禽肾炎病毒与鸡细小病毒双重PCR检测方法的建立

为了同时检测禽肾炎病毒(avian nephritis virus,ANV)和鸡细小病毒(chicken parvovirus,ChPV),根据GenBank中ANV的ORF基因和ChPV的NS1基因的保守序列,设计筛选了扩增片段大小分别为511 bp和242 bp的特异性引物,通过反应条件优化、特异性和敏感性试验,建立了一种双重PCR检测方法。该方法最佳引物比例为ANV上下引物各0.4μL(20 mol/L),ChPV上下引物各0.6μL(20 mol/L);最佳退火温度为53.8℃;灵敏度可达到55 fg(ANV)和58 fg(ChPV);对常见鸡病病原体进行检测,结果全为阴性。本研究建立的PCR方法具有特异、敏感、快速、稳定的优点,可用于同时鉴别诊断ANV和ChPV的混合感染。     

鸡星状病毒、禽肾炎病毒和鸡传染性支气管炎病毒多重PCR检测方法的建立

为有效确定引起鸡痛风的病原，本试验建立了同时检测鸡星状病毒(CAstV)、禽肾炎病毒(ANV)和鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的多重PCR方法。针对IBV的N基因、CAstV和ANV的ORF-1b基因分别设计了3对特异性引物，通过优化退火温度等反应条件建立了多重PCR检测方法，并评估了该方法的特异性和敏感性，而后对临床痛风样本进行了检测。结果显示，多重PCR方法对3种病毒扩增产物的大小分别为1 600 bp(IBV)、794 bp(ANV)和350 bp(CAstV);该多重PCR检测禽马立克氏病毒、血清4型禽腺病毒、减蛋综合征病毒和J亚型禽白血病病毒均为阴性；病毒最低检测限IBV为1.96×10~2 copies/μL,ANV为2.10×10~2 copies/μL,CAstV为1.33×10~5copies/μL;多重PCR对临床病料的检测结果与单项PCR的检测结果一致。结果表明，本试验建立的多重PCR检测方法具有较好的特异性、敏感性和可靠性，为临床鸡痛风的诊断提供了准确、有效的技术手段。     

禽病毒学最近研究进展(下)

4 禽肾炎病毒和其他微小 RNA 病毒以前认为微小 RNA 病毒科肠病毒属仅有一种病毒成员,即脑脊髓炎病毒(AEV)。但后来研究最详细的病毒是禽肾炎病毒(ANV),1976年首次在日本从外表似正常的肉鸡直肠内容物分离到,称为 G4260毒株。该病毒在鸡传播迅速并且呈典型的亚临床症状,初期引起肾脏病变(包括近端小管的变性),后期呈间质性肾炎、类痛风病的小结出现。在鸡和火鸡群(包括 SPF 鸡)常可检测到 ANV 抗体。ANV 属于禽微小 RNA 病毒科,在亲嗜性及致病性上与 AEV 有些差异。     

鸡的禽肾炎病毒感染试验

禽肾炎病毒(ANV)能导致4周龄以内的SPF鸡出现间质性肾炎,并且在1日龄SPF鸡能引起肝脏重量降低。本实验室以前的一项研究首次在感染ANV的鸡中看到内脏尿酸盐沉积。1日龄SPF鸡接种ANV,在接种8—10天死亡鸡只中大约20%有内脏     

鸡传染性肾炎

鸡传染性肾炎是新发现的由鸡肾炎病毒(ANV)引起的主要侵害一日龄雏鸡,以间质性肾炎为特征的一种亚临床型传染病。本病在临床上暴发尚未见报道,因此其确切的发生率和分布情况目前也尚不清楚。然而,在北爱尔兰和日本,ANV抗体普遍存     

禽肾炎病毒──养禽业面临的又—严峻问题

1976年日本学者由鸡粪便中分离到一株微小RNA病毒，用其接种健康鸡，可引起肾脏炎症，据此被认为是传染性肾炎的致病因子。自此发现报道以后，在世界范围内从鸡血清中检出了传染性肾炎技体。现在，此病毒被称作禽肾炎病毒（ANV）。病原特性禽肾炎病毒届肠道病毒属。肠道病毒寄居于肠道，能抵抗pH3，故不会被胃酸所破坏。ANV与其他一些重要的家禽病原体，如禽脑脊髓炎（AE）、鸭病毒性肝炎（DVH）及火鸡病毒性肝炎等病毒相似。尽管鸡群感染ANV后不表现明显的临诊症状（亚临诊感染），但它与发育不良及僵化综合症有关。在14日龄内的雏…     

