热应激对文昌鸡雏鸡垂体、卵巢生长发育的影响

为了探究热应激对文昌鸡雏鸡垂体、卵巢生长发育的影响,试验将1日龄健康雌性文昌鸡随机分为对照组(CK组)和热应激组(HS组),每组36只,每天将HS组雏鸡置(40. 0±0. 5)℃人工气候箱中热应激处理2 h,试验为期6周,利用常规组织解剖学方法对雏鸡垂体和卵巢组织重量、细胞分布密度、细胞大小进行测定。结果表明:HS组雏鸡垂体重量于第6周龄时显著低于CK组(P0. 05);HS组雏鸡卵巢重量于第4,5周龄时显著低于CK组(P0. 05); HS组雏鸡垂体中嗜碱细胞分布密度于第1~6周龄时显著低于CK组(P0. 05),HS组各周龄嫌色细胞分布密度与CK组比较均具有显著差异(P0. 05),HS组嗜酸细胞分布密度于第2,3,6周龄时与CK组比较差异显著(P0. 05); HS组雏鸡卵巢中原始卵泡直径于第2,3,5周龄时显著低于CK组(P0. 05),HS组初级卵泡直径于第2,4,5周龄时显著低于CK组(P 0. 05),HS组次级卵泡直径于第4~6周龄时显著低于CK组(P 0. 05);雏鸡卵巢中HS组原始卵泡分布密度于第2,4,6周龄时与CK组比较差异显著(P0. 05),HS组初级卵泡分布密度于第2,3周龄时与CK组比较差异显著(P0. 05),HS组次级卵泡分布密度与CK组比较均差异不显著(P0. 05)。说明热应激损伤了文昌鸡雏鸡垂体、卵巢组织/器官,影响了雏鸡生殖系统的生长发育过程。     

热应激对雄性文昌鸡雏鸡垂体-睾丸轴主要生殖激素分泌及其受体表达的影响

为探讨热应激对雄性文昌鸡雏鸡垂体-睾丸轴(PT axis)中主要生殖激素以及其受体的影响,将72只1日龄健康雏鸡随机分为对照组(CK)和热应激组(HS),饲养6周,每周龄末用ELISA和免疫组化法分别测定雏鸡血清中黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)、睾酮(T)含量及其受体表达情况。结果显示:雏鸡血清中LH、FSH、T水平分别在26～40 ng/L、6～13 IU/L、179～309 ng/L之间波动,且HS组LH和T低于CK组(P0.05),FSH则相反(P0.01);LH受体(LHR)和FSH受体(FSHR)阳性细胞在垂体随机分布,而T受体(TR)阳性细胞主要分布腺垂体中部及边缘,且初期垂体FSHR较多,LHR较少,后期反之,TR分布较少且较为稳定,受热应激影响具有时间效应;LHR、FSHR、TR阳性细胞主要分布于睾丸间质,第3周起,HS组LHR、FSHR、TR阳性细胞数低于CK组。结果表明:热应激干扰雏鸡PT轴生殖激素的正常分泌,阻碍LH、FSH、T受体发育。     

GABA对热应激雏鸡法氏囊组织中IL-IL-6、TNF-TNF-α和HSPHSP70 mRNA表达的影响

试验旨在研究γ-氨基丁酸(GABA)对1~6周龄热应激雏鸡法氏囊组织中IL-6、TNF-α、HSP70 mRNA表达的影响。选择体重相近的1日龄雄性文昌鸡108只,随机平均分为对照组(CK)、热应激(HS)组、GABA+热应激(GABA+HS)组,饲养6周。每周龄末剖取法氏囊组织,采用RT-PCR方法检测雏鸡法氏囊组织中IL-6、TNF-α、HSP70 mRNA的表达水平,分析其在1~6周龄不同组雏鸡法氏囊组织中表达的变化。结果显示:与CK组比较,HS组和GABA+HS组雏鸡法氏囊组织中IL-6 mRNA表达水平上升,且GABA+HS组法氏囊组织中IL-6 mRNA普遍低于HS组;三组的TNF-α mRNA在1~3周龄时均有较低的表达水平,在4~6周龄时表达升高;1~6周龄HS组和GABA+HS组雏鸡法氏囊组织HSP70 mRNA表达水平整体普遍低于CK组。结果表明:热应激导致雏鸡法氏囊组织中IL-6和TNF-α mRNA的表达水平上升,同时抑制HSP70 mRNA的表达,而GABA在一定程度上能够缓解热应激造成的损伤。     

