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为探明艾纳香母株与分株苗间左旋龙脑含量的稳定性,同时筛选优良单株,选择10个分株苗无性系分别在3个不同地的土壤(澄迈、儋州和临高)进行盆栽试验,采用GC法测定左旋龙脑含量,应用相关分析和方差分析等对母株和分株苗间差异进行统计.结果表明:艾纳香母株和分株苗间左旋龙脑含量呈极显著相关(P＜0.01);分株苗左旋龙脑含量受种质影响显著,其方差贡献率达69.65％,且在3种土壤下的广义遗传力(重复力)均达0.8以上;分株苗C33-3、C5-1和C5-4的左旋龙脑含量较高,均大于14 mg/g,可作为较优材料进行生产扩繁.     

不同生长期艾纳香l-龙脑和总黄酮含量变化

为了艾纳香适宜采收期的确定提供理论依据,对不同月份和不同株龄的艾纳香,采用GC法测定l-龙脑含量,紫外可见分光光度计法测定总黄酮含量。结果表明:艾纳香l-龙脑含量以10月的最高,8-12月份的无显著性差异(P0.05),3年生艾纳香中的l-龙脑含量最高,与1年生及更小株龄的艾纳香存在显著差异(P0.05);总黄酮含量以6月、8月与11月的较高,2年生艾纳香中总黄酮含量最高,且与其他株龄的艾纳香存在显著差异(P0.05)。以l-龙脑为指标提取艾片时,9-12月中旬都可采收,以10月最佳;以总黄酮为指标在11月份采收较好。     

钙元素对冬季迟缓期的艾纳香生物量和有效成分含量的影响

以一年生艾纳香种子苗为实验材料,用一水合氯化钙提供钙元素,在冬季艾纳香生长迟缓期进行3次施肥,测定艾纳香的株高、地径、叶长和叶宽等生长指标以及生物量.采用紫外可见分光光度法测定艾纳香不同部位中总黄酮的相对含量,并计算总黄酮的绝对含量;采用GC测定艾纳香叶片中1-龙脑的相对含量,并计算1-龙脑的绝对含量.结果表明:钙元素极显著增加了冬季生长迟缓期的艾纳香叶、茎和根生物量,其中5g/L钙处理组的艾纳香叶生物量极显著高于其他3个处理组,10、15 g/L钙处理下的叶生物量极显著高于空白对照组(CK),分别是对照的3.03倍和2.65倍.钙元素的施加抑制了艾纳香不同部位总黄酮相对含量的积累,然而显著增加了总黄酮绝对含量.5 g/L钙处理组的1-龙脑相对含量和绝对含量最高,分别为0.22％和0.22 g,与10、15g/L钙和CK组相比,分别增加了37.50％、22.22％、37.50％和100％、100％、450％.在冬季艾纳香生长迟缓期施加钙元素可以显著促进艾纳香叶、茎和根生物量的积累,提高总黄酮和1-龙脑的绝对含量.     

钙元素对冬季迟缓期的艾纳香生物量和有效成分含量的影响（英文）

以一年生艾纳香种子苗为实验材料,用一水合氯化钙提供钙元素,在冬季艾纳香生长迟缓期进行3次施肥,测定艾纳香的株高、地径、叶长和叶宽等生长指标以及生物量。采用紫外可见分光光度法测定艾纳香不同部位中总黄酮的相对含量,并计算总黄酮的绝对含量;采用GC测定艾纳香叶片中l-龙脑的相对含量,并计算l-龙脑的绝对含量。结果表明:钙元素极显著增加了冬季生长迟缓期的艾纳香叶、茎和根生物量,其中5 g/L钙处理组的艾纳香叶生物量极显著高于其他3个处理组,10、15 g/L钙处理下的叶生物量极显著高于空白对照组(CK),分别是对照的3.03倍和2.65倍。钙元素的施加抑制了艾纳香不同部位总黄酮相对含量的积累,然而显著增加了总黄酮绝对含量。5 g/L钙处理组的l-龙脑相对含量和绝对含量最高,分别为0.22%和0.22 g,与10、15g/L钙和CK组相比,分别增加了37.50%、22.22%、37.50%和100%、100%、450%。在冬季艾纳香生长迟缓期施加钙元素可以显著促进艾纳香叶、茎和根生物量的积累,提高总黄酮和l-龙脑的绝对含量。     

