禽网状内皮组织增殖症病原检测及其抗体检测分析

运用PCR方法对8种日龄(0、21、35、75、126、168、245、315d)的400份棉拭子、水样和环境样本以及12个批次的疫苗样本进行禽网状内皮组织增殖症病毒(REV)病原检测;用间接ELISA方法对2 208份8个日龄的鸡血清样品进行REV抗体检测。结果发现,400份棉拭子、水样和环境样本REV病原检测全部为阴性,16个批次的疫苗有2个批次疫苗检测REV病原阳性。抗体分布特点是刚出壳时REV抗体滴度主要集中在3 000~10 000,占81.88%,抗体阳性率为90.58%;21~35d抗体下降明显,抗体阳性率仅为0~1.09%;70d抗体为0的鸡群占50.72%,1 077~1 500滴度之间的血清占30.43%;126~315d抗体滴度主要集中在12 000以上,占53.26%~65.94%。     

黄羽肉鸡IBV抗体消长规律及免疫基准线的建立

运用间接ELISA方法对不同日龄(0、21、35、75、126、168、245、315日龄)的黄羽肉鸡采集血清样品,分6个批次,每批次46份样本,共计2 208份血清样品进行鸡传染性支气管炎病毒(IBV)抗体检测,测定抗体消长规律,确定免疫基准线。结果显示:在0日龄时母源抗体为主,抗体滴度在2 400~4 000之间,21日龄时母源抗体基本消退,最低降至159.13,35日龄抗体缓慢上升,到168日龄达到最高峰期,一直维持到315日龄。6个批次鸡除在21日龄差异不显著,其余日龄6个批次间差异显著。抗体均匀度在21日龄最高,0日龄其次,35日龄第三,70日龄第四,245日龄第五,其余日龄差异不大,为最后。研究首次确定黄羽肉鸡抗体基准线,即0日龄在3 053~5 100之间,平均3 391.93;21日龄在93~419之间,平均214.11;35日龄在578~1136之间,平均714.63;70日龄在1 982~3 282之间,平均2 193.53;126日龄在4 465~6 252之间,平均4 428.67;168日龄在4 067~6 290之间,平均5 390.46;245日龄在5 082~6 509之间,平均5 079.98;315日龄在5 198~7 477之间,平均5 281.43。     

抗体滴度几何平均值分析在监测动物群体免疫效果中的应用

在规模养殖场动物群体血清抗体监测工作中,通过计算分析动物群体血清抗体滴度几何平均值,以及对不同批次血清样品抗体滴度的几何平均值进行比较,为科学开展动物防疫工作提供科学依据。     

重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活苗的不同免疫程序对黄羽肉鸡免疫的效果分析

将临床健康的360只黄羽鸡随机分成3组,每组120只,选择广西壮族自治区贺州市常用的3种免疫程序,用重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活苗(即H5N1Re-8株+H7N9 Re1株)免疫黄羽肉鸡,于免疫前及免疫后不同时间采集血清,用血凝和血凝抑制法检测血清中禽流感H5和H7抗体水平。结果表明,在免疫后第120 d时3种免疫程序的禽流感H5抗体阳性率分别为89.17%、83.33%和95.83%,禽流感H7抗体阳性率分别为86.67%、80.83%和92.50%,均高于农业农村部规定的70%群体阳性率,表明该疫苗免疫效果良好;3种免疫程序中在鸡20日龄和40日龄时,每组分别肌肉注射疫苗0.5 mL/只组的黄羽鸡,在免疫抗体滴度值、维持时间、抗体均匀度等三个方面均最高,说明免疫效果最好。     

抗体滴度几何平均值分析在规模养殖场动物群体免疫效果监测中的应用

在规模养殖场动物群体血清抗体监测工作中,通过计算分析动物群体血清抗体滴度几何平均值,以及对不同批次血清样品抗体滴度几何平均值进行比较,为其科学开展动物防疫工作提供信息支撑。     