SB203580对热应激雄性雏鸡主要生殖激素分泌的影响

为探讨丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)抑制剂SB203580对热应激雄性雏鸡主要生殖激素含量的影响,试验将72只1日龄健康雄性文昌鸡雏鸡常规饲养2周,随机分为对照(CK)组、热应激(HS)组及热应激+SB203580(HS-I)组,每日中午将HS组与HS-I组雏鸡置于温度为(40.0±0.5)℃,相对湿度为(70±5)%的大型人工气候箱中热处理2 h(12:00—14:00),第3,4,5,6周龄末、热应激前0.5 h对HS-I组雏鸡按体重腹腔注射SB203580 5 mg/kg,HS组及CK组腹腔注射等量生理盐水;然后将HS组及HS-I组雏鸡置于人工气候箱中进行热应激[温度为(40.0±0.5)℃,相对湿度为(70±5)%]2 h(12:00—14:00),CK组雏鸡同时置于没有加热的人工气候箱中2 h。热应激结束后,各组随机抽取6只雏鸡立即采集颈动脉血液,并用酶联免疫吸附法测定雏鸡血浆中促性腺激素释放激素(GnRH)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)等激素含量,试验进行4周。结果表明:与CK组相比,HS和HS-I组的GnRH、LH、T含量在第3,6周显著下降(P0.05),HS-I组的FSH含量在第6周显著降低(P0.05);在第5周,HS-I组FSH和T含量显著高于HS组(P0.05)。说明热应激能显著降低雏鸡生殖激素含量,而SB203580可提高热应激雄性雏鸡FSH和T含量。     

p38 MAPK抑制剂对热应激雌性雏鸡主要生殖激素分泌的影响

为探究p38 MAPK抑制剂SB203580对热应激雌性雏鸡主要生殖激素分泌的影响,将72只1日龄文昌鸡母雏随机分为对照组(CK)、热应激组(HS)和抑制剂组(HS+I),从第三周开始,每天中午12:00对HS、HS+I组雏鸡进行热应激2 h,每周龄末在热应激前30 min给HS+I组雏鸡腹腔注射SB203580(5 ...     

GABA对热应激雏鸡小肠黏膜中IL-IL-7和sIgA含量的影响

为探究γ-氨基丁酸(GABA)对热应激雏鸡小肠黏膜中IL-7和s Ig A含量的影响,选择体重相近的1日龄文昌雏公鸡,随机分为对照(CK)组、热应激(HS)组、50 mg/kg GABA(G50+HS)组和100 mg/kg GABA(G100+HS)组,每组36只,每天13∶00~15∶00将HS组、(G50+HS)组和(G100+HS)组置于(40±0.5)℃人工气候箱中进行热处理,利用ELISA法测定不同周龄雏鸡小肠黏膜液中IL-7和s Ig A含量。结果:HS组的十二指肠、空肠及回肠中IL-7和s Ig A含量显著低于CK组(P0.05);(G50+HS)组和(G100+HS)组十二指肠、空肠及回肠中IL-7和s Ig A含量显著高于HS组(P0.05);(G100+HS)组部分肠段中的IL-7和s Ig A含量与(G50+HS)组比较有显著差异(P0.05)。研究结果表明GABA对热应激造成的肠道损伤具有一定修复作用,能够有效提高热应激状态下雏鸡小肠黏膜的免疫功能,但其保护作用并不与浓度呈正比。     

