苜蓿花药培养及倍性鉴定

在不同低温预处理时间,不同培养基和不同激素组合下进行了苜蓿花药培养实验。结果表明,花药4℃低温预处理24h、48h较72h诱导效果好。NB培养基对愈伤组织的诱导效果比战培养基好。最佳愈伤组织诱导培养基组合为NB＋2,4-D0．5mg／L＋NAA0．3mg／L＋6-BA0．5mg／L＋KT3．0mg／L。通过不同蔗糖浓度对愈伤组织的诱导效果比较,表明低浓度的蔗糖有利于降低愈伤组织的褐化率,高浓度的蔗糖有利于单倍体愈伤组织的诱导。分化培养的最佳组合为MS＋NAA0．2mg／L＋6-BA3．0mg／L。诱导生根最好的培养基为1／2MS培养基,最适合蔗糖浓度为10g／L。     

紫花苜蓿组织培养再生体系的建立

以紫花苜蓿无菌苗的下胚轴、子叶、叶片和叶柄为外植体,研究了不同培养基、不同激素种类和配比对胚性愈伤组织诱导的影响以及不同分化培养基对胚状体分化的影响。结果表明：下胚轴外植体胚性愈伤组织诱导率最高;最佳胚性愈伤组织诱导培养基为改良SH＋2．0mg／L2,4-D＋0．5mg／L6-BA;最佳胚状体诱导培养基为MSO＋2．0mg／L6-BA＋0．5mg／LNAA;成苗培养基为1／2MS＋1％蔗糖＋0．7％琼脂。     

多枝赖草的组织培养

以多枝赖草种子为材料,在MS 3mg/L2,4-D 0.5mg/L激动素 3%蔗糖 0.5%琼脂培养基上暗培养,产生愈伤组织。愈伤组织经多次继代培养后仍可保持分化潜力。在1/2MS 0.5mg/L6-BA 0.5mg/LIBA 3%蔗糖 0.5%琼脂培养基上光照培养后分化出丛生状绿芽,并大量生根,形成再生植株。     

马蹄金叶片离体培养及植株再生的研究

在不同植物生长调节剂组合、不同培养基条件下，探讨了马蹄金叶片离体培养的方法和影响因素。结果表明，含不同植物生长调节剂组合的培养基对愈伤组织的诱导频率无显著影响，出愈率均达90％-100％；以MS或B5培养基作诱导愈伤组织的基本培养基效果较好；将叶片接种到MS 2mg／L6—BA的诱导培养基中诱导愈伤组织，再用B5 1．5mg／L6-BA 0．5mg／L ZT 0．2mg／Lα—NAA作分化培养基出苗效果最佳，愈伤组织分化频率高达20％。     

短芒大麦草组织培养体系的建立

以短芒大麦草幼穗为外植体,建立了比较稳定高效的组织培养体系.研究结果表明,在含有3.0～4.0mg/L 2,4-D的MS+ 300mg/L CH+3％蔗糖+0.7％琼脂(pH5.8)培养基上,短芒大麦草幼穗切段愈伤组织诱导率可达到80.0％以上;经MS+ 300mg/LCH+0.5mg/L 2,4-D +3％蔗糖+0.7％琼脂(pH5.8)培养基上继代培养后,其胚性愈伤组织在MS+ 300mg/LCH+ 0.5mg/L 2,4-D +0.1 mg/L 6-BA +3％蔗糖+0.7％琼脂(pH5.8)分化培养基上的分化率为62.9％;短芒大麦草组培苗在1/2MS+ NAA0.1mg/L+蔗糖1％+琼脂0.7％ (pH5.8)培养基上生根后,移栽成活率可达到98.0％以上.     