镁对两年生艾纳香生物量、抗氧化酶活性及有效成分积累的影响

以两年生艾纳香苗为实验材料,用七水合硫酸镁提供镁素,研究镁对艾纳香药材生物量、3种抗氧化酶活性、总黄酮和l-龙脑百分含量和单株产量。结果表明,镁显著增加了艾纳香生物量。与其他处理组相比,5、10和80 mg/m L镁处理的SOD和CAT活性较高,而POD活性较低。不同浓度的镁处理显著提高了艾纳香中总黄酮百分含量、总黄酮单株产量以及l-龙脑单株产量,其中5、10和80 mg/m L镁处理组最显著。而10 mg/m L镁处理下的l-龙脑百分含量最高。因此,综合以上结果,10 mg/m L镁处理为两年生艾纳香施用的最佳浓度,能显著提高药材生物量和药材质量。     

锰元素对冬季迟缓期的艾纳香幼苗生物量和有效成分含量的影响

以一年生艾纳香种子苗为试验材料,在冬季艾纳香生长迟缓期3次施用锰元素,研究锰元素对冬季生长迟缓期的艾纳香生物量和有效成分含量的影响.结果表明:在冬季艾纳香生长迟缓期,施用锰元素可以显著促进艾纳香的生长和生物量的积累,显著提高总黄酮和l-龙脑的绝对含量.锰元素极显著提高了冬季生长迟缓期艾纳香的株高、地径、叶长和叶宽等生长指标,进而导致艾纳香叶、茎和根生物量的增加,其中以4 g/L Mn处理的艾纳香叶生物量最高,极显著高于其他3个处理;锰元素对艾纳香不同部位中总黄酮相对含量和叶片l-龙脑相对含量提高无促进作用或影响不显著,但是极显著增加了其绝对含量的积累,其中4 g/L Mn处理下叶总黄酮绝对含量最高,其次是1、10 g/L Mn处理,分别是对照的7.62、5.5、4.08倍;4g/L Mn处理下叶片l-龙脑绝对含量显著高于其他处理.     

气质联用法对艾纳香中龙脑含量的测定

以艾纳香(Blumea balsamifera L.)组织培养过程中的愈伤组织、组培苗以及罗甸野生苗为研究对象,以乙醇为溶剂提取艾纳香中的龙脑,运用气质联用法分别测定艾纳香组培愈伤组织、组培苗、罗甸野生苗中龙脑的相对百分含量.结果表明,艾纳香组培愈伤组织中不含龙脑,组培苗、罗甸野生苗中龙脑的含量分别为3.216 7和3.6200 mg/g.该方法简便、精密度和重复性良好,龙脑在0.020 0～0.060 0 mg/mL内线性关系良好.组培苗和罗甸野生苗的添加回收率分别为97.11％和97.78％.     

水杨酸和茉莉酸甲酯对艾纳香叶片左旋龙脑与总黄酮含量的影响

以艾纳香为试材,用水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(各设浓度10、1、0.1、0.01 mmol/L)分别喷施艾纳香叶片(嫩叶、成熟叶、老叶),以喷施去离子水为对照,探索不同浓度SA、茉莉酸甲酯(MeJA)对艾纳香叶片中左旋龙脑(L–龙脑)和总黄酮含量的影响效果。结果表明:除10 mmol/L MeJA处理外,其他浓度的MeJA处理艾纳香嫩叶后,L–龙脑含量均在72 h达到最大值;用1.0 mmol/L MeJA处理成熟叶,L–龙脑在72 h达到最大值(3.043 mg/g),显著高于对照;除0.01 mmol/L MeJA处理外,用其他浓度的MeJA处理嫩叶,总黄酮的含量均在48 h达到最大值;用1.0 mmol/L MeJA处理老叶,总黄酮含量在72 h达19.246 mg/g;用0.01 mmol/L SA处理成熟叶、老叶,L–龙脑的含量在72 h时分别为2.418、2.034 mg/g,与对照差异达显著水平;用0.1 mmol/L SA处理嫩叶、成熟叶、老叶,总黄酮含量在24 h较高,分别为6.287,8.172、11.827 mg/g。综合本研究结果,1 mmol/L的MeJA对艾纳香叶片中L–龙脑和总黄酮的合成均具有较好的促进作用,且在处理后72 h艾纳香叶片中L–龙脑和总黄酮含量相对较高;0.01 mmol/L SA对艾纳香叶片中L–龙脑和总黄酮含量的积累具有较好的效果,处理后,艾纳香叶片中L–龙脑含量在72 h较高,总黄酮含量在24 h较高。     