某规模化猪场抗体检测分析及防控对策

探讨了规模化猪场如何开展抗体检测,并对抗体水平检测结果进行分析提出相应的防控措施。     

深圳出入境检验检疫局动检实验室禽流感检测情况与分析

通过深入分析深圳出入境检验检疫局动检实验宣对禽流感开展的病原学检测方法和血清学检测方法,系统总结了目前动物检疫实验室禽流感检测与监测过程中常用的方法。在病原学检测方面,比较了鸡胚病毒分离鉴定方法、实时荧光PCR检测方法和乳胶凝集试验检测方法的优劣,提出了适合本实验室的病毒快速鉴定方法。鉴于生物安全的要求,对禽流感病毒检测采用施实时荧光RT-PCR,同时不断开展新的检测方法。在血清学检测方面,全面总结了在常规的HA和HI检测中的注意事项,并对近年来深圳出入境检验检疫局的血清学检测数据进行了分析。     

禽病毒性疾病研究的最新进展 续完

禽肾炎病毒和其它小RNA病毒一段时间来,唯一被认为是小RNA病毒科肠道病毒属一员的病毒是禽脑脊髓炎病毒(AEV)(Calnek等,1991b)。禽病工作者对于认为是小RNA病毒和可能属于肠道病毒属的禽病毒又发生了兴趣,其中,得到极透彻研究的就是1976年首次在日本从外表正常的肉鸡直肠内容物中分离到的禽肾炎病毒(ANV)G 4260。该病毒容易传播,主要引起鸡亚临床感染,引起的肾脏的病变起初是近端小管变性,而后是间质性肾炎,形成痛风小结以及血浆中尿酸盐水平升高、(Narita等,1990a,b;Takase等,1990;Imada和Kawamura,1991)。有些鸡在内脏上或趾关节中有尿酸盐沉积。 ANV抗体普遍存在于鸡和火鸡甚至SPF鸡中(Connor等,1987;Nicholas等,1988)。ANV可能只是一     

供港猪群流感病毒的分离鉴定及流行病学调查

为了对供港猪群中的猪流感流行情况进行分析,从华南地区供港猪群中用无菌棉拭子采集鼻腔粘液样品,采用鸡胚接种方法,从供港猪群中分离出了2株不同亚型的猪流感病毒株,经国家流感中心鉴定分别为H1N1和H3N2亚型。本研究设计了猪流感常见亚型的HA和NA分型特异性引物,建立了猪流感型特异性RT-PCR检测方法;对分离鉴定的2株猪流感病毒和禽流感H5N1 HI检测抗原进行了RT-PCR检测,并对其部分HA和NA基因进行克隆测序分析。对供港猪群的血清检测结果表明:供港猪群中H1N1和H3N2亚型抗体阳性率分别为26.87%、38.26%,禽流感H5N1和H9N2亚型抗体阳性率均为0%。     

一例猪场抗体检测结果的分析

通过分析一猪场的抗体检测结果,揭示了其抗体变化的原因和猪场疾病的感染和流行情况,同时对猪场抗体检测和分析的常见问题进行了探讨。     

日本禽肾炎病毒株的致病性和抗原性

禽肾炎病毒(ANV)属细小病毒科。在日本田间常可从一周龄小鸡分离。一日龄接种时可导致伺质性肾炎直至四周龄,同时伴有活重下降和内脏的尿酸盐沉着。 J.Shirai等(1991)利用4株日本的ANV田间分离株进行致病性和抗原性的研究。结果表明,G-4260株1日龄口服接种可使5/15的鸡死于内脏痛风;M-6株和M-8株各有1/15的鸡死于肾病和内脏痛风,而接种IR-N株的鸡则无一死亡(0/15)。此外,除IR-N株接种鸡外,其他的接种鸡在接种     

奶山羊布鲁氏菌病抗原与抗体双检测的效果分析

为了有效检测净化奶山羊布鲁氏菌病群体,加快奶山羊产业健康稳步发展。本文采用布鲁氏菌病抗原与抗体双检测方法对陕西某奶山羊场进行了检测分析。结果表明,在某奶山羊场引入羊时,采用抗体单一检测发现全群228只羊感染了36只,感染率达到15.79%,发现感染后对本群感染羊进行了无害化处理和圈舍清洗消毒,3个月后对剩余的192只羊有进行了一次全群检测,结果检测出18只阳性羊,与上一次的净化方式一样处理后,同样又在3个月后对剩余的174只羊采用抗原与抗体双检测方法,布病抗体检测卡检测出8只羊,布病抗原检测卡检测出10只羊,而且用布病抗体检测卡和布病抗原检测卡检测出来的羊只编号完全不同,3个月后对剩余的156只羊进行同样的方法进行检测,结果仅检查出1只阳性羊,6个月后对剩余的155只羊进行同样的方法进行检测,未发现布病阳性羊只。利用抗原与抗体双检测继续在3个月、6个月进行检测均未发现阳性羊只。本试验得出结论,相比于抗体单一的布鲁氏菌病检测法,抗原抗体共同使用的检测方法布病阳性率明显的降低,且能短期内达到预期净化的效果,说明双抗使用在羊布鲁氏菌病检测中效果更好,更具有推广使用的意义。     

