三七花药培养的研究（I）愈伤组织的诱导

对三七花药愈伤组织的诱导进行了探索.在由不同浓度的2,4-D,BA和IAA组成的16种培养基上对三七花药进行了愈伤组织的诱导试验.结果显示在MS基本培养基中附加2,4-D 2.0 mg/L+BA 1.5mg/L+ IAA 0.5mg/L+蔗糖6%的条件下,花药愈伤组织的诱导率可达41.1%. 本试验为三七花药培养体系的建立奠定了基础.     

三七花药培养的研究（Ⅰ）愈伤组织的诱导

对三七花药愈伤组织的诱导进行了探索。在由不同浓度的2，4-D，BA和IAA组成的16种培养基上对三七花药进行了愈伤组织的诱导试验。结果显示：在MS基本培养基中附加2，4-D2．0mg／L BA1．5mg/L IAA0．5mg/L 蔗糖6％的条件下，花药愈伤组织的诱导率可达41．1％，本试验为三七花药培养体系的建立奠定了基础。     

平卧菊三七组织培养技术研究

该研究以平卧菊三七的叶片为外植体,对影响其愈伤组织诱导及芽分化的相关因素进行了探讨。结果表明,适合平卧菊三七愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 1mg/L;愈伤组织分化出芽的培养基配方为MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.4mg/L。在1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.3mg/L的培养基配方上生根较好,移栽到不同基质中的组培苗,存活率达100%。     

多年生黑麦草成熟种子愈伤组织的诱导和植株再生（摘要）

[目的]探索多年生黑麦草的愈伤组织诱导和植株再生,为多年生黑麦草的转基因研究奠定基础。[方法]以多年生黑麦草成熟种子为外植体,施以浓度不同的外源激素,探讨不同激素组合对愈伤组织诱导、继代培养以及植株分化的影响。愈伤组织诱导以MS培养基为基础培养基,添加300 mg/L水解酪蛋白,300 mg/L脯氨酸,300 mg/L谷氨酰胺,并附加不同浓度2,4-D（2、4、5、8、10 mg/L）和6-BA（0.025、0.100、0.200、0.300、0.400、0.500 mg/L）,pH值调节至5.8。继代培养基为MS＋2,4-D减半的诱导培养基。愈伤组织分化以MS培养基为基础培养基,添加300 mg/L水解酪蛋白,300 mg/L脯氨酸,300 mg/mL谷氨酰胺,并附加不同浓度6-BA（0.50、1.0、2.0、3.0 mg/L）,pH值调节至5.8。[结果]黑麦草在附加了8 mg/L2,4-D和0.025 mg/L6-BA的MS培养基中诱导率最高,达56.42%。愈伤组织经过2～3次继代后分化,分化培养附加2.0 mg/L6-BA,分化率最高,达34.14%,且愈伤组织继代后的状态明显影响分化率,带有毛状根的愈伤组织分化能力明显低于表面光洁的愈伤组织。在大量元素减半的MS培养基中附加0.5 mg/L NAA进行生根培养,生根率达98%。[结论]建立了高频的遗传再生体系,移栽成活率可达98%。     

婆婆纳组织培养再生体系的建立

以婆婆纳(Veronica didymaTenore)的叶片、茎节、茎段、顶芽为外植体,接种在附加2,4-D、6-BA、NAA等不同质量浓度和组合的培养基中进行离体培养,并比较了不同培养基上不同外植体的诱导率。结果表明,诱导愈伤组织的最佳外植体是叶片,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D0.01 mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L,愈伤组织诱导率为100%。诱导愈伤组织分化的最适培养基为MS+2,4-D0.01 mg/L+6-BA0.75mg/L+NAA1.75 mg/L,分化率为90%。诱导生根的培养基为l/2MS+NAA0.2 mg/L,生根率为90%。     

黑莓叶片组织培养及植株再生的初步研究

以美国黑树莓叶片作为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA或IAA进行愈伤组织诱导及植株再生试验.结果表明:树莓叶片外植体在培养基MS+6-BA 2.0～ 4.0 mg/L+NAA(IAA)0.01～0.5 mg/L都能不同程度地形成愈伤组织 ,但以MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L愈伤组织的诱导率最高,诱导率可达100%;所试验的各种不定芽分化培养基,都能不同程度地诱导愈伤组织分化出不定芽,在添加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的MS培养基上,愈伤组织分化不定芽的比例最高,达49.7%的;所产生的不定芽在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L的培养基上的生根率可达89.3%.     

花魔芋组织培养初步研究

以花魔芋球茎切块作外植体,接种在MS附加6-BA、NAA和KT的培养基上诱导愈伤组织的形成.各种培养基均能诱导外植体产生愈伤组织,但不同激素浓度组合其诱导率不一样.其中以MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 1.0 mg/L的诱导率最高,达84.62%.愈伤组织芽分化最适培养基是MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.5 mg/L KT2.0 mg/L,分化率为73.81%.芽在MS NAA 0.5 mg/L和1/2MS NAA 0.5 mg/L培养基上的生根率均在78%以上.     