热应激对兔垂体和下丘脑CAT与SOD水平的影响

为研究不同热应激温度及持续时间对兔下丘脑与垂体抗氧化能力的影响,选用80日龄~90日龄的健康新西兰兔60只,随机分为3组,高热组、低热组和常温对照组。每天热应激3 h,分别在处理后15、30、45、60 d处死,取下丘脑和垂体组织,研究热应激对组织的损伤机制。结果表明,下丘脑与垂体过氧化氢酶(CAT)的活性随着温度的升高显著降低,相同应激温度条件下,随着应激时间的延长其CAT活性显著降低;下丘脑和垂体中超氧化物歧化酶(SOD)的活力随着温度升高显著降低,相同应激温度条件下,随着应激时间的延长同一应激组中其活性也显著降低。说明随着应激时间的延长,应激温度的增加,垂体与下丘脑的抗氧化能力呈下降趋势。     

日粮添加绿原酸对热应激小鼠睾丸抗氧化功能的影响

试验旨在探讨日粮添加不同剂量绿原酸对热应激小鼠睾丸指数、形态、抗氧化及炎症反应的影响。试验择取体重日龄相近的健康雄性小鼠30只,随机分为5组,分别饲喂基础日粮添加绿原酸0 mg/kg(对照组)、0 mg/kg(热应激组,HS)、250 mg/kg(HS+C250组)、500 mg/kg(HS+C500组)及1 000 mg/kg(HS+C1 000组)。饲养10 d后,除对照组外均进行高温处理,8 d后取样分析。结果表明：1)与对照组相比,热处理显著降低小鼠睾丸指数并显著增加生精细胞脱落比率(P<0.05);与HS组相比,日粮添加1 000 mg/kg绿原酸显著增加热应激小鼠睾丸指数并降低生精细胞脱落比率(P<0.05)。2)与HS组相比,日粮添加1 000 mg/kg绿原酸显著降低了热应激小鼠睾丸组织中MDA含量并提高GSH水平(P<0.05),但睾丸组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)及总抗氧化能力(T-AOC)活性在HS、HS+C250、HS+C500及HS+C1 000组之间无显著差异(P>0.05)。3)与HS组相比,日粮添加1 000 mg/kg绿原...     

急性热应激对肉鸡生产性能、血液生化及下丘脑和垂体mRNA表达的影响

本研究旨在评估急性高温下肉鸡的热应激反应、体温调节和代谢变化及其潜在激素调节机制。选取900只1d的公雏(Ross 708)饲养至31日龄;然后,随机分成热应激和无热应激2个处理中。于热应激开始前收集血液样品;随后将一半的笼子移入2个高温房间(35℃)处理8小时;其余笼子留在常温房间(22℃)。热应激处理5小时后收集血液样品,屠宰并收集下丘脑和垂体样品(每个处理16只肉鸡),保存至-80℃,比较下丘脑和垂体中关键的促肾上腺皮质激素和甲状腺激素基因的m RNA水平。结果发现:HS组肉鸡采食量和体重及血浆碳酸氢根离子、钾离子、CO_2和T_3水平显著降低(P 0.05),而其死亡率及血浆葡萄糖、p H、T4和皮质酮水平显著增加(P 0.05)。HS组中肉鸡垂体促肾上腺皮质激素释放激素受体1基因m RNA表达显著下调(P0.001),促肾上腺皮质激素释放激素受体2基因m RNA表达显著上调(P=0.001)。热应激提高了垂体甲状腺激素受体β(P=0.01)(2.8倍)和甲状腺刺激激素β(P=0.009)(1.4倍)基因m RNA表达;而对下丘脑相关基因m RNA水平无影响。结果表明:热应激显著影响促甲状腺激素轴和促肾上腺皮质激素轴激素分泌反应,期望通过营养策略调节此通对缓解热应激。     

