凤尾草乙醇提取物体外抑菌试验方法的筛选

为了筛选凤尾草乙醇提取物体外抑菌试验最佳方法,通过打洞法、牛津杯法、干、湿纸片法、二倍稀释法测定乙醇以及中药凤尾草乙醇提取物对大肠杆菌的体外抗菌效果。结果二倍稀释法中乙醇的最低抑菌浓度为6.25%;无水乙醇在打洞法、牛津杯法、纸片法、二倍稀释法中均无抑菌圈;凤尾草乙醇提取物在打洞法、牛津杯法、湿纸片法中抑菌圈直径分别为20±1 mm、14±1 mm、13±2 mm;凤尾草乙醇提取物在干纸片法中无抑菌圈。表明无水乙醇可作中药提取物的溶剂用于打洞法、牛津杯法、湿纸片法;打洞法用于凤尾草乙醇提取物的体外抑菌试验重复性好,抑菌圈质量高。     

中药"止泻散"防治仔猪腹泻病的试验研究--单味中药及复方的体外抑菌试验

本试验采用纸片法和试管二倍稀释法进行体外抑菌试验,观察复方制剂中药“止泻散”及其组成成分中的五味中药:白头翁、秦皮、黄柏、苦参、马齿苋,对引起仔猪腹泻的常见细菌大肠杆菌及沙门氏菌的抑菌圈大小及其最小抑菌浓度(MIC)。     

中药“止泻散”防治仔猪腹泻病的试验研究——单味中药及复方的体外抑菌试验

本试验采用纸片法和试管二倍稀释法进行体外抑菌试验，观察复方制剂中药“止泻散”及其组成成分中的五味中药：白头翁，秦皮、黄柏、苦参、马齿苋，对引起仔猪腹泻的常见细菌大肠杆菌及沙门氏菌的抑菌圈大小及其最小抑菌浓度(MIC)。     

防治家禽腹泻的复方中药筛选及其提取工艺研究

为筛选能够有防治家禽腹泻的复方中药,选择对大肠杆菌有抑菌效果的单味中药,配置14种复方,结合对金黄色葡萄球菌、致病性沙门菌的抑菌能力,筛选出一个复方中药,通过正交试验确定该复方中药最佳提取工艺。结果显示:筛选的复方中药乙醇提取物(1 g/mL,200μL)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鸡大肠杆菌、鸭大肠杆菌、鸡致病性沙门菌、鸭致病性沙门菌(指示菌浓度1×10^8cfu/mL)的抑菌圈直径分别为24.21mm、31.36mm、25.19mm、24.12mm、25.00 mm、25.49 mm;硫酸新霉素对上述致病菌的抑菌圈直径分别为23.61 mm、26.52 mm、14.69 mm、16.00 mm、24.11 mm、25.49 mm。经正交试验优化的最佳提取工艺为:15倍溶剂、提取时间60 mim、乙醇浓度90%、提取2次。优化后提取物体外抑菌试验(O78)的抑菌圈均值为26.65 mm。研究表明:筛选的复方中药对引起家禽腹泻的主要致病菌具有良好抑菌、杀菌作用,正交试验确定的提取工艺稳定可行。     

不同中药复方对3种鸡细菌性腹泻病原菌的体外抑菌试验

为研究中药复方对3种鸡细菌性腹泻病原菌的抑制效果,采用纸片法对自拟的6个中药复方进行敏感性试验,并用试管二倍法测定中药复方的最小抑菌浓度。结果表明,6个中药复方均具有不同程度的抑菌作用,其中复方4对大肠杆菌的抑菌效果较好,平均抑菌圈直径为21.2 mm,平均MIC值为62.5 mg/mL;复方1对沙门氏菌效果较好,平均抑菌圈直径为19.8 mm,平均MIC值为41.7 mg/mL;复方3对多杀性巴氏杆菌效果较好,平均抑菌圈直径为23.3 mm,平均MIC值为3.92 mg/mL,3个复方均呈高度敏感。表明中药复方可以用于鸡细菌性腹泻的防治。     

