十二烷基苯磺酸钠对奥尼罗非鱼免疫毒性的研究

用5种浓度的十二烷基苯磺酸钠（sodium dodeeyl benzene sulfonic,SDBS）浸泡刺激奥尼罗非鱼（Tilapianilotica♀×raurea♂）8周,每2周采血样1次,测定免疫指标。0．05和0．10mg·L^-1组对奥尼罗非鱼的氯化硝基四氮唑兰（nitro blue tetrazolium,NBT）阳性细胞和IgM含量无影响。0．40mg·L^-1组在第8周时,IgM含量显著下降,而NBT阳性细胞突然急剧下降,与对照组相比差异极显著。0．70mg·L^-1组从第4周起,NBT阳性细胞和IgM含量开始减少,第6周时差异显著。1．00mg·L^-1组NBT阳性细胞数在第2周时量就已经有减少,但与对照组相比差异不显著,到第4周时差异极其显著;在第4周时IgM含量有显著差异,第6周后差异极显著。攻毒试验表明,0．40、0．70和1．00mg·L^-1组的死亡率均高于对照组。以上结果表明,当SDBS浓度大于0．40mg·L^-1时,奥尼罗非鱼免疫功能不同程度受到抑制,对NBT阳性细胞和IgM的影响存在着时间与剂量效应。     

氧化油脂对奥尼罗非鱼生长和抗氧化性能的影响

通过饲喂不同过氧化值油脂的饲料,研究奥尼罗非鱼(Oreochromisniloticus×O·aureus)的生长性能、肝胰腺抗氧化能力与氧化油脂的关系。试验结果表明:添加氧化油脂导致罗非鱼的增重率和饲料转化率显著下降(P<0·05),肝体比显著增加,但肝脂率、肌脂率的变化不明显(P>0·05);相对于过氧化值较低的饲料,饲料过氧化值(POV)为73·44mmol/kg时,肝胰腺中还原型谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力明显增高(P<0·05);氧化油脂对肝胰腺中丙二醛(MDA)含量无明显影响(P>0·05)。     

奥尼罗非鱼5种组织中4种同工酶的研究

用聚丙烯酰胺凝胶垂直梯度凝胶电泳法对奥尼罗非鱼肾脏、肝脏、眼睛、肌肉和心脏等5种组织的酯酶(EST)、乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、超氧化物歧化酶(SOD)进行了初步研究,并分析了这4种酶的同工酶位点及酶谱表型。结果表明:奥尼罗非鱼的4种同工酶系统具有明显的组织特异性;EST由7个基因位点编码;LDH酶带多于大多数硬骨鱼典型的5条酶带;MDH和SOD都具有线粒体型和上清液型2种类型。     

饲料中添加硫酸锌对奥尼罗非鱼幼鱼生长和机体抗氧化功能的影响

试验以硫酸锌为锌源,评价不同锌水平对奥尼罗非鱼幼鱼(Oreochrvmis aureus ♂×Oreochromis niloticus♂)生长和抗氧化能力的影响.体质量为(4.13±0.32)g罗非鱼随机分配在18个水族箱中,每箱20尾,每3个箱为1个处理组,分别以添加锌为0、20、40、80、160和320 mg·kg-1的6种饲料投喂,日投喂率为鱼体重5%～9%.8周的试验结果表明:20 mg·kg-1锌饲料组的增重率和鱼体蛋白含量显著高于其它各组(P<0.05),蛋白质效率、饲料转化率也明显高于其它各组;全鱼脂肪含量随着饲料锌水平的升高而升高,但320 mg·kg-1锌饲料组降低;20 mg·kg-1锌饲料组,脊椎骨中锌离子浓度达到最大值且显著高于0 mg·kg-1锌饲料组(P<0.05);20 mg·kg-1与40 mg·kg-1锌饲料组的血液中红细胞数量显著高于其它各添加组(P<0.05),20 mg·kg-1锌饲料组的血液中血比容显著高于0 mg·kg-1组(P<0.05),与其它各组没有显著差异;肌肉中,硫代巴比妥酸反应产物(TBARS)(Thiobarbituricacid-reactivesubstances)的量,锌为0mg·kg-1饲料组显著高于其它各组(P<0.05).综上所述,饲料中锌添加量为20 mg·kg-1饲料促进了罗非鱼生长,使鱼体抗氧化功能增强.     