黑色马铃薯的组织培养及快繁技术研究

[目的]研究黑色马铃薯的组织培养及快繁技术。[方法]以黑金刚马铃薯的块茎为外植体,于附加不同激素配的MS培养基中诱导愈伤组织、不定芽和不定根,探讨增殖培养和植株再生的条件。[结果]适宜块茎外植体愈伤组织诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L GA,诱导率可达95%以上;适宜丛生芽诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率达92%以上;1/2MS培养基易于诱导生根,部分外植体可产生紫黑色小块茎,生根率达100%。[结论]该研究可为人工规模化生产黑色马铃薯种苗提供技术资料。     

红叶石楠愈伤组织抗褐化研究以及悬浮细胞系的建立

以红叶石楠无菌苗叶片为试材,诱导愈伤组织并建立悬浮细胞系。结果表明:红叶石楠愈伤组织初代诱导最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导率可达97%。继代培养以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L为宜。针对红叶石楠愈伤组织继代培养过程中易褐化的问题,通过正交试验探讨了不同吸附剂、抗氧化剂及其它因素对褐化的影响。采用MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+Vc 1.0 mg/L+Ch 100 mg/L附加1%蔗糖的继代培养基,可以明显降低红叶石楠愈伤组织的褐化现象。将胚性愈伤组织接种到1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L附加2%蔗糖,pH 5.5液体培养基中悬浮震荡培养获得了分散性好、色泽鲜艳的悬浮细胞。     

樟树胚性愈伤组织诱导与体胚发生研究

以樟树未成熟合子胚为外植体,探讨了外植体取材时间、植物生长调节剂配比、附加有机物等因素对胚性愈伤组织诱导、增殖培养及体细胞胚胎发生的影响。结果表明:不同采集时期的合子胚愈伤组织诱导率差异显著,只有心形胚时期的合子胚才能诱导胚性愈伤组织;在改良MS+4.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA培养基初诱导情况下,后接入改良MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D培养基中,胚性愈伤组织诱导率可达77.78%;外加添加200 mg/L水解络蛋白和200 mg/L环糊精可保持胚性愈伤组织增殖和体细胞胚诱导,胚性愈伤组织增殖系数达3.86,每克愈伤组织平均分化116.67个体细胞胚,胚性愈伤组织继代周期以25～30 d为宜。在改良MS+200 mg/L环糊精+1.0 mg/L ABA+0.5 mg/L IAA中可以促使体胚成熟萌发,萌发率可达52.78%。将萌发的芽体转接到MS+0.1 mg/L BA+0.5 mg/L IAA+0.2 g/L AC生根培养可获得完整植株。     

种子处理及GA3浓度对诱导三七实生苗影响研究

以健康饱满成熟的三七种子为外植体,接种到不同处理的培养基上,诱导实生苗。结果表明,剥除三七种皮,用70％的乙醇浸泡1min,再用0．1％升汞消毒灭菌10min,无菌水冲洗4～5次,接种到MS＋2,4-D（1．0mg／L）＋KT（0．5mg／L）＋GA3（40mg／L）＋蔗糖（30g／L）＋琼脂粉（7g／L）的培养基（pH5．8）中,根、茎、叶生长表现良好,从而初步建立了三七实生苗组培体系。     

不同处理对刺梨未受精胚珠愈伤组织诱导的影响

以刺梨未受精胚珠为材料,研究了不同低温预处理时间、基本培养基、生长调节剂以及附加物对刺梨未受精胚珠愈伤组织形成的影响。结果表明:低温预处理3 d,刺梨未受精胚珠愈伤组织诱导率最高,为75.14%;以MS为基本培养基最有利于愈伤组织的诱导;6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L为最优的生长调节剂组合,其愈伤组织诱导率高达84.58%;在培养基中添加100 mg/L的AgNO3有利于愈伤组织的形成,而添加Vc有利于愈伤组织转绿。     

不同培养基对三七花粉愈伤组织皂甙含量的影响

[目的]探讨不同培养基上三七花粉愈伤组织培养过程中总皂甙含量的变化情况。[方法]以MS培养基为基本培养基,添加不同的激素(IAA、NAA、KT、6-BA、GA2、,4-D、HL)和营养物质(蔗糖、琼脂)配制成5种不同的培养基,研究不同培养基对三七花粉愈伤组织中皂甙含量的影响。[结果]不同培养基培养的三七花粉愈伤组织中总皂甙的含量不同,5种培养基中总皂甙含量最高的为3.45%,最低的为0.02%,两者相差172.5倍。[结论]培养基中添加2,4-D有可能会促进三七花粉愈伤组织中皂甙的合成,增加总皂甙含量。     

