禽霍乱、新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究Ⅰ报——疫苗的制备、免疫效果及安全性试验

采用新城疫病毒(NDV)Lasota株感染鸡胚尿液毒和多杀性巴氏杆菌(禽A型)接种固体培养基收获菌液,经灭活后制备成油乳剂灭活疫苗,应用该疫苗分别免疫18日龄雏鸡和60日龄以上的青年鸡;18日龄雏鸡免疫量为每只0.25mL,免疫后2周可测到ND抗体HI≥1∶16,3周攻毒ND保护率为100%;90～120日龄鸡免疫量为每只1mL,免疫3周攻毒,禽霍乱保护率为87.5%～100%.安全性试验表明,18日龄雏鸡注射0.5mL、120日龄鸡注射2mL疫苗,观察14天,无不良反应.     

禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究Ⅱ报——疫苗的免疫持续期及保存期试验

采用新城疫病毒(NDV)Lasota株感染鸡胚尿囊液毒和多杀性巴氏杆菌(禽A型)接种固体培养基收获茵液,经灭活后制备成5批油乳剂灭活苗(批号2001-1～2001-5),用于免疫2月龄以上的青年鸡,试验分一次免疫组和二次免疫组,分别在免疫后1个月、3个月、6个月、9个月进行ND和FC强毒攻击保护试验,结果表明,相同剂量分两次免疫,近期效果差异不明显.一次免疫组,6个月攻毒ND的保护为100%、FC保护为80%;8个月攻毒ND的保护为95%、FC保护为52.5%.二次免疫组.6个月攻毒ND的保护为100%,HI抗体1:64以上;FC攻毒保护87.5%;8个月攻毒ND的保护为100%,FC保护为77.5%.疫苗保存期试验证明,4～8℃冰箱保存可达18个月,10～20℃保存的有效期为4个月.     

禽霍乱·新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究(Ⅲ报)——疫苗对鸭和鹅的安全性及免疫效力试验

[目的]为禽霍乱、新城疫二联油乳剂灭活疫苗免疫鸭和鹅等水禽提供理论依据。[方法]将禽A型多杀性巴氏杆菌接种固体培养基收获的菌液与鸡新城疫病毒弱毒株La Sota接种易感鸡胚收获的感染鸡胚液混合,用甲醛溶液灭活后制备成5批二联油乳剂灭活苗,用于鸭和鹅的安全性及免疫效力试验。[结果]5批二联苗对鸭和鹅的安全性试验表明,免疫鸭和鹅均未出现任何不良反应;免疫效力试验表明,免疫后3周,鸭和鹅的新城疫血凝抑制抗体效价均≥4 log2,新城疫攻毒保护率均为100%,禽霍乱攻毒保护率为66.7%~83.3%。[结论]该二联苗用于免疫鸭和鹅安全可靠,免疫效果良好。     

禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究 (Ⅳ报)——疫苗的田间试验

[目的]评价禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗的临床应用效果,为联合防制禽霍乱和新城疫提供条件。[方法]将禽A型多杀性巴氏杆菌1502强毒株与鸡新城疫病毒La Sota弱毒株混合,制备成5批合格的二联油乳剂灭活苗,用于鸡、鸭和鹅的田间安全性和免疫保护试验。[结果]田间安全性试验表明,免疫鸡、鸭和鹅均未出现不良反应;鸡的田间免疫效力试验表明,7～14日龄雏鸡和60～90日龄青年鸡免疫3周后新城疫血凝抑制（ND-HI）抗体效价均比对照组高2～3 log2,可持续4个月以上,禽多杀性巴氏杆菌攻毒保护率均达到75.0%以上,免疫效力可持续6个月;鸭和鹅的田间免疫效力试验表明,接种3周后免疫组ND-HI抗体效价均≥4.2 log2,对照组均≤2 log2;鸭、鹅的禽多杀性巴氏杆菌攻毒保护率分别在75.0%和62.5%以上。[结论]该二联苗免疫禽类安全可靠,具有良好的免疫效果。     

禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究（Ⅳ报）——疫苗的田间试验

1材料与方法 1．1二联营的制备与质量检验 1．1．1毒株来源与二联苗的制备。禽A型为杀性巴氏杆菌（APM）效力检验用强毒为C48．1株,鸡新城疫病毒（NDV）效力检验用强毒为北京株、APM1502株和NDVLaSota株,均购自中国兽药监察所。将APM强毒1502株培养菌液与NDV弱毒LaSota株感染鸡胚尿囊液混合,经甲醛溶液灭活后,按马闻天等的方法制备5批二联油乳剂灭活疫苗（批号05-1—05-5）。     

禽霍乱油乳剂灭活疫苗的制作机理及应用效果

禽霍乱油乳剂灭活疫苗 ,采自地方流行菌株 ,选用独特的方法获得多杀性巴氏杆菌的荚膜抗原 (此方法已获得国家专利 ) ,以矿物油为载体混合制成的。并在白湖地区进行中试和推广应用 ,取得明显成效     

禽霍乱蜂胶与氢氧化铝胶灭活疫苗免疫效果比较试验

利用蜂胶作为佐剂制成禽霍乱蜂胶佐剂灭活疫苗,将其与同批菌液制成的禽霍乱氢氧化铝胶灭活疫苗进行免疫效果比较试验,结果显示,用蜂胶佐剂制成的禽霍乱灭活疫苗免疫效果优于禽霍乱氢氧化铝胶灭活疫苗。     

新城疫弱毒联苗对雏鸡新城疫免疫效果的观察

本试验雏鸡在相同饲养管理条件下,14日龄时分别用N79单苗、N79-H120联苗、N79-IBD(三价)联苗接种对照组(ND)、ND+IB组、ND+IBD组试验雏鸡,接种后的第7天、14天和21天,通过HA和HI实验,随机抽样测定其血中抗新城疫抗体的含量及其消长,发现N79-H120联苗、N79-IBD(三价)联苗产生的抗鸡新城疫的抗体效价明显低于N79单苗,差异极显著(P＜0.01).     

新城疫疫苗及免疫程序对蛋鸡免疫效果的研究

通过对2组新城疫疫苗接种及免疫程序的研究表明:泰州兴化地区蛋雏鸡在7日龄通过滴鼻点眼方法用鸡新城疫(ND)弱毒Ⅳ系苗进行首次免疫,在36日龄时通过肌肉注射ND灭活苗和肌肉注射ND弱毒Ⅳ系苗方法进行第2次免疫,在113日龄通过肌肉注射ND弱毒Ⅰ系苗方法进行第3次免疫,可以取得较好的免疫效果.     

禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗免疫效果及免疫机理的研究

 用禽脑脊髓炎病毒 (AEV)不同毒株分别接种易感鸡胚所制作的油乳剂灭活疫苗 ,分别给 4组正常 1周龄雏鸡接种免疫 ,另设 1组SPF雏鸡作空白对照。对免疫前后及攻毒后的雏鸡 ,以琼脂扩散试验 ,淋巴因子的提取 ,血清IgG的分离、纯化及检测 ,鸡胚敏感试验 ,病理学观察为检验手段 ,以期对本油乳剂灭活疫苗的免疫效果作出综合评定 ,同时根据各试验的结果对免疫机理作初步的探讨。结果表明 ,各组试验用疫苗均安全有效 ,雏鸡免疫后体内抗体持续保持高水平 ,雏鸡免疫期至少达 37周 ,子代鸡胚敏感试验保护率≥ 92 .3%以上。免疫机理方面 :以IgG为主的体液免疫在抵抗感染过程中起关键作用 ;细胞免疫也同时存在 ,并与日龄的增长存在一定的相关性 ,而与疫苗接种不存在相关性     

