柔嫩艾美耳球虫对藏鸡和隐性白羽鸡致病性差异分析

为进一步明确柔嫩艾美耳球虫对球虫易感性差异鸡种的致病性,本研究以1×10~5个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊的剂量分别感染对球虫具有抗性的藏鸡和易感的隐性白羽鸡,接种后观察记录各组鸡的临床表征、血便记分、死亡率、增重、盲肠病变记分、卵囊产量,并于感染前和感染后3、6和8 d每个品种分别随机选择5只鸡采集抗凝血,应用流式细胞仪(FCAS)检测外周血CD4~+T和CD8~+T淋巴细胞亚群数量。结果显示,柔嫩艾美耳球虫感染后藏鸡相对增重率高于隐性白羽鸡,死亡率、血便记分和盲肠病变记分均低于隐性白羽鸡,但卵囊产量高于隐性白羽鸡。外周血T淋巴细胞亚群变化方面,感染前,藏鸡CD4~+T淋巴细胞数及CD4~+/CD8~+比值均高于隐性白羽鸡。感染后第3天,藏鸡CD4~+、CD8~+ T淋巴细胞数及CD4~+/CD8~+比值下降,隐性白羽鸡CD8~+ T淋巴细胞数略有下降,CD4~+T淋巴细胞数及CD4~+/CD8~+比值上升,但CD4~+/CD8~+比值仍显著低于藏鸡(P0.05)。感染后第6天,2个品种鸡CD4~+ T淋巴细胞数及CD4~+/CD8~+比值均下降,其中藏鸡表现为显著下降(P0.05),而隐性白羽鸡仅CD4~+/CD8~+比值显著降低(P0.05),隐性白羽鸡CD8~+ T淋巴细胞数显著升高(P0.05)。感染后第8天,2个品种鸡CD4~+/CD8~+比值显著下降(P0.05),藏鸡CD8~+ T淋巴细胞数显著高于隐性白羽鸡(P0.05),但CD4~+/CD8~+比值显著低于隐性白羽鸡(P0.05)。结果表明,球虫对藏鸡和隐性白羽鸡的致病性存在差异,这种差异与T淋巴细胞介导的免疫应答反应密切相关。     

柔嫩艾美耳球虫对藏鸡和隐性白羽鸡致病性差异分析

为进一步明确柔嫩艾美耳球虫对球虫易感性差异鸡种的致病性,本研究以1×10⁵个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊的剂量分别感染对球虫具有抗性的藏鸡和易感的隐性白羽鸡,接种后观察记录各组鸡的临床表征、血便记分、死亡率、增重、盲肠病变记分、卵囊产量,并于感染前和感染后3、6和8 d每个品种分别随机选择5只鸡采集抗凝血,应用流式细胞仪（FCAS）检测外周血CD4⁺T和CD8⁺T淋巴细胞亚群数量。结果显示,柔嫩艾美耳球虫感染后藏鸡相对增重率高于隐性白羽鸡,死亡率、血便记分和盲肠病变记分均低于隐性白羽鸡,但卵囊产量高于隐性白羽鸡。外周血T淋巴细胞亚群变化方面,感染前,藏鸡CD4⁺T淋巴细胞数及CD4⁺/CD8⁺比值均高于隐性白羽鸡。感染后第3天,藏鸡CD4⁺、CD8⁺ T淋巴细胞数及CD4⁺/CD8⁺比值下降,隐性白羽鸡CD8⁺ T淋巴细胞数略有下降,CD4⁺T淋巴细胞数及CD4⁺/CD8⁺比值上升,但CD4⁺/CD8⁺比值仍显著低于藏鸡（P<0.05）。感染后第6天,2个品种鸡CD4⁺ T淋巴细胞数及CD4⁺/CD8⁺比值均下降,其中藏鸡表现为显著下降（P<0.05）,而隐性白羽鸡仅CD4⁺/CD8⁺比值显著降低（P<0.05）,隐性白羽鸡CD8⁺ T淋巴细胞数显著升高（P<0.05）。感染后第8天,2个品种鸡CD4⁺/CD8⁺比值显著下降（P<0.05）,藏鸡CD8⁺ T淋巴细胞数显著高于隐性白羽鸡（P<0.05）,但CD4⁺/CD8⁺比值显著低于隐性白羽鸡（P<0.05）。结果表明,球虫对藏鸡和隐性白羽鸡的致病性存在差异,这种差异与T淋巴细胞介导的免疫应答反应密切相关。     

