 mg/L+ NAA 0.05 mg/L适宜继代增殖,30天的增殖系数为10.87;培养基MS+ NAA 0.50~0.75 mg/L适宜诱导生根,生根率100%;生根苗移栽于河沙、珍珠岩和表土(1:1:1)的混合基质中,成活率96%,高生长量最大。运用该组培快繁技术,可以实现裸花紫珠的工厂化育苗。     

Study on Hybridation and Aseptic Seeding as Well as Rapid Propogation of Demdrobium officinale and Dendrobium aduncum

[Objective]To study the system of aseptic seeding and rapid propogationtin of hybrid seeds of Demdrobium officinale and Dendrobium aduncum [Methods] Demdrobium officinale and Dendrobium aduncum were the objects of research,and their hybrid seeds were gained by artificially auxiliary hybridation. The seeds were induced to germinate in vitro,and study on the technology of aseptic seeding was finished. [Results]Successful hybridation of Demdrobium officinale and Dendrobium aduncum could be easily realized,and hybrid fruit-bearing rate could reach 80%; the suitable culture medium for seeds was: MS +1. 0 mg/L 6-BA +0. 1 mg/L NAA,the germination rate after 30 d of cultivation was 89. 7%; appropriate culture medium for proliferation of protocorm was: MS + 1. 5 mg /L 6-BA + 0. 1 mg /L NAA + 100 g /L banana + 1. 0 mg /L AC; appropriate culture medium for differentiation of protocorm was: MS + 1. 5 mg /L 6-BA + 0. 1 mg /L NAA + 200 g /L potato + 1. 0 g /L AC; the formula of culture medium for strenghening the seedlinge and nurturing the rooting was: 1 /2 MS + 0. 6 mg /L NAA +100 g /L banana + 1. 0 g /L AC,the plant grew robustly,the rooting percentage was 100%,and the survival rate of transplanting was higher than 95%. [Conclusions]This method ascertains the optimum culture media formula in the whole regeneration process and all phases from seed germination to acclimatization and transplantation,so fine solidation is laid for its germplasm innovation and industrialized seedling production.     

两种野生绣球花组培及快繁技术研究

以蜡莲绣球和莼兰绣球种子为外植体,探究不同培养基类型、不同激素浓度对其增殖及生根的影响。结果表明:蜡莲绣球最佳增殖培养基为MS+0.8 mg·L^-16-BA+0.05 mg·L^-1 NAA,增殖系数高达9,较适宜的生根培养基为1/2 MS+0.1 mg·L^-1 IBA+NAA 0.1 mg·L^-1或未加激素的1/2 MS,生根率为100%;莼兰绣球最佳增殖培养基为MS+0.8 mg·L^-16-BA+0.2 mg·L^-1 IBA,增殖系数高达9.67,较适宜的生根培养基为1/2 MS+0.2 mg·L^-1 IBA+NAA 0.5 mg·L^-1或未加激素的1/2 MS,生根率可达100%。     

金莲花组织培养和快繁体系建立的研究

近年来,野生金莲花资源因被大量采摘而受到严重破坏,对野生金莲花进行引种驯化,并将之运用于园林绿化具有重要意义。本研究以金莲花种子为初始材料建立金莲花离体培养体系,研究不同灭菌时间对金莲花成苗的影响,同时通过比较不同培养基对金莲花增殖和生长的影响,筛选获得适宜金莲花增殖和生根培养的最佳培养基。研究结果如下：用0.1% HgCl2对金莲花种子灭菌20 min可有效抑菌;适宜金莲花增殖培养的培养基是1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,适宜金莲花生根、壮苗培养的培养基是1/2MS或1/2MS+0.05 mg/L NAA。试验结果将为金莲花快繁和规模化生产提供依据。     

花叶凤尾竹(Bambusa glaucescens f.albo)组培快繁体系的建立

花叶凤尾竹(Bambusa glaucescens f.albo-variegata)具有很高的观赏价值,但现存量少,需通过组织培养技术实现快速繁殖的目标。本研究以花叶凤尾竹当年生幼嫩带节茎段为外植体进行组织培养,探索花叶凤尾竹组织培养外植体采集时间、消毒条件、增殖和生根的最佳培养基配方。结果表明,以6月下旬采集保留叶鞘的花叶凤尾竹幼嫩带节茎段为外植体,可得到最高的存活率;最佳消毒方式为有效氯浓度1%的NaClO溶液,消毒12 min;最佳丛芽诱导和增殖的培养基为MS+0.08 mg/L TDZ+1 mg/L BA+0.2 mg/L KT;生根培养基为1/2MS+2.5 mg/L NAA。综上建立的花叶凤尾竹快繁体系,无菌苗获得率可达58.88%,增殖系数可达3.65,生根率86.67%,平均生根数3以上。本研究为快速繁育花叶凤尾竹种苗提供技术支持。     

