羔羊轮状病毒荧光抗体的制备和应用

荧光抗体技术是在组织化学及蛋白质技术发展的基础上建立起来的一项新技术。它能广泛地应用于细菌、病毒、枝原体、寄生虫等抗原物质的追踪和鉴定。我们将这一技术应用于羔羊轮状病毒腹泻的诊断,试验证明它能快速地确诊羔羊轮状病毒引起的腹泻。可做为羔羊轮状病毒性腹泻诊断的一种技术应用于现场。     

用斑点免疫吸附试验快速诊断犊牛轮状病毒感染

现已证实轮状病毒已是人和动物的重要病原(McNulty 1978)。对于轮状病毒引起的腹泻,常用的诊断方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、电镜技术和反向免疫电渗电泳等。ELISA 是一种敏感性和特异性较强的试验,已被认为是检测犊牛粪便中的轮状病毒抗原较有效的方法(Ellens 等1977),     

应用电子显微镜技术对轮状病毒的鉴定

应用电子显微镜技术检查仔猪、羔羊的腹泻粪便和小肠病料发现了轮状病毒。从而证明轮状病毒也是导致我国幼畜(仔猪、羔羊)发生急性胃肠炎的原因之一。应用电子显微镜技术可以对各种动物的轮状病毒进行鉴定并获得疾病曲快速诊断。     

动物轮状病毒病的流行病学及综合防治

轮状病毒病(Rotavirus diseases)是由轮状病毒引起的各种动物的腹泻性疾病,如小牛、小猪、羔羊、小狗或家禽等。通过试验发现也可引起非人类灵长目Tupaiabelangeriyunalis的严重腹泻病,因此轮状病毒病是一种人畜共患传染病,不仅感染率高,发病率也相当高,对人类健康和畜牧业危害较大。本病最早(1943年)在患腹泻的儿童中发现,     

猪轮状病毒试验接种无菌猪的肠道变化

象幼儿腹泻一样,轮状病毒也是数种动物,诸如犊牛、乳鼠、羔羊以及雏鸡腹泻的原因。在澳大利亚、英国、比利时、美国也有轮状病毒引起的仔猪腹泻的报告。经试验研究确定了轮状病毒可以引起自然宿主腹泻及其在小肠内产生病变。该病变是由立方或鳞状上皮细胞被复的萎缩绒毛构成的。应用免疫萤光抗体和透射电镜技术可以在小肠上皮细胞中分别检出轮状病毒抗体和病毒颗粒。本文的目的是描述应用光学显微镜,扫描电镜和透射电镜技术观察猪轮状病毒感染小猪肠道的变化。     

应用乳胶凝集试验对猪粪便中轮状病毒的检出

我们改进了一种对腹泻猪粪中轮状病毒的简便凝集试验检出方法。法是用抗猪轮状病毒OSU毒株抗体被了的乳胶颗粒(抗OSU—LA)在玻片上进行凝集试验,此法对检出猪轮病毒具有高的敏感性和特异性。抗 OSU—LA和OSU抗原在载玻片上进行时,2分钟之内呈现出明显可见的凝集现象。此种乳胶凝集(LA)试验的敏感性比电子显微镜(EM)检出法高4倍。LA试验法可用于快速诊断猪轮状病毒感染症。     

猪流行性腹泻病毒重组酶聚合酶扩增快速诊断方法的建立和应用

旨在建立一种针对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的敏感性高、特异性强的快速临床诊断方法。以猪流行性腹泻病毒cDNA为模板，在重组酶和聚合酶的共同作用下实现对目的基因的扩增，本研究设计了用于重组酶聚合酶扩增的引物，优化了重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification, RPA)反应体系，检测了反应的特异性和敏感性，确定了反应的最佳温度和时间，通过结合琼脂糖凝胶电泳和侧流层析试纸条的方法进行分析和鉴定。试验结果显示反应的最佳温度和时间为30℃、20 min,反应可以检测到的最低质粒拷贝数为10² copies·μL^-1,且在对猪的丁型冠状病毒、传染性胃肠炎病毒、轮状病毒和圆环病毒2型的检测中具有良好的特异性。综上所述，通过对RPA反应条件的摸索与优化，成功建立了猪流行性腹泻病毒重组酶聚合酶扩增结合琼脂糖凝胶电泳(Basic RPA)和侧流层析试纸条(LF-RPA)的检测方法，两种方法相比较于RT-PCR,有更短的检测时间且具有更高的敏感性，对...     