北京油鸡新城疫抗体消长规律及免疫基准线的建立

试验旨在建立北京油鸡保种场的新城疫抗体基准线,对不同日龄（0、21、42、84、105、147、168、252、315日龄）的北京油鸡采集血清样品,采用血凝抑制试验进行鸡新城疫抗体检测,测定抗体消长规律,确定免疫基准线。结果显示：0日龄时雏鸡受母源抗体影响,新城疫抗体滴度在8.8～9.0 Log2;21日龄时母源抗体基本消退,降至3.5～3.8 Log2,抗体合格率为48.3%;42日龄抗体缓慢上升,达到6.8 Log2,抗体合格率为100.0%;84日龄达到9.7 Log2,105日龄达到高峰10.2 Log2;147～315日龄鸡群抗体维持在较高水平,均在8.0 Log2以上。根据上述数据得出,北京油鸡新城疫抗体基准线为0日龄在7.8～10 Log2,21日龄在2.0～5.4 Log2,42日龄在4.9～8.3 Log2,84日龄在7.7～12.0 Log2,105日龄在9.0～11.1 Log2,147日龄在8.6～11.0 Log2,168日龄在8.3～11.1 Log2,252日龄在5.4～10.3 Log2,315日龄在7.1～11.4 Log2。研究表明,建立新城疫抗体基...     

肉鸡接种传染性法氏囊病活疫苗的抗体水平检测

为了确定肉鸡进行IBD活疫苗免疫的最佳日龄,90只肉鸡随机平均分成6组,分别于10、13、17日龄进行IBD活疫苗CH/80和法倍灵免疫接种,剂量为1.5羽份.免疫后10 d、21 d用IDEXX试剂盒检测ELISA抗体滴度.同时设对照组,分别于2、10、17、24、31、38日龄用IDEXX试剂盒检测ELISA抗体滴度.试验组和对照组均于38日龄时进行新城疫(ND)抗体检测.抗体检测发现,各试验组免疫接种后10d ELISA阳性率均小于50%,免疫接种后21 d检测发现,A组和B组ELISA抗体阳性率分别为71.4%和78.5%;C、D、E、F组ELISA抗体阳性率均为100%,而且抗体滴度明显高于A、B组;对照组IBD母源抗体逐渐下降,大约每7 d为1个半衰期,至31日龄鸡群IBD抗体均为阴性;试验组和对照组38日龄ND抗体滴度无显著差异(P>O.05).结果表明,试验用鸡于13日龄进行IBD活疫苗免疫接种效果较好,两种IBD活疫苗免疫接种效果没有显著差异.     

对鸡群A/B亚群禽白血病病毒抗体ELISA检测阳性率的可靠性评估

为了评估某些批次的禽白血病病毒（ALV）抗体商品化 ELISA检测试剂盒在检测鸡群中A/B亚群禽白血病病毒（ALV-A/B）抗体阳性率的可靠性,使用同一批次试剂盒,对往年ALV-A/B抗体检测阳性率达标（＜1%）的A类鸡场及往年ALV-A/B抗体检测阳性率不达标（＞1%）的B类鸡场所送检样品进行初检,在A类鸡场初检阳性样品中挑选S/P值最高的8份阳性样品,在B类鸡场初检阳性样品中挑选S/P值最高的40份样品,再使用相同批次的试剂盒将每个初检阳性样品做3个孔的重复检测,并以上述48份样品为一抗同时做间接免疫荧光试验（IFA）,系统比较了IFA和ELISA 2种方法检测结果的一致性。结果发现,A类鸡场初检为阳性的8份样品经复检和IFA检测均变为阴性;B类鸡场4份样品（4/40）ELISA复检和IFA结果均变为阴性,36份样品（36/40）ELISA复检仍为阳性,但其中20份呈IFA阳性,16份呈IFA阴性,结果表明某些批次的试剂盒在特异性和稳定性方面存在一定问题。提示,相关企业在进行大批量样本检测时,ELISA阳性样品需结合IFA进行结果判定,以提高检测的准确性。     

小反刍兽疫活疫苗二次免疫效果评价

为研究已免疫小反刍兽疫(PPR)活疫苗的羊群经二次免疫后PPR抗体水平的变化趋势,对初免21 d羊群进行了第二次免疫,同时监测初免21 d及二免后3 d、7 d、14 d、21 d的血清中和抗体。结果显示,一次免疫羊21 d PPR中和抗体滴度平均可达5.18±2.87,阳性率为84%;二次免疫后3 d、7 d、14 d、21 d,PPR抗体呈上升趋势,平均滴度分别为5.65±2.56、6.95±1.82、7.28±1.18、8.12±1.31,阳性率分别为90%、100%、100%、100%。一免试验组21 d~323 d PPR抗体阳性率为83%,二免试验组在二次免疫7 d PPR抗体阳性率达到100%,并且维持到21 d。试验表明,活疫苗二次免疫增强了免疫效果,对已经有PPR抗体的羊进行二次免疫,可明显提升免疫抗体阳性率。     

