牛磺胆酸对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

为了阐明TCA对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响,本研究分别采用鸡红细胞半体内法和体外培养的腹腔巨噬细胞吞噬中性红法测定了TCA对体内、外小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,结果证明,高、低剂量的TCA均能极显著的提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率（P〈0.01）,显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的鸡红细胞吞噬指数;0.015μg/ml、0.3μg/ml、1.5μg/ml和15μg/ml的TCA均能显著提高体外培养小鼠腹腔巨噬细胞对中性红的吞噬率（P〈0.05）,表明TCA具有提高巨噬细胞吞噬功能的作用。采用ELISA法测定了TCA对小鼠巨噬细胞分泌白介素-1β的影响,试验结果表明,高、低剂量的TCA均能极显著提高正常和免疫抑制小鼠血清中的含量（P〈0.01）,1.5和15？g/mL的TCA可显著提高体外培养小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β的分泌量（P〈0.01）,0.015μg/ml和1.5μg/ml的TCA可极显著提高LPS活化的小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β的分泌量（P〈0.01）,0.3μg/ml和15μg/ml的TCA可显著提高LPS活化的小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β的分泌量（P〈0.05）,表明TCA具有促进腹腔巨噬细胞的分泌IL-1β的功能。     

牛磺酸对有丝分裂原刺激的小鼠免疫细胞功能的影响

为探讨牛磺酸对有丝分裂原刺激的小鼠免疫细胞功能的影响,本实验体外设计了终浓度为0.5、5、50、和500μg/mL四个浓度梯度。开展了Tau对有丝分裂原刺激的小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞功能影响的研究。结果Tau对LPS刺激的腹腔巨噬细胞分泌IL-1β具有免疫增强作用;对LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞的增殖反应无显著作用。Tau对LPS刺激的脾淋巴细胞增殖反应在一定浓度范围内无显著作用,但当浓度较高时,有显著的抑制作用;Tau对ConA刺激的脾淋巴细胞分泌IL-2具有极显著的增强和调节作用;Tau在较高浓度时对LPS刺激的脾淋巴细胞分泌IgG也具有极显著的促进作用。牛磺酸对有丝分裂原刺激的小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞的免疫功能具有增强和调节作用。     

牛磺胆酸对小鼠免疫功能的调节作用

探讨牛磺胆酸TCA)对小鼠免疫功能的调节作用.采用吞噬鸡红细胞法、MTT法和ELISA法检测了体内腹腔巨噬细胞的吞噬功能和体外腹腔巨噬细胞分泌的细胞因子的含量;采用流式细胞术、MTT法和ELISA法检测了脾脏中脾淋巴细胞的百分率、增值活性和IGg的分泌量.高剂量TCA (0.25g/kg)和低剂量TCA (0.15g/kg)均能显著提高腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数和小鼠血清中IL- 1β、IgG和TNF-α的分泌量(P ＜0.05);TCA对腹腔巨噬细胞的增殖反应呈现上抛物线形式的促进作用,对腹腔巨噬细胞中IL - 1β的分泌呈现向上抛物线形式的增强和调节作用;高低剂量TCA均极显著地提高机体脾脏CD4 +/CD8+的比值及CD19+细胞百分率(P ＜0.01);TCA对脾淋巴细胞的增殖反应和分泌IgG呈现向上抛物线形式的调节作用.TCA通过增强巨噬细胞的吞噬功能及细胞因子分泌功能和提高脾脏T、B淋巴细胞的增殖和IgG分泌来发挥对小鼠机体非特异性和非特异性免疫功能的调节作用.     