牛轮状病毒与病毒性腹泻病毒的双重RT-PCR检测方法的建立

建立了能够同时检测牛轮状病毒(BRV)与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的双重RT-PCR方法.应用两对特异性引物进行了双重RT-PCR扩增,这两对引物分别对应于BRV的VP7基因和BVDV的5-UTR中的部分编码序列,其扩增产物分别为342bp和196bp.说明该方法的特异性强、敏感性高,可检测到1pg的病毒RNA,可应用于临床诊断和流行病学研究.     

轮状病毒感染及其诊断

关于轮状病毒(Rotavirus. RV)的病毒学和免疫学的若干问题,作者已进行过评述(粟寿初等,1980),本文仅就轮状病毒感染及其诊断作一简单的介绍。一、轮状病毒感染1.流行病学轮状病毒感染流行遍及全世界,可感染人和各种动物。在家畜和家禽中,可引起犊牛、仔猪、羔羊、幼驹和雏鸡的腹泻。在牛,本病集中发生于冬季,一经发     

致羔羊腹泻的主要细菌和病毒病原的研究进展

羔羊腹泻是一种复杂的多因素综合征,细菌和病毒感染是致羔羊发生腹泻的2种常见因素。常见的致腹泻细菌病原包括大肠杆菌、沙门氏菌和产气荚膜梭菌,病毒病原包括轮状病毒、牛病毒性腹泻病毒、腺病毒、星状病毒等。该文对致羔羊腹泻的主要细菌和病毒病原进行综述,旨在为羔羊腹泻疾病的防控和治疗提供参考。     

猪流行性腹泻实验诊断技术的研究进展

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起的一种猪的高度接触性的肠道传染病,该病以排水样稀粪、呕吐、脱水及哺乳仔猪高死亡率为主要特征,给生猪养殖业带来严重危害。猪流行性腹泻于20世纪80年代在我国暴发并流行至今,该病不仅发生范围广、强度大、致死率高,且常与猪传染性胃肠炎、猪轮状病毒及德尔塔冠状病毒等传染病混合感染,临床诊断并不能对该病确诊,必须运用一些实验室方法才能准确诊断该病。通过对猪流行性腹泻的酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光法(IF),RT-PCR诊断技术、多重PCR技术、实时荧光定量PCR技术、环介导等温扩增检测技术(LAMP)等几种实验室检测技术进行综述,以期对该病的诊断及确诊提供可靠的实验方法和一定的技术依据。     

粪菌移植法治疗非特异病原性羔羊腹泻的效果初报

羔羊腹泻是一种常发生于新生和断奶阶段,且能够导致羔羊生长迟滞甚至死亡的消化道疾病。粪菌移植(fecal microbiota transplantation, FMT)技术在反刍幼畜消化道疾病防治上鲜有研究。本研究采用FMT对腹泻羔羊进行治疗并与不同抗生素药物治疗进行对比,探索FMT对吮乳期羔羊腹泻的治疗效果。试验选择日龄(24±2) d、体重(6.12±1.01) kg、临床散发的具有典型腹泻症状的吮乳期羔羊60只(公母各半)以及健康羔羊10只(公母各半),分为健康对照组(HC)、腹泻对照组(SC)、粪菌移植治疗组(FMT)、庆大霉素治疗组(GM)、恩诺沙星治疗组(ENR)、庆大霉素+粪菌移植治疗组(GM+FMT)以及恩诺沙星+粪菌移植治疗组(ENR+FMT),测定腹泻羔羊腹泻治愈天数、日增重以及羔羊生理生化指标及相关炎性因子指标。结果表明:1)腹泻羔羊平均日增重、红细胞数量、血红蛋白含量、淋巴细胞比例和肌酐浓度均显著低于健康对照组羔羊(P0.05),而平均血红蛋白浓度和炎性因子均显著高于健康对照组(P0.05);2)与SC组相比,经过5种方法治疗,除GM+FMT组外,FMT、ENR、ENR+FMT和GM组均显著降低治愈天数(P0.05)。ENR组还显著提高腹泻羔羊日增重(P0.05);3)与SC组相比,FMT治疗可显著提升腹泻羔羊血液中血红蛋白含量和血液淋巴细胞数量(P0.05);4)经FMT、ENR和GM+FMT治疗后,各种炎性因子均显著下降到健康组羔羊水平。结果表明,FMT能够有效治愈羔羊腹泻症状,血液生理生化功能得到改善,抑制了炎性反应,显著降低腹泻率。FMT有望作为一种抗生素替代方法应用于羔羊腹泻防治实践。     