肠杆菌肽对鸡源大肠杆菌和沙门氏菌抑菌作用

试验旨在研究肠杆菌肽对临床分离大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌作用特性。采用药敏纸片法、微量肉汤法测定肠杆菌肽对大肠杆菌、沙门氏菌抑菌圈直径和最小抑菌浓度,通过微量棋盘法测定肠杆菌肽与硫酸粘杆菌素联合抑菌效果,并测定肠杆菌肽对大肠杆菌和沙门氏菌的生长抑制作用。结果显示,肠杆菌肽对鸡源大肠杆菌和沙门氏菌的最小抑菌浓度分别在4～8 mg/L和4～16 mg/L之间;抑菌圈直径在6.0～21.6 mm和6.0～22.5 mm之间。肠杆菌肽与硫酸粘杆菌素的联合抑菌指数（FIC）在1.0～1.5之间。研究表明,肠杆菌肽对大肠杆菌和沙门氏菌具有良好的抑菌作用,与硫酸粘杆菌素无联合抑菌效应。     

加味珠蓼散对鸡大肠杆菌腹泻的防治作用研究

为了探索加味珠蓼散对鸡腹泻的防治作用,以便为加味珠蓼散的临床应用提供试验依据,将100羽2日龄海兰蛋鸡随机分成5组,每组20羽,进行治疗试验。各组蛋鸡适应性饲养3d后,均用O2型大肠杆菌腹腔注射致泻,出现腹泻症状后,取泻粪检测病原,A、B、C组分别用治疗低(0.05 mL/羽)、中(0.1 mL/羽)、高(0.2 mL/羽)剂量加味珠蓼散灌服治疗,D组用对照药物氟苯尼考组(1.5 mg/羽)灌服治疗、E组不治疗作为空白对照,记录各组雏鸡的腹泻情况,计算有效率和治愈率。另取2日龄海兰蛋鸡50羽,随机分成5组,每组10羽,进行预防试验。各组蛋鸡适应性饲养3d后,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别用预防低(0.025mL/羽)、中(0.05mL/羽)、高(0.1mL/羽)剂量加味珠蓼散灌服,1次/d,连续灌服7d,Ⅳ组用对照药物氟苯尼考组(0.75mg/羽)灌服,1次/d,连续灌服7d,Ⅴ组不给药作为空白对照,各组雏鸡均用O2型大肠杆菌腹腔注射致泻,观察并记录各组的发病、死亡及恢复情况。结果显示:治疗试验中,各剂量的加味珠蓼散和对照药物均对大肠杆菌腹泻具有治疗作用,且有效率和治愈率均表现为:C组B组D组A组,而E组腹泻无明显改善;预防试验中,O2型大肠杆菌腹腔注射24h后,Ⅰ～Ⅴ组的保护率分别为40%、60%、100%、40%和0%。研究表明:加味珠蓼散对雏鸡大肠杆菌腹泻具有较好的预防和治疗作用,高、中剂量时优于氟苯尼考。     

裸花紫珠提取物对鸡源大肠杆菌的体外抑菌效果

为研究裸花紫珠提取物对鸡源大肠杆菌体外抑菌试验,采用牛津杯法和肉汤二倍稀释法测定裸花紫珠提取物抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC).结果表明,裸花紫珠提取物对大肠杆菌属于中度敏感,平均抑菌圈直径为16 mm,最小抑菌浓度(MIC)为32.0 mg/mL.试验结果表明,裸花紫珠提取物对鸡源大肠杆菌具有良好的抑菌效果,为下一...     