青海省海晏县绵羊布氏杆菌病的调查

用布氏杆菌试管凝集试验(SAT),对海晏地区的绵羊进行了布氏杆菌血清抗体的检测,共检397份血清样品,检出阳性血清2份,阳性率为0.50%;其中:成年母羊血清233份,检出阳性1份,阳性率为0.43%;后备母羊血清91份,检出阳性1份血清,阳性率为1.10%;羯羊血清52份,阳性率为0%;种公羊21份,也未检出阳性。     

用间接ELISA法检测鸡痘病毒抗体的研究

建立了检测鸡痘病毒抗体的间接ELISA方法，用该法检测20份人工感染鸡血清样品，抗体阳性率为100％，康复期鸡群血清抗体阳性率为43％，人工接种弱毒疫苗65d和170d鸡群血清抗体的阳性率分别为60％、70％。经反复试验，确定了诊断抗原的制备方法和间接ELISA检测鸡痘抗体的最佳反应条件，即抗原包被浓度10．8μg／孔，待测血清最佳稀释度为1：100。     

水貂抗犬瘟热病毒中和抗体滴度的测定

为了解当前犬瘟热疫苗及免疫程序的在水貂的免疫效果,该研究在6个水貂养殖场,随机对CD疫苗免疫接种后55~60d的水貂进行心脏采血,共采集、制备84份血清。采用血清微量中和试验,测定84份水貂血清中抗CDV的中和抗体滴度。结果表明,只有1份水貂血清中抗CDV的中和抗体滴度为94,占1.2%,其余83份血清样品中的抗CDV中和抗体滴度小于10,达98.8%。     

AA肉仔鸡禽流感H5N1亚型Re-6株母源抗体跟踪监测报告

笔者跟踪监测了肉仔鸡母源抗体。结果表明,在2 d时母源抗体水平较高,集中在6log2~9log2,平均抗体滴度为7.10,抗体阳性率为100%;在8d时母源抗体水平集中在4log2~7log2,平均抗体滴度为5.70,抗体阳性率为100%;在17d时母源抗体水平主要集中在2log2~5log2,平均抗体滴度为3.19,抗体阳性率为42.31%;在24 d~37 d的3次检测结果,母源抗体水平均为≤2log2,平均抗体滴度分别为0.47、0.13和0,抗体阳性率均为0%;跟踪检测抗体的下降具有明显的线性关系。通过监测数据分析,该场雏鸡14日龄左右是最佳的AIV H5N1 Re-6免疫日龄。     

海南省规模猪场猪传染性胸膜肺炎的血清学调查

为了解海南省规模猪场猪传染性胸膜肺炎(PCP)的感染情况,采集海南省8个市县16个不同规模猪场血清样品1 286份,用ELISA方法对猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)ApxⅣ抗体进行检测,分析APP的感染情况。结果显示,1 286份猪血清样品共检出阳性样品436份,抗体阳性率为33.90%。其中,检测母猪血清326份,抗体阳性率为47.85%;检测哺乳仔猪血清324份,抗体阳性率为37.65%;检测保育猪血清316份,抗体阳性率为18.99%;检测育肥猪血清320份,抗体阳性率为30.63%。8个市县均有APP感染,其中文昌市APP抗体阳性率最高;不同规模猪场均有APP感染,其中中型规模猪场APP抗体阳性率最高;不同品种猪均有APP感染,其中杜长陆三元杂猪APP抗体阳性率最高。说明PCP在海南省部分规模猪场中普遍存在,对猪场进行PCP的控制是十分必要的。     

