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兽药人工抗原合成的研究进展 总被引:4,自引:0,他引:4
在兽药的免疫化学残留分析中,能否合成稳定的具有良好免疫原性的人工抗原是制备抗体和建立免疫分析方法的最关键步骤.综述了国内外兽药人工抗原合成过程中载体的选择、半抗原的设计(强调偶联部位和间隔臂的引入)、半抗原与载体的偶联方法、人工抗原的纯化与鉴定等方面的研究进展. 相似文献
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为提高酶联免疫方法测定喹乙醇残留标志物(MQCA)的检测性能,设计了一种新型MQCA人工半抗原,该半抗原既完整保留MQCA分子特征性基团和结构,又具有便于和蛋白质载体偶联的基团-NH2。通过三步化学反应合成该半抗原,将其与蛋白质载体偶联成为免疫抗原后,进一步制备特异性抗体,研制了MQCA酶联免疫试剂盒,灵敏度高,特异性好,IC50为1.94μg/L。建立了测定动物性产品中MQCA残留量的直接竞争酶联免疫法,测定猪肝、猪肉、鸡肉、鸡蛋中MQCA的检测限分别为0.42、0.23、0.28、0.28μg/kg。猪肉中不同添加浓度MQCA(1,2,4μg/kg)的回收率为70%~97%;批内、批间变异系数均低于12%。本试剂盒可同时快速检测大批样品,有望在MQCA残留检测中发挥重要作用。研究有助于指导小分子药物半抗原的合理设计,为现有的半抗原设计方法提供新的理念和思路。 相似文献
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1原理农兽药多残留酶免疫分析法的基本原理是根据待测药物的共性结构或共有结构特征,设计并合成突出其结构特征的半抗原,半抗原偶联大分子蛋白质作为全抗原并免疫动物,通过细胞融合获得杂交瘤细胞,收集并纯化杂交瘤细胞分泌的类特异性抗体,利用抗体建立酶免疫吸附测定(ELISA)、免疫胶体金(GICA)等免疫分析法。 相似文献
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合成磺胺母核人工半抗原,并对其产物进行鉴定。采用4-氨基苯甲酸甲酯(PBPA)和对乙酰氨基苯磺酰氯(ASC)为原料,经过亲和取代,酯的水解反应合成磺胺药物共有的母核结构苯甲酸对氨基苯磺酰胺(SH),应用质谱法(ESI—MS)与核磁共振氢谱法(1H—NMR)鉴定SH。质谱结果显示[M-]=291.03766,与理论值[M]-292相符,表明SH合成成功;核磁共振氢谱(1H—NMR)的数据与SH化合物的结构相符。磺胺母核人工半抗原合成成功,为研制磺胺药多残留检测试剂盒和胶体金免疫层析试纸条奠定基础。 相似文献
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分别用碳二亚胺(EDC)法和生理学法将半抗原青霉素G与BSA、OVA偶联,合成4种抗原分别为PEN-EDC-BSA、PEN-BSA、PEN-EDC-OVA和PEN-OVA。用PEN-EDC-BSA与PEN-BSA分别免疫兔获抗青霉素G多克隆抗体,间接ELISA法检测结果表明使用生理学偶联方法合成的结合抗原其免疫原性好于EDC法。免疫PEN-BSA组的兔抗血清效价达到1∶204800。用正辛酸-饱和硫酸铵法纯化抗血清,IgG的最高浓度为27.42mg/mL。 相似文献
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目的合成氨基脲人工抗原并制备其多克隆抗体。方法以氨基脲(SEM)和对醛基苯甲酸(CP)为原料合成半抗原(CP-SEM),并采用碳化二亚胺法和混合酸酐法将其分别与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)偶联,合成氨基脲人工抗原。以氨基脲人工抗原(CPSEM-BSA)为免疫原免疫Balb/c小鼠,利用间接ELISA法测定其抗体效价。结果经薄层层析、红外光谱和元素分析等方法鉴定合成半抗原即为CP-SEM。紫外扫描、聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明人工抗原合成成功。免疫获得抗氨基脲的多克隆抗体,其抗体效价为1:64000。结论氨基脲人工抗原合成成功,并获得抗氨基脲的多克隆抗体。 相似文献
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二氟沙星人工抗原的合成与鉴定 总被引:15,自引:2,他引:13
通过化学方法合成了二氟沙星人工免疫原和包被原;采用碳二亚胺法将半抗原二氟沙星与载体蛋白BSA连接制备人工免疫原;并采用氯甲酸异丁酯法将二氟沙星与载体蛋白OVA连接制备人工包被原,经FeCl3显色反应、紫外扫描分析和动物免疫试验证实人工抗原合成成功。这对抗二氟沙星单克隆抗体的制备具有重要意义。 相似文献