氮磷钾配施对艾纳香生长及产量、品质的影响

在大田条件下,采用L_9(3~3)正交试验设计,研究氮、磷、钾配施对艾纳香生长、产量和主要有效成分的影响。结果表明,不同施肥水平对生长期间艾纳香茎粗、叶片数的影响不明显,对株高、分枝数、分生苗数的促进作用较为明显;N、P_2O_5、K_2O施用量分别为0、400、200 kg/hm~2和100、200、200 kg/hm~2时,艾纳香单株鲜质量、单位面积产量相对较大,挥发油、左旋龙脑含量相对较高,总黄酮含量也较高。结合产量与氮磷钾肥料效应模拟方程得出,N、P_2O_5效应的最大值分别为氮肥施用量为161.32 kg/hm~2,磷肥施用量为184.72 kg/hm~2,与N∶P_2O_5∶K_2O使用量分别为100、200、200 kg/hm~2接近,可实现艾纳香的优质高产。     

氮磷钾配施对艾纳香产量及品质的影响

为给艾纳香大规模栽培合理施肥提供技术支撑和理论依据,采用"3414"试验设计和GC色谱法研究不同氮磷钾配施对艾纳香产量和品质的影响。结果表明:氮磷钾配施可以显著提高艾纳香的产量,并有利于l-龙脑相对含量的积累。其中,以N_2P_2K_2(N 16.71kg/667m~2,P_2O_5 24.91kg/667m~2及K_2O12.40kg/667m~2)的产量最高,其生物产量和经济产量分别为1 325.66kg/667m~2和133.35kg/667m~2,有效化学成分l-龙脑相对含量为3.84mg/g,仅次于N_2P_2K_1(N 16.71kg/667m~2,P_2O_524.91kg/667m~2及K_2O6.20kg/667m~2)的4.38mg/g。氮磷钾3种肥料配施其互作效应依次为NPKNKNPPK,氮素对产量影响最大,其次是钾素和磷素。综合考虑艾纳香产量和l-龙脑的相对含量以及氮磷钾配施的肥料利用率,推荐施肥水平为N_2P_2K_2(N∶P∶K=1∶1.49∶0.74)。     

艾纳香产量和有效成分含量对氮素营养的反应

对艾纳香氮肥施用量试验结果表明,施氮可提高艾纳香原料产量和药用有效成分含量。尿素用量25kg／667m2 可达生物和原料产量的峰值,6～10kg／667m2可达有效成分含量的峰值,20kg／667m2可达有效成分产量的峰值;氮素用量过多,产量和有效成分含量均下降,经济系数和氮的有效性降低。有效成分中L-龙脑与其他成分(艾纳香油)的比例也可施氮调控。     

贵州艾纳香的主要成分质量测定

为贵州艾纳香药材的质量标准的修改和制定提供基础数据,按照《中国药典》2015版中附录及相关方法,对艾纳香药材进行水分、总灰分和酸不溶性灰分鉴别;采用薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)对其进行定性定量分析。结果表明:不同产区艾纳香药材的水分含量不超过14%,总灰分不高于14%,酸不溶性灰分不高于3%;药材提取液TLC斑点清晰,分离度好;艾纳香素含量在6.375～38.25μg/mL,线性范围良好,平均回收率97.93%,RSD为2.63%(n=6)。结论:艾纳香的质量测定稳定、准确、可靠。     

