琯溪蜜柚汁胞粒化原因分析

观测分析了溪蜜袖汁胞的粒化过程、症状及若于相关因素。结果表明,汁胞粒化现象在果实生长后期（9月中下旬）开始出现,与果实正常种子数的有无与多寡有关。扫描电镜和透射电镜观察,发现汁胞的粒化是从顶端开始,外表横纹的消失是重要的外表特征;粒化汁胞细胞壁加厚,纤维、半纤维增多,高尔基体增加,核体积增大。并首次观察到粒化汁胞的细胞多核仁现象。     

琯溪蜜柚汁胞粒化的磁共振成像无损检测

为评估磁共振成像(MRI)用于柑桔汁胞粒化无损检测的有效性,采用1.5T高场磁共振成像仪对采后贮藏30d的琯溪蜜柚Citrus grandis‘Guanximiyou’果实进行磁共振扫描检查,以同层断面解剖图为对照。结果表明,在MRI检测中,T2WI能够明显区分果肉组织与海绵层组织的信号差异,其信号强度可代表果实组织相对含水量;T2WI信号在汁胞粒化部位强度明显降低,病变组织的失水特征清晰,与解剖结果一致。T2WI对汁胞粒化的识别率100%,T1WI的识别率41.7%,两者差异显著(χ2=5.76,p=0.016)。T2WI和T1WI均能显示种子照影,但T2WI对果肉组织影像的分辨率优于T1WI。MRI的T2WI分析可作为一种无损检测方法,对柚果的汁胞粒化程度以及种子有无进行评估。     

木质素生物合成途径相关基因调控琯溪蜜柚汁胞粒化的研究

【目的】探究琯溪蜜柚果实汁胞粒化过程中木质素生物合成途径相关基因在果实发育过程中的表达特征,以揭示汁胞粒化过程中木质素合成的分子调控机制。【方法】选取2018年花后135、165、195、215 d 4个时期的琯溪蜜柚果实,测定汁胞粒化率及木质素含量以及分析转录组数据筛选到的木质素生物合成途径关键基因的差异表达和相关酶活性变化,并进行汁胞细胞壁木质素沉积的显微观察。【结果】在琯溪蜜柚花后195至215 d果实发育成熟期,木质素生物合成途径中CrPAL1、CrPAL3、CrC4H1、CrC4H2、Cr4CL、CrCCR3、CrCAD3、CrPOD2和CrPOD7等9个基因的表达量都显著增强,qRT-PCR验证结果与转录组数据一致。这期间果实汁胞粒化明显加速,木质素合成相关酶苯丙氨酸解氨酶（PAL）、肉桂酸-4-羟基化酶（C4H）、4-香豆酸辅酶A连接酶（4CL）、肉桂醇脱氢酶（CAD）、过氧化物酶（POD）的活性明显上升,木质素含量显著积累,番红染色显示木质素在蜜柚汁胞细胞壁中明显沉积。【结论】琯溪蜜柚木质素生物合成途径相关基因参与调控汁胞粒化过程中细胞壁木质素的合成。研究结果为今后琯溪...     

平和‘琯溪蜜柚’春季栽培技术

针对2013年产季树势、温光条件及其2014年春季自然气候件和产业发展面临的品种过于单一、优良品质种性还原等生产中存在的问题,针对性地提出产地平和县2014年‘琯溪蜜柚’春季适用栽培技术意见。     

‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化过程中POD同工酶谱分析

【目的】探讨‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化过程中过氧化物酶(POD)的同工酶变化及赤霉素对其的影响。【方法】以赤霉素处理和未经赤霉素处理的‘红肉蜜柚’果实的近中柱和远中柱汁胞为材料,统计粒化指数后,采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳方法进行可溶性和离子结合POD同工酶谱测定。【结果】发现‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化指数随着果实生长发育呈先平稳后急剧上升的趋势,有无赤霉素处理无明显变化;可溶性POD中存在酸性POD和碱性POD,有无赤霉素处理对近、远中柱POD出现的时期和组分基本没有影响;离子结合POD只存在碱性POD,近中柱POD同工酶谱分离出6条(5条为果实发育后期的特异性谱带)、远中柱POD分离出4条,两者出现的时期和组分差异较大,赤霉素处理使近中柱5条果实发育后期特异性谱带减为3条且时期提前,而赤霉素处理下的远中柱没有检测到谱带。【结论】粒化时期,离子结合POD出现的5个特异性碱性POD可能与汁胞粒化关系密切,赤霉素处理可明显减少POD谱带,但赤霉素对汁胞粒化的影响有待进一步研究。     

‘琯溪蜜柚’园土壤和树体的硼素营养与果实粒化关系分析

【目的】研究福建省平和县‘琯溪蜜柚’园土壤和树体的硼素营养状况及其与果实粒化的关系。【方法】采集平和县314个蜜柚园土壤、叶片和果实样品,进行硼素营养和果实品质的测定。【结果】蜜柚园土壤有效硼含量(w,后同)范围为0·05～4·61 mg?kg~(-1),平均值为0·77 mg?kg~(-1),土壤有效硼低量(0·5 mg?kg~(-1))、适宜(0·5～1 mg?kg~(-1))和高量(1mg?kg~(-1))的比例分别为43·57%、33·54%和22·89%,0～60 cm土层土壤有效硼含量随土层深度的增加而降低,呈现明显的表聚特征。蜜柚叶片硼含量范围为9·61～252·02 mg?kg~(-1),平均值为72·47 mg?kg~(-1),叶片硼含量属于低量(15 mg?kg~(-1))、适宜(15～50 mg?kg~(-1))和高量(50 mg?kg~(-1))的比例分别为0·32%、24·84%和74·84%。叶片硼高量的比例显著高于土壤有效硼高量的比例,说明含硼叶面肥的过量施用是造成叶片硼含量高的主要原因。蜜柚果实硼含量范围为1·13～57·50mg?kg~(-1),平均值为14·07 mg?kg~(-1),果实硼含量8～16 mg?kg~(-1)和高于16 mg?kg~(-1)样品汁胞严重粒化(粒化率40%)的比例分别较硼含量低于8 mg?kg~(-1)的样品提高了31·87%和31·89%。相关分析表明,果实硼含量与果实Ca/B比值呈极显著负相关(y=304·81x-0·63,r=0·77**),果实汁胞严重粒化(粒化率40%)的比例随Ca/B比值的提高而降低。【结论】平和县蜜柚园土壤和叶片均存在硼过量的问题,硼过量可能会增加蜜柚果实汁胞粒化的风险,施用含钙肥料、提高果实Ca/B比值,可缓解果实汁胞粒化的程度。平和县蜜柚生产应限制含硼叶面肥的过量使用,增加含钙肥料的施用。     

琯溪蜜柚成熟期间汁胞纤维素含量及其合成酶基因表达分析

【目的】探究琯溪蜜柚汁胞粒化与次生壁纤维素含量、自由水和束缚水含量、品质等指标的相关性以及纤维素合成酶基因表达情况,以期为汁胞粒化过程中次生壁形成的分子调控机制研究提供依据。【方法】选取2018年8、9、10和11月4个时期的琯溪蜜柚果实,测定汁胞粒化率、可溶性固形物(total soluble solid, TSS)、可滴定酸(titratable acid,TA)、含水量和纤维素含量。从汁胞转录组中筛选差异表达的纤维素合酶基因(cellulose synthase, CESA)并进行分类和表达分析。【结果】琯溪蜜柚果实10月后,果实横径迅速增加,汁胞粒化明显加速,单汁胞粒化严重,纤维素、TA和束缚水含量显著上升,果形指数和自由水含量明显下降;转录组筛选差异基因CrCESA4、CrCESA7-1和CrCESA8分别与拟南芥AtCESA4、陆地棉GhCESA7和拟南芥AtCESA8聚类在一起。CrCESA4、CrCESA7-1、CrCESA8基因相对表达量在11月显著上升,相对表达量与转录组一致。【结论】汁胞粒化程度与纤维素、TA和束缚水含量呈正相关,与果形指数和自由水含量呈负相关;进化树、转录组和表达分析表明CrCESA4、CrCESA7-1、CrCESA8可能参与了汁胞粒化过程中次生壁纤维素的合成。     