新城疫和传染性法氏囊病二联疫苗的免疫效力研究

以LaSota系新城疫(ND)病毒制成ND弱毒疫苗,以含传染性法氏囊病(IBD)病毒VP2基因重组质粒pET28a/VP2的大肠杆菌BL21制成IBD重组活载体疫苗,将ND弱毒疫苗和IBD重组活载体疫苗组建ND-IBD二联疫苗.将试验鸡分成8个组,分别肌肉注射接种ND弱毒疫苗、IBD重组活栽体疫苗和ND-IBD二联疫苗.最后一次接种后第10天,对所有试验鸡进行采血,分离血清,以病毒血凝抑制试验(HI)及琼脂免疫扩散试验检测NDV抗体和IBDV抗体.对NDV HI抗体阳性率进行x2检验及对NDV HI效价进行方差分析,结果对照组与其他4组之间差异均显著(P＜0.05),而试验组(B、C、D、E)4组之间差异均不显著(P＞0.05).对IBDV抗体阳性率进行x2检验及对IBDV沉淀抗体滴度进行方差分析,结果在A、B、F 3组之间差异不显著(P＞0.05),在C、D、G、H 4组之间差异不显著(P＞0.05);而A、B、F 3组与C、D、G、H 4组之间差异显著(P＜0.05).试验表明,在诱导雏鸡体液免疫应答方面,ND-IBD二联疫苗与ND弱毒疫苗和IBD重组活载体疫苗具有同样的效力.     

禽流感新城疫重组二联活疫苗在鸡体内的免疫应答初探

养鸡场注射禽流感新城疫重组二联活疫苗15d后,随机抽取64只鸡血样进行禽流感和新城疫免疫抗体水平监测试验,结果表明禽流感免疫抗体水平合格率为0,新城疫免疫抗体水平合格率为93.75%.     

禽霍乱·新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究(Ⅲ)——疫苗对鸭和鹅的安全性及免疫效力试验(英文)

[Objective] The aim of this study is to provide theoretical basis for immunizing waterfowls(duck and goose)with the inactivated oil emulsion binary vaccine against Newcastle Disease(ND)and Fowl Cholera(FC).[Method]Bacterial liquid from solid culture media inoculated avian Pasteurella multocida(APM)type A and allantoic fluid from embryonic eggs infected with Newcastle Disease Virus(NDV)attenuated strain La Sota were mixed and inactivated by formalin to prepare 5 batches of inactivated oil emulsion binary vaccine,which were then used for the safety and immune efficacy test on duck and goose.[Result]Immunized ducks and geese didn’t performed any adverse reactions in the safety test of the 5 batches of vaccine;the immune efficacy test showed that ND-HI antibody titers of ducks and geese were no less than 4 log2 three weeks after inoculation,and the protection rates against NDV and APM were 100% and 66.7%-83.3%,respectively.[Conclusion]The binary vaccine against ND and FC is safe and reliable for duck and goose,and can provide them with sufficient immunity protection against ND and FC.     

ND—EDS-76异源二联油乳剂疫苗与普通二联疫苗田间对比试验研究

鸭源ＮＤＶ—Ｄ１０毒株与ＥＤＳ－７６ＧＣ２毒株混合接种同一鸭胚,培养 ９６ ｈ后收集尿囊液,制成ＮＤ—ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗。然后与普通二联油乳剂灭活疫苗接种同一鸡群,在 １０ ｄ、２０ ｄ、３０ ｄ、１８０ ｄ、３６０ ｄ分别检测抗体滴度并进行比较,结果差异不显著。在免疫后３０ ｄ、１８０ ｄ、３６０ ｄ,随机取鸡各 ６０只为一组,用 ＮＤＶ—Ｆ４８Ｅ９和 ＥＤＳ－７６ＧＣ２强毒株进行攻毒保护试验并进行比较,结果两种疫苗在 ３０ ｄ、１８０ ｄ免疫保护率均为 １００％,３６０ ｄ对 ＮＤ和 ＥＤＳ－７６的免疫保护率分别为９２ ％和８７ ％以上,差异不显著。对开产前１２０日龄左右蛋鸡群免疫接种ＮＤ—ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗,可有效地保护整个产蛋期对ＮＤ和ＥＤＳ－７６自然强毒的攻击,是一种理想的生物防疫制剂。     