脂肪酶对三丁酸甘油酯抑菌效果的影响研究

本试验旨在研究脂肪酶处理对不同浓度三丁酸甘油酯抑制大肠杆菌、沙门氏菌及金黄色葡萄球菌能力的影响。选用的脂肪酶浓度为3、6、9 mg/mL,三丁酸甘油酯浓度为20、40、60 mg/mL,抑菌效果以抑菌圈直径表示,抑菌圈直径越大表明抑菌效果越强。结果表明:三丁酸甘油酯本身不具备明显的抑菌能力,在被脂肪酶酶解后,其抑菌能力增强;当三丁酸甘油酯浓度为20 mg/mL时,酶解后其对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径由7.9 mm增大至11.6 mm(P0.05);对大肠杆菌的抑菌直径由10.0 mm增大至12.7 mm(P0.05);当三丁酸甘油酯浓度为40 mg/mL或60 mg/mL时,酶解后其对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果由低度或中度敏感提高至高度敏感,且脂肪酶浓度对抑菌效果无显著影响。结果显示,脂肪酶酶解能增强三丁酸甘油酯对大肠杆菌、沙门氏菌以及金黄色葡萄球菌的抑菌能力。     

单一中草药以及复方中草药体外抑菌效果研究

试验旨在探究单一中草药、多种中草药组方对猪肠道大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用,筛选效果较好的单一中草药以及中草药组方。试验选用黄芪、何首乌、黄连、金银花、大黄、白头翁、五倍子、葛根等八种中草药的提取液,采用双层琼脂扩散法和微量二倍稀释法,测定其对3种育肥猪常见的有害肠道菌株抑菌圈的大小和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:(1)猪大肠杆菌对黄连、金银花和五倍子呈高度敏感,抑菌圈直径分别为24.54、20.13、20.13 mm,其MIC值分别为31.25、125、125 mg/ml。(2)金黄色葡萄球菌对黄芪、黄连和大黄呈低度敏感,抑菌圈直径分别为14.07、12.57、14.4 mm,其MIC值分别为250、125、125 mg/ml。(3)沙门氏菌对黄芪呈低度敏感,MIC值为250 mg/ml,黄连和大黄对沙门氏菌呈中度敏感,MIC值均为62.5 mg/ml。(4)黄芪和何首乌提取液混合试验,以黄芪0.75 mg/ml,何首乌0.25 mg/ml组合效果最好,对大肠杆菌呈中度敏感,抑菌圈直径为16.1 mm;对金黄色葡萄球菌呈低度敏感,抑菌圈直径为11 mm;对沙门氏菌呈不敏感,抑菌圈直径为9.8 mm。(5)黄芪、黄连和大黄三种提取液混合试验,以黄芪0.25 mg/ml,黄连0.5 mg/ml,大黄0.25 mg/ml组合效果最好,对大肠杆菌呈低度敏感,抑菌圈直径为12.4 mm;对金黄色葡萄球菌呈低度敏感,抑菌圈直径为12.2 mm;对沙门氏菌呈低度敏感,抑菌圈直径为12.9 mm。综上所述,单一添加黄芪、黄连和大黄三种中草药对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌体外抑菌效果较好。以黄芪,黄连和大黄三种中草药复配的组方对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌体外抑菌效果最好。     

石榴皮止泻散体外抑菌效果研究

为评价石榴皮止泻散的体外抑菌效果，将石榴皮止泻散制成水煎液，采用平板法进行体外抑菌试验，并采用试管稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示，平板法体外抑菌试验中每1 mL含1 g生药的石榴皮止泻散水煎液孔周围有明显的抑菌圈，平均抑菌圈直径分别为14.0和15.7 mm;试管稀释法测定石榴皮止泻散对大肠杆菌的MIC为25 mg/mL,MBC为50 mg/mL。结论，石榴皮止泻散水煎液在体外对大肠杆菌具有抑制和杀灭作用。     