‘琯溪蜜柚’园土壤和树体的硫素营养研究

【目的】研究‘琯溪蜜柚’园土壤和树体的硫素状况及其影响因素,探讨土壤硫富集与土壤酸化以及钙、镁淋失的关系。【方法】采集和分析314个‘琯溪蜜柚’园土壤、叶片样品以及27个土壤剖面样品的硫含量。【结果】‘琯溪蜜柚’园土壤有效硫含量(w,后同)范围10.98～116.65 mg·kg~(-1),平均值55.63 mg·kg~(-1),土壤有效硫高量(30 mg·kg~(-1))、适量(16～30 mg·kg~(-1))和低量(16 mg·kg~(-1))的比例分别为83.44%、13.06%和3.50%,土壤有效硫含量随土壤有机质含量、阳离子交换量和黏粒(0.002 mm)含量的增加而提高,随种植年限的延长呈升高的趋势,剖面土壤有效硫含量平均值为40～60 cm20～40 cm0～20 cm。相关分析表明,土壤有效硫含量与土壤pH以及交换性钙、镁含量均呈极显著负相关‘。琯溪蜜柚’叶片硫含量的范围为0.24%～0.53%,平均值为0.34%,叶片硫适量(0.2%～0.4%)和高量(0.4%)的占比分别为86.94%和13.06%。【结论】‘琯溪蜜柚’园土壤和树体均存在硫过量问题,土壤硫富集会导致土壤酸化、促进钙和镁的淋失,生产上应减少含硫肥料的使用。     

‘琯溪蜜柚’荧光定量PCR内参基因的筛选

【目的】为了克隆‘琯溪蜜柚’的管家基因,并筛选合适的管家基因作为内参,【方法】以‘琯溪蜜柚’盛花期后5个不同时期的果实汁胞,以及根﹑茎﹑叶为材料,采用实时荧光定量PCR技术,分析actin1﹑β-tubulin﹑18S rRNA﹑EF1-α和Ubiquitin 5个管家基因在不同材料中的表达情况,并结合geNorm、NormFinder﹑comparative Delta-CT和BestKeeper 4种评估方法进行稳定性分析。【结果】结果表明,actin1和β-tubulin是‘琯溪蜜柚’果实发育进程中较为稳定的内参基因,而EF1-α和β-tubulin则是研究不同组织特定靶基因表达中稳定的内参基因。【结论】筛选出了‘琯溪蜜柚’最佳的内参基因β-tubulin,为今后目的基因的表达分析奠定了基础。     

防止琯溪蜜柚木质化的综合措施

琯溪蜜柚产量高,果实皮薄,可食率高,果肉晶莹,汁多化渣,甜酸可口,营养丰富,耐贮藏。但在贮藏过程中易出现木质化现象,即果实囊瓣靠近中心柱(果心)的内果皮开裂,汁胞一层或数层失水硬化。一般贮藏1个月左右时发生,贮藏时间越长,木质化越重,果肉失去原有风味,甚至不能食用。     