饲料中添加硫酸锌对奥尼罗非鱼幼鱼生长合机体抗氧化功能的影响

试验以硫酸锌为锌源,评价不同锌水平对奥尼罗非鱼幼鱼（Oreochromis aureus♂×Oreochromis niloticus♀）生长和抗氧化能力的影响。体质量为(4.13±0.32)g罗非鱼随机分配在18个水族箱中,每箱20尾,每3个箱为1个处理组,分别以添加锌为0、20、40、80、160和320 mg•kg^-1的6种饲料投喂,日投喂率为鱼体重5%～9%。8周的试验结果表明：20mg•kg^-1锌饲料组的增重率和鱼体蛋白含量显著高于其它各组(P＜0.05),蛋白质效率、饲料转化率也明显高于其它各组;全鱼脂肪含量随着饲料锌水平的升高而升高,但320mg•kg^-1锌饲料组降低;20mg•kg^-1锌饲料组,脊椎骨中锌离子浓度达到最大值且显著高于0mg•kg^-1锌饲料组(P＜0.05);20mg•kg^-1与40mg•kg^-1锌饲料组的血液中红细胞数量显著高于其它各添加组(P＜0.05),20mg•kg^-1锌饲料组的血液中血比容显著高于0mg•kg^-1组(P＜0.05),与其它各组没有显著差异;肌肉中,硫代巴比妥酸反应产物(TBARS)(Thiobarbituricacid reactive substances)的量,锌为0mg•kg^-1饲料组显著高于其它各组(P＜0.05)。综上所述,饲料中锌添加量为20mg•kg-1饲料促进了罗非鱼生长,使鱼体抗氧化功能增强。     

金属蛋白酶对奥尼罗非鱼生长、消化率及非特异性免疫功能的影响

在基础饲料中分别添加0、0.03%、0.05%、0.10%的金属蛋白酶,饲喂奥尼罗非鱼56d,测定奥尼罗非鱼的生长、消化率及血清溶菌酶活力和超氧化物歧化酶活力(SOD)。结果表明,添加0.10%的金属蛋白酶显著提高了奥尼罗非鱼的增重率(P<0.05),降低了饵料系数(P<0.05);添加0.10%的金属蛋白酶显著提高了奥尼罗非鱼对蛋白质的表观消化率(P<0.05),添加0.05%和0.10%的金属蛋白酶均显著提高奥尼罗非鱼对干物质的表观消化率(P<0.05);在血清酶活力方面,添加0.10%的金属蛋白酶组SOD活力比对照组高(P<0.05)。因此,饲料中添加金属蛋白酶能显著促进罗非鱼生长和营养物质的利用,提高罗非鱼血清SOD活力。     

pH和盐度对奥尼罗非鱼幼鱼生存的影响

本文研究了pH和盐度对奥尼罗非鱼幼鱼生存的影响.幼鱼初始规格:平均体重为2.12±0.79,试验设计2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9和9.5共15个pH梯度组以及10、15、20、25、32和对照组0共6个盐度组,对奥尼罗非鱼幼鱼进行急性毒性试验.结果表明:奥尼罗非鱼幼鱼耐酸碱能力较强,适宜生存的pH范围为5～9;幼鱼的耐盐性较差,盐度高于20时,死亡率100%,96h半致死盐度(MSL～96)为16.91.     

耐高温酶制剂对奥尼罗非鱼生长和消化酶活性的影响

在初始体质量(64.35±1.75) g 的奥尼罗非鱼基础饲料中分别添加0、0.05%、0.10%、0.15%的耐高温酶制剂饲喂56 d,探讨耐高温酶制剂对奥尼罗非鱼生长以及消化酶活性的影响.试验结果表明,饲料中添加耐高温酶制剂能促进奥尼罗非鱼的生长,提高质量增长率,降低饵料系数,提高奥尼罗非鱼消化酶活性.当耐高温酶制剂添加量为0.10%时,奥尼罗非鱼的质量增长率、前肠蛋白酶活性和淀粉酶活性以及肝胰脏淀粉酶活性最高,饵料系数最小,与对照组相比差异显著(P＜0.05).     

