云芝胞外多糖液体发酵条件的优化

以提高云芝胞外多糖含量为主要目的,通过单因素试验,对云芝摇瓶培养条件进行优化。结果表明:云芝胞外多糖发酵培养的最适碳源为蔗糖,最佳氮源为蛋白胨,最适宜碳氮比为20,最适宜的pH为5.0;优化后的云芝发酵生物量为12.14 g/L,较优化前提高了42.49%;胞外多糖含量为3.34 g/L,较优化前提高了20.58%。     

一株野生金针菇菌株的分离鉴定及驯化栽培

采用形态学及ITS序列分析鉴定野外采集的一份野生大型真菌菌株,并研究分离纯化菌株的生物学特性,进行出菇试验。结果表明：该野生菌株为金针菇Flammulina filiformis（编号21JYF01）,其菌丝培养基最适碳源为葡萄糖,最适氮源为酵母粉;出菇试验时子实体丛生,呈淡黄色,农艺性状均较好,生物学效率为78.5%。     

诱变筛选云芝高产多糖菌株及其液体培养条件优化

对从不同地区引进多株云芝菌株,进行云芝液体发酵试验,筛选出云芝菌丝体多糖产量高的菌株作为出发菌株,运用低能N~+离子注入诱变选育出云芝液体发酵高产云芝多糖的新菌株。对新菌株最佳培养基及液体发酵参数的研究与优化使其液体发酵菌丝体多糖产量高于高产出发菌株50%,液体发酵量菌丝体多糖达到了2.26 g/L。     

云芝多糖提取工艺的研究比较

对酶法、超声波法提取云芝子实体多糖进行了比较,试验结果表明,采取酶超声波联用提取云芝多糖的得率最高,达到4．98％,通过正交试验优化了提取条件：纤维素酶浓度1．5％,酶解温度为55℃,酶解时间20min,溶剂pH值为6．5,超声提取时间为20min,料液比1：25,提取温度65℃。     

云芝菌丝体产SOD的深层发酵培养条件的优化

通过设计Lm（3^6）正交试验确定了可提高云芝菌丝体中SOD活性的深层发酵的最优培养条件,试验结果表明：培养条件对菌丝体生物量的影响顺序依次为：种龄〉光照〉培养时间〉接种量〉装液量〉温度,而对菌丝体产SOD总活性的影响顺序为：培养时间〉光照〉接种量〉种龄〉装液量〉温度。综合考虑试验结果,确定云芝菌丝体产SOD的最适培养基为：种龄3d,接种量10％,培养温度25℃,装液量100mL,微弱光照,培养4d。     

一株野生柳生田头菇菌株分离鉴定及驯化栽培

以采自柳树腐木上的野生食用菌菌株KEFI-010为试材,通过形态学特征和ITS序列分析进行鉴定,并开展了驯化栽培试验研究,以期为柳生田头菇优良菌种选育及栽培技术研究提供参考依据。结果表明:该菌株为柳生田头菇(Agrocybe salicacicola),其菌丝生长速度快、洁白、浓密、整齐,栽培周期较短,出菇整齐、健壮,菌盖光滑,大小均匀,菌肉厚,菌柄粗,农艺性状较好,生物学效率为51.49%。子实体营养成分分析发现,该菌株蛋白质含量高,粗纤维、矿物质和氨基酸非常丰富,还含有人体必需的微量元素硒,具有较高的保健价值,是一种开发潜力巨大的食药用菌。     

云芝漆酶的分离纯化和理化性质及抗增殖活性

采用DEAE-cellulose, CM-cellulose和 Q-Sepharose离子交换层析和Superdex 75 凝胶过滤层析,从云芝(Coriolus versicolor)发酵液中纯化得到了一种漆酶, SDS-PAGE 电泳检测其为单一蛋白,分子量为67 kDa,N-端部分氨基酸序列为GIGPVADLTITNAAV.该酶可以催化氧化多种底物,其中对ABTS[ 2,2,-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonate)]的催化作用最强.最适反应条件为40 ℃, pH 5.0,其活性可以被Cu2+ 激活,被Fe3+、Hg2+、Fe2+抑制.该酶对HIV-1逆转录酶、乳腺癌MCF7细胞和肝癌HepG2细胞均具有抑制作用,其IC50 分别为 1.5 μmol/L、 2.3 μmol/L 和 4.4 μmol/L.     