模拟酸雨对‘琯溪蜜柚’叶片抗氧化酶活性和光合作用的影响

【目的】探讨酸雨胁迫对‘琯溪蜜柚’叶片抗氧化酶活性和光合作用的影响。【方法】以p H值5.6为对照,采用p H 2.5和p H 4.5模拟酸雨对1 a(年)生‘琯溪蜜柚’进行胁迫,研究酸雨对蜜柚叶片氧化伤害、抗氧化酶系统、气体交换参数和叶片结构的影响。【结果】p H 2.5和p H 4.5模拟酸雨胁迫处理3个月,没有造成叶片可见伤害,叶片上表皮细胞排列整齐紧密,但p H 2.5模拟酸雨胁迫处理显著降低了叶肉中栅栏组织发育;p H 2.5模拟酸雨胁迫处理1 d后,叶片SOD和CAT活性的升高减少O2-和H2O2的积累,降低过氧化伤害,p H 2.5模拟酸雨胁迫处理3 d之后引起叶片膜脂过氧化;p H 4.5模拟酸雨胁迫处理6 d后虽然3种抗氧化系统酶活性显著高于对照,但不足以清除酸雨胁迫引起的活性氧,引起膜脂过氧化;模拟酸雨胁迫处理初期,2种处理均显著抑制光合速率,酸雨处理90 d后,p H 2.5酸雨显著抑制‘琯溪蜜柚’叶片光合速率,推测是由于氧化胁迫、栅栏组织发育等非气孔调节因素引起的,p H 4.5酸雨处理下叶片具有较强自我修复能力,其光合速率没有受到显著抑制。【结论】‘琯溪蜜柚’具有较强的酸雨抗性,p H 4.5中度酸雨胁迫对植株生长影响不显著,p H 2.5重度酸雨胁迫显著抑制叶片光合作用。     

琯溪蜜柚果实分级标准研究

2014年10月20日至2015年1月10日在福建省平和县取样,对2 316个琯溪蜜柚单果的6项外观指标及可溶性固形物含量、汁胞粒化率进行测定分析。结果表明:汁胞粒化率变异系数(116.4%)远大于可溶性固形物含量变异系数(8.9%),汁胞粒化率是影响品质的首要因子。按外观指标与汁胞粒化率相关系数绝对值的大小,外观指标排序为体积(r=0.504)质量(r=0.472)、横径(r=0.469)果皮粗度(r=0.271)、体积质量(r=-0.265)果形指数(r=0.108);按外观指标与可溶性固形物含量相关系数绝对值的大小,外观指标排序为体积(r=-0.309)横径(r=-0.265)、质量(r=-0.259)、体积质量(r=0.257)果皮粗度(r=-0.230)果形指数(r=-0.086),各相关系数均达极显著水平(r0.001=0.071)。单果质量分级虽不及果实体积科学,但目前仍不失为好的选择。取200g为单果质量分级幅度基本能保证级别内果实品质的一致性。建议,单果质量800g和2 200g的果实划为等外果,果实分级幅度采用200g,将等级果(800~2 200g)分为4L、3L、2L、L、M、S和2S共7个级别;可溶性固形物含量标准为"特级≥11.5%,一级≥11.0%,二级和三级≥10.5%"。     

琯溪蜜柚光合特性的研究

 利用Li-6400 光合作用仪对田间条件下7 年生琯溪蜜柚的光合特性进行了系统研究。结果表明: (1) 琯溪蜜柚外围叶片晴天的净光合速率(P_n) 日变化为双峰曲线, 首峰出现在8～10 时, 次峰值小于首峰值, 出现在14 时以后; 阴天呈单峰曲线; 内膛叶片P_n 日变化有双峰、单峰和锯齿形3 种类型。(2)观测期内P_n季节变化近似双峰曲线。(3) 不同月份和不同枝条叶片Pn 对光和CO₂ 响应有较大差别, 光补偿点和饱和点分别为16～46 和1 026～1 656μmol·m^-2·s^-1 , 表观量子效率0.01725～0.05431 ; CO₂ 补偿点和饱和点分别为51～80 和822～926μmol·mol ^-1 , 羧化效率0.01769～0.05191 ;P_n对CO₂ 的响应进程近似双曲线。(4) P_n与气孔导度、蒸腾速率、光照强度正相关, 与胞间CO₂ 浓度负相关, 与温度、湿度和叶面水气压亏缺的相关性比较复杂。(5) P_n 与叶片的叶绿素含量和比叶重之间没有明显相关性。(6) 光合适温为24～34 ℃。     

