嗜碱假单胞菌Ej2对稻瘟病的防治效果及对水稻内源激素的影响

[目的]明确水稻内生菌嗜碱假单胞菌(Pseudomonas alcaliphila)菌株Ej2对镰孢菌(Fusarium spp.)等病原菌的抑菌效果,重点研究对稻瘟病的防治作用及对水稻内源激素的影响,为稻瘟病菌(Magnaportheoryzae)杀菌剂的研发提供新的生防菌资源.[方法]嗜碱假单胞菌菌株Ej2分离于水...     

5种杀菌剂对短短小芽孢杆菌TW-2菌体及芽孢的影响

采用平皿计数法和抑菌圈法研究了5种化学杀菌剂(春雷霉素、三环唑、戊唑醇、稻瘟酰胺和咪鲜胺)对稻瘟病生防菌短短小芽孢杆菌TW-2菌株(Bacillus pumilus)菌体和芽孢存活的影响。结果表明:供试的5种化学杀菌剂在高浓度下(2 000 mg/L)可以完全抑制短短小芽孢杆菌TW-2菌株菌体和芽孢的存活,而低浓度下(0.32~8.00mg/L)对菌体和芽孢的存活影响较小;在5种化学杀菌剂中春雷霉素对短短小芽孢杆菌TW-2菌株菌体和芽孢存活影响最大,其次依次是咪鲜胺、三环唑、戊唑醇、稻瘟酰胺。研究结果显示:稻瘟病生防菌短短小芽孢杆菌TW-2菌与供试的5种化学杀菌剂分别混用防治稻瘟病,这5种杀菌剂的浓度应在0.32 mg/L以下,否则会影响生防菌的效果。     

拮抗真菌菌株BOS-013对稻瘟病菌的抑制作用

[目的]为寻找对水稻稻瘟病的有防治作用的有益微生物及其代谢产物,研究放线菌BOS-013菌株发酵液对水稻稻瘟病菌的抑制作用。[方法]以水稻稻瘟病菌作为目标指示菌,采用杯碟法和滤纸片法测定BOS-013菌株发酵液及其不同溶剂提取物的抑菌活性。[结果]研究结果表明,含菌量为4×108 cfu/ml的BOS-013菌株发酵液对水稻稻瘟病菌的抑制率为92.0%±0.5%;该发酵液经高温、高压灭活后对水稻稻瘟病菌仍有抑制作用,抑制率为60.0%±0.5%。发酵液经非极性CAD-45型大孔吸附树脂吸附、60%乙醇溶液洗脱后,其抑菌活性很高,抑菌圈直径达33.0 mm。[结论]BOS-013菌株发酵液水稻稻瘟病菌有显著的抑制作用;该研究结果为进一步明确BOS-013菌株发酵液对水稻稻瘟病菌的抑制作用机理及其实际应用奠定了基础。     

生防菌株2LN3对水稻纹枯病的防效和产量构成的影响

[目的]进一步验证生防菌株2LN3对水稻纹枯病的防治效果。[方法]通过大田生产试验研究生防菌剂2LN3、生防菌剂2LN3+井冈霉素、井冈·腊芽菌、井冈霉素和清水对照5个处理对水稻纹枯病的防效和产量构成的影响。[结果]生防菌剂2LN3+井冈霉素对水稻纹枯病的防治效果较好,2次用药后第7和第15天的防效分别达60.85%和72.16%,2次调查防效均超过生防菌剂2LN3、井冈·腊芽菌和井冈霉素,而单用生防菌剂2LN3则表现为药效持续时间较短,在2次用药后的第15天防效比井冈霉素略高,但与井冈·腊芽菌相比防效则降低了6.5%;与井冈霉素相比,生防菌株2LN3具有促生作用,能显著提高有效穗数、实粒数、结实率和千粒重;喷施生防菌剂2LN3和生防菌剂2LN3+井冈霉素都具有一定的增产作用,与井冈霉素相比分别增产3.8%和12.1%,均达到显著性差异。[结论]将生防菌剂2LN3和井冈霉素复配可替代井冈霉素应用于实际生产中来提高对水稻纹枯病的防效。     

