北京生菜黑斑病病原菌鉴定

【目的】生菜黑斑病是生菜的重要病害之一,在生产上影响生菜质量并导致减产。目前报道的生菜黑斑病病原菌种类较多,为了明确引起北京地区生菜黑斑病的病原菌种类,从北京市昌平区生菜种植温室采集生菜黑斑病病样,进行病原菌的分离培养、致病性测定与鉴定。【方法】采用的病原菌鉴定的主要方法为形态学鉴定和分子生物学鉴定。通过显微镜观察病原菌的形态特征,并对病原菌DNA的ITS部分序列进行分析。【结果】结果表明:引起生菜黑斑病的病原菌为互隔链格孢Alternaria alternata。【结论】研究结果可以为生菜黑斑病的相关研究以及今后生产上相关生菜病害的防治提供理论依据。     

奉新猕猴桃黑斑病病原菌鉴定及室内药剂筛选

【目的】明确江西省奉新县猕猴桃黑斑病病原菌种类,筛选防治该病害的有效药剂。【方法】从奉新县果园中随机采集40个呈典型症状的猕猴桃黑斑病病果,采用PDA培养基按照常规组织分离法对其进行病菌分离和纯化。从获得的菌株中选择代表性菌株HB-1进行病菌鉴定和药剂筛选。在测定其致病性的基础上对其培养性状、分生孢子和分生孢子链形态进行观察,并测量其分生孢子大小。根据菌落形态特征和病菌形态大小,参考相关文献,对病原菌进行种类归属鉴定。提取菌株HB-1基因组DNA,对其rDNA-ITS和EF-1α基因进行PCR扩增和序列测定,根据序列同源性大小对病原菌进行分子鉴定。采用菌丝生长速率法测定22种杀菌剂对该病菌的室内抑菌活性。【结果】共分离获得35个培养性状一致的真菌菌株,供试菌株HB-1具有致病性,其菌落绒状,正面墨绿色,背面淡绿色。菌株产生卵形或倒棍棒形,具2～5个横隔膜和1～3个纵、斜隔膜、大小(15～50)μm×(7.5～12.5)μm的分生孢子。分生孢子链状着生并有分支,支链一般长1～5个孢子,最长也未达到10个孢子。上述培养性状和形态特征符合文献中对链格孢(Alternaria alternata)的描述。该菌株的rDNA-ITS和EF-1α基因序列长度分别为531 bp和240 bp,与GenBank中链格孢(A. alternata)的序列同源性为100%。在药剂筛选试验中,申嗪霉素、咪鲜胺锰盐、己唑醇、肟菌·戊唑醇、丙环唑、苯醚甲环唑、戊唑·嘧菌酯和氟硅?8种杀菌剂抑菌活性强,EC_(50)值均小于1μg/mL;中生菌素、嘧菌环胺、吡唑醚菌酯、异菌脲、噁酮·锰锌、多抗霉素、丙森锌、代森联和腈苯唑9种杀菌剂抑菌活性较强,EC_(50)值1～10μg/mL;啶酰菌胺、乙蒜素、春雷霉素、精甲·百菌清和百菌清5种杀菌剂的抑菌活性较弱或不明显,EC_(50)值均大于25μg/mL。【结论】确定奉新县猕猴桃黑斑病病原为链格孢(A. alternata),申嗪霉素、咪鲜胺锰盐、己唑醇、肟菌·戊唑醇、丙环唑、苯醚甲环唑、戊唑·嘧菌酯和氟硅?8种杀菌剂对链格孢具有强烈的抑菌活性。     

杏果实黑斑病病原鉴定及病原菌生物学特性

对杏果实上发生的一种新病害——黑斑病进行了报道，根据病原菌致病性、生物学特性、培养性状及形态研究结果，鉴定其病原是一种链格孢菌(Alternaria sp.)，适宜病原菌生长的温度为25～30℃，最适温度为28℃，适宜pH值为4～8，最适pH值为5．78．以蛋白胨或酵母汁为氮源，淀粉或乳糖为碳源有利于菌丝生长，分生孢子萌发的适宜温度为25～35℃，最适温度为30℃，光照有利于菌丝生长和孢子萌发。     

