不同剂量猪瘟疫苗对免疫效果的影响

猪瘟是南猪瘟病毒（HCV）引起的高度传染性疾病,该病各种年龄猪均易发生,一年四季流行．严重威胁着养猪业发展。猪瘟最有效的控制方法是疫苗免疫．为研究猪瘟疫苗不同剂量对免疫效果的影响,本人在当地某猪场进行了免疫试验。本试验设计了4种不同的免疫剂量,其目的在于通过考察猪瘟疫苗的不同剂量对免疫效果的影响,以确定适宜的疫苗剂量,为科学制定猪瘟免疫程序,提供依据。     

2种猪瘟疫苗对猪群的免疫效果评价

采用阻断ELISA检测血清抗体的方法对2种猪瘟疫苗的免疫效果进行了评价,结果显示:(1)猪瘟活疫苗A(脾淋源)的免疫效果与免疫剂量和次数没有明显关系;(2)猪瘟活疫苗B(细胞源)在加强免疫后2倍剂量的抗体保护率比单倍剂量更高;(3)随着免疫时间(80d内)的增加,2种试验疫苗的抗体保护率都在提高,但在一次免疫后20d内均不能达到较好的免疫保护效果。     

不同猪瘟疫苗对仔猪的免疫效果

选择24头断奶仔猪,随机分成4组,每组6头,其中1组猪瘟细胞苗(A苗)按5和10 mL的剂量进行注射,其他3组猪瘟脾淋苗(依次为B、C、D苗)均按1和2 mL的剂量进行注射。在免疫15 d后,分别采血、分离血清、按照猪瘟正向间接血凝试剂盒使用说明方法检测猪瘟抗体水平。检测结果显示,A苗、B苗、C苗、D苗检出的平均抗体水平与未注射之前的平均抗体水平之比分别为1∶51、1∶91、1∶114、1∶161。统计分析表明,猪瘟脾淋苗免疫效果最好,而猪瘟细胞苗和脾淋苗两者抗体水平差异不显著,但总体上使用4种疫苗免疫15 d后都能使仔猪获得良好的保护力。     

小剂量动物疫苗不同免疫剂量对免疫效果的影响

为探究不同免疫剂量的小剂量动物疫苗对免疫效果的影响,该试验选用180只3月龄绵羊,随机分为5组,每组36只,试验Ⅰ-Ⅴ组试验羊免疫剂量分别为正常剂量的1、 2、 3、 4和5倍,在相同饲养条件下按照正常免疫程序进行基础免疫后,分别用1、 2、 3、 4和5倍量的剂量接种口蹄疫疫苗,并定期测定各组试验羊的血清抗体效价和合格率。结果表明,使用不同剂量口蹄疫疫苗对试验羊进行免疫后,试验Ⅳ和Ⅴ组中血清中抗体效价显著高于前三组（P<0.05）,且试验Ⅴ组中免疫后14d时达到最高值5.22,试验羊免疫抗体合格率在第7天升至最高,其中试验Ⅴ组达97.22%,比同一时间段试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别高了83.34%、 77.78%、 55.56%和8.34%。因此,4或5倍量的口蹄疫疫苗接种拟为推荐接种剂量,而且延长了疫苗的有效保护期。     

猪口蹄疫、猪瘟、蓝耳病疫苗不同剂量免疫效果的比较

为了研究猪O型口蹄疫（FMD）、猪瘟（HC）、高致病性猪蓝耳病（PRRS）疫苗不同剂量的免疫效果,在黔东南州的宏大、万富、兴旺三个养殖场各选择35日龄仔猪120头,每个场分成6个组,每组20头,在免疫后的21天、28天、35天、42天、49天、56天、63天采血检测抗体,猪O型口蹄疫、猪瘟用正向间接血凝试验检测、猪高致病性蓝耳病用间接ELISA检测。结果表明适当增加猪O型口蹄疫、猪高致病性蓝耳病疫苗免疫剂量,可增强免疫效果,适当增加猪瘟疫苗免疫剂量,并不能增强免疫效果。     