中药对致犊牛腹泻大肠杆菌体外抑菌效果

本试验旨在探讨黄连、白头翁和黄芩等中药对致犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌效果，为犊牛腹泻的防控提供参考。试验菌株为致犊牛腹泻大肠杆菌，采用水提法提取黄连、白头翁和黄芩等24种中药，以抑菌圈直径大小、药物的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)为观测指标评判中药对引发犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌效果。结果显示，黄芩、地榆2种中药对致犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑制效果最明显，抑菌圈直径分别是10.15 mm和10.07 mm, MIC均为31.3 mg/mL;其余22种中药对试验菌株的体外抑菌效果较差，未表现出明显的抑菌效果。本试验结果表明，黄芩、地榆2种中药对致犊牛腹泻大肠杆菌有一定的体外抑制作用，具备一定的临床应用潜力。     

杠板归对仔猪大肠杆菌的体外抑菌试验

采用纸片扩散法(K-B法)检测不同来源的大肠杆菌对21种抗生素类药物和不同浓度杠板归的敏感性,采用二倍稀释法确定杠板归的最小抑菌浓度,评估杠板归对多重耐药菌株的抑制效果。试验结果显示:20%杠板归水浸液对肠道多重耐药大肠杆菌平均抑菌圈达到18 mm,对仔猪粪便大肠杆菌平均抑菌圈达到23 mm,均为高度敏感;10%杠板归水浸液对仔猪粪便大肠杆菌平均抑菌圈达到15 mm,高度敏感。杠板归与20种抗菌药联合对大肠杆菌抑菌圈明显增大。杠板归对多重耐药大肠杆菌菌株有明显抑制效果,杠板归与20种抗菌药联用起到协同作用,杠板归抗菌活性强可以代替抗菌药单独用于仔猪大肠杆菌病的治疗,为研制临床上耐药性疾病防治的新药物提供参考。     

22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌试验

开展了乌梅、白头翁、黄连、穿心莲等22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌试验。按照常规法制备中药水提物,采用平板打孔法和微量稀释法测定了22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,22味中药中有10味中药对犊牛腹泻大肠杆菌有抑菌作用,其中乌梅、诃子、五倍子和半边莲对犊牛腹泻大肠杆菌的抑菌作用最佳,抑菌圈直径为15 mm以上,为高度敏感;其次是黄连、秦皮、穿心莲、连翘、金银花、石榴皮,抑菌圈直径均大于10 mm,为中度敏感;黄柏、紫花地丁等12味中药对犊牛腹泻大肠杆菌无抑菌作用。对五倍子、乌梅、诃子和半边莲等抑菌作用较好的中药可进一步开展研究。     

痢见停与其他治疗仔猪黄白痢药物的抑菌比较试验

痢见停浓度为1%时,大肠杆菌和沙门氏杆菌对该药极为敏感,其抑菌圈直径分别为22mm 和20mm;当药物浓度为0.05～0.1%时,抑菌圈直径分别为13mm 和12mm.与其他治疗本病药物比较,抑菌效果相似,但较价廉。故痢见停可考虑为治疗仔猪黄白痢的首选药物.     

11种中药对致犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌试验

采用水提醇沉法提取中药中的有效成分,通过测定骆驼蓬子、黄连和没食子等11种中药对致犊牛腹泻大肠杆菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)值和最低杀菌浓度(MBC)值,比较各中药对致犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌效果。结果表明,11种中药提取物中骆驼蓬子、没食子、黄连和小檗实对致犊牛腹泻大肠杆菌抑菌效果最明显,抑菌圈直径分别为:25.63 mm、21.89 mm、21.82 mm、19.32 mm,MIC值分别为3.91 mg/mL、31.25 mg/mL、62.5 mg/mL、62.5 mg/mL,而石榴花、红花、阿魏、柽柳实和甘草提取物对致犊牛腹泻大肠杆菌没有显示抑菌作用。     

