日本盘鲍与皱纹盘鲍杂交育种技术研究

通过日本盘鲍和本地皱纹盘鲍的杂交育种，使杂种鲍苗1cm以上的成活率高达45．76％，越冬后成活率达到98％，培育出性状稳定、生长快、抗病力强的杂交鲍。报告了杂交育种的试验过程和有关技术。     

日本盘鲍与皱纹盘鲍杂交育种技术研究

１９９８年于山东省蓬莱市用１０只日本盘鲍与３００只皱纹盘鲍,在２２０ｍ＾２的育苗水体中培育出平均壳长１４．７ｍｍ的杂交鲍苗１４３．８万只,６５００只／ｍ＾２,;在５８０ｍ＾２的育苗水体中培育出平均壳长１１．９ｍｍ的皱纹盘鲍自交鲍苗１７７．９万只,３１００只／ｍ＾２。杂交鲍苗的壳和存活率明显大于我国的皱纹盘鲍自交鲍苗。     

盘鲍和皱纹盘鲍的杂交育苗技术

种质退化问题,导致我省鲍的育苗与养成病害日趋严重.杂交,是改良种质的重要手段.漳州市东山湾海珍品良种场利用产自日本的盘鲍(俗称黑鲍)和产自我国黄海的皱纹盘鲍开展杂交育苗试验,培育出杂交鲍苗.对比试验表明,杂交鲍苗比本地产的盘鲍苗生长较快、抗病力较强.现将试验情况总结如下.     

皱纹盘鲍与盘鲍杂交效果分析

从杂种优势的角度对皱纹盘鲍♀与盘鲍♂杂交子一代的经济性状进行分析。结果表明,4月龄杂交鲍子一代(F1)活体重比皱纹盘鲍增加36.87%,软体部干重增加33.21%,总干重增加29.20%,其它性状也显著优于皱纹盘鲍。杂交鲍F1的壳长、壳宽、活体重、软体部干重和总干重等主要性状的变异系数为12.94%~44.51%,其中软体部干重的变异系数最大,壳长的变异系数最小;且杂交鲍各性状的变异系数均大于皱纹盘鲍。杂交鲍子一代的变异有助于定向选择,提高杂交育种的效果。     

日本盘鲍与皱纹盘鲍杂交育种技术研究

<正>我国鲍的养殖技术研究始于20世纪70年代。人工育苗技术的突破,为鲍大规模养殖生产提供了行之有效的途径,进而掀起了鲍人工养殖的高潮,并取得了显著的经济效益和社会效益。但随着养殖规模的不断扩大、养殖环境的日趋恶化,导致鲍病害频发、种质严重下降,     

皱纹盘鲍卵受精时间对受精率及孵化率的影响

在22℃水温下，通过对皱纹盘卵子受精时间的实验，测定不同受精时间所对应的受精率及孵化率。结果表明，皱纹盘鲍卵子的受精时间不同，对其受精率，孵化率有显著影响，其最适的受精时间是2h以内。     

皱纹盘鲍幼虫流水孵化培育技术的研究

采用紫外线海水培育、充气海水培育、流水孵化培育、流水孵化培育中试4种不同方法进行皱纹盘鲍（Haliotis discus hannai）幼虫孵化培育，并与常规孵化技术对照，结果表明：紫外线海水孵化培育组幼虫48h面盘与壳分离死亡；充气流水培育组幼虫发育畸形；48h下沉死亡；流水培育组幼早孵化率为69.7%，流水培育中试组幼虫孵化率达75.8%。而对照组孵化率仅为23.5%。流水孵化培育不仅提高了孵化率，而且稳定性较高，同时节省大量劳动力。     

日本大鲍与皱纹盘鲍杂交的研究

利用从日本引进的大鲍，与我国产皱纹盘鲍进行了杂交育苗试验，在540m^2鲍育苗池中，1999年6月常温采苗至当年11月份，培育出平均壳长17.9mm的皱纹盘鲍雌与日本大鲍雄的杂交鲍苗180余万粒，单位面积出苗量为3300余粒／m^2。这些杂交鲍苗，经过1年多的室内饲育，至2000年11月平均个体壳长达37mm，最大个体壳长达45mm，显示出了良好的生产性状和一定的杂种优势。     

皱纹盘鲍与日本西氏鲍杂交育苗技术的初步研究

利用从日本引进的西氏鲍,与我国北方产皱纹盘鲍进行了杂交育苗试验,使杂交鲍苗越冬后成活率提高,生长快,抗病力强,显示出了良好的生产性状和一定的杂交优势。     

鲍杂交育种技术开发研究

选用皱纹盘鲍(♀)与日本盘鲍(♂)进行杂交育种,培育生长快、色泽鲜艳、活力强、抗逆性强杂交鲍苗.从2003年4月20日进行苗种培育,当年11月份鲍苗壳长20mm以上的超过50%,表现出明显的生长优势.     