促性腺激素释放激素在牦牛睾丸中的免疫组化定位

牦牛属于季节性繁殖牛科动物,且生长在海拔较高的寒冷地带。促性腺激素释放激素(GnRH)可通过下丘脑-垂体-性腺轴作用于性腺,调节性腺发育及生殖功能。为探讨GnRH在牦牛睾丸中的作用机理,本文对牦牛睾丸进行免疫组化SP法染色,研究GnRH在牦牛睾丸不同细胞中的表达特征。结果显示GnRH主要分布于睾丸组织的间质细胞与生精细胞的胞质中,且在生精细胞中呈强表达,间质细胞次之。说明GnRH对睾丸的生殖功能紧密相连,一方面通过性腺轴促进睾酮和精子的生成,另一方面通过旁分泌或自分泌的方式调节生殖激素。     

大通牦牛的培育——野、家牦牛杂种公牛生精水平的研究

通过解剖组织学、体视学方法及聚丙酰胺凝胶电泳方法,对半血野牦牛,横交半血野牦牛和家牦牛6～24月龄公牛睾丸组织进行了超微结构形态学观察,组织定量学参数、乳酸脱氢同工酶(LDH)及LDH-x活性及百分含量比较分析.结果表明半血野牦牛、横交半血野牦牛和家牦牛睾丸组织的超微结构、生殖细胞发育程度相似.12月龄时公牛精细胞开始分化,第一批精子生成,睾丸开始迅速生长,应为牦公牛的初情期.睾丸的重量和曲细精管、生殖上皮的体积密度及生精上皮高度随月龄增长而逐渐增加和变厚.曲细精管的空腔体积密度及间质组织的体积密度随月龄增长而逐渐减小,睾丸和附睾LDH同工酶随月龄增长和睾丸组织生殖细胞发育,活性分布规律和电泳图谱特征表现出明显组织器官特异性.24月龄时,睾丸和附睾6条带俱全.LDH-x位于LDH4及LDH5之间,标志着牦公牛性成熟开始和睾丸发育及精子生成是同步的.     

Orexin B在猪下丘脑-垂体-性腺轴的分布及对生殖调节的体外研究

本试验采用免疫组化和放射免疫测定的方法对Orexin B在1月龄健康苏钟猪和和性成熟青年母猪下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴的分布定位及其在HPG轴各级水平的直接分子生物学作用进行了研究。结果显示,Orexin B在下丘脑、垂体和性腺均有分布。在下丘脑的分布比较广泛,其中以穹隆周区、外侧区、背内侧核和后区的Orexin B免疫阳性神经元分布最为密集,而下丘脑前区、视前区和视交叉上核的Orexin B免疫阳性神经元分布较少。在垂体Orexin B主要分布在腺垂体的远侧部和中间部的内分泌细胞内。在性腺器官,Orexin B主要分布在初级卵泡、次级卵泡的颗粒细胞以及卵母细胞的细胞质和睾丸、附睾间质细胞内;用不同剂量的Orexin B处理体外培养的下丘脑脑片、腺垂体细胞和卵巢颗粒细胞,其中1000nmol·L-1剂量组Orexin B能极显著的刺激GnRH的释放(P0.01),100和1000nmol·L-1剂量组能显著(P0.05)刺激LH和E2的释放。结果表明Orexin B在HPG轴各级水平直接参与猪生殖活动的调节。     

哺乳动物下丘脑-垂体-卵巢轴的研究进展

哺乳动物的下丘脑、垂体和卵巢分泌的激素在功能上相互作用,构成一个完整的神经内分泌生殖调节体系,即下丘脑垂体卵巢轴,它在生殖活动中起着主要的调节作用。下丘脑中分布的GnRH神经元可以分泌GnRH,GnRH调节垂体中促性腺激素细胞分泌促性腺激素FSH和LH,促性腺激素作用于卵巢受体,引起雌激素和孕酮分泌并影响生殖活动。从组织学角度上研究,下丘脑垂体卵巢轴中的结构,如GnRH神经元、促性腺激素细胞、卵泡随周期性变化而呈现出不同的形态结构和分泌特点。因此,对以上各种细胞的研究是探讨其所分泌激素的基础,而下丘脑垂体卵巢轴中的各种激素的研究则是了解和控制动物繁殖机能的关键。     