藏鸡和隐性白羽鸡感染柔嫩艾美耳球虫后免疫相关基因的表达变化分析

试验旨在从免疫遗传学的角度初步探讨藏鸡（TC）和隐性白羽鸡（RWC）对柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）易感性差异的分子机制,分别用1×10⁵个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊感染对球虫具有抗性的藏鸡和易感的隐性白羽鸡。应用实时荧光定量PCR检测藏鸡和隐性白羽鸡感染前0 d和感染后第2、4、6和8天脾脏、盲肠、胸腺、法氏囊中γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）、IL-16、Toll样受体（TLR3）和TLR15免疫相关基因的转录水平变化。结果显示,藏鸡脾脏IFN-γ、IL-2、IL-16及TLR3、TLR15免疫相关基因转录水平于感染后第4和8天明显上调,隐性白羽鸡则无明显变化。藏鸡盲肠IFN-γ转录水平在感染后第2天显著上调（P<0.05）,TLR3在感染后第4天起显著上调（P<0.05）,其余免疫相关基因变化幅度不大;隐性白羽鸡盲肠IFN-γ转录水平在感染后第8天显著上调（P<0.05）,IL-2在感染后第2天起显著上调（P<0.05）,IL-16在感染后第6天起显著上调（P<0.05）,TLR3在感染后第2和8天显著上调（P<0.05）,TLR15变化幅度不大。各免疫相关基因在2个品种鸡胸腺和法氏囊中均出现上调或下调,但除藏鸡法氏囊TLR3和TLR15转录水平变化幅度相对较大外,其余免疫相关基因与感染前相比变化幅度不大。以上结果显示,球虫感染主要导致藏鸡和隐性白羽鸡脾脏和盲肠中的各免疫相关基因出现显著变化,表明宿主的遗传背景在一定程度上可影响球虫感染的免疫应答。     

雏鸡感染柔嫩艾美耳球虫后血清生化指标的动态变化

选择80只14日龄蛋公雏,随机均分为对照组和感染组。感染组每只鸡接种8.0&#215;104个E.tenella孢子化卵囊,分别于感染后0、3、6、9、12d采血,测定血清生化指标。结果表明:与对照组相比,感染组血清尿酸(UA)、钾(K)、肌酐(Cre)、一氧化氮(NO)含量和乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)、一氧化氮合成酶(iNOS)活性均有升高趋势,其中血清UA含量于3、6、9d显著升高(P&lt;0.01或P&lt;0.05);血清Cre、K含量和LDH活性在3、6d达显著水平(P&lt;0.05或P&lt;0.01);血清iNOS在6、9d显著升高(P&lt;0.01或P&lt;0.05);血清NO含量及ALP活性仅在6d升高明显(P&lt;0.05或P&lt;0.01)。血清甘油三酯(Tg)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、铁(Fe)、磷(P)含量和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、超氧化物岐化酶(SOD)活性较对照组均呈下降趋势,其中血清Tg、TP及Fe含量在6、9d显著降低(P&lt;0.05或P&lt;0.01);血清P在3、9d差异显著(P&lt;0.05或P&lt;0.01);血清ALB含量和GSH-Px活性只在6d存在显著差异(P&lt;0.05);血清SOD活...     

柔嫩艾美耳球虫毒害艾美耳球虫变位艾美耳球虫交叉免疫试验

柔嫩艾美耳球虫毒害艾美耳球虫变位艾美耳球虫交叉免疫试验黄兵，赵其平，何林华，吴薛忠，陈兆国，史天卫（中国农科院上海家畜寄生虫病研究所，２００２３２）鸡感染球虫后会产生一种抵抗再次感染的免疫反应，这种免疫反应具有种的特异性，即感染某种球虫不能保护抵抗另...     