披碱草×野大麦杂种F_1幼穗培养再生体系的建立

以披碱草×野大麦杂种F_1幼穗为外植体,诱导出胚性愈伤组织,建立了植株再生体系,对影响愈伤组织诱导、分化、生根的基本培养基、激素种类及质量浓度等进行筛选。结果表明:愈伤组织诱导以MS为基本培养基+3mg/L 2,4-D较好;外植体在MS+3mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖+7g/L琼脂的诱导培养基上经过20d培养,小穗愈伤组织诱导率达28.3%;愈伤组织的分化培养基为MS+1mg/L 6-BA+1mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂,愈伤组织分化率达78%;生根培养基以1/2MS+0.5mg/L IBA+0.5mg/L NAA+蔗糖+7g/L琼脂为最佳,生根率可达86.7%,移栽后成活率可达100%。     

黄花苜蓿愈伤组织诱导及分化培养条件的研究

以黄花苜蓿子叶和下胚轴为外植体,研究不同激素配比对黄花苜蓿愈伤组织诱导及分化的影响,结果表明:MS+2,4-D 2mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖3％+琼脂0.7％为适宜的愈伤组织诱导培养基;MS+ KT0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖2％+琼脂o.7％为适宜的分化培养基;生根培养基为:1/2MS+ NAA 0.1mg/L+蔗糖2％+琼脂0.7％.下胚轴是诱导愈伤及分化的最佳外植体,诱导率可达100％,分化率可达80％.     

扁蓿豆愈伤组织诱导和分化条件的研究

以扁蓿豆3个品系的下胚轴和子叶为外植体，研究不同培养基、不同激素种类和配比对愈伤组织诱导的影响，以及不同分化培养基对愈伤组织分化的影响。结果表明：下胚轴的愈伤组织诱导率普遍高于子叶；品系B1、B2最佳愈伤组织诱导培养基为MS--0．5mg／L2，4--D＋O．5mg／L6--BA，品系B3最佳愈伤组织诱导培养基为MS＋0．5mg／L2，4--D＋0．7mg／L 6-BA；适宜分化的培养基均为MS＋1mg／L KT＋1mg／L6-BA。     

苜蓿高效再生体系的建立

以黑龙江主栽苜蓿品种肇东苜蓿、敖汉苜蓿、公农1号苜蓿、公农2号苜蓿为受体材料，分别研究了外植体类型对不定芽分化的影响，基因型、PGRs的不同配比对子叶节不定芽分化的影响，并确定了芽分化、芽伸长及再生植株生根时的最佳培养基。结果表明，当BA浓度为1．0mg／L时最适于子叶节的分化；当BA浓度为0．5mg／L时植株生长最佳。芽分化培养基为：MS＋1．0mg／LBA，30g／L蔗糖，0．8％琼脂，pH5．8；芽伸长培养基为：MS＋0．5mg／LBA，30g／L蔗糖，0．8％琼脂，pH5．8；再生植株生根培养基为：MS＋1.5mg／LIBA，15g／L蔗糖，0．8%琼脂，pH5．8。     

紫花苜蓿基因转化的影响因素分析

通过农杆菌介导法对紫花苜蓿不同品种植株进行了抗旱基因转化的研究,得到了一套紫花苜蓿基因转化的优化体系。研究表明,100 mg/L的卡那霉素对苜蓿愈伤组织的生长有着显著的抑制效应。250 mg/L头孢霉素能够有效地抑制农杆菌菌株LBA4404的生长。紫花苜蓿供试材料被切后直接用OD600值为0.3~0.5的农杆菌LBA4404菌液侵染10~15 min;培养材料共培养3 d后在愈伤组织诱导培养基MS 2 mg/L 2,4-D 0.5 mg/LKT 30 g/L蔗糖 9 g/L琼脂 250 mg/L Cef上诱导出愈伤组织;在体细胞胚分化培养基MS 1.0 mg/L BA 0.3 mg/L NAA 30 g/L蔗糖 9 g/L琼脂 50 mg/L Kan 250 mg/L Cef上促进体细胞胚的分化;分化出的体细胞胚在再生培养基上(同分化培养基,Kan为80 mg/L)进一步发育成抗性转化苗;转化的无根小苗在生根培养基1/2 MS 1.0 mg/L IBA 1%蔗糖 0.8%琼脂 100 mg/L卡那霉素上可生长出根系。     