云芝胞外多糖充液胶囊的研制

从云芝培养液获得云芝胞外多糖提取物,并将其研制云芝胞外多糖充液胶囊产品;研究不同含水量的聚乙二醇400,不同的稀释剂PEG400和聚山梨酯80的适当比例和不同的封口乙醇的体积分数对明胶胶囊稳定性的影响;最后采用紫外分光光度法测定充液胶囊中云芝胞外多糖在60 min内的溶出度。结果表明:聚山梨酯80和含水量为10%的PEG400比例为1:25的云芝胞外多糖充液产品,其稳定性最好,35 min内累积云芝多糖溶出度达到90%以上。     

牡丹江2株香蘑属菌株的鉴定及驯化研究

通过表型鉴定和ITS测序相结合的方法鉴定香蘑属2个菌株。结果表明,2个供试菌株1株是花脸香蘑,另1株是紫丁香蘑。对香蘑属菌株进行驯化研究发现,花脸香蘑菌丝体的最适生长温度为24℃,子实体的最适宜发育温度为22℃～26℃,利用玉米秸秆发酵料栽培,成功驯化花脸香蘑菌株。紫丁香蘑菌丝体的最适生长温度为20℃,没有获得子实体。     

云芝多糖特征及其对运动耐力的影响

对云芝多糖特征及其对运动耐力的影响开展研究。通过云芝多糖的室温稳定性试验表明,云芝多糖具有良好的室温稳定性;抑菌性试验表明云芝多糖具有广谱抑菌效果;小鼠负重游泳试验表明,云芝多糖对运动耐力的提高有一定作用。证明了云芝多糖是一种安全的多糖来源,能够提升运动耐力。     

云芝子实体氯仿提取物体外抗肿瘤活性研究

研究了云芝子实体氯仿提取物（CVFC）对人肝癌细胞株HepG2的体外抑制作用,并初步探讨了抑瘤机制。MTr结果显示,CVFC对HepG2细胞有明显的抑制作用,并呈明显的量效关系,半数抑制浓度为（75．83±3．96）μg·mL^-1。荧光显微镜和透射电镜形态观察发现CVFC处理可使细胞发生细胞皱缩、核碎裂等凋亡特征;Annexin V/PI双染结果证实有胞膜磷脂酰丝氨酸的翻转,经150μg·mL^-1 CVFC处理HepG2细胞24h后早期凋亡率为17．82％,晚期凋亡率为22．59％,均显著高于对照组5．35％和3．75％。这些结果表明CVFC具有体外抑制HepG2细胞的活性,其抑瘤机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

枸杞子水提物对采绒革盖菌木质纤维素酶和木质素酶活性的影响

以梯度试验方法研究了采绒革盖菌（Ｃｏｒｉｏｌｕｓ ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）在含不同量枸杞子（Ｌｙｃｉｕｍ ｃｈｉｎｅｎｓｅ）水煎液的ＰＤＹ液体培养基中生长时,纤维素酶、半纤维素酶、木质素酶（漆酶、邻苯二酚氧化酶、愈创木酚氧化酶）活性的变化。结果表明,培养基中含有４％￣５％的枸杞子水提物能明显促进菌丝体生长,显著增强胞内和胞外酶活性。     

不同生长条件对槐耳菌丝生长的影响

槐耳,学名槐栓菌[1](Trametes robiniophilaMurr.)。隶属非褶菌目,多孔菌科,栓菌属[2]。自然分布于河北,陕西,辽宁,湖南,广西,福建等地。在自然条件下生长于槐、洋槐等阔叶树的树干上。近几年研究发现,其所含的有效成分能调节人体机能,增强免疫力[3],抵抗和治疗多种疾病,尤其在     

