氧化应激对离体大鼠小肠上皮细胞的损伤及抗氧化研究

为了探讨氧化应激对动物小肠上皮细胞内抗氧化酶活性、细胞通透性和细胞增值的影响,并进一步研究GSH对离体小肠上皮细胞诱导型氧化损伤的保护作用。通过建立大鼠小肠上皮细胞X/XO体外氧化损伤模型,培养细胞随机分为7组,18个重复:对照组A加入蒸馏水,氧化损伤B、C、D各组加入黄嘌呤X(10μmol/L),并分别加入黄嘌呤氧化酶XO,(10,40,70 U/L),抗氧化E、F、G各组加入X(10μmol/L)和谷胱甘肽GSH(1.5μmol/ml),并分别加入XO(10,40,70U/L),应激培养24 h。研究发现:不同剂量的X/XO均可导致离体大鼠小肠上皮细胞氧化应激的发生。与对照组比较,显著降低了IEC增殖和CAT的活性,明显提高细胞内Ca2+浓度(P<0.05)。低活性XO(10U/L)提高了SOD活性(P>0.05),然而高活性XO(40,70 U/L)显著降低了细胞内SOD的活性(P<0.05),添加谷胱甘肽提高了抗氧化酶的活性和细胞增殖,显著降低了细胞内的Ca2+浓度。     

鸡离体小肠适宜培养时间的研究

文章用乳酸脱氢酶法探讨仔鸡肠囊的最佳培养时间。采用单因素试验设计,选择6只三黄公鸡并分别取其十二指肠、空肠和回肠肠囊,随机分配到锥形瓶中,每只鸡为1个重复。在培养的第0、20、40、60和80min时从每个锥形瓶瓶中取100μL培养液分析乳酸脱氢酶活力。结果表明,在0～60min,培养液中乳酸脱氢酶活力上升较缓慢,60min后上升幅度较快。结果提示,仔鸡肠囊的适合培养时间是40～50min。     

培养液磷含量和pH对鸡离体小肠磷吸收的影响

探讨了培养液不同pH和磷含量对鸡离体小肠磷吸收的影响,为体外培养鸡小肠合理选择培养液pH和用外翻肠囊法评定饲料有效磷时合理选择培养液磷浓度提供参考依据.采用2个单因子随机试验,每个因子4个处理.48只30日龄体重相近的三黄肉公鸡的十二指肠、空肠和回肠肠囊随机分配到8个处理中,每个处理6个重复,每个重复1个肠囊,40℃培养50 min.结果表明:培养液pH和磷含量对鸡离体小肠的磷吸收量有明显影响,pH 5.0～7.0时,肠囊的磷吸收量线性增加,与pH 5.0比较,pH 7.0时,肠囊的磷吸收量极显著增加(P＜0.01),pH 8.0时,肠囊的磷吸收量开始降低;磷含量在50～200μg/ml时,肠囊的磷吸收量与磷含量呈正相关,当磷含量增加到400μg/ml,十二指肠肠囊和空肠肠囊的磷吸收量开始降低.结果提示:用外翻肠囊法评定饲料有效磷时,鸡离体小肠培养液pH以6.0～7.0最佳;培养液中磷含量不能超过200 μg/ml.     

三白散超声提取液对鸡离体小肠运动机能影响的药效研究

目的:探讨三白散超声提取液对鸡空肠运动机能影响的药效作用。方法:采用离体器官实验法,将鸡的空肠置于盛有生理溶液的麦氏浴槽内,分别加入浓度为4.00、8.00、16.00 g/L的三白散水煎液和超声提取液,观察比较离体肠管运动张力的变化。结果:三白散水煎液和超声提取液均能使鸡离体空肠收缩张力和舒张张力降低,收缩振幅减小,浓度增加其作用增强。结论:三白散超声提取液对鸡离体空肠平滑肌收缩运动抑制作用显著。     

