绢纺精练液中丝胶蛋白的氨基酸组成、相对分子量及溶解性的测定

利用氨基酸自动分析仪对从桑蚕丝条吐精炼液中回收的丝胶蛋白的氨基酸组成进行分析,采用聚丙烯凝胶电泳法对其相对分子质量进行测定,利用紫外分光光度计对其溶解性进行探究。结果表明:丝胶蛋白含有18种氨基酸,其中极性氨基酸占80.39%,丝氨酸占27.52%,天门冬氨酸占15.91%,苏氨酸7.41%;丝胶蛋白的相对分子质量集中分布于17~75 KD;丝胶蛋白溶解性优于大豆分离蛋白。     

蚕丝脱胶方法的比较分析

对高温高压水、尿素溶液和碳酸钠溶液煮沸的蚕丝脱胶方法作了比较研究。结果表明 ,蚕丝在高温高压条件下丝胶蛋白易于溶解 ,脱胶率达 80 %以上 ,获得的丝胶分子量大 (10～ 2 0 0kD) ;在碱性的碳酸钠溶液中煮沸脱胶 ,丝胶蛋白易于降解或水解 ,其回收的丝胶分子量 2 0kD以下。蚕丝在高温高压水或高温高压尿素溶液中的脱胶率都随着处理温度和压力的增大而提高 ,而回收的丝胶蛋白分子量随着处理温度和压力的增大而下降。高温高压水蚕丝脱胶法是一种高效率、低成本、无污染的脱胶方法 ,特别适用于绢纺厂、丝棉厂等蚕丝的脱胶与加工以及纺织厂生丝的精练等。     

天然丝胶蛋白及其酶解产物抑制酪氨酸酶活性研究

丝胶蛋白是一种拥有多种特殊功能的蛋白质,在化妆品、保健食品及医用材料等领域都具有重要的应用价值。本研究从全天然丝胶茧中提取丝胶蛋白,采用多种蛋白酶进行酶解,选取最佳蛋白酶;测定丝胶蛋白及其酶解产物的溶解性,分析其对酪氨酸酶活性的抑制作用。结果表明:丝胶蛋白经木瓜蛋白酶酶解后产物的分子量集中分布在14~29kDa,溶解性增强;丝胶蛋白及其酶解产物均能够抑制酪氨酸酶的活性,尤以分子量较小的酶解产物抑制能力较强;抑制能力与样品的质量分数呈明显的量效关系。     

2种分子质量丝胶蛋白对肿瘤细胞和成体干细胞增殖的影响

家蚕丝胶蛋白是一种可用于制备生物医学材料的天然高分子原料。用热水脱胶法、高温高压脱胶法制备了2种分子质量的丝胶蛋白,测试分析2种丝胶蛋白对肿瘤细胞(Bcap-37细胞、MG-63细胞)和人间充质干细胞(MSCs细胞)增殖的影响,为丝胶蛋白的合理应用提供试验依据。热学分析表明:高分子质量(最高200 k D)丝胶蛋白HS比低分子质量(44.3~66.4 k D)丝胶蛋白LS有着更好的热稳定性和结晶性。细胞培养试验表明:LS和HS都具有良好的生物相容性;在96孔细胞培养板中加入HS较加入LS能更好地促进Bcap-37细胞和MG-63细胞的粘附与增殖;但在MSCs细胞的培养过程中,加入LS的第5天细胞增殖率显著高于加入HS后的细胞增殖率。因此,可水解加工不同分子质量的丝胶蛋白,用于制备不同用途的生物医学材料。     

蚕丝脱胶废水中的丝胶蛋白回收试验报告

丝胶蛋白具有亲水性、生物相容性和可降解性,在化妆品、食品、生物材料和医药领域具有巨大的应用潜力。蚕丝脱胶废水中含有15%～25%的丝胶蛋白,回收脱胶废水中的丝胶蛋白可以拓展茧丝绸产业链。笔者采用等电点沉淀法提取脱胶废水中的丝胶蛋白。结果表明,在pH值3.75左右的条件下,丝胶蛋白回收率为38.76%。     

丝胶蛋白膜的血液相容性研究

为了评价改性丝胶蛋白的血液相容性,进行了体外细胞毒性以及溶血性试验。结果显示:用丝胶蛋白膜浸提液对体外培养的成纤维细胞进行处理后,细胞平均相对增殖率为95.5%,属于细胞毒性I级;选取不同剂量(100%、50%、25%、10%)丝胶蛋白膜浸提液对家兔进行溶血试验,溶血率为4.43%、3.90%、1.48%、0.63%,均小于5%。表明丝胶蛋白膜是一种具有良好血液相容性的生物材料。     