艾纳香种苗等级划分及其与植株产质量的相关性

为了对艾纳香种苗等级标准的制定及高产栽培提供依据,以产自贵州艾纳香主产区罗甸、兴义的种苗为材料,以株高、叶长和地径为分级指标对种苗进行分级,根据不同等级种苗的田间生长情况,测定分析其植株产量和质量。结果表明:种苗可划分为3个等级,I级苗:株高≥22.5cm,叶长≥24.5cm,地径≥6.9mm;II级苗:株高≥15.0cm,叶长≥16.1cm,地径≥5.3 mm;III级苗:株高≥11.3cm,叶长≥13.8cm,地径≥4.7mm。I级种苗成药期植株的叶鲜重、干重、叶长、叶片数等生长指标均超过其他等级种苗,田间长势较好,产量高,药材的外部性状优;种苗等级与药材艾粉含量无线性相关,但与艾纳香叶产量呈正相关,生产上建议选用株高≥22.5cm,叶长≥24.5cm,地径≥6.9mm的苗作为种苗。     

艾纳香属药用植物的化学分类学

艾纳香作为传统的民族药已有悠久的历史,在苗族、壮族等少数民族流传甚广,其具有抗炎、杀菌等功效。据记载艾纳香属中有10到15个种可以入药,为了加强对其合理的使用,了解10种艾纳香属药用植物中的共有或特征性化学成分与植物类群间的关系,探讨其演化规律,该文采用薄层层析(TLC)法,分别以甲醇为提取液,二氯甲烷∶丙酮=(12∶1)为展开剂和乙酸乙酯为提取液,石油醚-乙酸乙酯-氯仿(3∶1∶0.5)为展开剂进行成分展开,进行了初步的化学分类研究,并以TLC图谱中斑点的Rf值为依据,采用SPSS系统进行聚类分析。TLC结果表明:10种艾纳香属药用植物中的化学成分较多且存在差异,薄层色谱图(甲醇提取物)中Rf=0.4处斑点出现较为集中,其中以艾纳香中所含的化学成分较多,推测艾纳香属药用植物中的基源物种。且部分样品在此色谱条件下显现出易于识别的特征性斑点,可用于艾纳香品种的鉴识。该研究初步确定了这几种艾纳香属药用植物的亲缘关系,为寻找到艾纳香的药用替代品及后续艾纳香属药用植物的研究奠定了基础。     

贵州省艾纳香种植基地土壤重金属污染现状评价

[目的]对贵州省罗甸县艾纳香种植基地土壤中5种重金属（Pb、Cd、Hg、As、Cu）污染现状进行评价。[方法]选用《土壤环境质量标准》（GB15618-1995）二级标准和黔南州土壤重金属背景值作为土壤评价标准,采用综合污染指数法与尼梅罗综合指数法进行污染现状评价。[结果]贵州省艾纳香种植基地土壤重金属含量水平差异较大,变异系数为13.70%~65.79%,均达国家土壤环境质量标准（二级） 综合污染指数与尼梅罗综合指数结果表明,调查区域内土壤未被污染。但结合艾纳香对土壤中重金属的吸收富集特征发现,土壤中重金属Pb、Cu、Cd对艾纳香均存在污染。[结论]土壤重金属污染的评价仅用总量进行分析是不够的,植物种类及土壤中重金属形态的变化也应考虑在内。     

正交实验法优化艾纳香提取废渣中 总黄酮提取工艺

采用三氯化铝显色,芦丁作对照品,紫外分光光度法测定总黄酮含量,对艾纳香叶中总黄酮提取因素进行研究,采用单因素筛选结合L9(34)正交试验法优选艾纳香总黄酮提取参数。结果表明,提取艾纳香黄酮因素影响大小为:料液比(C)提取温度(B)提取时间(D)提取溶剂乙醇体积分数(A)提取次数,最佳提取工艺参数为:60%乙醇、温度90℃、料液比1∶20、提取3 h,总黄酮百分含量为2.29%。经提取验证,该提取工艺对艾纳香总黄酮资源化开发与利用有一定的技术参考价值。     