木薯叶乙醇提取物对热应激下文昌鸡生产性能及血清抗氧化性能的影响

为了研究木薯叶乙醇提取物(cassava leaf ethanolic extracts, CE)对文昌鸡生产性能及血清抗氧化性能的影响,试验选取5周龄体重相近的文昌鸡432只,随机分为6组,每组6个重复,每个重复12只(公母各半),分为常温对照组[NC组,(25±2)℃]、热应激对照组[HS组,(38±3)℃]、热应激1,2,3组[CE200组、CE400组、CE600组,(38±3)℃]及热应激阳性对照组[VC400组,(38±3)℃],NC组及HS组分别饲喂玉米-豆粕型基础日粮,其余4组试验组分别饲喂添加了200 mg/kg、400 mg/kg、600 mg/kg的CE及400 mg/kg维生素C的基础日粮,试验期为28 d,测定试验鸡的生产性能及抗氧化指标。结果表明:热应激显著降低文昌鸡的生产性能,添加400 mg/kg、600 mg/kg CE及400 mg/kg维生素C可以使热应激下文昌鸡总增重分别较HS组显著上升6.95%、11.39%及13.31%;添加200～600 mg/kg CE试验鸡平均日采食量(ADFI)分别较HS组显著上升4.13%、5.23%、8.82%;但添加CE对料重比无显著影响。添加CE可降低热应激下文昌鸡血清皮质酮及丙二醛(MDA)含量,增加血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)酶活性,提高血清总抗氧化能力。说明热应激会影响文昌鸡的生产性能及抗氧化性能,饲粮中添加200～600 mg/kg CE能够缓解热应激对试验鸡的负面影响,其中以600 mg/kg添加效果最佳。     

文昌鸡GnRHR基因在不同组织中差异表达的研究

采用半定量RT-PCR方法检测文昌鸡处于性腺轴(下丘脑-垂体-性腺)的不同组织中GnRHR基因的表达水平,结果表明:GnRHR基因mRNA表达于鸡的3种组织--下丘脑、垂体和卵巢;GnRHR mRNA在3种组织中的表达量不同:下丘脑和垂体中表达量较高,卵巢中表达量较弱.     

大豆黄酮对急性热应激条件下公鸡睾丸发育、精液品质和血清甲状腺激素水平的影响

选取18只32周龄岭南黄公鸡,随机分为3组,每组6只。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ与Ⅱ组分别在基础日粮中添加大豆黄酮3mg/kg和6mg/kg。试验期14d。在试验的第10天对公鸡施行急性热应激(39℃,2h;40℃,2h)处理,分别于热应激前1d,热应激后4h、2d采集血样测定甲状腺激素(T3、T4)水平。试验结束时,宰杀公鸡、称睾丸重量并观察其组织学结构。结果表明:日粮中添加3mg/kg的大豆黄酮能显著(P<0.05)增加睾丸曲细精管直径。大豆黄酮对急性热应激公鸡的精子活率、精液密度、各级生精细胞含量、睾丸增重、睾丸重/体重等无显著影响。日粮中添喂3mg/kg和6mg/kg的大豆黄酮可降低急性热应激后公鸡T3、T4水平,但无显著差异。     