重组白细胞介素-2对猪瘟疫苗免疫效果的影响

观察了重组IL-2对经产母猪和育成母猪猪瘟疫苗免疫效果的影响．结果表明，进行猪瘟免疫时应用重组IL-2，可以显著提高经产母猪和育成母猪猪瘟疫苗的抗体滴度水平及整齐度．     

母源抗体水平对仔猪猪瘟疫苗免疫效果的影响

为科学评价母源抗体水平对仔猪猪瘟疫苗免疫效果的影响,为仔猪猪瘟疫苗免疫程序的制定提供科学的参考依据,本试验采用阻断ELISA方法对仔猪体内的母源抗体及疫苗免疫后的免疫抗体进行检测与分析。结果显示:仔猪在21日龄时母源抗体水平较高,此时免疫猪瘟疫苗后免疫抗体开始转阳和免疫抗体水平达到峰值所需时间均较长。仔猪在28日龄时母源抗体水平下降至临界值以下,但仍维持在一定水平,此时免疫猪瘟疫苗后免疫抗体达到峰值所需时间均较35日龄和42日龄免疫时所需时间长。仔猪在35日龄和42日龄时母源抗体水平较低,此时免疫猪瘟疫苗后免疫抗体开始转阳和免疫抗体水平达到峰值所需时间较短。根据本试验结果发现,该猪场仔猪猪瘟疫苗免疫的最佳免疫时间段应为28~35日龄。     

香菇多糖对猪瘟疫苗免疫效果的影响

【目的】为了进一步提高猪瘟疫苗的免疫效果,探讨香菇多糖对猪瘟疫苗的免疫增强作用,为新型猪瘟疫苗免疫增强剂的研发提供理论依据。【方法】以不同剂量的香菇多糖作为猪瘟疫苗的稀释液免疫断奶仔猪,分别于免疫当天、免疫接种后第7、14、21、28d无菌操作采集血样,运用ELISA检测血清猪瘟抗体水平。【结果】香菇多糖可显著提高血清中的猪瘟抗体水平,第4组(0.1875mg香菇多糖)于免疫后14d和28d,猪瘟抗体阻断率平均值分别比猪瘟疫苗专用稀释液稀释组提高13.6%和12.2%;免疫合格率为100%。【结论】实验结果表明,将香菇多糖作为猪瘟疫苗稀释液稀释,可特异性提高猪体的免疫应答,香菇多糖具有显著增强猪瘟疫苗免疫效果的作用。     

猪瘟的免疫及疫苗

<正>猪瘟是当前我国猪场需要重点防控的传染病,随着养殖方式的变化和疫苗长期免疫的压力,猪瘟的发生也呈现新的变化,即主要表现为慢性温和型猪瘟和非典型猪瘟以     

县域范围内猪瘟疫苗免疫效果的监测与研究

以涟水县范围内的10家规模猪场开展了猪瘟疫苗免疫效果评价、免疫持续期检测及免疫增强剂应用效果研究,结果表明:(1)5个企业生产的猪瘟疫苗免疫效果均符合农业部规定的要求,但不同企业生产的猪瘟疫苗在免疫效力方面存在一定差异,疫苗二免后21 d抗体阳性率为77.5%~100%,抗体离散度为19.7%~47.5%;其中一个企业的猪瘟疫苗免疫后4个月抗体阳性率仍达85%,离散度为38%,符合免疫要求;(2)添加免疫增强剂的疫苗二免后21 d、2个月、3个月、4个月时的抗体阳性率分别为90.8%、94.2%、92.5%、90.0%,比疫苗组分别高5.0、12.5、13.3、15.0个百分点;离散度分别为28.5%、27.9%、28.4%、28.0%,比疫苗组分别降低6.8、8.5、8.4、9.5个百分点;免疫增强剂的免疫促进作用明显。     

猪瘟和猪蓝耳病疫苗临床免疫效果评价

为了切实做好河南省猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征疫苗在临床上使用范围、安全性、有效性的调查及免疫效果的评估工作,更好地利用疫苗免疫技术预防猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征的发生和流行,在洛阳、新郑等20个市(县、区)、40个猪场进行了猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征疫苗的临床应用,并随机抽取了其中338份血清样品,用酶联免疫吸附试验检测其抗体效价。河南省猪瘟免疫抗体合格率平均为73.67%,而猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体合格率平均为87.57%。不同厂家疫苗对猪免疫后抗体合格率不同,不同年龄段的猪免疫后抗体合格率不同,不同疫苗种类对猪免疫后抗体合格率不同,对猪免疫次数不同其抗体合格率也不同。以上情况可能与不同厂家疫苗质量不同有关。     

