番茄愈伤组织诱导与细胞悬浮培养方法的改良

[目的]探讨番茄愈伤组织及细胞悬浮培养的最佳培养条件。[方法]用番茄的子叶作为外植体,研究不同浓度2,4-D与6-BA组合诱导"美国红"番茄子叶愈伤组织形成、不定芽发生的情况。[方法]在MS基本培养基上附加不同水平6-BA和2,4-D的培养基中,愈伤组织形态发生的情况不同,其中激素含量起主要作用。子叶外植体以MS+2,4-D0.05mg/L+6-BA0.01mg/L为最佳再生培养基,对愈伤组织的形成和不定芽的分化都有良好的效果。不同生长调节物质对细胞的悬浮培养有一定的影响,以2,4-D0.2mg/L+NAA0.2mg/L+ZT0.05mg/L的浓度组合为最佳。[结论]该研究确认了番茄愈伤组织及细胞悬浮培养的最佳培养条件,为番茄组织培养奠定了基础。     

百香果叶片植株再生快繁技术

以百香果种子无菌实生苗的子叶、真叶及田间茎尖嫩叶为外植体,以MS为基本培养基,经愈伤组织诱导、丛生芽分化、腋芽增殖及生根培养4个阶段进行比较试验,以探究适宜的外植体种类及4个培养阶段中最佳的激素种类、浓度和配比,为百香果组培快繁技术提供参考依据。结果表明,3种外植体中,子叶最容易诱导产生愈伤组织,其诱导率为100%;最佳子叶愈伤组织诱导培养基为:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最佳不定芽分化培养基为:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最佳腋芽增殖培养基为:MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L;最佳生根培养基为:MS+NAA 0.3 mg/L。     

刺槐子叶的不定芽诱导及植株再生

以刺槐种子在无菌条件下播种生长7 d的子叶为外植体,研究不同植物生长调节剂和继代培养次数对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明:生长调节剂种类和质量浓度对刺槐子叶的愈伤组织诱导及愈伤组织再分化有一定影响,刺槐子叶诱导愈伤组织的最佳培养基:MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.2 mg/L,诱导率为98.9%,愈伤组织再生不定芽的最佳培养基:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L,再生率为74.4%。愈伤组织的不定芽诱导率随继代次数的增加呈下降趋势。对刺槐子叶进行了直接诱导不定芽的试验,诱导率最高达87.8%,其培养基为:MS+6-BA 5.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L。     

萝卜诱导愈伤组织的影响因素

以萝卜种子为试材,研究了不同外植体、不同激素、不同激素浓度及继代培养对萝卜外植体形成愈伤组织的影响.结果表明:(1)诱导萝卜愈伤组织最好的外植体为子叶.(2)不同的生长素诱导效果不同,诱导效果为NAA＞2,4-D＞IBA;(3)萝卜子叶和下胚轴诱导愈伤组织的最佳初代培养基均为MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂.(4)继代培养能促进愈伤组织的形成,子叶和下胚轴的最佳继代培养基分别为:MS+6 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂和MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂.     

圣女樱桃番茄再生体系的研究

以圣女樱桃番茄为试材,通过对其子叶和下胚轴的离体培养,研究不同培养基和激素浓度及配比对愈伤组织诱导、不定芽分化及生根诱导的影响,以筛选最佳再生体系,并研究VC对番茄组培过程中褐化现象的影响。结果表明:诱导圣女樱桃番茄愈伤组织的最适培养基为MS+(0.2~0.4)mg/L IAA+2.0mg/L6-BA,不定芽分化的最适培养基为MS+0.1mg/L IAA+(1.0~3.0)mg/L 6-BA,诱导生根的最适培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA;子叶为最佳外植体,其不定芽的分化速度、分化率及生长情况均优于下胚轴;在愈伤组织诱导培养基中添加10mg/L VC,能有效抑制褐化的发生。     