拮抗细菌对6种植物病原菌的抑菌作用

分别就拮抗细菌生防菌2[短小芽胞杆菌（Bacillus pumilus)]和生防菌1[枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis)]对稻瘟病菌（Magnaporthe grisea)、芦笋茎枯病菌（Phomopsisi asparagi)、尖镰刀菌（Fusarium oxysporum)、玉米小斑菌（Bipolaria maydis)、百合灰霉病菌（Botrytis elliptica)和青枯病菌（Ralstonia solanacearum )6种植物病原菌的抑制作用进行了测定，结果发现，生防菌2发酵液50倍稀释液对稻瘟病菌分生孢子萌发的抑制率为62.6%，100倍稀释液则为55.3%，对分生孢子附着胞形成的抑制作用不明显；将稻瘟病菌和生防菌2发酵液同时接入燕麦培养基中，生防菌2对稻瘟病菌菌落的生长有明显的抑制作用；生防菌2对芦笋茎枯病菌、尖镰刀菌、玉米小斑菌和百合灰霉病菌分生孢子萌发的抑制作用不明显；生防菌1对青枯病菌生长有明显的抑制作用，而生防菌2对青枯菌抑制作用不明显。     

生防菌诱导水稻抗病性相关酶活性的变化

将生防菌bio—2和稻瘟病菌（Magnaporthe grisea）接种于正处于分蘖期的水稻植株上,测定其与植物抗病有重要相关的苯丙氨酸解氨酶（Phenlyalanine ammonia lyase PAL）、过氧化物酶（Peroxidase,POD）和多酚氧化酶（Polyphenoase,PPO）活性的变化．结果显示,接种处理后,POD活性明显高于对照,在接种后第5d。稻瘟病菌、稻瘟病菌＋生防菌bio-2处理组的POD活性达到最大值,但到接种后第8d开始略低于对照;稻瘟病菌＋生防菌bio-2、生防菌bio-2处理组,其叶片内的PAL活性仅在第1—2d内高于对照,其后均低于对照;在稻瘟病菌＋生防菌bio-2、生防菌bio-2处理组,其PPO活性除在第2d高于对照外,其余均低于对照．     

具有拮抗作用的石榴内生菌的分离与鉴定

[目的]筛选对石榴枯萎病菌具有拮抗作用的内生生防菌.[方法]从采自云南蒙自的石榴叶片中分离并获得5株内生拮抗菌,通过测定其对甘薯长喙壳(Ceratocystis fimbriata)的抑菌能力筛选出1株具有高效拮抗作用的生防菌株Y2,对其进行抑菌谱测定及鉴定.[结果]经生理生化和16S rDNA序列测定表明Y2为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).[结论]试验结果为石榴枯萎病的防治提供了理论依据.     

一种抑制稻瘟病菌生长的菌株鉴定

[目的]鉴定真菌M1的种类,明确其对稻瘟病菌的抑制作用.[方法]通过真菌M1的ITS测序,序列比对鉴定真菌种类.采用平板对峙培养和M1发酵液培养稻瘟病菌,分析真菌M1对稻瘟病菌菌株Y92-66b的拮抗作用,计算抑制率.[结果]ITS序列比对确定该真菌M1为蜜环菌(Armillaria novae-zelandiae),对稻瘟病菌菌株Y92-66b具有显著的抑制作用.密环菌与稻瘟病菌平板对峙培养其抑制率为48.80％;当发酵液浓度达50％时,稻瘟病菌菌株Y92-66b的菌丝生长抑制率为78.79％.[结论]蜜环菌对稻瘟病菌菌株Y92-66b具有显著的抑制效果,可作为稻瘟病生防菌的候选真菌.     

生防菌对稻瘟病害控制的研究进展

稻瘟病是水稻种植过程中危害性极强的病害之一,常见的防治措施包括化学农药防治、种植方式管理、抗病品种筛选等.稻瘟病病菌具有易突变的特点,使抗病品种的抗病效果持久度较低,而农药的不合理施用等原因又使其逐渐产生耐药性,导致防治效果不断降低,同时还给生态环境和人体健康带来巨大危害.在这样的背景下,安全高效的微生物防治方法迅速发展起来,成为防治稻瘟病的有效措施.对稻瘟病害的病原菌、症状、诱发因素和防治进行综述,重点论述了生防菌分类及其生防机制.最后,基于生防菌的研究进展和应用,对生防菌在稻瘟病防治上存在的问题和未来发展方向进行展望.     