苜蓿雄性不育系花药愈伤形成及分化培养条件的研究

以苜蓿雄性不育株系及其可育株系的花药为外植体,研究取材时间和不同激素配比对其愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明,雄性不育株系花药培养时,以现蕾初期取材、MS为基本培养基的条件下出愈率较理想。愈伤组织诱导的适宜培养基为:MS+0.5mg/L 2,4-D+0.25mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA+3mg/L KT+3%蔗糖+0.7%琼脂(出愈率66.7%);不育与可育植株花药愈伤适宜的分化培养基分别为:MS+1mg/L KT+0.2mg/L NAA+2%蔗糖+0.7%琼脂(分化率75%)和MS+4mg/L KT+0.2mg/L NAA+2%蔗糖+0.7%琼脂(分化率79%)。     

天蓝苜蓿组织培养及再生体系的研究

以野生天蓝苜蓿种子发育5～7d无菌苗的子叶、下胚轴和种子苗叶片为外植体，对其愈伤组织诱导及其分化的基本培齐与外源激素组合和浓度配比进行试验。结果表明：对子叶、下胚轴和叶片愈伤组织诱导最适宜的基础培养基分别是MS、B5和SH；激素的种类及其浓度配比对于愈伤组织的诱导因不同的外植体有很大的差异。其中，子叶、下胚轴以MS＋NAA（0．5～1．0mg／L）＋6-BA（0．7mg／L）效果较好，叶片以SH＋NAA（0.5—1．0mg／L）＋2，4-D（1.5～5mg／L）十6胡A（0．7mg／L）较好，少量下胚轴在MS＋NAA（0．5mg／L）＋6-BA（0．7mg／L）和MS＋NAA（0．5mg／L）＋KT（0．5mg／L）的培养基中直接分化出胚状体，并成功发育成植株。在培养基Whb5上，子叶、下胚轴和叶片的分化都得到了很好的效果，分化率分别为43％、57％、40％，15～30d后都能再生植株。     

星星草和朝鲜碱茅组织培养体系的建立

分别以星星草和朝鲜碱茅成熟胚为外植体,建立组织培养体系.结果表明,星星草和朝鲜碱茅成熟胚在MS+300mg/L CH+4.0mg/L 2,4-D +3%蔗糖+0.7%琼脂(pH5.8)培养基上,愈伤组织诱导率可分别达到53.3%和46.7%.经MS+300mg/LCH+1.0mg/L 2,4-D +3%蔗糖+0.7%琼脂(pH5.8)继代培养基中继代培养后,星星草和朝鲜碱茅胚性愈伤组织在MS+300mg/L CH+1.0mg/L 2,4-D+0.3 mg/L 6-BA +3%蔗糖+0.7%琼脂(pH5.8)分化培养基上,分化率分别达到了82.5%和75.7%.两种牧草再生苗生根移栽后成活率均可达到95%以上.     

山丹新麦草成熟胚组织培养研究

本研究以山丹新麦草成熟种子为材料,进行了组织培养再生体系的研究。通过研究和筛选新麦草离体成熟胚愈伤组织诱导培养、继代增殖和分化培养的最佳激素配比,建立了从愈伤组织到再生小植株的再生体系。结果表明：成熟胚愈伤组织诱导的最佳激素配比是MS＋2．4-D2．0mg／L。出愈率为91．7％。继代增殖培养的最佳激素配比是MS＋2．4-D1．5mg／L＋KT0．5mg／L。愈伤组织平均日增重1．43％。分化培养的最佳激素配比是MS＋2．4-D2．0mg／L＋NAA1．0mg／L。其绿色芽点率和出苗率分别为78．5％和49．5％,白化苗率为2．5％。     