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从半抗原的术的最新研究情况,旨在为制备一些采用常规设计与合成、新型载体和佐剂的使用、基因工程抗体的应用等方面论述了小分子半抗原抗体制备技方法不易获得的小分子半抗原抗体提供新的方法和思路。 相似文献
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为了合成氯霉素(CAP)人工抗原并制备抗体,试验建立CAP残留的酶联免疫吸附试验(ELISA)法,采用重氮化法将半抗原CAP与牛血清白蛋白(BSA)进行偶联,制得免疫抗原,然后与卵清白蛋白(OVA)进行偶联,制得包被抗原,通过紫外光谱扫描鉴定是否偶联成功;用免疫抗原免疫KM小鼠,制备CAP多克隆抗体,并通过间接ELISA法测定抗体效价。结果表明:通过紫外光谱扫描,CAP-BSA在275 nm处为最大吸收峰,CAP-OVA在276 nm处为最大吸收峰;并且免疫KM小鼠得到的抗体效价高达1∶128 000。说明试验成功制备了CAP人工抗原,并且获得了高效价的多克隆抗体,也进一步证明了药物偶联成功。 相似文献
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基于磺胺类药物(Sulfonamides,SAs)公共母环(对氨基苯磺酰胺)结构,合成了两种具有该结构的半抗原∶2-(对氨基苯磺酸氨基)-4-噻唑乙酸(TS)和对氨基苯磺酰胺基苯甲酸(SS).采用碳二亚胺法合成了免疫原和包被原,分别免疫10只新西兰大白兔,制备广谱性磺胺类药物抗体.应用间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清的灵敏度和特异性,发现所有兔子对TS-BSA和SS-BSA均产生较高效价和特异性.其中SS-1号和TS-6号兔的血清灵敏度最好,效价分别为1∶80 000和1∶160 000,对10种磺胺类药物均有不同程度的识别能力.SS-BSA组IC50为257.9~6 590.9 ng/mL,而TS-BSA组IC50为12.9~586.1 ng/mL.结果表明,具有磺胺母环结构的半抗原TS和SS,可以应用于广谱性磺胺类抗体的制备.通过10只兔子免疫试验证明,应用SS获得的血清具有较高的簇特异性、相似的亲和性,优于TS. 相似文献
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有机磷农药(OPs)是指用于防治植物病、虫、害含有机磷的化合物,这类农药品种多,药效高,用途广,易分解,在人、畜体内通常不容易积累。国内生产的有机磷农药绝大多数为杀虫剂,如常用的对硫磷、内吸磷、马拉硫磷、硫代磷酸酯、磷氨基苯甲酚等,已先后合成杀菌剂、杀鼠剂等有机磷农药。有机磷农药是极为重要的一类化合物,但有机磷农药品对人、畜的急性毒性很强,在使用时特别要注意安全。近年来,高效低毒的品种发展很快,逐步取代了一些高毒品种,使有机磷农药的使用更安全有效。 相似文献
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为制备一种呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)单克隆抗体(McAb),对DON进行改造,合成了半抗原,然后与载体蛋白BSA、OVA分别偶联合成偶联抗原DON-BSA、DON-OVA,并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法和紫外分析法对合成的偶联抗原进行鉴定。然后用DON-BSA作为免疫抗原,DON-OVA作为检测抗原免疫小鼠制备抗DON的单克隆抗体。结果所得单克隆抗体为IgG1亚型,分子质量为158ku,抗体标准曲线IC50值为1.7μg/L,与T2毒素、黄曲霉毒素B1几乎没有交叉反应,筛选到的单克隆抗体可用于研制DON酶联免疫检测产品。 相似文献
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《黑龙江畜牧兽医》2016,(15)
为了合成环丙沙星抗原,试验应用3-溴丙氨氢溴酸盐制备半抗原环丙沙星-溴丙氨衍生物,采用戊二醛方法与碳二亚胺法合成环丙沙星免疫抗原(CIP-NH2-BSA)与环丙沙星包被抗原(CIP-NH2-OVA),其中环丙沙星-溴丙氨衍生物采用红外光谱(IR)、电喷雾电离质谱(ESI-MS)和核磁共振(1H-NMR、13C-NMR)进行结构确证,CIP-NH2-BSA与CIP-NH2-OVA采用紫外扫描法进行鉴定。结果表明:环丙沙星-溴丙氨衍生物合成成功,环丙沙星-溴丙氨衍生物与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)耦联成功。说明通过制备环丙沙星衍生物可以合成高效的抗原。 相似文献