甜瓜红心脆和早皇后再生体系的建立

为了初步筛选出适宜诱导甜瓜红心脆、早皇后子叶和下胚轴愈伤组织和不定芽的培养基,以及筛选适宜其不定芽伸长和生根的培养基,采用组织培养的方法,以甜瓜红心脆和早皇后种子为材料、子叶和下胚轴为外植体,进行添加不同浓度6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、吲哚乙酸(IAA)激素组合的MS培养基诱导愈伤组织和不定芽、不定芽伸长、芽生根的研究。试验结果表明,MS+0.5 mg/L IAA、MS+1.0 mg/L IAA培养基不利于红心脆子叶愈伤组织的诱导,其余培养基均有利于其子叶和下胚轴愈伤组织的形成;MS和MS+0.3 mg/L IAA培养基不利于早皇后子叶愈伤组织的形成,MS培养基不利于其下胚轴愈伤组织的诱导,其余培养基均有利于其愈伤组织的形成;适宜诱导红心脆子叶不定芽的培养基是MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IAA、MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA,适宜诱导早皇后子叶不定芽培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA;适宜诱导红心脆、早皇后下胚轴不定芽的培养基分别为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA、MS+0.3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA;MS+0.5 mg/L 6-BA、MS+1.0 mg/L IAA培养基分别适宜红心脆、早皇后不定芽伸长;2个品种适宜的生根培养基均是1/2MS+1.0 mg/L IBA。研究初步建立了甜瓜红心脆、早皇后的再生体系,为其遗传转化研究作了准备。     

激素和外植体对辣椒愈伤组织诱导的影响

本实验以辣椒优良品种的种子为试验材料,接种在MS培养基上培养无菌苗,再分别以无菌幼苗的子叶、胚轴、根为外植体,接种在添加有不同浓度6-BA和2,4-D的MS培养基上进行愈伤组织诱导。结果表明:以下胚轴为外植体,诱导的愈伤组织质量最好和出愈率最高,愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+6-BA0.5mg/L+2.4-D2.0 mg/L。     

白及组织培养的建立与快速繁殖研究

以白及(Bletilla Reichb.f.)种子为外植体,通过不同的培养基进行愈伤组织诱导培养与继代生根培养,研究白及种子快速繁殖的最优培养基配方。结果表明,愈伤组织诱导培养最佳培养基组合为液体培养基1/2 MS+1.5 mg/L 6-BA+6.0 mg/L IAA+pH 8.2;在植物生长调节剂6-BA与NAA愈伤组织液体诱导培养中以1/2 MS+4 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+pH 5.8最佳;MS+pH 5.8培养基对生根较好,1/2MS+pH 5.8对丛生芽的增殖较好;试验为白及建立植株繁殖体系提供了科学依据。     

生长调节剂对白鲜愈伤组织的诱导及药用成分含量影响

为筛选白鲜愈伤组织培养的适宜培养基,试验以延边地区野生白鲜种子为材料,研究了MS培养基中植物生长调节剂种类及其浓度对愈伤组织诱导和生长以及愈伤组织中白鲜碱、黄柏酮和梣酮积累的影响。结果表明:在MS+2.0 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA以及MS+2.0 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA培养基中,愈伤组织诱导率及生长较好;在MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA培养的愈伤组织中,白鲜碱和梣酮的有效积累量最高,在MS+2.0 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA培养的愈伤组织中,黄柏酮的有效积累量最高。     

番茄宝大906高频再生系统的建立及其潮霉素选择压的测定

以番茄宝大906品种为试材,通过对其子叶、下胚轴的离体培养,研究了不同6-BA/NAA植物生长物质浓度配比对愈伤组织诱导、不定芽再生及生根的影响.另外,还测定了潮霉素选择压.结果表明:以子叶和下胚轴为外植体诱导愈伤组织的最适培养基分别是MS+ 2.0 mg,/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA和MS+ 2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA;诱导芽分化的最适培养基均为:MS+ 2.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA,子叶的芽分化率高达93.5％;不定芽适宜的生根培养基为MS+0.1 m g/L NAA;子叶、下胚轴的潮霉素选择压分别以20、40 mg/L为宜.     