猪瘟脾淋苗阻断多种基因亚群带毒母猪的垂直传播

为观察猪瘟脾淋苗限断多种基因亚群带毒母猪垂直传播的效果.选择5个有代表性的规模化猪场为试验点,分别将3种猪瘟带毒母猪(Subgroup1l,Suhgroup2.2,Subgroup2.3 )随机分成试验组和对照组.试验组采用猪瘟脾淋苗2头份免疫,对照组采用猪瘟细胞苗4头份免疫.采用酶联免疫吸附试验检测带毒母猪所产仔猪的猪瘟抗原状况.接受猪瘟脾淋苗免疫的带毒母猪Subgroup2.1,Subgroup2.2和Subgroup2.3所产仔猪的抗原阳性率分别为20.75%,18.75%,20.93%.明显低于对照组母猪所产仔猪的抗原阳性率(51.02%,44.83%,48.78%)猪瘟脾淋苗免疫多种基因亚群带毒,母猪对阻断垂直传播有很好的效果.     

黄芪多糖对猪瘟活疫苗免疫效果的影响

分别用1％的黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)、猪瘟疫苗专用稀释液稀释猪瘟活疫苗并免疫猪,比较免疫后不同时间段外周血中淋巴细胞增殖活性以及血清中的猪瘟抗体、白介素2(InterLeukin 2,IL-2)、白介素4 (In-terLeukin 4,IL-4)水平,综合评价黄芪多糖对猪瘟活疫苗免疫效果的影响,为临床使用提供理论依据.     

猪瘟病毒糖基化E2蛋白和E0蛋白的协同免疫保护作用

为了研究杆状病毒表达的糖基化亚单位疫苗的协同免疫保护作用,将重组杆状病毒感染Sf9细胞制备猪瘟E2、E0重组蛋白,Western blot检测蛋白表达和糖基化情况。用重组蛋白单独或联合免疫家兔,检测血清中抗体水平变化。在首免后4周用猪瘟兔化弱毒疫苗C株攻毒家兔,监测其体温变化,并运用RT-PCR检测家兔脾脏中病毒RNA。结果表明,E2、E2+E0免疫组兔均可诱导产生高水平的抗体和中和抗体,但两组间差异不显著。攻毒后E2免疫组2/5兔出现轻热症状,1/5兔脾脏病毒阳性;E2+E0组兔均未出现发热症状,也未检测到C株病毒RNA。E0组不能诱导兔产生中和抗体,但也能提供部分保护(2/5)。可见,基于E2、E0的亚单位疫苗具有良好的免疫原性,且两者联合使用具有协同作用,有望成为新型亚单位疫苗的候选抗原。     

RT-PCR和免疫荧光抗体试验检测猪瘟病毒的比较研究

根据已发表的CSFV序列合成1对引物,以猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒株为模板,建立并优化了检测CSFV的RT-PCR方法,并与直接荧光抗体试验(DFA)进行比较,检测了15份临床疑似病料。结果如下:应用RT-PCR对CSFV兔化弱毒株RNA进行扩增,获得与预期大小相符长为509 bp的特异性目的片段,敏感性达到10 pg的CSFV-RNA,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)和猪2型圆环病毒(PCV2)进行同条件扩增均为阴性,RT-PCR产物测序结果与文献报道的CSFV不同毒株的核苷酸序列同源性达到95%~99%;15份临床疑似病料应用RT-PCR的检出率为66.7%,而应用免疫荧光试验的检出率为60.0%,二者的总符合率为80%。表明RT-PCR方法比DFA更敏感,两种方法均可用于猪瘟的快速诊断。     

高母源抗体下仔猪猪瘟初免效果检测报告

在仔猪断奶时进行猪瘟的初次免疫是许多养猪场的习惯性做法.为了研究这一做法的实际效果,在某大型种猪场选择112头在3周龄断奶的仔猪,抽取血清,用猪瘟抗体ELISA试剂盒检测抗体,之后分为2组进行对比试验.免疫组按照常规做法在3周龄时初免猪瘟疫苗,对照组不进行猪瘟免疫,在随后的4、5、7周分别测定猪瘟抗体.结果表明,仔猪在3周龄时进行猪瘟初免并没有起到提高机体猪瘟免疫水平的作用;同时,发现高水平的猪瘟母源抗体在仔猪体内能维持较长时间.因此,可以适当推迟仔猪猪瘟的初免时间,以提高免疫效率,降低仔猪应激反应.     