蚕丝基布面膜丝胶蛋白鉴定及抗氧化活性检测

蚕丝中的丝胶蛋白因其有较好的亲水性和生物活性被广泛用于化妆品行业。为了调查笔者试制的两款保胶蚕丝纤维为基布的蚕丝面膜的相关特性，对蚕丝基布丝胶蛋白在面膜液中的溶出情况及清除自由基的能力进行了相应检测。同时，选择2款标识有“蚕丝”及2款非蚕丝的市售面膜作为对照。发现除笔者试制的两款面膜液含有丝胶蛋白外，其它面膜液不含丝胶蛋白。进一步利用丝胶抗体对其丝胶蛋白类型进行鉴定，发现面膜液中含有丝胶3蛋白，未检出Ser1和Ser2蛋白。利用DPPH法对其清除自由基能力进行检测，发现笔者试制的蚕丝面膜液中的一款具有较好的清除自由基的活性，其清除能力为41.77%，相当于9.4ug/ml的Trolox。该研究表明利用保胶蚕丝作为面膜基布，其丝胶蛋白能溶出到面膜液中，推测其丝胶中的其它活性物质也能一同溶出到面膜液中从而赋予蚕丝面膜特有的生物活性。该研究为开发以保胶蚕丝作为化妆品，特别是面膜的开发利用提供一定的参考。     

天然丝胶蛋白的生物学活性

丝胶由18种氨基酸组成,其中有8种是人体必需氨基酸,还有高含量的甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸和酪氨酸。从缫丝、丝织、绢纺 制棉等生产和加工过程的废液中回收的丝胶蛋白,经降解、水解或酶解处理后,获得的不同分子量的水溶性丝胶肽及其水解物,具有多种已知 的和未知的生物学活性功能。     

丝胶蛋白/羟基磷灰石复合支架材料的制备及性能研究

羟基磷灰石(HA)是骨组织中无机物的主要成分。利用丝胶蛋白(SS)良好的生物相容性、生物降解性、细胞相容性,以及含有的羧基和羟基能与Ca2+紧密结合的特点,将氢氧化钙和磷酸以湿法合成的羟基磷灰石按一定的比例加入到浓缩后的丝胶蛋白溶液中,经冷冻干燥制备成丝胶蛋白/羟基磷灰石复合支架材料,期望用于骨替代和骨缺损修复。对丝胶蛋白/羟基磷灰石复合支架材料进行扫描电镜(SEM)、X射线衍射(XRD)、红外吸收光谱(FTIR)、热力学性能以及力学性能等检测,并探讨不同原料配比对材料结构与性能的影响。结果表明,丝胶蛋白/羟基磷灰石复合支架材料的孔隙分散均匀,孔隙率33.0%～62.5%;支架材料中的HA呈弱结晶态,与人体骨组织中HA的晶体态相似,丝胶蛋白分子呈β折叠结构;随着复合支架材料中HA的比例不断增加,材料的热分解温度提高,热学性能改善,当HA的质量分数达到50%时,弹性模量增大到15.64MPa,呈现较好的结构性能。     

丝蛋白的合成

家蚕丝腺细胞在幼虫期的一个短暂发育的时期合成大量的丝蛋白(silk proteins),丝心蛋白(fibroin)和丝胶蛋白(sericin),丝蛋白的主要成分丝心蛋白是专门在后部丝腺中合成的,而丝胶蛋白则在中部丝腺合成。两种蛋白质都具有独特的,容易鉴别的氨基酸成分。     

丝胶蛋白精制纯化后用作牛血浆纤连蛋白冻干保护剂的试验

通过亲和层析的方法制备牛血浆纤连蛋白Fibronectin(FN),在其制剂中加入精制纯化的、一定比例的丝胶蛋白作为冻干保护剂,发现加入丝胶蛋白保护剂后的牛血浆纤连蛋白具有良好的生物活性,在(25±2)℃保存30个月不降解.试验表明:在牛血浆纤连蛋白冻干制剂中引入精制纯化的丝胶蛋白可以延长其保存时间.     

蚕丝蛋白制备方法的研究

以废蚕茧丝为原料,将脱胶丝素通过盐解、酶解、碱解等方法,制备了溶液状、粉末状丝素蛋白。以沸水提取丝胶蛋白,采用二次水解、碱解等方法,制备了溶液状、粉末状丝胶蛋白。采用SDS-PAGE蛋白质凝胶电泳和红外光谱等检测分析了蚕丝蛋白的结构特征,探讨了制备方法对蚕丝蛋白结构和产率的影响。结果表明,不同方法制备的丝素蛋白、丝胶蛋白具有不同的分子量分布和不同的产率,其分子结构以无规卷曲为主。     

酸提取法分析茧层缩氨酸的研究

分析家蚕茧层蛋白质的微量结果表明：其中存在着新构成成分——非纤维性的低分子量蛋白质。将其精制后，分析氨基酸的排列，有丝蛋白、丝胶蛋白等异质蛋白质，特别是4KDa成分的一次构造与KaZaL型胰蛋白酶抑制剂类似(栗风、平野、1995)。     