南瓜离体培养及植株再生的研究

研究了不同外植体、消毒方法、激素水平等对南瓜离体培养及植株再生的影响。结果表明:以子叶作为外植体可以通过愈伤组织途径之后形成再生植株;而以子叶节作为外植体可以直接诱导不定芽形成再生植株。诱导不定芽的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA;诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L 2,4-D;诱导南瓜不定根的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/LIAA。     

芝麻菜愈伤组织诱导及植株再生*

 以芝麻菜(Eruca sativa Mill)无菌苗的下胚轴、子叶和子叶柄作为外植体,研究了不同的激素浓度和组合对其愈伤组织诱导和植株再生的影响。结果表明,分别以MS+0.8mg／L 2,4-D,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.1mg／L 6-BA,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.2mg／L 6-BA为下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织诱导培养基时,效果较好,出愈率依次为86.3%,78.2%,97.6%;将下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织分别转移到分化培养基MS+3.0mg／L 6-BA+0.1mg／L　NAA,MS+3.0 mg／L 6-BA+0.2mg／L NAA上再生不定芽,效果最佳,不定芽再生频率分别为72.7%,63.6%,69.2%。将不定芽切下转移至1／2 MS+0.5mg／L IBA培养基上诱导生根,生根率达81％以上。     

樱桃番茄的组织培养与离体快繁技术研究

以樱桃番茄(Lycopersicon esculuntumvar.Cerasiform e)的下胚轴、子叶为外植体,在附加不同质量浓度6-BA和NAA的1/2 MS培养基上进行培养。实验结果显示:消毒方法对种子发芽率的影响很大,以10%NaC lO消毒20 m in最为有效,且能够保证种子的最大发芽率。樱桃番茄下胚轴和子叶的最佳不定芽诱导培养基分别为1/2 MS 3.0 mg/L 6-BA 0.2 mg/L NAA和1/2 MS 2.0 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA。最佳增殖培养基为1/2 MS 2.0 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA,其增殖系数为3.4。诱导生根培养基则以1/2 MS 0.1 mg/L NAA最好。     

番茄高效离体再生体系的建立

以中蔬四号番茄子叶和下胚轴为外植体进行离体培养,研究了不同激素及不同浓度的组合对愈伤诱导、不定芽分化及生根的影响。结果表明,MS+2,4-D0.2 mg/L+6-BA1.0 mg/L+蔗糖30 g/L诱导所得愈伤最好,MS+IAA0.2 mg/L+6-BA1.0 mg/L+蔗糖30 g/L诱导分化不定芽效果最佳,1/2 MS+蔗糖20 g/L是诱导不定芽生根的理想培养基。建立起高效番茄离体再生体系。     

番茄下胚轴和子叶组织培养及植株再生的研究

以番茄幼苗的下胚轴和子叶为外植体,研究不同激素培养基对其愈伤组织、不定芽诱导及生根的影响。结果表明:以MS为基本培养基,添加NAA0.7mg·L-1,LA2711在6-BA0.7mg·L-1,Liger在6-BA1.0mg·L-1时对子叶和下培轴诱导愈伤效果最好;6-BA为2.0mg·L-1时,LA2711在IAA0.3mg·L-1,Liger在IAA0.1mg·L-1条件下分化率最高。     

应用正交试验优选茎瘤芥子叶组培诱导培养基

[目的]建立茎瘤芥体细胞培养再生植株体系,为芸薹属植物茎瘤芥及芥菜的遗传转化体系及生物技术育种奠定基础。[方法]以茎瘤芥6 d苗龄子叶为材料,应用正交试验法研究不同浓度生长激素6-BA、NAA、2,4-D对外植体分化和愈伤组织成苗率的影响。[结果]最适合茎瘤芥外植体分化成苗的培养基为MS加6-BA 3.0 mg/L＋NAA 0.10 mg/L＋2,4-D 0 mg/L＋3 g/L琼脂粉;1/2MS＋0.10mg/LNAA利于组培苗生根。[结论]优选培养基的再生频率具有较大提高。     