皱纹盘鲍4个群体与九孔鲍16S rRN A基因遗传差异分析

采用PCR方法扩增了皱纹盘鲍（4个群体）和九孔鲍（1个群体）共5个群体（53个样本）16S rRNA基因片段（16S）,测序获得了1000 bp核苷酸序列,其中669 bp核苷酸序列用于遗传差异分析,旨在评估我国皱纹盘鲍不同群体间及其与九孔鲍间的遗传差异。从52个序列中共检测到17种单倍型,其中皱纹盘鲍4个群体有13种单倍型,九孔鲍1个群体（9个样本）有4种单倍型。单倍型核苷酸序列比对显示,变异位点占比对位点的20．5％,基于单倍型的皱纹盘鲍4个群体间的遗传距离为0．002～0．011,平均为0．005;九孔鲍群体内的平均遗传距离为0．004,两种鲍间的平均遗传距离为0．218;两种鲍间的遗传分化系数 F‐统计量 FST平均为0．982,皱纹盘鲍4群体间的 FST值为0．0051～0．0065。本研究显示2种鲍群体内16S变异很小。系统发育分析鲍属11种鲍的聚类关系,显示皱纹盘鲍与盘鲍、日本鲍交叉聚为一支,九孔鲍与杂色鲍也交叉聚为一支,4个种类未聚成单系支。     

皱纹盘鲍幼虫流水孵化培育工艺流程与应用

应用流水孵化技术大规模孵化皱纹盘鲍（Haliotis discus hannai)幼虫，与常规技术相比，孵化率平均提高到67.9%，采苗次数下降了88%，节省亲鲍数量72%，节省劳动力95%。     

皱纹盘鲍和盘鲍南方养殖群体遗传变异的微卫星分析

利用4对微卫星引物分析了皱纹盘鲍Haliotis discus hannai和盘鲍H.discus discus在福建和广东养殖群体的遗传多样性。结果表明,4个养殖群体平均等位基因数为3.750~5.500,平均有效等位基因数为2.941~3.885,平均期望杂合度为0.641~0.698,平均观察杂合度为0.456~0.620,平均多态信息含量PIC值为0.558~0.645,其中惠来盘鲍群体遗传多样性最高,东山盘鲍遗传多样性最低。AMOVA分析表明,群体间的遗传变异仅为总遗传变异的4.78%,但群体间遗传分化显著(FSC=0.048,P<0.001)。群体间NEI氏遗传距离为0.084~0.186,UPGMA聚类分析表明,东山盘鲍与惠来盘鲍群体间亲缘关系最近,并与惠来皱纹盘鲍聚为一类,东山皱纹盘鲍与其它群体间亲缘关系较远。皱纹盘鲍和盘鲍南方养殖群体遗传多样性较高,有利于遗传选育,但与野生群体相比等位基因有所丧失。     

用流式细胞仪检测活体鲍倍性

分别取皱纹盘鲍（Ｈａｌｉｏｔｉｓ ｄｉｓｃｕｓ ｈａｎｎａｉ）足肌和血液制样,经ＤＡＰＩ染色后,用ＰａｒｔｅｃＰＡＳ－Ⅲ型流式细胞仪测定其倍性,试验证明三倍体鲍的ＤＮＡ相对含量是二保体的１．５倍,切足法和抽取血液法两种制样方法均得到满意结果,用流式细胞仪法检测鲍倍性适应鲍多倍体产业化的需要。     

不同卵色皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)幼鲍的生长与免疫比较

随机选取100只经过480 d养殖的3♀×10♂绿卵全同胞家系子一代(F1)的皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)幼鲍为实验材料,进行雌雄、卵色分类后,测量所有样本总重、壳长、壳宽等生长指标,并测定不同卵色幼鲍的超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、过氧化氢酶(CAT)和溶菌酶(LZM)的活性,进行单因素方差分析(One-way ANOVA).结果显示,在生长方面,不同卵色幼鲍的各生长指标无显著差异(P＞0.05),但绿卵幼鲍的各生长指标均高于其他3种卵色;在免疫酶活性方面,4种卵色幼鲍在SOD和CAT活性上无显著差异(P＞0.05),绿卵幼鲍的AKP、ACP和LZM 3种酶的活性与棕色和棕红色卵幼鲍存在显著差异(P＜0.05),而与棕绿色卵幼鲍无显著差异,其酶活性从高到低按卵色排列依次为绿色、棕绿色、棕色和棕红色.上述研究结果可为利用卵色选育皱纹盘鲍高产抗逆新品系提供依据.     

杂色鲍与盘鲍种间杂交受精率的影响因素

研究卵子排放后的时间、精子排放后的时间、授精精子浓度、胰蛋白酶、钙离子、pH和水温等因子对杂色鲍(Haiotisdiversicolor,以下简称S)与盘鲍(H.discus discu,以下简称J)种间杂交受精率的影响。结果表明,卵子排放后的时间和授精精子浓度是影响杂交受精率两个最重要的因素。与自繁组合相比,正反杂交受精率均较低且下降速度快得多。水温21.5℃时,两亲本自繁对照组中,卵子排放1 h对受精率均无显著影响。而SJ杂交,卵子排放时间2 min时,受精率为55.9%±8.1%,4.7 min时受精率已下降了50%;JS杂交,卵子排放时间为4 min时,受精率为31.5%±9.7%,10 min时受精率下降至4 min时的29.1%。相比之下,精子排放时间对杂交受精率的影响小得多,3 h内对正反交杂交受精率没有显著影响。杂交适宜精子浓度约为母本自繁的100倍,其中SJ杂交适宜授精精子浓度为6.0×106~2.4×107mL-1,JS杂交适宜授精精子浓度为3.8×107~7.5×107mL-1。水温对于杂交受精率也有影响,短时间内将水温控制在26~29℃可以得到较高受精率。其他实验因素,如添加胰蛋白酶、Ca2+或改变授精体系pH对杂交受精率均无正向作用。