鸡减蛋综合征,新城疫二联灭活油的免疫比较试验及临床应用

本课题组研制的ＥＤＳ／ＮＤ二联灭活苗乳剂苗，免疫接种后产生的ＥＤＳ和ＮＤ的抗体效价分别达到国外进口的ＥＤＳ灭活苗和ＮＤ灭活苗的水平。     

禽霍乱强化苗研究——Ⅰ.强化苗研制与免疫保护性试验

本试验通过筛选抗原性较好的多杀性巴氏杆菌,经禽胚培养增殖细菌,灭活后加入免疫增强剂左旋咪唑和亚硒酸钠维生素E,制成油乳剂强化苗。试验表明,每头份含抗原量100亿,左旋咪唑和亚硒酸钠维生素E合用组免疫效果最佳。注射本苗后,鸡群第4天产生免疫应答,第7天即可产生坚强的免疫力,试管凝集抗体效价达到1:86,攻毒保护率达83.3％,第14天即可达100％,免疫期6个月。免疫期内攻毒保护率为97.6％,当试管凝集抗体效价为1:40时,80％的试验鸡能抵御C_(48-1)的攻击。临床上免疫接种4个鸡场12批商品蛋鸡共14.5万羽,有效地控制了该病的流行。     

鸡ND—EDS—76二联油乳剂灭活苗的研究及免疫效力、保存期观察

应用NDLasotaE株和EDS－76H912株，接种鸡胚和鸭胚，当血凝价上升到大于等于1：1280和1：10000时收获，收适当的灭活剂灭活后，按一定比较加吐温85、可苯85，硬脂酸铝和白油，制成ND－EDS－76二联灭活油苗，经免疫观察证明，该苗有良好的免疫力，两种病毒之间无干扰作用，被接种鸡无任何不良反应。该苗置4℃冰箱可保存12个月，15－30℃室温可保存6个月不破乳，不分层，颜色无改变，用该苗接种5000只父母代种鸡的追踪观察，接种后15天两种抗体呈明显的动态上升，25天可达到比较稳定的高峰水平，接种后10个月，ND和EDS－76抗体效价仍分别保持在6．5Log2和5．6tog2水平上，，对18－20周龄产蛋母鸡，肌肉或皮下注射0．5ml/只，应用30万忌份的联苗证明，疫苗安全，效力确实，抗体维持时间长，保存期长，使用方便，效益显著。     

禽霍乱强化苗研究——Ⅲ.疫苗免疫后淋巴细胞活性变化

本试验应用MTT检测法,对禽霍乱强化苗免疫鸡的外周血淋巴细胞活性进行检测。强化苗免疫后1周内试验鸡淋巴细胞增殖强度,Con A组和LPS组与对照组比较差异极显著（P<0.01）,第 3天达高峰,增殖强度分别为 31.8％和 44. 7％。第 14天,ConA组增殖强度恢复正常,而 LPS组仍处于一定水平,与强化苗免疫后第4天试验鸡产生应答,第10天抗体效价几乎达高峰,并维持较长时间相一致,攻毒保护率随着抗体效价升高而提高。说明禽霍乱的免疫性质是以B细胞参与的体液免疫为主,T细胞起辅助作用。     

EDS76—ND二联油乳剂苗的研究

本试验以减蛋综合症(EDS76)病毒株,新城疫(ND)Laosota 株为制苗毒株,分别经鸭胚和鸡胚增殖后,甲醛灭活.灭活毒液按适当比例混合加入油佐剂中,乳化制成“二联苗”.对所研制的二联苗的安全性、保存期、免疫效力等进行测试.结果表明:1.疫苗本身安全,对鸡无副作用;乳化度、稳定性和通针性良好;易于保存,常温避光6个月以上,4℃左右12个月,免疫效力无明显下降(P>0.05).2.疫苗免疫效果良好.ND于注苗后7天即产生免疫(HI抗体效价GMT log2为 7.5);EDS76免疫产生较慢,15天可产生较强免疫(HI价为7.3log2);两种HI抗体均于免疫后21天达到高峰值(ND为10.7long2.EDS76为10.2log2);免疫期可持续一年左右,即免疫活360天时,ND、EDS76两种HI抗体分别为7.1log2和6.2log2.区域试验免疫蛋鸡100多万只,临床调查可抽检证明该苗质量稳定,效果良好.