加工番茄遗传转化再生体系的建立

加工番茄种子出芽后7~8 d,子叶剪成约0.2~0.4 cm,0.3~0.5 cm的小块,以MS B5为基本培养基,附加IAA0.2 mg/L分别与0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 mg/L的6-BA/ZT/TDZ组合;6-BA2.0 mg/L分别与0.0,0.05,0.1,0.2,0.5,1.0 mg/L的IAA/IBA/NAA组合。经诱芽比较,在不同浓度6-BA/ZT/TDZ与0.2mg/LIAA组合中,出芽率最高的培养基为MS ZT1.0 mg/L IAA0.2 mg/L和MS TDZ2.0 mg/L IAA0.2 mg/L。在不同浓度的IAA/IBA/NAA与6-BA2.0 mg/L组合中,IAA明显优于NAA和IBA,筛选出MS 2.0 mg/L6-BA 1.0 mg/LIAA为最佳生芽培养基。以1/2MS添加NAA//BA0.0,0.1,0.2,0.5,1.0 mg/L进行生根比较,再生芽在MS 0.5 mg/L IBA生根培养基上生根最好,并发育成完整的小植株。     

双单倍体南瓜后代子叶离体再生植株研究

【目的】探索一种快速扩繁南瓜双单倍体植株的技术,以扩大双单倍体植株的数量,提高其育种效率。【方法】以双单倍体南瓜后代子叶为外植体,在MS培养基中分别添加不同质量浓度的6-BA（1.0,4.0 mg/L）和NAA（0.05,0.1,0.2,0.5,1.0 mg/L）,筛选最佳组合;在此基础上,继续添加不同质量浓度的2,4-D（0.5,1.0,1.5,2.0 mg/L）,筛选3种激素的最佳组合。在MS＋6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L的不定芽诱导培养基上,研究其对不同苗龄子叶的诱导效果。将不定芽接种在含不同质量浓度NAA (0.05, 0.1, 0.2, 0.5 mg/L)的MS生根培养基上,比较生根率和根系生长势。【结果】在诱芽培养基中,添加2种激素时,以6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L的MS培养基诱导率最高,为66.67％,分化系数为3.89;添加3种激素时,以6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L＋2,4-D 1.5 mg/L的MS培养基诱导率最高,达80.95％,分化系数为4.12。当子叶展开后苗龄为3 d时,不定芽诱导率相对较大,为77.42％。不定芽在MS+0.1 mg/L NAA培养基上生根效果最好,根系生长健壮,生根率达100%。【结论】双单倍体南瓜后代子叶离体再生的适宜激素质量浓度组合为MS＋6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L;以展开后3 d苗龄的子叶作为外植体诱导效果最好;MS+0.1 mg/L NAA是不定芽诱导生根的最适培养基。     

加工番茄子叶和下胚轴离体植株再生的研究

以加工番茄BO 2和BO 4无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,以M S为基本培养基,研究了不同浓度的ZT,6-BA与不同浓度的IAA组合对外植体芽诱导的影响。结果表明,在不同浓度的ZT和IAA组合中,对2个番茄品种的子叶和下胚轴外植体芽诱导均以M S+1.0 m g/L ZT+0.05 m g/L IAA培养基为最好,BO 2品种子叶和下胚轴的出芽率分别为32.7%和24.5%,BO 4品种的分别为37.3%和28.2%;在不同浓度的6-BA和IAA组合中,诱导BO 2外植体出芽率最高的培养基是M S+2.0 m g/L 6-BA+0.2 m g/L IAA,子叶和下胚轴的出芽率分别为27.3%和14.5%;诱导BO 4品种子叶和下胚轴出芽率最高的培养基分别为M S+1.0 m g/L 6-BA+0.2 m g/LIAA和M S+2.0 m g/L 6-BA+0.2 m g/L IAA,子叶和下胚轴的出芽率均为28.2%;在M S+0.1 m g/L IAA培养基上,加工番茄BO 2再生芽1周左右就能长出根,形成完整的小植株。