新疆杨组培再生体系建立

以新疆杨叶片为外植体,研究新疆杨组织培养再生体系建立的主要影响因素。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D;愈伤组织分化的最佳培养基组合为MS+0.1 mg/L TDZ+0.3 mg/L IBA,不定芽增殖的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA,诱导生根的最佳培养基组合为1/2MS+0.5 mg/L IBA,新疆杨组培苗在生根培养基上形成的根条数多,苗体健壮,生根率达到100%。本研究成功建立了新疆杨组织培养再生体系,为其转基因研究工作奠定了基础。     

高抗寒毛白杨杂种离体培养及玻璃化苗研究

[目的]为了能够将毛白杨优良资源应用到北纬41°以北地区,为我国北方生态防护林建设提供优良苗木,特进行高抗寒性毛白杨杂种—‘蒙树1号杨’组织培养技术研究。[方法]利用‘蒙树1号杨’切枝水培嫩芽为外植体,开展了最佳消毒剂和消毒时间筛选,以及无菌苗茎段增殖、叶片分化、生根培养和玻璃化苗恢复培养研究。[结果]嫩芽在0.10%升汞中灭菌5 min效果最佳,外植体污染率为15.60%、萌芽率达77.70%；最佳茎段增殖培养基为MS + 0.20 mg/L 6-BA + 0.05 mg/L NAA,平均分化出芽4.21个；不定根最佳诱导培养基为1/2 MS + 0.50 mg/L IBA + 0.20 mg/L NAA,生根率达93.90%；玻璃化苗在MS + 0.2 mg/L 6-BA + 0.05 mg/L NAA + 30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂培养基中恢复效果最好,恢复率达82.38%。[结论]‘蒙树1号杨’离体快繁体系的建立,为毛白杨体细胞多倍体育种及我国西北地区园林绿化和生态建设夯实了基础。     

药用植物白及组培苗瓶内复壮研究

对白及(Bletilla striata)试管苗进行复壮研究,以期解决其羸弱纤细、不利于生根培养及生根后成活率低等问题,同时优化复壮培养条件。在课题组已有的白及增殖及生根培养基配方中,分别添加不同质量浓度植物生长延缓剂多效唑(PP₃₃₃)和矮壮素(CCC)并改变培养基碳源浓度,以不同继代试管苗为材料,通过单因素和L₉(3⁴)正交实验研究不同材料和不同植物生长延缓剂种类及其质量浓度对试管苗复壮、繁殖生长、生根培养及驯化移栽的影响。实验表明,4代苗在MS+活性炭1.0 g/L+香蕉泥50 g/L+ 6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.01 mg/L+ PP₃₃₃ 0.5 mg/L+CCC 0.1 mg/L+蔗糖40 g/L中获得最佳的复壮效果,培养70天后,试管苗基茎直径平均达(0.26±0.06) cm,繁殖系数2.13,假鳞茎发生率100%;复壮后的试管苗在1/2MS+活性炭1.0 g/L+香蕉泥80 g/L+ 6-BA 0.1 mg/L+ NAA 1.0 mg/L+蔗糖15 g/L中培养60天后,可获得具假鳞茎、根粗苗壮的再生植株,生根率100%;再生苗移栽成活率亦达100%。本研究完善了白及体外快繁及复壮条件,建立了高效的植株再生体系。     

鞑靼忍冬和疏花蔷薇组培快繁体系的建立研究

以西天山野果林中的重要伴生种鞑靼忍冬和疏花蔷薇带芽茎段为外植体,研究不同培养基及激素配比对芽分化、增殖及再生的影响。结果表明:腋芽诱导的最适宜培养基为MS培养基,鞑靼忍冬和疏花蔷薇诱导率分别可达99.12%和100%;适合鞑靼忍冬腋芽增殖的培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+GA 31.0 mg·L-1,增殖系数可达5.37;而疏花蔷薇腋芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+GA 31.0 mg·L-1,增殖系数高达3.0;适合鞑靼忍冬组培苗生根的最佳培养基为1/2 MS+NAA 1.5 mg·L-1+6-BA 0.05 mg·L-1+活性炭1.0 g·L-1,生根率为100%;而疏花蔷薇组培苗生根最佳的培养基为1/2 MS+NAA 1.5 mg·L-1+6-BA 0.1 mg·L-1+活性炭1.0 g·L-1,生根率为66.67%。移栽到单独的珍珠岩基质中的鞑靼忍冬和疏花蔷薇组培苗成活率最高,成活率分别达90.00%和75.00%。