三聚氰胺抗原合成及其多克隆抗体的制备

以2-氯-4,6-二氨基-1,3,5-三嗪为原料,强碱条件下与3-巯基丙酸反应,制备三聚氰胺半抗原并经质谱和红外鉴定;应用碳二亚胺法将半抗原与BSA和OVA偶联制备三聚氰胺免疫原和包被原,完全抗原经紫外扫描鉴定偶联成功,偶联比分别为16:1和10:1,通过免疫新西兰大白兔成功制备三聚氰胺多克隆抗体,抗体效价可达1:128000以上。本研究为三聚氰胺人工抗原的制备提供了有效途径,为三聚氰胺免疫检测方法的研发奠定了基础。     

Chlamydial Infection in Animals: A Review

A review of the literature concerning chlamydial infection in birds and animals, particularly domestic animals is presented. Following a general discussion of the agent, the nature of chlamydial infection and diagnostic criteria, information regarding disease is summarized for each species. The possibility of zoonotic transmission is also discussed.     

动物布鲁菌病补体结合试验的影响因素及应注意的问题

补体结合试验是目前血清学试验中最为准确的实验技术之一,被世界动物卫生组织(OIE)认证为布鲁菌病诊断的确诊性试验.对动物布鲁菌病补体结合试验中影响因素夏应该注意的问题进行了较全面的分析和总结,以供同行参考.     

贵州省牛羊衣原体感染血清学调查

用间接血凝试验(IHA)对采自贵州省内838份牛血清、515份羊血清进行衣原体抗体检测。结果表明,抗体阳性牛血清24份,阳性率为2.86%,牛群阳性率为39.13%;抗体阳性羊血清186份,阳性率为36.12%,羊群阳性率为89.47%。调查表明贵州省部分牛群和羊群存在不同程度的衣原体感染。     

Equine Infectious Anemia: Preliminary Investigation of the Complement-Fixation Test for the Demonstration of Antibodies and Antigen

Clinical field cases of equine infectious anemia were studied and the disease was reproduced experimentally in horses. Attempts were made to adapt the complement-fixation test to the detection of antibodies in the serum of infected animals and to the demonstration of antigens in tissue extracts.

A moderate complement-fixing antibody response was demonstrated in the serum of horses shortly after primary exposure to the infectious agent. However, this reactivity was of short duration and occurred with normal as well as with infected saline tissue extracts. It was therefore concluded that this reaction was not specific for equine infectious anemia. Possibly it is due to the appearance of auto-tissue antibodies. The value of this reaction in the diagnosis of the infection was limited because of its short duration and absence in chronic infection and following re-exposure to the infectious agent.

     

沙门氏菌马流产凝集试验抗原参考品的研制

为研制沙门氏菌马流产凝集试验抗原国家参考品,提高沙门氏菌马流产凝集试验相关试剂半成品和成品检验的准确性和可重复性,按照有关最新规定,在以往各批次沙门氏菌马流产凝集试验抗原参考品的制备和标定技术基础上,规范了该抗原参考品的制备方法 ;采用3种效价血清进行标定,监测其保存期内的稳定性,并将其应用于生产检验实践。结果表明,用该方法制备和标定的沙门氏菌马流产凝集试验抗原参考品效价稳定、品质良好,可作为一种国家参考品使用。     

Occurrence of Antibodies to Group Specific Chlamydia Antigen in Cattle and Reindeer Sera in Finnish Lapland

The occurrence of group specific complement fixing antibodies was studied in random sera of cattle and reindeer in Finnish Lapland. Sixty-eight (40.5%) of the 168 cattle sera were positive. Sixty 4hree (21.6 %) of the 291 reindeer sera were positive. The difference is statistically nearly significant in the t-test. The antibody titer ≥ 1:16 was regarded as positive. The antibody frequency of cattle sera was statistically significantly higher and the antibody frequency of reindeer sera was nearly significantly higher than in earlier studies on cattle sera in South and Central Finland. The reasons are discussed.     

抗猪支原体共同抗原单克隆抗体的制备与鉴定

以猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)168菌株F332作为抗原，免疫8周龄BALB/c小鼠，利用淋巴细胞杂交瘤技术，获得两株能稳定分泌特异单克隆抗体的杂交瘤细胞株。两株单抗与Mhp和猪鼻支原体（M.hyorhinis,Mh)等反应，而不与鸡支原体，对照血清等反应。结果表明两株单抗可能是针对猪支原体共同抗原的单抗，用SDS-PAGE电泳和Western-blot分析猪支原体的膜蛋白成分。结果显示，猪支原体的共同抗原是80kd和30kd蛋白，两株单抗均与Mhp和Mh的30kd蛋白条带反应，表明这两株单抗特异地针对猪支原体的共同抗原成分30kd蛋白，可以看出，这两株单抗在Mhp的抗原分析，血清学诊断和疫苗质量监测以及猪源支原体污染细胞检测等方面有重要应用价值。     

酶联免疫吸附试验夹心法检测梅花鹿狂犬病病毒抗原的研究

以马抗狂犬病固定毒抗体建立的酶联免疫吸附试验夹心法,检测了动物脑组织中的梅花鹿狂犬病病毒抗原。对已知阳性和阴性鼠脑抗原的检测表明,本法具有敏感、特异、快速,简便等特点。实验室检测了50份阳性鼠脑抗原及40份阴性鼠脑抗原,其消光值(OD值)均数(X)分别为0.928和0.209。对5只鹿、3头牛和4只羊脑组织的检测结果皆与其它诊断结果相符;对15只犬的检测发现,其敏感性远远高于补体结合试验的敏感性。     