河南商丘月季黑斑病病原菌鉴定及生物学特性

月季是一种世界上常见的、重要的观赏植物.2019年10月在河南省商丘市平原路、长江路、文化路等绿化带发现月季植株患有黑斑病,为鉴定河南省商丘市月季黑斑病病原菌,采集月季患病植株叶片,使用单孢分离法对该病原菌进行分离,纯化得到1株病原菌SQYJAA-1.对该病原菌SQYJAA-1进行形态学鉴定,利用室内人工接种的方法对其进行致病性测定,对其rDNA ITS、GPD和EF1-α等3个基因序列进行PCR扩增和测序分析.结果表明,病原菌的分生孢子为棕褐色,呈倒棒状,表面有横隔膜和纵隔膜.该菌株能使健康月季离体叶片出现黑斑病病症.多基因系统进化分析表明,该病原菌菌株SQYJAA-1(ITS序列MN495846,GPD序列MK683866,EF1-α序列MT133312)与链格孢(Alternaria alternata)(ITS序列MN495797,GPD序列MK683865,EF1-α序列KY094931)聚于1个分支,由此确定河南省商丘市月季黑斑病病原菌SQYJAA-1为链格孢.生物学特性分析表明,SQYJAA-1菌丝最适宜生长的温度为28℃,pH值为6.0,光照条件为24 h光照,最适宜SQYJAA-1菌丝生长的碳源为葡萄糖,氮源为蛋白胨.研究结果为河南省商丘月季黑斑病的防治提供了理论依据和应用价值.     

北五味子黑斑病病原菌鉴定

北五味子黑斑病主要为害五味子的叶子、果实和新梢,可导致早期落叶、新梢枯死和落果。１９９７～１９９８年对田间栽培的北五味子进行了黑斑病病原菌的分离、接种和再分离,证实北五味子黑斑病病原为：交连孢属（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）真菌。     

宜昌市一种核桃黑斑病病原菌的分离及鉴定

为明确引起宜昌市核桃黑斑病的病原菌,根据柯赫氏法则测定其致病性,通过形态学观察和r DNA-ITS序列分析鉴定病原菌。结果表明,引起宜昌市核桃黑斑病的病原菌为链格孢属链格孢(Alternaria alternata)。     

三七黑斑病病原菌的复核鉴定

利用单孢分离法,从云南文山三七(Panax notoginseng)叶片上分离获得黑斑病病原链格孢菌。对所获得的供试菌株进行形态学鉴定,同时利用ITS、Alt a1、gpd、BT2和RPB2等5个基因的序列进行系统发育分析研究。结果表明,三七黑斑病病原菌为Alternaria panacis Whetzel。     

大白菜黑斑病病原鉴定及品种抗性评价

对辽宁省大白菜黑斑病进行调查、病样采集、病菌分离及形态鉴定,并对12份大白菜品种进行抗病性鉴定。结果表明,大白菜黑斑病由芸薹链格孢引起,12份大白菜品种对黑斑病抗性存在较大差异,感病品种有孙家湾5号、天津小青、河头早,中抗品种有辽白21号、辽白7号、辽白12号和辽白8号,抗病品种有辽白19号、辽白22号、辽白10号、秋绿75和水师营10号。     

红花黑斑病病原菌生物学特性研究

研究了红花上的一种新病害红花黑斑病,病原菌为红花链格孢(Alternaria cartham iChowdhury),主要危害红花叶片,在辽宁多个地区均有发生,发病率可达60%~80%。病原菌适宜生长温度为20~30℃,RH为96%~98%,pH值为5~7,最好以麦芽糖和可溶性淀粉为碳源,以苯丙氨酸和硝酸钠为氮源。分生孢子萌发的适宜温度为25~28℃,RH为100%,pH值为5~7。     