鲢和奥尼罗非鱼对池塘蓝藻水华及水质的影响

２００４～２００５年在广州市一个富营养化浅水池塘中开展原位围隔试验,研究放养鲢鱼和奥尼罗非鱼对蓝藻水华的控制效果及对水质的影响。结果表明,鲢鱼和奥尼罗非鱼可以有效控制蓝藻水华,使围隔水体中的浮游植物优势种由蓝藻渐变为裸藻、绿藻和硅藻。鲢鱼、奥尼罗非鱼围隔水体中总悬浮物浓度较池塘水体分别下降２９.７％和１８．６％;叶绿素ａ浓度分别下降２６．６％和１５．９％。同时,围隔水体透明度显著提高。但鱼类放养对水体中的总氮、总磷浓度没有显著影响,并会造成水体中悬浮颗粒物的粒径分布范围变宽,使水体中新增加了直径 大于５００μｍ的悬浮颗粒物。     

鲢和奥尼罗非鱼对池塘蓝藻水华及水质的影响

2004～2005年在广州市一个富营养化浅水池塘中开展原位围隔试验,研究放养鲢鱼和奥尼罗非鱼对蓝藻水华的控制效果及对水质的影响.结果表明,鲢鱼和奥尼罗非鱼可以有效控制蓝藻水华,使围隔水体中的浮游植物优势种由蓝藻渐变为裸藻、绿藻和硅藻.鲢鱼、奥尼罗非鱼围隔水体中总悬浮物浓度较池塘水体分别下降29.7%和18.6%;叶绿素a浓度分别下降26.6%和15.9%.同时,围隔水体透明度显著提高.但鱼类放养对水体中的总氮、总磷浓度没有显著影响,并会造成水体中悬浮颗粒物的粒径分布范围变宽,使水体中新增加了直径大于500 μm的悬浮颗粒物.     

奥尼罗非鱼消化系统的组织学研究

采用石蜡切片法研究了奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus ×O.aureus)的消化系统组织结构.消化道分段明显,有胃的分化,胃呈"U"型,腺体丰富,肌层分内纵外环2层,有些部位3层.消化道管壁有粘膜层、粘膜下层、肌层和外膜层组成.除口咽腔上皮有复层扁平细胞组成外,其余各段均为复层柱状上皮;食道肌层发达,有平滑肌和横纹肌组成.从前肠至后肠皱褶形态各异,数量逐渐减少,各段均有许多杯状细胞.肝脏为实心腺体,肝小叶分界不明显,肝胰脏未完全分离,少部分胰腺组织散布在肝脏内.     

盐度对奥尼罗非鱼受精卵孵化和仔鱼活力的影响

研究了盐度对奥尼罗非鱼受精卵孵化和仔鱼活力的影响.在不同盐度(2、5、8、11、14、17、20、23)及纯净淡水(0),水温(29±0.5)℃下,比较观察奥尼罗非鱼受精卵的孵化时间、孵化周期、孵化率和畸形率.同时在不同盐度条件下对初孵的奥尼罗非鱼仔鱼进行耐饥饿试验,测定其不投饵存活系数(Sal).结果表明,盐度5～14时,奥尼罗非鱼仔鱼受精卵孵化率较高(88.7%～90%),盐度高于17和低于2时,孵化率较低.盐度在2～5及14～17可分别视为奥尼罗非鱼受精卵孵化的两个临界区域.仔鱼生存适宜盐度5～14,最适盐度5～8.盐度为11和14时,SAI值分别为19.05和20.84,此时仔鱼发育缓慢.部分仔鱼的身体一直未出现色素.盐度高于17和低于2时不适合仔鱼的培育.仔鱼的SAI值与受精卵的孵化率呈正相关关系.     

吞噬作用在尼罗罗非鱼抵抗嗜水气单胞菌感染过程中的重要作用

罗非鱼是重要的经济鱼类,而嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)是其主要病原菌之一,只有充分的掌握该病原菌的感染机制才能提供更好的预防和治疗手段。本研究首先通过转录组筛查尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)脾脏中与细菌感染相关的基因,然后通过荧光定量PCR证实上述基因的表达变化,最后使用秋水仙素试验和交叉免疫试验进行验证。研究结果显示,尼罗罗非鱼在感染嗜水气单胞菌之后,吞噬作用发生显著增强。秋水仙素试验发现,微管蛋白的功能受到抑制可以显著降低罗非鱼对嗜水气单胞菌的防御能力。交叉免疫试验证实,通过迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda)激活吞噬作用也可以提高罗非鱼对嗜水气单胞菌的防御能力。本研究旨在了解吞噬作用在罗非鱼抵御嗜水气单胞菌感染过程中发挥重要作用,并试图通过交叉免疫试验为细菌疫苗的制备提供新思路。     

罗非鱼嗜水气单胞菌的分离鉴定

从广西某江网箱养鱼场的发病或濒死罗非鱼中分离到8株呈β溶血的革兰氏阴性杆菌,符合嗜水气单胞菌的特征,致病性试验结果显示8株分离菌均具有较强的致病性,均能致死小白鼠和罗非鱼,并都能产生较强的毒素致死小白鼠;8株分离菌对环丙沙星、氟哌酸、氯霉素、庆大霉素等高度敏感。     