GPR54基因在绵羊不同组织中的表达及其在睾丸中的定位研究

试验旨在研究GPR54(G-protein coupled receptor 54)基因在绵羊不同组织中的表达及其在4~6月龄公羔睾丸组织中的表达特性及定位。本研究采用实时荧光定量PCR法检测各组织GPR54 mRNA表达规律,以及其在不同月龄公羔睾丸中的表达量,运用免疫组化技术对睾丸中GPR54基因进行定位分析。结果显示,GPR54在不同组织中均有不同程度的表达,其中在下丘脑、垂体和睾丸中大量表达;GPR54在4~6月龄绵羊公羔睾丸组织中呈阶段性表达,6月龄表达量显著高于4和5月龄(P<0.05);4月龄时,在精原细胞和极少数的初级精母细胞中检测到较弱的阳性信号;6月龄性成熟时,在睾丸中分裂早期的精子细胞检测到强阳性信号。综上表明,GPR54基因在绵羊不同组织中广泛表达,在下丘脑-垂体-睾丸生殖轴中发挥重要的作用,并与动物的性成熟及雄性动物精子发生过程有密切的关系。     

绞股蓝多糖对热应激小鼠睾丸氧化损伤的保护作用

为了探究不同剂量绞股蓝多糖(Gynostemma pentaphyllum polysaccharides, GPP)对热应激引起的小鼠睾丸氧化损伤的保护作用，本研究采用生物化学、酶联免疫吸附、免疫组化等技术分别对空白对照(Con),热应激对照(HS),绞股蓝多糖高(GPP-H)、中(GPP-M)、低剂量(GPP-L)组小鼠的睾丸指数、睾丸细胞凋亡、雄激素受体表达以及生精小管直径、睾丸组织抗氧化能力进行观察和测定分析。结果发现，GPP-L组和GPP-M组血清睾酮含量与HS组相比均显著升高(P<0.05);GPP-M组和GPP-L组的丙二醛(MDA)含量与HS组相比显著降低(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量、过氧化氢酶(CAT)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力与HS组相比显著升高(P<0.05);GPP各剂量组睾丸曲精小管直径与HS组相比均显著增大(P<0.05);各GPP剂量组凋亡细胞累计光密度值/视野下睾丸组织的面积(IOD/Area)较HS组均有所减小，其中，GPP-M组显著减小(P<0.05);各GPP剂量组AR阳性细胞IOD...     

Ghrelin对动物生殖调控的研究进展

Ghrelin是一种主要由胃肠道分泌产生的28个氨基酸组成的多肽,具有促进生长激素释放、促进摄食、参与能量代谢平衡等多种生理作用,近年来研究表明Ghrelin也参与动物生殖的调控。Ghrelin及其受体在下丘脑-垂体-性腺轴都有分布,体内外试验表明,Ghrelin在下丘脑、垂体和卵巢(睾丸)水平上对生殖具不同调节作用。基于此,论文就Ghrelin对动物生殖调控的研究进展做一综述。     

冷应激对雏鸡下丘脑-垂体-甲状腺轴的影响

越来越多的证据表明,应激能够激活下丘脑-垂体-甲状腺轴,进而影响促甲状腺激素释放激素(TRH)、促甲状腺激素(TSH)及甲状腺激素的合成与分泌。为了探明冷应激对雏鸡下丘脑-垂体-甲状腺轴的影响,以公雏鸡为实验动物,进行急性(0.25、1、3、6、12h与24h)与慢性(5、10d与20d)冷应激处理(12±1)℃,检测了雏鸡下丘脑TRH mRNA的表达水平,血清TSH、FT(3T3的游离形式)及FT(4T4的游离形式)的含量。结果表明:急性应激时,TRH mRNA的表达水平在各应激时间点均显著升高,TSH变化不明显,FT3开始无变化,在6h时突然降低,而后又显著升高,FT4开始变化不大,6h后显著升高;慢性应激时,TRH mRNA的表达水平与相应的对照组相比显著降低,TSH变化仍不明显,FT3呈上升趋势,而FT4呈下降趋势。这说明冷暴露可以使雏鸡下丘脑-垂体-甲状腺轴的激素分泌发生改变,而且不同程度的冷应激对同一激素也会产生不同的影响。