一例猪瘟和猪伪狂犬病的鉴别诊断

主要介绍了在具有相似临床症状和解剖病变情况下,通过实验室血清学ELISA方法进行猪瘟病毒抗体、抗原和猪伪狂犬病毒gE抗体、gB抗体的检测。根据检测结果,综合分析,得出结论,达到鉴别诊断猪瘟和猪伪狂犬病的目的。     

2011～2014年某养猪场猪瘟抗体检测结果分析

为了及时了解猪瘟抗体免疫状况,采用阻断ELISA方法定期对该猪场进行血清样品猪瘟抗体检测,通过2011~2014年的抗体检测,及时做好疫病防控、加强饲养管理等措施,猪瘟抗体水平有了一定的提高,猪瘟免疫程序更加优化,较好地完成了对猪瘟的防控。     

马冠状病毒抗体的间接ELISA检测方法的建立

将含有马冠状病毒N蛋白(ECV-N)的重组杆状病毒rBac-ECV-N感染Sf9昆虫细胞,以表达的ECV-N蛋白作为抗原,以酶标记的鼠抗马IgC特异性单抗为二抗,建立了检测马冠状病毒抗体的ELISA方法.研究结果表明,ECV-N蛋白最佳包被浓度为10μg/mL初提重组蛋白,马血清以1:100稀释,酶标记的抗马IgG单克隆抗体工作浓度1:5 000.可以检出抗马冠状病毒血清抗体.利用该方法对来自3个国家的1064份马血清进行了检测,检测结果表明:国内711份马血清中检测出13份阳性;澳大利亚335份马血清中检测出31份阳性;瑞典18份马血清均为阴性.该间接ELISA方法的建立,为马冠状病毒感染的预防和控制,出入境检验检疫提供了一种新的检测方法.     

闽北地区猪伪狂犬病抗体检测分析

为了解猪伪狂犬病在闽北地区的流行情况,整理并分析2015年度血清抗体检测数据。采用ELISA检测方法对闽北地区45个规模化猪场进行检测分析,通过检测样品血清中伪狂犬病gE抗体和gB抗体的水平进行结果判定。结果显示：送检的45个规模化猪场,伪狂犬病gE抗体阳性场达25个,猪场阳性率达55.6%;共检测1304份血清,其中伪狂犬病gE抗体阳性213份、可疑24份、阴性1067份,抗体阳性率达20.6%。从伪狂犬病gE抗体阴性猪场抽检猪伪狂犬gB抗体380份,gB抗体阳性258份,猪群伪狂犬病抗体保护率仅有67.9%。     

应用PPA—ELISA检测鸡传染性法氏囊病卵黄抗体的研究

应用PPA-ELISA检测了北京市某种鸡场三个父母代鸡群种卵卵黄传染性法氏囊病的抗体水平,结果表明。卵黄抗体效价与血清抗体效价基本相同,证实了运用卵黄替代血清进行鸡传染性法氏囊病抗体水平的监测是一种省力。省时有效,实用的抗体监测手段;同时,利用几种不同方法进行卵黄抗体的提取,结果聚乙二醇和氯仿处理获得的卵黄抗体提取液用于检测效果最好。     

双抗体夹心阻断ELISA检测血清中牛病毒性腹泻-粘膜病病毒抗体的研究

本研究建立了检测血清中牛病毒性腹泻-粘膜病(BDV-MD)病毒抗体的双抗体夹心阻断ELISA,并用其检测了长春地区293头奶牛和262头黄牛的血清.结果,奶牛的阳性率为54.9％.黄牛的阳住率为43.5％.本方法是一种敏感、特异、快速的检测抗体方法,可在基层推广应用.     

阻断ELISA与中和试验检测猪瘟疫苗免疫猪血清抗体的比较

应用阻断ELISA和中和试验2种不同的方法对猪瘟疫苗免疫前后的猪血清抗体进行了检测,在所检测的6头仔猪免疫前和免疫后的12份血清中,2种方法的检测结果相符.应用Western blot对部分血清进行了验证,结果与2种方法检测结果一致,表明阻断ELISA和中和试验结果确实、特异,能真实反映免疫猪群的抗体水平.