离体小肠粘膜细胞对类胡萝卜素的吸收

选用两种有代表性的类胡萝卜素（β－胡萝卜素和黄体素）分别用蛋鸡、山羊的离体小肠细胞进行体外吸收实验。结果表明：β－胡萝卜素和黄体素的吸收均呈浓度依赖性，且β－胡萝卜素吸收率保持稳定（Ｐ＞０．０５）；培养温度对蛋鸡离体小肠粘膜细胞类胡萝卜素吸收无显著影响，而极显著地影响了山羊对黄体素和高浓度（≥１５μｍｏｌ／Ｌ）β－胡萝卜素的吸收；Ｔｗｅｅｎ２０对两种类胡萝卜素均有抑制作用，其中对黄体素抑制作用较大；体积分数（φ）为０．３％的Ｔｗｅｅｎ２０可能阻断了β－胡萝卜素转化为维生素Ａ；０．５ｍｏｌ／Ｌ的根皮素抑制了β－胡萝卜素的吸收而对黄体素吸收起促进作用（Ｐ＜０．０１）。     

鸡小肠上皮细胞表面大豆凝集素受体的标记

以0日龄海蓝褐蛋鸡为材料,用胶原酶结合组织块培养的方法分离培养了鸡小肠上皮细胞,通过抗角蛋白单克隆抗体对分离的细胞进行纯度鉴定,并用荧光标记大豆凝集素对已鉴定的细胞大豆凝集素结合位点进行了标记.结果表明:试验获得了鸡小肠上皮细胞原代培养物纯度＞90%,可用于后续试验,荧光标记表明细胞表面存在大量的大豆凝集素受体.     

烟蒂水浸泡液对家兔离体小肠运动的影响

[目的]研究香烟烟蒂水浸泡液对家兔离体小肠收缩运动的影响.[方法]采用常规离体灌注小肠平滑肌标本活动的试验方法,应用3种不同剂量(0.2、0.4、0.8 ml)的烟蒂水浸泡液作用于离体肠段,观察用药前后的离体肠段收缩幅度和收缩频率的变化.[结果]对离体肠段的收缩幅度,低剂量组有显著性差异(p＜0.05):中、高剂量组均有高度显著性差异(P＜0.01):对离体肠段的收缩频率,低剂量组差异显著(P＜0.05)中、高剂量组差异极显著(P＜0.01).[结论]香烟烟蒂水浸泡液能增大家兔离体小肠的收缩幅度,减弱收缩频率,作用机理可能与钠离子和钙离子的转运有关.     

高温胁迫下谷胱甘肽对离体玉米叶片的保护效应

室内培养玉米“掖单５１”幼苗至一叶一心，选择大小一致的展开叶片，切取中部２ｃｍ长叶段为试材，分别悬浮培养于３种不同处理条件的培养皿中；Ｉ（ＣＫ）－蒸馏水＋室温２５℃；Ⅱ－蒸馏水＋４０℃；Ⅲ－ＧＳＨ（还原型谷胱甘肽）（１０μｍｏｌ／Ｌ）＋４０℃；于０ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ进行有关生理指标的测定。结果表明：用１０μｍｏｌ／Ｌ的ＧＳＨ浸泡离体玉米叶片能减少高温协挞下叶绿素和可溶性蛋白质含量的降低，地ＰＯＤ     

白术对鸡离体肠管运动张力的影响

探讨白术对鸡离体空肠和盲肠运动张力的彰响.采用离体器官试验法,将鸡的空肠和盲肠置于盛有生理溶液的麦氏浴皿内.然后加入不同剂量的白术水煎液,使溶液终浓度为3.75、7.50、15.00、22.50mg/ml,观察和记录离体肠管运动张力的变化.白术水煎液能促进鸡离体空肠平滑肌收缩运动,使收缩张力和舒张张力增强,收缩振幅增大,其剂量越大作用越强.但对盲肠的自律性收缩活动有显著的抑制作用,可降低肠运动张力,减小收缩幅度,加大剂量其抑制效果亦随之加强.白术能增强鸡离体空肠平滑肌运动张力,抑制盲肠的运动张力,并呈量效关系.     