金钗石斛多糖对脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α·NO的影响

[目的]研究金钗石斛多糖对脂多糖（LPS）诱导的小鼠腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、一氧化氯（NO）的影响。[方法]用不同浓度金钗石斛多糖作用于小鼠腹腔巨噬细胞,LPS作为诱导剂,采用放射免疫法检测细胞培养液中TNF—α的含量,硝酸酶还原法测定细胞培养液中NO的含量,荧光法测定细胞内诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的活性,实时PCR（real—time PCR）法测定TNF-α mRNA、iNOS mRNA的表达。[结果]与LPS组比较,金钗石斛多糖在50～400mg／L范围内可干预LPS对小鼠巨噬细胞的作用,使小鼠腹腔巨噬细胞TNF—α、NO合成减少,iNOS活性降低。TNF-α mRNA、iNOS mRNA的表达降低。[结论]金钗石斛多糖可改善LPS对小鼠腹腔巨噬细胞的作用,使TNF—α mRNA、iNOS mRNA的表达降低,TNF—α、NO合成减少,从而起到抗炎的作用、     

不同品系小鼠腹腔巨噬细胞对LPS的反应性初步比较研究

为初步探究不同品系小鼠腹腔巨噬细胞对LPS的反应性区别,通过对C57BL/6小鼠、BALB/C小鼠和昆明小鼠腹腔注射硫乙醇酸盐(Thioglycollate,TG)以诱导巨噬细胞聚集。4d后收集细胞,计数并培养。使用脂多糖(LPS)分别刺激3种细胞,测定并对比炎症因子的分泌情况。结果表明:腹腔注射TG后,C57BL/6小鼠诱导率最高;LPS刺激细胞后,C57BL/6小鼠的腹腔巨噬细胞分泌的TNF-α、IL-6、iNOS和COX-2的分泌量均较其他2种小鼠高。     

LPS与ATP共同诱导巨噬细胞中NLRP3炎症小体的激活

【目的】以脂多糖(LPS)为刺激源,探索小鼠巨噬细胞(RAW264.7)中NOD样受体家族pyrin结构域蛋白3(NLRP3)炎性小体激活的响应机制。【方法】试验分为对照组、LPS组、LPS与ATP共同刺激组。ELISA检测NLRP3源性白介素-1β(IL-1β)表达情况;RT-PCR检测NLRP3、Caspase-1、白介素-1β(IL-1β)的转录水平;ELISA检测LPS与NLRP3其他激动剂(MSU、CPPD、SiO2、Alum)共同作用后IL-1β的表达以及PI染色检测细胞焦亡。【结果】与对照组相比,LPS刺激组对IL-1β的表达无显著影响,LPS/ATP共同刺激组IL-1β的表达显著升高;LPS/ATP刺激组NLRP3、Caspase-1、IL-1βmRNA的表达显著升高且LPS/ATP刺激组发生明显的细胞焦亡。【结论】LPS与ATP共同作用能够显著提高NLRP3、Caspase-1、IL-1β的表达,说明LPS对NLRP3炎性小体的激活是LPS与ATP共同作用实现的。     

桔梗皂苷D对小鼠淋巴细胞和巨噬细胞免疫功能的影响

【目的】探讨桔梗皂苷D对小鼠淋巴细胞和巨噬细胞免疫功能的影响。【方法】无菌分离小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,制备淋巴细胞和巨噬细胞悬液。分别培养这2类细胞,并分为空白对照组、阳性对照组(左旋咪唑处理细胞)及25,50,75和100μg/mL桔梗皂苷D组,采用MTT法检测桔梗皂苷D对淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬功能的影响,采用ELISA法检测桔梗皂苷D对淋巴细胞IL-2、IL-4和巨噬细胞TNF-α、IL-12分泌的影响。【结果】桔梗皂苷D能够促进淋巴细胞增殖,增强巨噬细胞的吞噬功能,并可刺激淋巴细胞IL-2、IL-4和巨噬细胞TNF-α、IL-12的分泌,其中以50μg/mL组效果最佳。【结论】桔梗皂苷D能增强小鼠淋巴细胞和巨噬细胞的免疫调节活性。     