猪瘟病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

根据GenBank中5′端非编码区的靶序列设计了用于TaqMan荧光定量PCR的1对引物及TaqMan探针,以猪瘟活疫苗病毒为模板,在常规PCR的基础上优化了TaqMan荧光定量PCR反应条件,建立了猪瘟病毒（CSFV）TaqMan荧光定量PCR检测方法。其敏感性和特异性试验结果表明,所建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法对CSFV具有很高的特异性,其检测灵敏度可达5.03×10-2μg/μL。说明TaqMan荧光定量PCR适用于CSFV的快速检测。     

猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR快速鉴别检测方法的建立

【目的】建立猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株的RT-PCR快速鉴别检测方法。【方法】根据Gen-Bank中36株猪瘟病毒(CSFV)强毒株和兔化弱毒疫苗株的基因序列,分别设计了针对CSFV强毒和兔化弱毒疫苗株的特异性引物,建立了一种能区分CSFV强毒和兔化弱毒疫苗株的RT-PCR检测方法。【结果】建立的RT-PCR检测方法可以从CSFV强毒株和兔化弱毒疫苗株中分别扩增出大小为187和492 bp的特异性片段,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等猪源性病毒的检测结果均为阴性,说明该方法具有较好的特异性。对10份疑似猪瘟临床样品进行检测后发现,利用该方法可以从中分别检测出CSFV强毒和疫苗毒。【结论】建立了可鉴别检测CSFV强毒株和弱毒疫苗株的RT-PCR方法,为猪瘟的早期诊断及疫苗免疫猪和野毒感染猪的鉴别提供了技术参考。     

GM-CSF与猪瘟病毒E2基因共表达载体的构建及其诱导的免疫应答

为探讨粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对猪瘟病毒E2基因核酸疫苗小鼠免疫应答诱导的影响,将CSFVE2基因和GM-CSF片段插入真核表达载体pcDNA3.0内构建pcE2,pcE2-GF及pcGF核酸疫苗.动物试验时,50只雌性供试小鼠随机分为5组,即pcE2,pcE2-GF,pcDNA3.0,pcGF,生理盐水组,每组10只.0,2,4周于小鼠左后肢胫前肌进行肌注免疫,质粒量为每只每次50μg.每次免疫前和末次免疫后2周尾静脉采血收集血清,ELISA检测血清内特异性IgG水平.末次免疫后1周每组随机选3只无菌取脾,MTT法检测淋巴细胞增殖情况.结果表明,与对照组比较,pcE2和pcE2-GF第3次免疫2周后,免疫小鼠IgG抗体水平逐渐增高,淋巴细胞的转化率也明显增高,且pcE2-GF免疫组的IgG抗体水平和淋巴细胞的转化率高于pcE2免疫组.可见,细胞因子GM-CSF可有效提高猪瘟病毒E2基因核酸疫苗的免疫应答.     

猪瘟胶体金快速诊断试纸条的研制

采用柠檬酸钠还原法制备胶体颗粒,用猪瘟(CSF)抗体标记纯化,并包被在玻璃纤维膜上,另外将纯化的CSF抗体和羊抗鼠抗体包被在硝酸纤维膜上,组装成CSF快速检测条,对猪瘟病毒进行检测.结果表明:使用所研制的CSF快速检测条检测收集的70份待检样品,共检出猪瘟阳性病例26例,而经病毒分离鉴定阳性病例有28例,阳性符合率达92.8%;将5份阳性猪瘟病毒稀释后用试纸条和ELISA方法进行敏感性实验,结果表明,诊断试纸条的敏感性较高,用试纸条对鸽新城疫病毒、鸡减蛋综合症病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒进行检测,无交叉反应.