多粘类芽孢杆菌TC35的鉴定及对辣椒疫病的田间防效

[目的]鉴定生防菌株TC35,评价其对辣椒疫病的防治效果。[方法]克隆gyr B基因序列鉴定生防菌种类,采用对峙培养法测定抑菌谱,通过田间药效试验研究其防治效果。[结果]生防菌TC35鉴定为多粘类芽孢杆菌,与辣椒疫霉的抑菌带为22 mm,对辣椒疫病的防治效果为84.3%~92.1%。[结论]多粘类芽孢杆菌TC35发酵液对辣椒疫病有良好的防治效果,可应用于辣椒疫病的防治。     

嘧菌酯·苯醚甲环唑复配剂对稻瘟病和水稻纹枯病的防治效果

[目的]筛选一种双重防治稻瘟病和水稻纹枯病的安全、高效、经济的替代药剂。[方法]通过田间药效试验研究嘧菌酯和苯醚甲环唑复配剂对稻瘟病和水稻纹枯病的防治效果。[结果]相比常用药剂75%肟菌·戊唑醇WG和20%三环唑WP,20%嘧菌酯和12.5%苯醚甲环唑混配剂的防治效果增加10%左右。[结论]嘧菌酯和苯醚甲环唑复配剂安全性好、防效高,可推广示范,建议使用剂量为750 m L/hm~2。     

植物枯萎病拮抗细菌KL-1菌株的分离及鉴定

[目的]筛选、鉴定植物枯萎病菌拮抗细菌,为植物枯萎病生防制剂的研究奠定基础。[方法]采用对峙培养法筛选对植物枯萎病菌具有良好抑制作用的生防细菌,通过Biolog细菌自动鉴定系统和16SrDNA序列分析法鉴定其分类地位,并研究该菌株对棉花和小鼠的安全性。[结果]从棉花根际土壤中分离出的12株细菌中,有5株对多隔镰刀菌、香石竹尖孢镰刀菌、棉花枯萎病菌具有拮抗活性;其中,KL-1菌株对3株目标病原菌的抑菌活性分别达69.09%、80.78%、78.89%。Biolog细菌自动鉴定系统和16SrDNA序列分析法鉴定结果表明,KL-1菌株为解淀粉芽孢杆菌;生物安全性初步测定结果表明,KL-1菌株对棉花和小鼠安全无毒。[结论]解淀粉芽孢杆菌KL-1菌株具有对多种植物枯萎病菌的抑菌活性,且对棉花和小鼠安全无毒,是一株具有研究和开发潜能的生防菌株。     

水稻离体叶抗稻瘟病鉴定方法研究

[目的]筛选一套较为完善的适宜于水稻稻瘟病抗性叶片离体鉴定的方法。[方法]从保绿剂对离体叶保绿效果的影响、保绿剂对孢子在离体叶上萌发率的影响、不同孢子接种方法对叶片发病的影响和孢子悬浮液浓度、温度对稻瘟病病原菌染叶片效果的影响几方面对水稻稻瘟病抗性叶片离体鉴定方法的影响因素进行了研究。[结果]以6-BA作为保绿剂,浓度在50-75mg／ml范围内保绿效果较好,叶片几乎全部保绿。接种方法以喷雾法与液滴法较好,孢子萌发率较高,分别达到了84．7％、86．5％,浸泡法不适合叶片离体鉴定。温度为28℃时,接种用孢子悬浮液的浓度1×10^5～2×10^5个／ml较为合适。叶片发病期间温度低于28℃,潜育期有所延长。[结论]得到了行之有效的水稻抗瘟性叶片离体鉴定方法。     

四霉素诱导水稻对稻瘟病的抗性研究

[目的]探讨四霉素诱导抗性的作用及作用机理,为其在生产实践中更好地应用提供依据。[方法]以稻瘟病为防治对象,研究四霉素对水稻叶片苯丙氨酸解氨酶（PAL）、过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）、超氧化物歧化酶（SOD）的影响。[结果]喷施四霉素后,水稻叶片PAL、POD、PPO活性明显升高,其中喷药24h后接种处理的酶活升高最明显,各处理间SOD酶活无明显差异。[结论]四霉素不仅具有较强的抑菌作用,还可能通过诱导水稻防御酶系活性升高而增强抗病性以防止病菌侵染。     