小口枣黑斑病病原分离鉴定——链格孢属的初步研究

2012年从景泰县采集小口枣黑斑病病果样品,分别在PDA培养基、枣汁培养基、肉质胨培养基上对病原菌进行分离、纯化,统计和计算分离频率,观察菌落形态特征,共分离出三种菌:菌1,菌2,菌3。通过菌落形态、孢子形态的观察,鉴定出菌3为半知菌亚门链格孢属的Alternaria tenuis。进而测定菌3在PDA、肉质胨、枣汁培养基上的生长速率,以及菌3在不同培养基上的产孢量,从而得出菌3最适宜在PDA培养基上生长,同样在PDA培养基上产孢量最大。     

蜜柚黑斑病症状及病原鉴定

症状观察结果确认平和县琯溪蜜柚黑斑病出现2种症状类型：黑星型和黑斑型．通过病原菌分离培养、形态特征观察和ITS序列分析,果实黑斑病的病原鉴定为亚洲柑橘叶点霉,叶片黑斑有亚洲柑橘叶点霉和中华柑橘叶点霉．采用科赫氏法则证实亚洲柑橘叶点霉是瑁溪蜜柚黑斑病的病原菌,中华柑橘叶点霉未能对琯溪蜜柚果实致病．     

广西剑麻黑斑病病原菌鉴定及其生防菌筛选

【目的】分离、鉴定一种在广西剑麻叶片上产生圆形、近圆形或长椭圆形黑色凹陷斑块病害的病原菌,并针对该病原菌筛选具有较好防治效果的生防菌,为病害防治提供科学依据。【方法】从广西5个剑麻种植农场采集具有圆形、近圆形或长椭圆形黑色凹陷斑块的病叶,采用组织分离法分离病原菌;采用叶片针刺法接种,进行病原菌致病性测定;通过病原菌形态特征观察和分子生物学方法鉴定病原菌。采用平板对峙培养法和载玻片孢子萌发法研究哈茨木霉（Trichoderma harzianum）菌株GZ-5、深绿木霉（T.atroviride）菌株ST-1、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）菌株B11和解淀粉芽孢杆菌（B.amyloliquefaciens）菌株YZ14-3对剑麻黑斑病病原菌菌丝生长和孢子萌发的抑制效果。【结果】从病叶组织中分离出6种真菌,其中编号为JMHB1的菌株分离率最高,达96%;致病性测定结果表明菌株JMHB1为致病菌;依据形态特征和分子生物学方法,将菌株JMHB1鉴定为新暗色柱节孢（Neoscytalidium dimidiatum）。对峙培养结果显示,生防菌菌株B11和YZ14-3可显著抑制菌株JMHB1的菌丝生长（P<0.05）,抑菌圈半径分别为12.14和13.22mm,且2株生防菌株的培养滤液均可导致菌株JMHB1的菌丝隘缩、断裂;生防菌菌株ST-1和GZ-5对菌株JMHB1的拮抗系数为Ⅲ级和Ⅳ级,但其培养滤液对菌株JMHB1的菌丝无抑制作用。菌株JMHB1的孢子可在菌株YZ14-3、B11、ST-1和GZ-5的培养滤液中的萌发,萌发率分别为31.67%,32.37%,68.63%和76.63%。【结论】引起广西剑麻叶片产生圆形、近圆形或长椭圆形黑色凹陷斑块病害的病原菌为新暗色柱节孢[N.dimidiatum（Penz.） Crous&;Slipper],这是我国首次报道新暗色柱节孢侵染剑麻引起黑斑病。病害名称暂定为剑麻Neoscytalidium黑斑病。剑麻生产上可选择和搭配使用解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、深绿木霉及其商品制剂防治剑麻Neoscytalidium黑斑病。     

黑穗醋栗叶斑病病原鉴定

叶斑病是近年黑穗醋栗栽培区危害比较大的一种病害,严重时导致叶片大量提前脱落,从而影响树势和产量。分别从黑龙江省海林市、桦川县、宾县和东北农业大学园艺实验站采集病样,采用组织分离法分离病斑,并对分离的病原菌进行纯化、形态观察和人工接种。结果表明,黑龙江省黑穗醋栗叶斑病是由壳针孢属(Septoria)真菌引起的,属于半知菌亚门(Deuteromycetes)球壳孢目(Sphaeropsidales)球壳孢科(Sphaeropsidaceae),该病原菌的适宜生长培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基(Potato dextrose agar,PDA)。试验研究主要是确定了导致黑穗醋栗叶斑病的病原,以期为黑穗醋栗的抗叶斑病育种及病害的防治提供依据。     