中草药和球敌对鸡感染柔嫩艾美耳球虫后血清生化指标的影响

将160只14日龄雏鸡随机分为未感染对照组(Ⅰ)、感染对照组(Ⅱ)、中草药组(Ⅲ)和球敌组(Ⅳ),每组40只.除Ⅰ组外,其余3组每只鸡口服感染8.0×10~4个E.tenella孢子化卵囊,于感染当天,Ⅲ、Ⅳ组鸡分别饮用有效质量浓度为10 g/L和1 mg/L的抗球虫中草药饮水剂和球敌,连用12 d.对球虫感染0、3,6、9、12 d时的血清TP、ALB、Tg、UA、Cre、MDA含量和LDH、ALP、SOD、GSH-Px、CAT活性的动态变化进行测定.结果表明:与Ⅱ组鸡比较,Ⅲ、Ⅳ组血清TP含量于感染后6、9 d分别显著提高了22.31%(P<0.05)、33.57%(P<0.05)和17.48%(P<0.05)、24.23%(P<0.05);在感染后6 d,ALB含量提高了26.17%(P>0.05)和48.23%(P<0.05),Tg含量也显著提高了49.25%(P<0.01)和40.30%(P<0.01).而UA含量在感染后3 d显著降低了42.39%(P<0.01)和42.48%(P<0.01);LDH活性于感染后3、6 d分别降低了30.77%(P<0.01)、30.13%(P<0.01)和23.36%(P<0.05)、21.21(P<0.05);NO含量和iNOS活性于感染后6 d分别降低了36.18%(P<0.01)、29.91%(P<0.05)和14.25%(P<0.01)、12.36%(P<0.05).虽然Cre,MDA含量及ALP、SOD、GSH-Px、CAT活性与Ⅱ组比较差异不显著,但在感染高峰期(6 d),Cre、MDA含量和ALP活性分别降低了17.51%、12.52%,9.21%、14.58%和16.92%、14.39%,而SOD、GSH-Px、CAT活性分别提高了5.65%、7.33%,15.01%、19.82%和65.97%、52.08%.与Ⅰ组比较,除UA、Cre含量和SOD活性差异显著(P<0.05或P<0.01)外,其他指标均无显著差异.提示:中草药和球敌通过抵抗球虫感染,在一定程度上有助于保持血清生化指标的相对恒定.     

鸡感染巨型艾美耳球虫后血清生化指标的变化

以１５日龄公雏为试验对象,利用ＴＥＣＨＮＩＣＯＮＲＡ－１０００ＳＹＳＴＥＭ血液生化分析仪,研究了鸡在人工感染Ｅ．ｍａｘｉｍａ（４２０００个孢子化卵囊／只）后３、５、７、９、１１天时其血清中葡萄糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、淀粉酶、尿酸、总蛋白、白蛋白、钙和镁的变化。结果表明：Ｅ．ｍａｘｉｍａ感染鸡后可使其血清谷丙转氨酶活性升高,血清白蛋白含量和碱性磷酸酶活性则明显降低（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。尿酸浓度在感染中期降低,晚期升高（Ｐ＜０．０５）。其它各项指标虽有不同程度的升高和降低,但与对照组相比无差异。     

雏鸡感染柔嫩艾美耳球虫后脂质过氧化物的变化

为了探讨柔嫩艾美耳球虫 (E.tenella)对感染雏鸡的损伤机制 ,本试验给 10日龄海兰白公雏鸡口服柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊 8× 10 4个 /只 ,在感染后 2、4、6、7、9、12、16和 2 1d分别各取 5只雏鸡剖检 ,取盲肠并采血 ,观察盲肠病理组织学变化 ,测定盲肠组织及血清中的丙二醛 (MDA )、超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)的水平。结果表明 ,雏鸡在感染 E.tenella后 2～ 4d,盲肠开始出现损伤 ,同时 SOD和 GSH- Px活性也开始下降 ;感染后 4～ 7d,盲肠粘膜上皮和肠腺上皮细胞大量变性、坏死崩解 ,发生严重损伤时 ,盲肠及血清中 MDA含量显著增加 ,并持续到 9d,同时 SOD和 GSH- Px活性也显著下降 ;感染 9d后 ,损伤的盲肠组织及 MDA、SOD和 GSH- Px水平逐渐恢复 ,至 2 1d基本达到正常     