醉制过程中气单胞菌控制的试验观察

[目的]研究醉制辅剂对河蟹源性气单胞菌等致病菌的杀菌效果。[方法]采用从患病河蟹体内分离的温和气单胞菌、嗜水气单胞菌人工感染鲫鱼,以加饭酒和醉制辅剂对鱼肉做杀菌试验。[结果]结果表明,醉制辅剂以一定浓度(30%~40%)与加饭酒同时加入醉制品中,能在较短的时间内(2~4 h)有效地杀灭气单胞菌。[结论]醉制辅剂与加饭酒对河蟹源性致病性气单胞菌的联合杀菌作用,在一定的条件下,效果高于两者单独作用结果。     

病健人参根际土壤真菌种类及数量的研究

[目的]深入了解人参根际土壤中的病原真菌种类及其分布规律,分离获得有益真菌种类资源,为人参土传病害防治提供生防菌资源。[方法]统计健康人参植株与根腐病人参植株根际土壤中的真菌种类及数量并分析其变化情况。[结果]各地区人参根际土壤中的真菌种类不完全一致,分离出了18个属的52种真菌。青霉、曲霉是土壤中的常见真菌,镰刀菌Fusarium、柱孢菌Cylindrocarpon是部分人参根腐病的病原菌。[结论]根腐病人参根际土壤中的病原菌(镰刀菌、柱孢菌)及拮抗菌(粘帚霉、枝顶孢)种类和数量均有所增加。     

可食性抗菌膜的研制及其在草莓保鲜中的应用

[目的]研制出可用于草莓的抑茵保鲜的可食性果蔬保鲜抗菌膜.[方法]先用浓度为80％的乙醇溶液分别提取大黄、地榆、丁香和肉桂,然后进行中草药抑茵试验探索其对草莓灰霉菌的抑菌效果;再以膜的力学性能、吸水率、水蒸气透过率以及抑菌性能为依据,分别确定海藻酸钠的浓度、交联剂的种类、交联剂溶液的浓度、交联时间和丁香与海藻酸钠的比例;最后,将可食性抗菌膜处理草莓后,分别测定草莓腐烂率、失重率、呼吸强度和维生素等指标的变化,来探索抗茵膜的保鲜效果.[结果]试验表明,丁香和肉桂具有广普抑菌性,其中丁香的抑菌性最佳,尤其对草莓灰霉菌的抑菌效果最好;海藻酸钠的浓度为2％,交联剂为4％的CaCl2、交联20 min以及丁香与海藻酸钠比例为7:43时抗菌膜具有最佳的物理和抑菌性能;保鲜组草莓烂果率、失重率、呼吸强度和维生素等指标的变化速度均低于空白对照组,保鲜效果较好,草莓在室温下能保存3d,比空白对照组能延长保存2d.[结论]可食性果蔬保鲜膜制作工艺简单、成本低、保鲜效果好、易降解、可食用、对环境无污染,是一种极具开发潜力的果蔬保鲜膜.     

姜瘟致病菌高毒力菌株及拮抗菌的分离

[目的]筛选强拮抗能力强的芽孢杆菌。[方法]从山东莱芜采集病姜及附近土壤中分离出姜瘟致病菌高毒力菌株,并利用芽孢杆菌进行了拮抗试验。[结果]LW-4、LW-7、LW-32这3株菌对姜瘟致病菌有较强的拮抗能力,其抑菌圈面积较其他菌株大。[结论]为防治姜瘟病提供了理论依据。     

生防菌株CAB-1抑菌物质产生的条件及其稳定性研究

[目的]探索生防菌株CAB-1的最优培养条件及其产生的抑菌物质稳定性。[方法]以黄瓜灰霉菌为靶标,分别采用改进牛津杯法和含药平板法测定抑菌物质活性,并对菌株CAB-1产生抑菌物质的发酵条件及抑菌物质特性进行了研究。[结果]菌株CAB-1产生抑菌物质的最适培养基为4号培养基,最佳发酵温度为31℃,最佳发酵时间为48h。菌株CAB-1所产的抑菌物质在60℃及其以下具有热稳定性;超声波（100W）处理20min对抑菌物质的活性没有影响,处理30min以上抑菌物质的活性显著下降;紫外线照射20、30、40min对抑菌物质的活性没有显著影响,照射50min后其活性显著降低;pH值为6、10、11时,抑菌物质的活性最高。[结论]该研究为利用生防菌株CAB-1开发新型微生物杀菌剂提供了依据。