采后‘琯溪蜜柚’果实柠檬酸合成酶基因的克隆与表达分析

为研究柠檬酸合成酶基因与‘琯溪蜜柚’果实"返酸"的关系,以不同贮藏期‘琯溪蜜柚’果实汁胞为材料,克隆了1个柠檬酸合成酶基因,将其命名为CmCS,其含有1 416 bp开放阅读框,编码具有471个氨基酸的蛋白。生物信息学分析表明,CmCS推导的氨基酸序列与甜橙、川桑等植物的相似度皆大于90%,为稳定的亲水蛋白,亚细胞定位预测其定位于线粒体。结果表明,‘琯溪蜜柚’贮藏期间伴随着有机酸含量逐渐增加,CmCS基因表达量整体先升高后降低,推测其对‘琯溪蜜柚’果实采后有机酸代谢具有一定调控作用。     

‘琯溪蜜柚’及其芽变品种果实有机酸和矿质元素含量分析

对‘琯溪蜜柚’‘黄金蜜柚’‘红肉蜜柚’‘红绵蜜柚’‘三红蜜柚’果实成熟期果肉有机酸和矿质元素含量进行测定。结果表明:与‘琯溪蜜柚’相比,其4个芽变品种果肉柠檬酸含量降低,苹果酸含量普遍升高;4个芽变品种果肉Mg、Fe含量均高于‘琯溪蜜柚’,Zn含量均低于‘琯溪蜜柚’,K、P、Ca、Na含量因品种而异;4个芽变品种果肉Fe/Zn值均升高,K/P值变化因品种而异,其中3个果肉颜色有变异的品种(‘黄金蜜柚’‘红肉蜜柚’‘三红蜜柚’)Ca/Mg、Ca/Na、Mg/Na值普遍升高。     

重庆市万州区引种‘琯溪蜜柚＇的实践与探讨

琯溪蜜柚是我国的名贵果品，已有400多年的栽培历史。近年来，引入重庆市万州区柑橘基地发展，前景喜人。本文论述了琯溪蜜柚的经济价值、主要品种特点和早果丰产栽培技术，旨在有针对性地指导生产。     

制汁苹果品种‘瑞林’

 ‘瑞林’是从法国引进的苹果加工品种中选育出来的优良制汁品种, 经过品种比较试验和区域性试验证明, 该品种制汁品质优良, 还可兼用鲜食, 有很好的早实性、丰产性和稳产性, 生态适应性强,是山岭瘠薄地适宜的优良加工品种。     

制汁苹果品种‘瑞林’

缺乏制汁品种已经成为制约我国苹果浓缩汁加工业发展的瓶颈。本实验室自1998年从法国引进了十几个苹果加工品种，经过品种比较试验和区域性试验．筛选出了制汁品种‘瑞林’。2004年通过山东省林业厅新品种认定，已经在山东、江苏、河南等地规模推广，在陕西、甘肃、辽宁、河北等地试栽。     

‘北红’‘北玫’葡萄制汁及调配工艺研究

以我国自主培育的优良酿酒葡萄品种‘北红’‘北玫’为原料,通过挑选、清洗→破碎→葡萄醪加热处理→榨汁分离→冷冻澄清→加热杀菌→装瓶等过程获得葡萄汁,经后续调配进一步获得葡萄汁预调酒。对制汁过程中的加热浸渍过程设定不同加热温度、加热时间、浸渍时间进行对比研究;通过分析葡萄汁的总糖、有机酸含量等理化指标及单宁、白藜芦醇含量等营养指标,确定了最佳制汁工艺;并对所获得的葡萄汁与纯净水及蒸馏酒进行不同比例调配,通过感官品尝及打分,获得了‘北红’‘北玫’葡萄汁预调酒最佳调配比例。综合工艺优化和品尝分析结果,确定‘北红’‘北玫’葡萄品种具有色泽深厚、高糖、高酸、低单宁的特点,适合制汁并调配预调酒。