一枝蒿对兔离体小肠平滑肌运动试验的研究

用两种自制的一枝蒿制剂型对家兔离体小肠平滑肌运动影响的试验表明：一枝蒿有明显加强小肠平滑肌运动的作用。为临床治疗消化道及其有关的一类疾病提供了理论依据。     

鸡胚小肠上皮细胞的分离培养及其热应激效应

【目的】比较不同消化酶对鸡胚小肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IECs)的分离和培养效果及细胞的热应激能力,为后续研究提供依据。【方法】以15日龄鸡胚为研究对象,分别使用0.5 g/L胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ与透明质酸酶联合及中性蛋白酶Ⅱ消化分离其小肠上皮细胞。培养不同时间后,观察IECs的生长状态,测定细胞生长活性;通过免疫荧光染色和免疫组化对所得IECs进行鉴定,确定最佳的消化酶。对优化所得鸡胚IECs于42℃分别进行2,3,4 h热应激处理,以37℃处理的IECs为对照,MTT法和流式细胞测定IECs的相对活力和凋亡率。【结果】细胞形态学观察发现,用胶原酶Ⅰ与透明质酸酶联合消化分离得到了大量小肠绒毛隐窝团块,易贴壁,细胞生长快;用0.5 g/L胰蛋白酶和中性蛋白酶Ⅱ消化分离得到的细胞数量少,贴壁慢。用3种酶消化方法分离的细胞生长曲线均呈"S"形,但用胶原酶Ⅰ与透明质酸酶联合消化分离的细胞生长曲线峰值较高,细胞活性强;联合消化所得IECs特异性标记抗原均为阳性,免疫荧光阳性率达(92.7±7.9)%,细胞膜质呈棕黄色,而对照组细胞膜质无着色。42℃下热应激3 h后细胞活力极显著下降,凋亡率为(35.96±1.57)%,极显著高于对照组的(0.67±0.02)%,可进行后续试验。【结论】采用胶原酶Ⅰ与透明质酸酶联合消化可得到IECs;42℃下处理3 h是构建IECs热应激模型的条件。     

乌金口服液对兔离体小肠平滑肌收缩的影响及机制研究

通过构建离体小肠平滑肌浴槽试验模型,运用BL-420型生物信号采集处理系统测定其收缩张力及运动振幅的变化,观察不同浓度(0.0172 mg/mL、0.0338 mg/mL、0.0654 mg/mL)的乌金口服液对兔离体小肠平滑肌收缩的影响,并利用肾上腺素、阿托品等预处理后再添加0.7 mg/mL的乌金口服液,以研究其对...     

淫羊藿对家兔离体小肠平滑肌生理特性的影响

[目的]观察淫羊藿苷对家兔离体小肠平滑肌收缩活动的影响。[方法]取家兔离体小肠（十二指肠）肠段,将其置于恒温平滑肌槽中,连接张力传感器,信号输入BL-420E生物机能实验系统,加入不同浓度的淫羊藿苷溶液,分别记录小肠平滑肌的收缩活动。结果不同浓度淫羊藿苷（10-4、10-3、10-2mol/L）对小肠平滑肌自发收缩活动有抑制作用,其收缩幅度变化值与用药前比较差异显著。[结论]淫羊藿苷对小肠平滑肌活动有抑制性影响。     

阿里红水提物对家兔离体小肠平滑肌收缩性的影响

为研究不同质量浓度的阿里红水提物对家兔离体小肠平滑肌收缩活动的影响,制备家兔离体十二指肠、回肠肠段标本,灌流给药后分别记录低、中、高质量浓度组阿里红水提物作用下小肠平滑肌收缩频率与收缩幅度的变化.结果表明,阿里红水提物低、中、高质量浓度组均能抑制家兔小肠平滑肌的收缩活动,并呈浓度依赖效应,高质量浓度组有极显著的抑制作用(P＜0.01),说明阿里红有抑制小肠平滑肌收缩的作用.     