中草药复方制剂对柔嫩艾美耳球虫感染鸡血液生化指标的影响

自制中草药复方制剂对球虫感染鸡的血液成分影响进行研究,初步探讨中草药防治鸡球虫病的机理。由商陆、白头翁、常山等中草药组方,制成散剂。将90只20日龄鸡随机均分成3组,第1组:中药组;第2组:感染不给药组;第3组:不感染不给药组。于给药第2天,除阴性对照组外,其他两组每只雏鸡人工感染球虫孢子化卵囊致球虫病。分别于感染前(0 d)和感染后5,9,13,17,21 d对鸡心脏采血,分离血清。分别测定葡萄糖、总蛋白、碱性磷酸酶等15项生化指标。结果发现除血液超氧化物岐化酶变化不明显外,鸡血清葡萄糖、镁、钠、总蛋白、白蛋白、琥珀酸脱氢酶、淀粉酶、碱性磷酸酶含量明显下降;血清钙、一氧化氮、溶菌酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶含量升高;IgG、IgM、IgA含量升高。中草药复方制剂能够维持血糖等指标稳定在较正常水平,并能明显提高溶菌酶等指标的水平。     

柔嫩艾美耳球虫研究概况

本文简要介绍柔嫩艾美耳球虫生活史、生物学特性、卵囊形状、以及卵囊产量的影响因素，对柔嫩艾美耳球虫日龄与粪便卵囊产量进行科学的分析，旨在为疾病的治疗和预防提供依据。     

布氏艾美耳球虫感染后鸡血清生化指标变化的研究

以１５日龄公雏作为试验对象，利用ＴＥＣＨＮＩＣＯＮＲＡ－１００ＳＹＳＴＥＭ血液生化分析仪，研究了鸡在人工感染Ｅ．brunetti（４１５００个孢子化卵囊/只）后３、５、 ７、９和１１d时其血清中葡萄糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶碱性磷酸酶、乳酸脱氨酶、淀粉酶、尿酸、总蛋白、白蛋白、钙和镁的变化。结果表明：Ｅ．brunetti感染鸡后其血清谷丙转氨酶活性显著升高（Ｐ〈０．０１）；血清白蛋白含量和碱性磷酸酶活性均明显降低（     

柔嫩艾美耳球虫感染肉鸡后盲肠粘膜iNOS活性变化

本研究旨在探讨肉鸡柔嫩艾美耳球虫 (Eimeria tenella)感染与盲肠粘膜诱生型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)活性之间的时间 -效应和剂量 -效应关系。 1日龄黄羽肉鸡 ,在实验室条件下用雏鸡日粮饲养两周后供试。在时间 -效应关系试验中 ,4 5只肉鸡中用 5只鸡作对照 ,其余每只鸡接种 1.0× 10 4 个球虫孢子化卵囊 ,接种前捕杀对照组雏鸡 ,于接种后每 2 4 h分别捕杀 5只 ,取其盲肠粘膜样本 ,按分光光度法检测 i NOS活性 ,连续 8天。试验结果表明 ,与对照组相比 ,肉鸡盲肠组织 i NOS的活性在接种球虫后不同时间明显不同 ,其中接种后第 96 h活性最高 (2 3.70± 7.6 5) ;在剂量 -效应关系试验中 ,4 0只肉鸡以不同的剂量 0、0 .5× 10 4 、1.0× 10 4 、1.5× 10 4 、2 .0× 10 4 、2 .5× 10 4 、3.0× 10 4 、3.5× 10 4 个 /只分别口服接种 ,然后按时间 -效应关系中酶活性最高的时间点取样 ,以同法检测 i NOS活性。试验结果显示 ,接种不同剂量的雏鸡 ,其盲肠组织中 i NOS活性不同 ,与对照组相比各剂量组 i NOS活性均显著增高 (P<0 .0 1) ,在 7个剂量组中 ,以 2 .5× 10 4 个 /只剂量组活性最高 (2 3.37± 8.32 )     