蚕丝胶蛋白的多肽组分及其分子量的研究

以家蚕、野桑蚕、天蚕、柞蚕、樗蚕、蓖麻蚕为材料，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法对成熟幼虫丝腺分区进行丝胶蛋白多肽组成的研究。结果表明，六种蚕类丝胶蛋白表现出不同的多肽组成。     

丝胶蛋白滋养润白保湿面膜的毒理学试验结果

本品以丝胶蛋白为主要配料,经特殊工艺提取处理和配制,研制成功产品"丝胶蛋白滋养润白保湿面膜"。依据卫生部《化妆品卫生规范》(2007),对它进行了毒理学试验。本文简要介绍了丝胶蛋白滋养润白保湿面膜的毒理学试验检测结果。     

家蚕5龄幼虫期乙酰化修饰丝胶蛋白对蚕丝性能的影响

乙酰化修饰即在翻译中或翻译后的蛋白质分子链上嫁接乙酰基团,是通过化学修饰改变蛋白质性质的方式之一,丝胶蛋白是高度乙酰化的蛋白质。以丝腺组织大量合成丝蛋白的家蚕5龄第2天幼虫供试,分别将去乙酰化酶抑制剂TSA和乙酰化酶抑制剂C646自幼虫第2腹节注射入体内丝腺,上调和下调丝胶蛋白的乙酰化水平,探究通过乙酰化修饰丝胶蛋白的方法改善蚕丝性能的可行性。收集试验组家蚕的茧丝进行力学性能测试、红外光谱分析、X射线衍射分析、扫描电子显微镜(SEM)观察,结果证实丝胶蛋白的乙酰化修饰并不会改变蚕丝丝素的晶体结构,但具有增强丝胶与丝素表层附着力的作用。研究结果可为蚕丝精练脱胶和染整工艺的改进提供新的理论依据。     

彩色蚕茧与白色蚕茧中丝胶蛋白抗氧化能力的比较研究

以几种颜色不相同的彩色蚕茧和普通白色蚕茧为原料,采用高温水煮提取各种样茧的丝胶蛋白,并以无水乙醇纯化。通过测定丝胶蛋白清除自由基的能力,判定丝胶蛋白是否具有抗氧化能力,同时比较彩色蚕茧和普通白色蚕茧丝胶蛋白抗氧化能力的大小。结果表明,彩色蚕茧与白色蚕茧丝胶蛋白均具有较强抗氧化能力,且差异不显著。     

高丝胶蛋白含量家蚕品种资源库的构建及应用

利用杂交育种、丝胶蛋白含量跟踪检测等方法,构建了能分泌白色、绿色、黄色、橘红色丝胶蛋白的18个品种组成的资源库,其丝胶蛋白含量位于93.92～100%,为制备纯天然、不变性的高品质丝胶蛋白及其在化妆品、医药、食品和纤维改性材料等领域的利用提供高品质原料。     

丝胶蛋白液的护肤功能及应用研究

利用丝胶蛋白护肤功能,研制成抗菌抑菌、对人体皮肤起保护作用的“天然丝胶护肤乳”。经检验,产品符合企业标准和卫生部《化妆品卫生规范》(2002)的规定。本文简要介绍了丝胶蛋白护肤功能和“天然丝胶护肤乳”的研制过程。     

Bmo-miR-2771对家蚕丝胶蛋白基因BmSer-1表达的调控作用

微小RNA(miRNA)可通过抑制mRNA转录或使RNA降解的方式在转录后水平调节靶基因的表达。研究与家蚕丝胶蛋白基因1(BmS er-1)转录后表达有关的miRNA(Bmo-miR)及其作用方式,以丰富丝胶蛋白基因表达的精细调控信息。首先从miRBase 21数据库中获得全部成熟体Bmo-miR,通过生物信息学分析筛选到一个对BmS er-1有潜在调控作用的BmomiR,命名为Bmo-miR-2771。设计茎环引物,采用半定量RT-PCR方法检测Bmo-miR-2771及其预测靶基因BmS er-1在家蚕5龄3 d幼虫头部、脂肪体、前部丝腺、中部丝腺、后部丝腺、中肠等组织器官以及血淋巴细胞中的表达水平,结果显示Bmo-miR-2771特异性地在中部丝腺中表达,并且靶基因BmS er-1在中部丝腺的相对表达量也明显高于其他组织。将构建的表达BmomiR-2771的重组质粒pcD NA3.0(ie1-egfp-pri-miR-2771-SV40)和表达BmS er-1 3'-UTR的重组质粒pG L3(A3-luc-Ser-1 3'UTRSV40)共转染家蚕卵巢培养细胞BmN,并以共转染pcD NA3.0(ie1-egfp-SV40)和pG L3(A3-luc-Ser-1 3'UTR-SV40)的BmN细胞为阳性对照,以海肾荧光素酶表达载体pRL-CMV为内参,检测荧光素酶活性,结果显示实验组的荧光素酶活性相对于阳性对照组显著降低(P0.05),从细胞水平证实了Bmo-miR-2771对BmS er-1基因表达具有负调控作用。