大蒜醇提液对小鼠离体小肠平滑肌运动的影响

【目的】 研究大蒜醇提液对胃肠运动的影响,了解其可能的作用机制。【方法】 用生物信号处理系统监测大蒜醇提液对小鼠离体小肠平滑肌运动的影响。【结果】 2倍浓度递增(0.025%-0.4%)的大蒜醇提液剂量依赖性抑制小肠收缩幅度(P < 0.05),但对收缩张力无影响(P> 0.05);大蒜醇提液抑制小肠收缩幅度的最效浓度为0.2%,小肠收缩幅度仅为用药前26%±7%(P< 0.01);0.2%大蒜醇提液与M-受体激动剂氯贝胆碱或KCl联合用药对小肠收缩张力、收缩幅度、峰值和曲线下面积与这两种药物单独用药比差异均不显著(P> 0.05)。【结论】 大蒜醇提液对小鼠离体小肠平滑肌的运动具有抑制作用,且该抑制作用可能同抑制胆碱能M-受体和阻止细胞内钾离子外流减少无关。     

人工培育牛黄对小白鼠离体小肠运动的解痉作用

本文证明培育牛黄对乙酰胆硷与氯化钡所引起的小白鼠离体小肠痉挛有解痉作用。培育牛黄的成份中去氧胆酸具有较强的抗乙酰胆硷与氯化钡作用,其浓度与效应呈直线相关。其成分中的胆酸仅有较弱的抗乙酰胆硷作用,且浓度与效应不呈直线相关,也无抗氯化钡作用。     

新生仔猪小肠上皮细胞体外培养的研究

采用灌肠消化、组织块消化、机械刮取+胰蛋白酶消化和机械刮取+胶原酶消化等4种方法对仔猪小肠黏膜上皮细胞(Intestinal epithelial cell, IEC)的体外分离培养进行了比较.结果表明,使用机械刮取+胶原酶消化法分离IEC,可简便快速地获得数量大、活性高的小肠上皮细胞,其中原代培养细胞24 h出现贴壁,7～8 d明显增殖,10～12 d贴壁细胞汇合成片,18～21 d细胞呈"铺路石"状;传代培养细胞3 h出现贴壁,3～4 d快速增殖.采用碱性磷酸酶显色反应检测,90%以上的贴壁细胞呈阳性反应.     

金银花水提醇沉剂对家兔离体小肠运动的影响

目的:观察不同处理的金银花水提醇沉剂对家兔离体小肠运动性能的影响,并探讨其药理作用的机制。方法:采用离体器官法,利用BL—Newcentury生物信号采集与处理系统,记录不同处理的金银花水提醇沉剂对离体小肠作用前后的张力值。结果:乙醇体积分数为50%、70%和90%,药液浓度为0.1、0.5和1.0g/ml的金银花水提醇沉剂对家兔离体小肠运动均有明显的抑制作用,用药前后差异极显著(P<0.01);不同处理间比较,以乙醇体积分数为70%,浓度为1.0g/ml的金银花水提醇沉剂作用最强(P<0.01);乙醇体积分数相同时,随着金银花浓度的增大,其对小肠运动的抑制作用加强。结论:金银花水提醇沉剂对家兔离体小肠运动有明显的抑制作用,且生药含量越大,抑制作用越明显。     

刺糖对小鼠肠推进和离体小肠平滑肌运动的影响

通过观察刺糖对小鼠离体小肠和在体小肠平滑肌运动的影响,以中华墨汁的推进距离与小肠总长的比值计算小肠推进率;采用离体肠管平滑肌收缩实验,以小鼠小肠平滑肌的收缩幅度、收缩频率及运动指数为指标,观察在正常台氏液中刺糖对小鼠离体肠管的影响,同时观察胃肠通和阿托品对不同浓度刺糖的作用。结果表明,刺糖可增强小鼠小肠运动功能（P〈0.01）,但与胃肠通相比作用缓和（P〈0.01）。35%,70%刺糖溶液均可促进正常离体肠管的收缩功能（P〈0.01,P〈0.01）,能拮抗阿托品引起的舒张作用（P〈0.01,P〈0.01）和胃肠通引起的收缩运动（P〈0.01,P〈0.01）。体内外实验结果表明,刺糖对小鼠小肠运动在体内外均具有调节作用。