柔嫩艾美耳球虫病毒的鉴定

鸡球虫病是由艾美耳属（Eimeria）的一种单细胞寄生性原虫引起的严重危害养禽业发展的重要疾病之一,遍及世界各地。感染鸡的艾美耳属球虫中,国外已报道在巨型艾美耳球虫（E.maxima）,堆型艾美耳球虫（E.acervu-lina）,毒害艾美耳球虫（E.necatrix）和布氏艾美耳球虫（E.brunetti）中发现了病毒粒子或病毒RNA。但是作为危害最严重的柔嫩艾美耳球虫是否有病毒感染,国内外迄今尚无报道。本研究首次在柔嫩艾美耳球虫中发现病毒并对其进行了鉴定。通过核酸分析、RNA依赖的RNA聚合酶（RDRP）活性和电镜形态观察对病毒进行鉴定。核酸酶的敏感性试验结果表明在柔嫩艾美耳球虫总核酸电泳图谱上观察到的大小分别为1.4、2.4和3.6kb的3条病毒带均不能被DNA酶（100mg/L）降解,但可被RNA酶（1.0mg/L）降解,表明这些核酸为RNA。另外,这些核酸不能被高盐浓度（0.3mol/L NaCl）RNase A（10mg/L）降解,但可被低盐浓度（0.015mol/L NaCl）RNase A（10mg/L）降解,并且采用α-32P标记的UTP掺入法测得该病毒样核酸具有RNA依赖RNA聚合酶（RDRP）活性,表明这些核酸为双链RNA（dsRNA）。利用蔗糖梯度离心和透射电镜技术对柔嫩艾美耳球虫病毒进行了分离和鉴定。电镜负染观察到柔嫩艾美耳球虫病毒粒子外观呈球形,二十面体,无囊膜,直径38nm。     

柔嫩艾美耳球虫感染鸡的体液免疫机理研究

为了揭示鸡柔嫩艾美耳球虫（E．tenella）病的免疫机制,试验从分子水平、细胞、亚细胞对人工攻毒病鸡特异性抗体、免疫细胞的动态变化及在抗球虫中的作用进行了探讨,试验结果如下：一是雏鸡感染E．tenella后,第6天即可在外周血液中检测出特异性IgG,于第18天达到峰值,第23天开始下降,第30天时降至感染后第7天的水平;二是揭示了雏鸡感染E．tenella后,鸡体IgG生成细胞的动态变化规律为：主要免疫器官胸腺、法氏囊、脾脏、盲肠扁桃体和盲肠局部的IgG生成细胞于第2天和第3天开始增殖,在第9天至第16天达到峰值,然后逐渐下降,盲肠扁桃体中的IgG生成细胞在第18天降至对照组水平,盲肠、脾脏和法氏囊中的IgG生成细胞数在第22天仍高于对照组,且差异显著。     

柔嫩艾美耳球虫交叉抗药性试验

以雏鸡为试验对象,以抗球虫指数(ACI)为判断指标,检测5 mg/kg马杜霉素,70 mg/kg盐霉素,1 mg/kg 地克珠利对抗盐霉素株、抗地克珠利株和实验室保存的敏感株的控制效果。结果表明,马杜霉素对3 个虫株都有很好的抑杀效果,地克珠利也可有效地控制抗盐霉素株,同时,盐霉素也可有效地控制抗地克珠利株,说明盐霉素和地克珠利2种药物之间没有交叉抗药性。     

柔嫩艾美耳球虫感染剂量对雏鸡临床病变指标的影响

本试验应用1.0×103、1.0×104和5.0×1043个不同剂量的柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,进行人工感染发病。对雏鸡感染后不同时间的盲肠病变、血便和卵囊排放量以及死亡率进行了观察。结果表明不同剂量的柔嫩艾美耳球虫感染对雏鸡盲肠病变、卵囊排放量、血便以及死亡率均有不同程度的影响,上述指标多随着感染剂量的加大而变大,但卵囊排放量当感染剂量增加到5.0×104时反而降低。血便和死亡率各组均以感染后第6d最为严重,卵囊排放量以感染后第7d最多。     

柔嫩艾美耳球虫的抗原分析

本文采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳，免疫印渍技术，用抗柔嫩艾美耳球虫抗体分析了第二代型殖子、子孢子和未孢子化卵囊的蛋白质。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳银染表明第二代裂殖子主要蛋白质为：１７．６ＫＤ，２９．９ＫＤ，３８．９ＫＤ和５３．７ＫＤ，但用抗Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ抗体免疫印渍法检测出的主要抗原为：７８．０ＫＤ，８３．２ＫＤ和９５．５ＫＤ，这说明并不是含量高的蛋白质就是产生抗体的抗原；子孢子蛋白质含