艾纳香化学成分在不同组织中的分布

为探明营养生长期与生殖生长期艾纳香主要化学成分在不同组织中的分布规律,为艾纳香适宜采收部位的确定提供理论依据,采用GC法测定l-龙脑含量,紫外可见分光光度法测定总黄酮含量,并分析不同组织部位化学成分含量的变化差异。结果表明:1)l-龙脑含量,在营养生长期,嫩叶中的含量最高,为6.25mg/g,与其他组织部位呈显著性差异(P0.05),但功能叶、老叶和枯叶中的含量也较高,分别为5.11mg/g、4.80mg/g和4.33mg/g;生殖生长期,嫩叶中l-龙脑含量最高,为2.30mg/g,与其他6个组织部位呈显著性差异(P0.05),其中侧枝、花枝、花蕾和花朵中未检测到l-龙脑。2)总黄酮含量,营养生长期,功能叶的含量最高,为97.56mg/g,与嫩叶、老叶无显著性差异,但与嫩梢、嫩茎、枯叶则呈显著性差异(P0.05)。生殖生长期,功能叶中总黄酮含量最高,为111.39mg/g,与花蕾、嫩叶无显著性差异,但三者与枯叶、侧枝、花枝都呈显著性差异(P0.05)。因此,以l-龙脑为指标,用于提取艾片时,宜选择营养生长期采收,并采收全部叶片(包含枯叶、老叶、功能叶和嫩叶)及嫩梢;以总黄酮为指标,营养生长期与生殖生长期都较为合适,应采集老叶、功能叶和嫩叶。     

空间诱变甜椒M_3代果实营养品质的变异分析

试验结果表明:空间诱变甜椒的3个营养品质性状(果实维生素C含量、可溶性固形物含量和糖酸比)在M3代的变异趋于稳定,株系内的株间变异均小于株系间变异,果实维生素C含量和糖酸比在群间的差异不显著,可溶性固形物含量在群间的差异显著;维生素C含量与可溶性固形物含量呈极显著正相关,与糖酸比呈极显著负相关,可溶性固形物含量与糖酸比呈显著正相关。宜筛选单株果实维生素C含量高、可溶性固形物含量和糖酸比适中的株系。优选的株系为A6、A7、C7、B2、B6、B1、A5、C5、B7、C4、A3、B5、A4和C6。     

羟丙基-β-环糊精包合艾纳香挥发油的制备工艺研究

为了制备艾纳香挥发油-羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)包合物,并考察包合物的包合效果及包合后的质量。本研究采用饱和水溶液法制备艾纳香挥发油-HP-β-CD包合物,运用正交试验法对其制备工艺进行优选,分别考察艾纳香挥发油包合物的产率、油利用率、含油率3个指标,并根据上述指标计算其综合评分,优选出最佳工艺条件,最后采用薄层色谱(TLC)和紫外扫描(UV)等方法对包合前后艾纳香挥发油的性质进行考察和分析。结果显示,HP-β-CD将艾纳香挥发油包合的最佳工艺条件为:包合温度50℃、HP-β-CD与艾纳香油的比例8∶1(g∶ml)、包合时间3 h。最佳包合工艺所制备的包合物包合率为83%,综合评分为72.33。TLC和UV等表征结果证明了包合物的生成。本实验研究表明:优选出的艾纳香挥发油-HP-β-CD包合工艺合理、可行,这为艾纳香挥发油进一步的制剂开发提供了数据参考。     

草莓栽培技术

1 育苗 草莓的匍匐茎、根状茎、茎尖和种子都可作繁殖材料,生产上最常用匍匐茎分株繁殖.在果实采收后,将母株隔行间除,给匍匐茎苗留出空地.及时疏松土壤,清除残根枯叶和杂草,当匍匐茎大量发生后,要追施速效肥料,保持土壤湿润,用以恢复母株生长势,促使抽生的匍匐茎生长.