野生朱红硫磺菌驯化栽培研究

营养试验、菌丝体培养和出菇温度试验、培养基酸碱度试验、出菇条件试验结果表明：朱红硫磺菌菌丝体适宜生长的温度范围为15-32℃，最适温度范围为22～28℃；子实体发生的最适温度为16～25℃，气温低于16℃，子实体色泽为淡橙色，16℃以上，子实体呈鲜橙红色；培养料适宜营养C／N为20-26／1；朱红硫磺菌菌丝体适宜酸碱度范围为pH3．0～8．0，最适酸碱度为pH4．0—6．5；朱红硫磺菌的产量与光照条件无关，但光照强度影响子实体的发生时间和色泽；朱红硫磺菌栽培原料广泛，凡栽培木腐菌的培养料均可用于栽培朱红硫磺菌。     

一株野生羊肚菌的分离鉴定及原种培养基的筛选

对野外茅草林下采集到的一株野生羊肚菌(菌株命名为Y1)进行分离纯化,通过经典分类方法结合分子生物学方法进行品种鉴定,并基于菌丝生长速度、菌丝密度及菌核数量从9种不同培养基配方中筛选最佳原种培养基。结果为:Y1的子实体菌盖呈黄色,上有凹凸不平的网格,菌柄呈白色、中空,形似羊肚菌;在显微镜下观察,菌丝体呈黄色,菌丝粗壮,菌丝结构明显,与羊肚菌属形态特征相似;ITS序列比对显示Y1与羊肚菌属中的黄色羊肚菌类群同源性高达99%,初步鉴定该野生菌株为羊肚菌Mes-19;筛选出的最优原种培养基配方为麦粒75%、土壤23%、石灰1%、过磷酸钙1%。     

红栓菌和槐耳菌菌体蛋白对硒富集的比较

主要研究了红栓菌和槐耳菌对硒的耐受力以及菌丝体蛋白对硒的富集作用。结果表明．红栓菌的生长速率明显要快于槐耳菌．蛋白质富集硒的能力比槐耳菌强．但对硒的敏感性较强。当发酵培养基中硒的添加量达到25μg／ml时．对菌丝体生长的抑制率最小。且在发酵初期添加无机硒．红栓菌蛋白质富硒能力最强．其中蛋白总硒量为255.87μg．蛋白质中硒含量为6．40μg／mg。     

双孢蘑菇褐腐病病原菌的分离及分子鉴定

对引起双孢蘑菇(Agaricus bisporus)褐腐病的病原菌进行分离和分子鉴定.分离培养褐腐病病原菌,采用CTAB法抽提其基因组总DNA,利用真菌通用引物ITS1和ITS4扩增菌株rDNA ITS区序列,扩增产物纯化后克隆转化至大肠杆菌,挑选克隆成功的菌株进行测序.测序结果在GenBank中进行同源性搜索,并下载部分具有代表性种的ITS序列,利用软件MEGA4 构建分子系统发育树,通过序列分析,鉴定出引起双孢蘑菇褐腐病的病原菌为Mycogone perniciosa.     

云芝菌丝体发酵清液的流变特性与表面张力研究

对云芝菌丝体采用摇瓶发酵培养,用旋转圆筒粘度计对其发酵清液进行流变测量表明：其流变特性随发酵过程有较大变化,其流变模型由Ｎｅｗｔｏｎｉａｎ型变为Ｂｉｎｇｈａｍ型、再变为Ｙｉｅｌｄｐｓｅｕｄｏｐｌａｓｔｉｃ型。用双毛细管最大汽泡压力法测量其表面张力,结果显示表面张力随发酵过程变化较小,流变特性变化与表面张力变化之间没有明显的相关性