毒害艾美耳球虫配子体抗原EnGAM22单克隆抗体的制备与鉴定

旨在制备毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)配子体抗原EnGAM22单克隆抗体,用Ni-NTA亲和层析纯化的重组抗原rEnGAM22免疫BALB/c小鼠,免疫3次后,取脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用预先建立的ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,经有限稀释法对阳性杂交瘤细胞进行4次亚克隆后,获得2株能稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株并命名为2F3和3D3;对单抗亚类和特异性进行鉴定,应用单抗识别天然蛋白和虫体定位。结果显示,单克隆抗体2F3和3D3亚类分别为IgG2a、IgG2b,纯化后腹水效价分别为1:256 000、1:64 000,能特异性识别重组抗原rEnGAM22和毒害艾美耳球虫天然配子体蛋白;免疫荧光定位显示单克隆抗体2F3和3D3能特异性识别大配子体的成壁体和卵囊壁,表明EnGAM22抗原参与卵囊壁的形成。制备的单克隆抗体为研究球虫卵囊壁形成的分子机制奠定了基础。     

牦牛EPF的原核表达及多克隆抗体制备

本试验旨在制备牦牛早孕因子(early pregnancy factor,EPF)多克隆抗体,为牦牛妊娠早期高效快速诊断技术研究奠定基础.采用RT-PCR方法,从牦牛胎盘和卵巢组织中提取RNA,反转录为模板后进行EPF基因扩增,并将其克隆到改造后的载体pET28-His10-Sumo上,构建pET28-His10-Su...     

动物常用消毒药的配制与使用

消毒药在动物防疫工作中应用十分广泛，如果配制或使用不当，轻则达不到消毒效果，重则对人畜安全造成影响，并造成人力和物力的浪费。怎样才能做到正确地配制和使用呢？本文仅介绍几种常用消毒药的科学配制法与使用，供参考。１克辽林（臭药水、煤焦油）由煤酚与肥皂、烧碱等混合而成，毒性及腐蚀性较小，有去臭、防腐、制酵及抑菌作用。３％－５％溶液用于生猪仓库、地面、用具、阴沟、走道等处的经常性消毒。用３－５份臭药水加９７．－９５份水，配成３％－５％臭药水。因本品有特殊的酚臭味，不适用于肉联厂、屠宰场、奶牛场的消毒，以…     

诺如病毒P-partical-GnIH抗原制备及抗原性初步检测

为探索调控家鹅繁殖性能的技术,本研究通过设计合成鹅促性腺激素抑制激素（gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH）序列片段,酶切后连接到诺如病毒（Nov）P基因重组pEGX-4T-1载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,提取阳性菌重组质粒,并通过测序和酶切进行验证。将测序正确的质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,利用IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE及Western blotting检测重组蛋白表达。进一步在不同IPTG浓度及诱导时间条件下进行原核表达,确定最佳诱导条件,在最佳条件下的诱导菌液经过离心收集菌体,并超声波破碎离心后对重组蛋白可溶性进行分析。利用xTractor Buffer和Glutathione Superflow树脂对重组蛋白进行纯化,并使用自制的抗GnIH鹅血清及抗鹅二抗通过Western blotting检测重组蛋白。结果显示,重组质粒Nov P-partical-GnIH经双酶切鉴定获得大小约为96 bp的目的基因条带,进一步测序结果证明重组质粒构建成功。诱导表达的重组蛋白分子质量约为64 ku,与预期大小一致,且在37℃、1.0 mmol/L IPTG、诱导2 h条件下表达量最高;菌体超声破碎后经SDS-PAGE检测,重组蛋白主要表达在沉淀中。重组蛋白与GST单抗及抗GnIH阳性血清均能反应,表明此重组蛋白具有较好的反应原性和免疫原性。本研究通过对Nov P-partical-GnIH蛋白原核表达及纯化成功获得了大量纯度较高的重组蛋白,将有助于进一步建立家鹅的繁殖性能免疫调控方法,为提高繁殖性能及调控繁殖机制的研究奠定基础。     

展青霉素人工抗原的制备与鉴定

为探讨展青霉素（patulin,PAT）不同抗原合成方法对完全抗原制备及抗体产生的影响,本试验利用琥珀酸酐联合活泼酯法,分别制备免疫原PAT-BSA和包被原PAT-OVA。为提高PAT与偶联蛋白的结合率,尝试将BSA修饰为EDA-BSA后与PAT进行偶联,并对比2种偶联方法制备的完全抗原免疫动物后抗血清的效价水平。同时利用琼脂糖凝胶电泳、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、凝胶渗透色谱多种方法分析鉴定偶联结果,为PAT单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立奠定了基础。     

一种快速有效制备单克隆抗体的方法

以人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）为抗原,对ＢＡＬＢ／ｃ小鼠一次脾内直接注射免疫,免疫后６ｄ,取其血清进行抗体检测,结果１２８００倍稀释度仍呈阳性。取此免疫小鼠脾细胞与同系小鼠骨髓瘤细胞ＮＳ－１进行细胞融合。融合后,将经检测抗体阳性的细胞孔置于显微镜下,挑选单个克隆进行克隆化,得到２株单克隆抗体细胞株２Ａ８、４Ｅ６。将其分别接种于ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔中,收获的腹水效价分别达１０－６和１０－５。     

生长素及其在动物生产中的应用

本文概括了生长素及其受体的结构及分布,对生长素的生物学效应、分泌调节及其在动物生产中的应用进行了综述。     

动物寄生虫疫苗的研究进展

1.新疆石河子大学动物科技学院，石河子 832000;2.新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室，石河子 832000