轮状病毒病的防控

轮状病毒病是由轮状病毒引起的,主要感染婴幼儿和多种幼龄动物的一种急性肠道传染病,是引起仔猪、犊牛、羔羊腹泻的病因之一,对人类健康和畜牧业发展都有较大危害。对轮状病毒病的病原、流行病学特点、临诊症状、病理变化、诊断及防控措施作一介绍,以期为有效防控该病提供参考。     

应用免疫酶组织化学方法诊断猪流行性腹泻的试验研究

猪流行性腹泻(porcine epidemie diarrhea，PED)，是由冠状病毒属猪流行性腹泻病毒引起的各种年龄猪急性腹泻性疾病，传播迅速，仔猪死亡率高，可达100％，给养猪生产造成巨大的经济损失。多年来，猪流行性腹泻一直缺乏简便快速、特异性强的诊断方法，给诊断造成了困难。为此，我们进行了应用免疫酶组织化学方法诊断猪流行性腹泻的试验研究，结     

轮状病毒病的防控

轮状病毒病是由轮状病毒引起的,主要感染婴幼儿和多种幼龄动物的一种急性肠道传染病,是引起仔猪、犊牛、羔羊腹泻的病因之一,对人类健康和畜牧业发展都有较大危害.对轮状病毒病的病原、流行病学特点、临诊症状、病理变化、诊断及防控措施作一介绍.以期为有效防控该病提供参考.     

ELISA检测技术在畜禽养殖业中的应用

<正>酶联免疫吸附法(ELISA)是固相吸附技术和免疫酶技术相结合的一种方法,是免疫学诊断中的一项新技术。因其具有特异性高、敏感性强、稳定性好、易于检测、结果可靠等特点,应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免     

ELISA检测技术在畜禽养殖业中的应用

<正>酶联免疫吸附法(ELISA)是固相吸附技术和免疫酶技术相结合的一种方法,是免疫学诊断中的一项新技术。因其具有特异性高、敏感性强、稳定性好、易于检测、结果可靠等特点,应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免     

检测牛轮状病毒抗体间接ELISA方法的建立

利用CsCI密度梯度离心化的牛轮状病毒作为包被抗原,建立了检测牛轮状病毒抗体的间接酶联免疫吸附试验(EuSA).用牛病毒性腹泻病毒、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌制备的对照包被抗原与牛轮状病毒阴性和阳性血清反应,其结果均无交叉反应,说明该方法具有良好的特异性,可用于牛轮状病毒抗体的检测.     

羔羊痢疾的综合防治措施

羔羊痢疾是一种典型的肠道疾病,主要发生在1周龄以内的羔羊身上。羔羊痢疾主要侵害病羊的肠道,造成腹泻症状,给羊养殖业造成比较严重的经济损失。临床研究显示,大肠杆菌、沙门氏菌和轮状病毒都能够引发该病,一旦发病的话,将造成羔羊的大量死亡,或者影响羊群整体性能。此外,羔羊痢疾的主要症状为腹泻,做好日常的羊舍管理工作和销售工作非常的重要。本文通过阐述羔羊的流行病学、发病原因和诊断等方面阐述了具体的防控措施,希望为相关的养殖户提供参考。     

应用免疫酶组织化学法诊断猪流行性腹泻试验

猪流行性腹泻，是由冠状病毒属猪流行性腹泻病毒引起的各种年龄猪急性腹泻性疾病，传播迅速，仔猪死亡率高，可达100％，给养猪生产造成巨大的经济损失。多年来，猪流行性腹泻一直缺乏简便快速，特异性强的诊断方法，给诊断造成了困难。为此，我们进行了应用免疫酶组织化学方法诊断猪流行性腹泻的试验研究，结果表明该方法敏感性，特异性，准确性均比较理想，而且操作简便，对技术设备条件要求不高，是一种适合临床应用的的诊断方法。现报告如下。