氨氮胁迫对奥尼罗非鱼非特异性免疫的影响

将奥尼罗非鱼（Oreochromis niloticus× O. areus）幼鱼暴露于不同质量浓度（0、2.5 mg·L -1、5 mg·L -1、10 mg ·L -1和20 mg·L -1）的氨氮溶液中,于第0、第12、第24、第48和第72小时测定其非特异性免疫相关指标。结果表明,试验幼鱼经氨氮胁迫后各试验组血清溶菌酶活力随着胁迫时间的延长下降显著（P ﹤0.05）。氨氮胁迫明显影响鱼肝脏总抗氧化能力（T-AOC）及相关抗氧化酶活力。与对照组相比,随胁迫时间增加各试验组肝脏 T-AOC 及总超氧化物歧化酶（T-SOD）活力均先下降后上升（P ﹤0.05）。过氧化氢酶（CAT）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力变化还与胁迫溶液浓度相关。低浓度组（2.5 mg·L -1和5 mg·L -1）,CAT 活力在胁迫24 h 后显著下降（P ﹤0.05）;高浓度组（10 mg·L -1和20 mg·L -1）,CAT 活力却出现先升高后降低的变化。除最高浓度组,各试验组 GSH-Px 活力表现为诱导效应（P ﹤0.05）。试验条件下氨氮胁迫对罗非鱼非特异性免疫产生明显影响,且随浓度增加及时间延长影响程度加大。     

白鲢对嗜水气单胞菌疫苗的免疫应答

用嗜水气单胞菌9120株制备了鱼类出血性败血症疫苗。用该疫苗分二组对白鲢进行免疫，检测免疫后白鲢血清中的抗体水平，其中加佐剂免疫组获得了较高滴度的凝集抗体，不加佐剂免疫组产生的凝集抗体滴度较低，但用间接血球凝集试验可以检出。     

越冬罗非鱼细菌性类结节病的初步研究

1997－2000年，对罗非鱼类结节病（暂定名）进行了研究。经分离，纯化以及回归发病试验，鉴定其病原为嗜气单胞菌（Aeromonas hydrophola)。在此基础上筛选出氯霉素，庆大霉素，诺氟沙星，环丙沙星和复配制剂（穿心莲，黄芪，大黄，痢菌净）等防治类结节病的敏感药物，并提出健康养殖措施。     

耐高温酶制剂对奥尼罗非鱼免疫和肠道结构的影响

为了验证耐高温酶制剂的使用效果,试验在基础饲料中添加0.1%的耐高温饲用酶,饲养奥尼罗非鱼60d,测定罗非鱼血清中非特异免疫指标,并电镜观察小肠细胞微绒毛排列情况;同时测定饲料厂制粒前后蛋白酶活力的变化情况。结果表明,添加耐高温酶制剂组超氧化物歧化酶(SOD)和溶菌酶水平比对照组有显著提高(P<0.05);同时,试验组罗非鱼小肠细胞微绒毛排列整齐、细而长,吸收面积增大;对照组的小肠细胞的微绒毛稀疏、短,排列不均匀。结果证实,在罗非鱼饲料中添加耐高温酶可以显著增强其免疫力,增加其对饲料的吸收率。制粒冷却包装后酶活力仍可保持90%以上,而普通酶只有25%左右。     

复方中草药对奥尼罗非鱼血液非特异性免疫功能的影响

在基础饲料中添加3个不同水平的复方中草药分别饲养奥尼罗非鱼,旨在探讨复方中草药对奥尼罗非鱼血液非特异性免疫功能的影响.挑选质量(36±5)g的健康奥尼罗非鱼,共480尾,随机分为8组,每组60尾,每组设置1个平行.分别用含有0‰(对照组)、0.5‰、1.0‰、1.5‰复方中草药的饲料喂养60 d,每15 d分别取血样,...     

奥尼罗非鱼血清免疫球蛋白的纯化及分子量的初步分析

通过饱和硫酸铵盐析结合 Sephadex G-200柱层析的方法,纯化制备了健康非免疫状态下奥尼罗非鱼的免疫球蛋白,进行变性还原条件下的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹试验对血清的免疫球蛋白进行初步分析,发现SDS-PAGE电泳条件下血清重链分子量为85 kD,轻链分子量为30 kD.如果罗非鱼血清免疫球蛋白在自然状态与其他硬骨鱼类一样也为四聚体,那么其总分子量的理论值应为920 kD.