草地早熟禾午夜2号植株再生研究

以草地早熟禾(Poa pratensis L.)品种午夜2号成熟种子为外植体,进行植株再生研究,建立高频再生体系,为草地早熟禾进行原生质体培养和细胞融合奠定基础。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D(1mg/L)+6-BA(0.1 mg/L)+3%蔗糖+0.7%琼脂,其诱导率为52.3%;最佳继代培养基为MS+2,4-D(1mg/L)+6-BA(0.3mg/L)+3%蔗糖+0.7%琼脂;最佳分化培养基为MS+NAA(0.5 mg/L)+6-BA(1 mg/L)+3%蔗糖+0.6%琼脂、分化率为57.5%;生根培养基同分化培养基,供体材料经100d的培养后获得再生植株。     

草地早熟禾愈伤组织诱导及植株再生

以成熟种子和胚轴为外植体诱导草地早熟禾愈伤组织，比较草地早熟禾四个品种的愈伤诱导情况和不同6-BA浓度、愈伤年龄等因素对愈伤组织分化能力的影响。结果表明：成熟种子的出愈率与胚性愈伤诱导率均高于胚轴；MS 2，4-D(2mg／L) 6-BA(0.1mg／L)培养基为草地早熟禾Mardona品种较为合适的愈伤培养基，其诱导率为58，3％；MS BA(3mg／L) KT(0．2mg／L)为较为适合的分化培养基。再生率高达70％；随着继代次数的增加，草地早熟禾分化能力能够继续保持。选择致密、易碎、生长迅速的愈伤继代能够保持草地早熟禾的胚性。可以为遗传转化提供长期良好的植物材料。     

菊苣组织培养与植株再生的研究

以菊苣叶片、茎段，花蕾和花瓣为外植体，进行离体培养试验，结果表明，叶片，茎段，花蕾可产生淡黄色的愈伤组织，并可诱导出不定芽，出愈率为100％，叶片和茎段的分化率为100％，诱导愈伤组织及分化的最佳培养基为：MS＋BA 2mg/L IBA0.3mg/L，生根培养基为：1／2MS＋NAA 0．1mg/L，生根率为100％。     

岷山红三叶愈伤组织诱导和植株再生研究

通过对岷山红三叶下胚轴和子叶再生体系建立的研究,获得愈伤组织诱导的最佳培养基为:MS+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L6-BA+2%蔗糖+0.6%琼脂,胚性愈伤组织诱导培养基为:MS+0.1 mg/L IAA+0.5 mg/L 6-BA+2%蔗糖+0.6%琼脂,芽诱导培养基为:B5+0.06 mg/L NAA+2%蔗糖+0.6%琼脂,每瓶可以长出2~10条茎,将茎转入生根培养基后愈伤继代可持续出芽。最佳的生根培养基为:1/2 MS+0.05mg/LNAA+1.5%蔗糖+0.8%琼脂。建立再生植株约需160 d。     

蒙古冰草根尖高效组培再生体系的建立

以蒙古冰草根尖为外植体研究不同激素配比对蒙古冰草愈伤组织诱导及分化的影响,结果表明:蒙古冰草根尖最适愈伤诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L+蔗糖20.0g/L+琼脂7.0g/L,诱导率为73.33％;最适分化培养基为MS+KT 3.0mg/L+NAA 1.0mg/L+蔗糖20.0g/...     

熏衣草微体快速繁殖与试管苗壮苗技术研究

对熏衣草微体快速繁殖和壮苗技术进行了研究。适合于熏衣草试管苗繁殖的培养基为MS＋6～BA2．0mg／L＋NAA0．05mg／L＋蔗糖30g／L＋琼脂7g／L,培养28d,繁殖系数达8以上;培养基中附加CCC质量浓度为0．05mg／L-0．5mg／L时对熏衣草试管苗繁殖和壮苗有利;熏衣草试管苗生根用IAA的效果较好,适宜于生根的培养基配方为MS＋IAA1．0mg／L＋蔗糖20g／L＋琼脂7g／L,培养25d生根率为91．6％;生根试管苗移栽成活率为73％。