红树植物根际土壤细菌分离鉴定及抑菌活性的研究

为了从红树林植物根际土壤中分离出具有广谱抑菌作用的海洋细菌，试验以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、链球菌4种常见致病菌为指示菌，采用M10和P3培养基从红树植物根际土壤中分离细菌，以固体琼脂打孔法对分离的细菌进行抑菌活性筛选，并提取分离菌株的基因组DNA,PCR扩增16S rDNA基因并测序，同时采用邻接法构建系统发育树。结果表明：从红树植物土壤中分离得到654株细菌，其中107株细菌具有抑菌活性，占分离菌株的16.4%。菌株M36对大肠杆菌和链球菌抑菌活性最强，抑菌圈直径分别为13 mm、16 mm;菌株P19和P25对金黄色葡萄球的抑菌活性最强，抑菌圈直径均为16 mm;菌株P83对沙门氏菌抑菌活性最强，抑菌圈直径为13 mm;菌株M36和P31的抑菌谱最广。综合两种培养基的培养结果有抑菌活性的菌株被分成4个属，分别是肠杆菌属、芽孢杆菌属、葡萄球菌属、伯克霍尔德氏菌属，其中肠杆菌属为优势菌属，其次为芽孢杆菌属，占比分别为69.2%和15.9%。说明红树植物根际土壤中存在具有广谱抑菌活性的细菌。     

15种中药水煎法与乙醇回流提取法体外抑菌试验比较

为将水煎法和乙醇回流法对醋五味子等15种中药进行提取,通过琼脂打洞法比较体外抑菌效果研究。试验选用15种中药(醋五味子、千里光、石榴皮、地榆、石菖蒲、吴茱萸、秦皮、姜厚朴、白头翁、升麻、忍冬花、马齿苋、葛根、大青叶、鱼腥草),分别采用水煎法和乙醇回流法提取制备出生药浓度为1 g/mL,以琼脂打洞法测定不同中药对大肠杆菌的抑制作用。结果表明,水煎法除地榆、千里光、忍冬花、石榴皮、醋五味子提取物对大肠杆菌有抑制作用外,其余中药对大肠杆菌均表现为不敏感,所测得平均抑菌圈大小分别为7.33 mm、10.67 mm、8.83 mm、6.5 mm、16.17 mm;乙醇回流提取法中醋五味子、石榴皮、大青叶和千里光对大肠杆菌有抑制作用,所测得的平均抑菌圈直径分别为24.33 mm、11.67 mm、8.33 mm和6.67 mm,其余中药提取物对大肠杆菌表现为不敏感。说明同一种中药分别通过水煎法和乙醇回流提取对大肠杆菌的抑菌效果不同,15种不同中药通过同一种方法提取对大肠杆菌抑菌程度不同,选用中药最优的提取方法和提取工艺来全面有效地发挥中药的抑菌活性。     

丁香叶提取物对猪源性大肠杆菌的抑菌作用研究

丁香叶中不同的化学成分有抗菌、抗病毒、抗炎镇痛、保肝利胆及增强机体免疫力等药理作用。本试验测得丁香叶提取液浓度为0.2 g/ml时对猪体内采集的大肠杆菌K1的抑菌圈直径为10 mm,对猪体内采集的大肠杆菌K2的抑菌圈直径为13 mm;浓度为0.8 g/ml的丁香叶提取液对猪体内采集的大肠杆菌K1的抑菌圈直径为20 mm,对猪体内采集的大肠杆菌K2的抑菌圈直径为21 mm。试验结果表明,丁香叶提取物抑菌效果良好,并且浓度增加,效果更佳。丁香叶总黄酮提取液对猪源性大肠杆菌K1和K2的最低抑菌浓度值为1 000μg/ml。     

15种单味蒙药对致病性沙门氏菌体外抑菌作用的研究

为进一步研究蒙药对畜产品主要病源菌的体外抑菌作用,筛选抑菌活性较高的蒙药复方.采用牛津杯法和两倍稀释法测定了15种单味蒙药对沙门氏菌抑菌圈直径、体外的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC).结果表明,宝日·温度苏、朝您·哈日莫各2个单味蒙药对沙门氏菌具有较强的抑菌作用,抑菌环直径大于15.00 mm,最大达20...