耧斗菜愈伤组织和不定芽诱导的初步研究

以耧斗菜(Aquilegia vulgaris)为实验材料,研究了不同外植体以及生长调节物质对其愈伤组织和不定芽再生的影响,实验结果表明:叶片作为外植体,培养基为MS+2.0 mg/L NAA+2.0 mg/L6-BA时,较适宜于诱导愈伤组织,诱导率达到92.6%;诱导不定芽的较适宜培养基为MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L6-BA。     

黑芝麻愈伤组织的诱导及分化的初步研究

以黑芝麻(Sesamum indicum DC)成熟种子无菌苗的子叶、子叶节、下胚轴作为外植体,选用MS基本培养基,并设置4种蔗糖浓度作愈伤组织诱导培养基,以2,4-D、6-BA、IAA、KT组成16种生长调节剂浓度配伍的分化培养基,对愈伤组织的形成及分化进行了研究.结果表明,蔗糖浓度30 g/L时对子叶、子叶节愈伤组织诱导较为有利,蔗糖浓度40 g/L时对下胚轴愈伤组织诱导较为有利,分化培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L IAA 1.5 mg/L时,子叶愈伤组织的分化率达30.0%,其效果较好.     

东方百合胚性愈伤组织诱导和植株再生研究

为建立东方百合元帅、提拔、西伯利亚的高频愈伤体系,以幼叶、花丝、生长点为外植体,进行了不同激素组合的MS固体培养基对胚性愈伤组织诱导及植株再生研究。结果发现,Picloram比2,4-D更有利于胚性愈伤组织的诱导,幼叶、花丝更能有效诱导出胚性愈伤组织和再生植株,生长点的出愈率较低。幼叶在MS＋2mg／L Pieloram培养基,花丝在MS＋2mg／LPicloraIn＋0．1mg／L ABA培养基,生长点在MS＋2mg／LPieloram＋0．03mg／LTDZ培养基上能高效诱导出愈伤组织,来自幼叶的胚性愈伤组织在MS＋1．0mg／LBA＋0．1mg／LKT＋0．1mg／LIBA培养基上能高频再生出芽,来自花丝的胚性愈伤组织在Ms＋1．5mg／LBA＋0．3mg／LKT＋0．2mg／LIBA培养基上能高频再生出芽。愈伤组织生长呈直线生长趋势。     

高山红景天叶片愈伤组织诱导与植株再生

以高山红景天叶片作为外植体,研究了影响愈伤组织诱导、芽增殖、生根的主要因素。结果表明:高山红景天叶片切块诱导愈伤组织的最佳培养基为MS 6-BA 2mg/L NAA0.5mg/L,诱导率达88.33%;高山红景天叶片切块经诱导可产生3种色泽的愈伤组织,其中只有绿色愈伤组织诱芽容易,绿色愈伤组织在附加1mg/L6-BA 0.1mg/LNAA的MS培养基中有利于芽的分化和增殖,培养7周左右,平均每个外植体分化形成的再生小植株数达到21.33个;增殖苗转入1/2MS培养基中生根率高达100%。     

I-72杨再生体系的建立

以水培I-72杨（Populus euramericana San Martino）的叶片和叶柄为外植体,探讨了I-72杨植株再生的方法。结果表明：I-72杨愈伤组织诱导和不定芽分化的最佳培养基为MS＋BA 0．5mg／L＋NAA0．1mg/L,愈伤组织诱导率为97．0％,不定芽分化率为91．1％;在诱导培养基中添加Vc（150 mg／L）能有效地抑制叶片的褐变,褐变降低率达25．0％;不定芽在MS＋BA 0．3mg／L＋NAA 0．05mg／L培养基中继代增殖系数为6．3;添加0．8mg／L GA3对继代培养中不定芽的伸长和增殖有显著效果;在生根培养基1／2MS＋NAA 0．05mg／L＋IBA0．2mg／L上,生根率达93．5％。     

木薯叶片愈伤组织诱导与分化影响因子研究

以木薯试管苗顶部1～3处的幼叶为外植体,研究不同激素种类、浓度对愈伤组织的诱导、分化、不定芽生根的影响,并探讨了愈伤组织褐化过程中减轻褐化的方法。结果表明:在含0.5～1.0 mg/L 2,4-D的改良MS培养基上,可诱导木薯叶片产生愈伤组织,其愈伤诱导率为73.33%～89.44%;在愈伤组织的继代过程中,添加了200～300 mg/L PVP的处理可减轻愈伤褐化和提高愈伤增殖率;产生不定芽的最适激素条件是在改良MS培养基中添加0.75～1.00 mg/L ZT;不定芽产生的嫩枝在1/2MS基本培养基中添加0.25～0.50 mg/L IBA的条件下,其生根率达81.13%～90.63%。