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《中国兽医学报》2017,(8):1605-1612
外源基因拷贝数是转基因动物检测中的重要内容。本实验室使用PiggyBac(PB)转座子系统获得Tβ4-GFP、FGF5s-GFP、VEGF164-GFP 3种转基因类型陕北白绒山羊,为研究其外源基因整合情况,利用荧光定量PCR方法对其外源基因copGFP的整合拷贝数进行检测。以Gluc为内参基因,建立外源基因和内参基因的标准曲线方程,对转基因陕北白绒山羊DNA进行荧光定量PCR,将copGFP/Gluc的比率作为外源基因的拷贝数。同时,选取Tβ4-GFP转基因绒山羊对其整合位点进行检测,以验证拷贝数结果。结果显示:copGFP与Gluc的标准曲线方程分别为,y=-3.230 6x+39.216(R~2=0.998 8)、y=-3.564 8x+38.440(R~2=0.996 0);成功得到9只转基因绒山羊的整合拷贝数;Tβ4-GFP转基因绒山羊整合位点数目和拷贝数检测结果一致。结果表明,利用荧光定量PCR检测转基因绒山羊外源基因整合拷贝数,操作简单、灵敏方便,是一种切实可行的检测方法。 相似文献
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20世纪80年代以后,生物技术飞速发展,笔者通过对辽宁绒山羊生产及研究现状的调研,从种质资源保护、生物技术辅助育种、转基因技术培育新品种、胚胎工程技术提高繁殖率等几方面进行探讨,阐述了现代生物技术与辽宁绒山羊育种的紧密联系,认为现代生物技术为辽宁绒山羊的育种提供了广阔的发展前景,开创了绒山羊生产新的途径。 相似文献
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<正>分子育种技术是以分子生物学为基础,遗传学为依据,在DNA分子水平上对家畜品种进行的改良,包括转基因技术、克隆技术、胚胎生物技术和分子遗传标记。分子育种技术加快了动物育种速度,改良了动物品种。1分子育种技术的应用1.1在产毛(绒)性状上的应用羊产毛(绒)性状评定指标主要包括剪毛量、毛(绒)的品质、净毛率等。IGF-1是胰岛素样生长因子,能够促进羊毛囊形成和发育,增加纤维直径,研究者通过转基因技术获得IGF-1的转基因绵羊和转基因绒山羊,IGF-1转基因绵羊F1代的净毛量比非转基因绵羊高6.2%,IGF-1转基因绒山羊能够显 相似文献
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浑江“绒山羊技术开发”是省级科技兴牧“奔马工程”项目。为合理开发利用高寒山区杂草灌木资源及矿泉水源,发展长白山南麓草山绒山羊带,较大幅度地提高山区养羊经济效益、社会效益和生态效益,设立本工程项目。八道江区是浑江绒山羊技术开发中心区,所辖浑江绒山羊种羊场是“浑江绒山羊 相似文献
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绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9基因的扩增及表达 总被引:1,自引:1,他引:0
本试验旨在构建绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9(keratin type Ⅱ intermediate filament 9,KIF Ⅱ-9)基因cDNA的毛囊特异性表达载体,转染辽宁绒山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定表达外源基因并可用于核移植的转基因细胞克隆。通过PCR扩增得到的KAP6-1基因启动子,然后与RT-PCR扩增得到的KIFⅡ-9 cDNA 序列连接构成皮肤特异性表达载体pcDNA3.1-KK,将重组表达载体以脂质体介导转染胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得转基因细胞克隆,结果显示,外源KAP6-1启动子序列和KIF Ⅱ-9 cDNA整合到细胞基因组中,为下一步通过核移植方法获得转基因绒山羊提供了条件。 相似文献
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IGF-1毛囊特异表达载体的构建以及转染绒山羊胎儿成纤维细胞的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
本研究旨在构建绵羊胰岛素样生长因子1(IGF-1)毛囊特异表达载体pCDsR-KI,并转染绒山羊胎儿成纤维细胞,最终获得稳定表达红色荧光并可用于核移植的转基因细胞克隆.通过RT-PCR方法获得IGF-1 cDNA,其与KAP6-1基因启动子片段以及红色荧光蛋白表达元件连接构成IGF-1毛囊特异表达载体pCDsR-KI(大小7.4 kb).以组织块贴附法分离和培养绒山羊胎儿成纤维细胞,外源性表达载体以lipofectamineTM 2000介导转染所培养的第2代成纤维细胞,在DMEM/F12+10%FBS、37℃、5%CO2中培养,并添加G418筛选,获得了表达红色荧光蛋白的细胞克隆.经PCR法鉴定证实外源基因已经整合在细胞基因组中.通过分析转基因体细胞的生长曲线和染色体核型证明转基因细胞的生长状态良好、各项参数趋于正常.为下一步通过体细胞核移植技术获得转基因克隆绒山羊准备了核供体细胞. 相似文献
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本文主要是介绍《改善环境提高绒山羊生产性能的研究与推广应用项目》中的实际试验部分,改善绒山羊饲养环境后绒山羊产绒量、产羔成活率等指标跟没有改善生产环境的绒山羊进行对比情况,同时也介绍了一年产两胎的试验情况。 相似文献
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“乌珠穆沁绒山羊”正式命名内蒙古锡盟“乌珠穆沁绒山羊选育”项目,历时6年,于1994年7月31日鉴定验收,得到自治区人民政府的正式命名。使我国绒山羊家族又添一个新成员。乌珠穆沁绒山羊分布于锡盟东乌珠穆沁旗、西乌珠穆沁旗、锡林浩特市和阿巴嘎旗。该品种是... 相似文献
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“乌珠穆沁绒山羊”被正式命名王泽文(内蒙古锡林浩特市锡盟技术监督局026000)内蒙古锡盟“乌珠穆沁绒山羊选育”项目,历时6年,于今年7月31日通过鉴定验收和得到自治区人民政府的正式命名。使我国绒山羊家族又增添了一个新成员。乌珠穆沁绒山羊分布于锡盟东... 相似文献