紫锥菊多糖对LPS损伤后IEC-6分泌TNF-αmRNA的影响

[目的]研究紫锥菊多糖(EPS)在内毒素(LPS)损伤小肠上皮细胞(IEC-6)时对肿瘤坏死因子(TNF)表达的影响,以探讨 EPS对损伤细胞的作用机制。[方法]采用 TRIzon试剂提取总RNA,RT-PCR扩增 TNF-α mRNA,琼脂糖凝胶电泳,并进行电泳及图像分析。[结果]50μg/ml EPS 可以部分抑制 LPS 刺激 IEC-6产生的TNF-α mRNA水平,而200、500μg/ml EPS随着浓度的增加,其抑制 TNF-α mRNA的水平逐渐增加;将 IEC-6分别用50、100、200及500μg/ml EPS预处理24 h,然后用10μg/ml LPS刺激达1、4 h,采用 RT-PCR方法分析得, LPS诱导 TNF-α mRNA表达被 EPS有效地抑制,4 h的抑制率高于1 h的抑制率。[结论]EPS通过抑制 LPS刺激细胞分泌 TNF-α mRNA的产生而起到肠道粘膜的保护作用,且 EPS对这种抑制作用具有浓度及时间依赖性。     

苦参碱对奶牛子宫内膜上皮细胞抗炎作用及其机制

为探究苦参碱在抗炎方面的作用,本试验用LPS建立奶牛子宫内膜上皮细胞炎症损伤模型,通过MTT法测得LPS最佳刺激浓度为30μg/mL,作用12h;苦参碱的低中高浓度分别为5、10、20μg/mL。RT-PCR分别检测3、6、12h各组细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8)mRNA的表达变化,结果表明,苦参碱显著(P0.05)降低TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的表达,具有较强的抗炎作用。     

苜蓿黄酮对脂多糖刺激下乳成分合成相关基因表达的影响

为探索苜蓿黄酮对脂多糖(LPS)刺激下乳成分合成相关基因表达的影响,采用体外细胞培养技术,将奶牛乳腺上皮细胞分成4个组:1)基础培养基(Con);2)基础培养基中加入1μg/mL的LPS(L);3)基础培养基中加入1μg/mL的LPS和75μg/mL苜蓿黄酮(L+F);4)基础培养基中加入75μg/mL苜蓿黄酮(F)。细胞在37℃,5%CO2的培养箱中培养12h后,对其乳成分合成相关基因的表达进行测定。结果表明:1)相对于对照组,L组和L+F组的酪氨酸激酶(JAK2)表达显著降低(P0.01),信号转导子和转录激活子(STAT5)和真核起始因子4E(eIF4E)表达显著升高(P0.05)。L+F组真核细胞始动因子4E结合蛋白1(4EBP1)的表达显著高于F组(P0.01),核糖体S6蛋白激酶1(S6K1)的表达显著高于L组和对照组(P0.05)。2)F组胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)的表达显著低于L组(P0.05),过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)的表达则相反;F组脂肪酸转运蛋白1(FATP1)和脂肪酸转运蛋白4(FATP4)的表达显著低于L和L+F组(P0.01),脂肪酸结合蛋白3(FABP3)和乙酰辅酶A羧化酶(ACACA)的表达则相反;对照组硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)的表达显著高于其他各组(P0.01)。3)L+F组葡萄糖转运蛋白1(Glut1)(P0.05)、葡萄糖转运蛋白4(Glut4)(P0.05)和葡萄糖转运蛋白8(Glut8)(P0.01)的表达显著高于对照组,F组己糖激酶2(HK2)的表达显著低于L组和L+F组(P0.05),而β-1,4-半乳糖基转移酶(β-1,4-Gal T)的表达最低。因此,在无LPS刺激下,添加苜蓿黄酮可能会抑制乳脂合成;在LPS刺激下,添加苜蓿黄酮可能会促进乳蛋白和乳糖的合成。