四种试剂盒检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗抗体的对比试验

使用国产的4种猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA诊断试剂盒(VP1-ELISA)、猪口蹄疫O型液相阻断ELISA检测试剂盒(LB-ELISA)、猪口蹄疫正向间接血凝试剂盒、猪O型口蹄疫病毒ELISA抗体检测试剂盒(O-ELISA)同时检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫后的50份血清样品,阳性率分别为98.0%、94.0%、54.0%、90.0%。同时使用农业部规定的3种试剂盒分别检测20份血清样品的抗体滴度发现,VP1-ELISA试剂盒和LB-ELISA试剂盒阳性符合率为95%,平均抗体滴度相差0.7,与IHA试剂盒符合率为55%,平均抗体滴度相差3.8,故LB-ELISA试剂盒可以用来评价合成肽疫苗免疫的抗体,而IHA试剂盒不能用来检测合成肽疫苗免疫的抗体。     

犬、猫钩端螺旋体病的流行病学调查

为了解钩端螺旋体病在犬、猫体内的感染情况,2011年,在北京地区建立了20个宠物疫病监测点,随机收集了犬、猫血清及尿液样本396份,进行犬、猫钩端螺旋体病的流行病学调查。调查结果为显微镜凝集试验检测犬、猫血清共计200份,抗体阳性的样品共有106份,阳性率为53%,其中猫血清为阳性的样品有20份,阳性率为27.8%;犬血清为阳性的样品有86份,阳性率为67.2%。RT-PCR检测犬、猫尿液共计196份,阳性的样品共有54份,阳性率为27.6%,其中猫尿样21份,阳性样品4份,阳性率为19%;犬尿样175份,阳性样品50份,阳性率为28.6%。     

南疆某规模化猪场猪瘟病原与抗体的检测分析

研究旨在调查南疆某规模化猪场免疫猪群的猪瘟抗原与抗体水平,为制定适应当地生产条件的免疫程序提供参考。试验运用酶联免疫吸附试验(ELISA)对该场免疫猪群的480份血清样品进行抗体检测与分析,并采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对采集的24份猪瘟疑似病料进行抗原检测。结果显示,对随机采集的480份血清样品进行猪瘟抗体检测,其中449份为阳性样品,阳性率为93.5%;不同类别群体中以母猪的抗体阳性率最高,为97.2%;2～4胎母猪与5～6胎母猪的抗体阳性率为97.8%;22～28 d的阳性率最低,为76.9%;36～50 d的仔猪抗体阳性率最高,为92.3%。对采集的24份猪瘟疑似病料进行抗原检测,显示均为阴性。研究表明,该规模化猪场的猪瘟免疫情况良好,未出现感染情况。     

民和县某奶牛场流产类疫病的血清学调查

本文采用虎红平板凝集试验和正向间接血凝试验对民和县某奶牛场奶牛进行了流产类疫病的血清学检测。结果从第一批次的178份血液样品中未检出布病阳性血清;在第二批次的160份血清样品中,检出衣原体阳性3份,阳性率为1.9%;从第三批次的96份血清样品中,检出弓形虫阳性48份,阳性率为50%。     

2020—2021年河北邢台及周边地区猪瘟流行病学调查与分析

为初步了解近年来河北省猪瘟（CSF）流行情况。于2020—2021年从河北邢台及周边地区采集猪血清样品共1 644份,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中猪瘟病毒（CSFV）特异性抗体阳性率,评估猪场免疫猪瘟疫苗效果;同时采集疑似感染CSF猪组织样品共306份,通过荧光定量PCR法检测样品中CSFV感染率;扩增部分样品E2基因序列,分析流行毒株基因型。结果发现,1 330份血清样品与45份组织样品分别为CSFV抗体和核酸阳性,其阳性率分别为80.90%和14.71%;2020年和2021年抗体和核酸阳性率分别为76.33%、85.13%和18.69%、12.56%。4个阳性样品E2基因序列扩增与分析结果发现,4个毒株的E2基因核苷酸序列与GenBank收录的CSFV 2.1d亚型同源性最高。以上研究表明,河北省猪群CSF免疫效果较好,但CSFV仍然广泛流行于河北各地,且2.1d可能是主要的基因亚型。     

新疆部分地区绵羊弓形虫抗体监测与分析

<正>为查明新疆北疆部分地区绵羊弓形虫感染情况,在伊犁、阿勒泰和昌吉地区4个专业养殖场和7户散养户共采集12批次403份绵羊血清样品,采用间接ELISA和IHA方法进行弓形虫抗体监测。结果表明,403份样品中共检出14份阳性样品,阳性率为3. 5%;伊犁、阿勒泰和昌吉地区阳性率分别为