越橘叶斑病病原菌的鉴定

文章在辽东地区越橘叶斑病发生严重的种苗繁育圃场采集病叶标本,经分离纯化获得一株真菌,用涂抹法回接健康植株的叶片,与自然发病症状相同。根据该病原菌在光学显微镜下的形态特征以及对其ITS和-βtubulin的核酸序列分析,结果表明,确认辽东地区发生的越橘叶斑病的病原菌是柯氏帚梗柱孢霉(Cylindro-cladium colhounii Peerally)。     

桔梗叶斑病病原细菌的鉴定

2000-2001年在江苏、浙江、安徽等地发现一种桔梗病害，并从其病叶上分离得到了26个菌株。菌株接种于桔梗叶片后，发病症状与自然发病症状完全一致，并从回接病株上重新分离得到此病原菌。各菌株间致病力无明显的差异。经革兰氏染色反应、菌体形态、培养性状、生理生化反应、（G C）%等鉴定，确定该病原菌为丁香假单胞杆菌的一个新的致病变种。该病菌能引起桔梗细菌性叶斑病（又称斑点病）。     

金银花褐斑病病原检测和ITS鉴定

为了提高金银花褐斑病防治的靶向性,加强对银花褐斑病病原的检测。依据科赫氏法则,采用‘巨花一号’金银花褐斑病病叶为试材,经过平板分离、菌种纯化、叶片接种试验和ITS鉴定。通过3次病原菌分离、检测,共分离真菌71株,从金银花叶片上首次筛查出番茄匍柄霉(Stemphylium solaini)、旋丝毛壳(Chaetomium bostrychodes)两种潜在致病菌;另外,还有2株具有生防价值的球毛壳菌(Chaetomium globosum)和黑附球菌(Epicoccum nigrum);试验证实拟茎点霉(Phomopsis sp.)为金银花褐斑病病原微生物。     

福州地区对虾暴发性白斑病的病原鉴定

1997- 1998年在福州对虾养殖病害区的调查和采样结果表明 ,该地区的病害主要为暴发性白斑病 .显微镜观察、抑菌和人工感染试验表明 ,病害的致病病原为病毒 .现已分离到其主要致病病毒——一种具囊膜的子弹状的病毒     

大蒜蒜头黑腐病病原菌鉴定

在陕西关中大蒜产区发现了一种大蒜新病害——蒜头黑腐病,依据柯赫氏证病律进行了病原菌鉴定。由发病蒜瓣分离到一种国内未报道的病原真菌Embellisiaallii(Campanile)Simmons。该菌在PDA平板上菌落灰黑色,边缘整齐;分生孢子梗屈膝状弯曲,有分枝,孢痕明显;分生孢子单生,暗色,椭圆形或近圆柱形,正直,少数弯曲,呈S形或Y形,有暗褐色横膈4～10个,纵膈或斜膈0～2个。孢子大小(30～56)μm×(10～17)μm,表面光滑或微粗糙。用分离菌接种蒜瓣,引起黑腐症状,与自然发病相同。该菌为中国新记录种。     

黑龙江省玉米弯孢霉叶斑病病原鉴定

玉米弯孢霉叶斑病是近年我国玉米生产中发生的一种叶部病害,在黑龙江省已演变为主要病害。通过采集黑龙江省哈尔滨、绥化、大庆、齐齐哈尔和牡丹江等玉米产区病叶标样,经病原菌分离培养、致病性测定、形态鉴定和rDNA-ITS序列分析,明确黑龙江省玉米弯孢霉叶斑病可由新月弯孢Curvularia lunata、棒状弯孢Curvularia clavata、不等弯孢Curvularia inaequalis、苍白弯孢Curvularia pallescens 4种弯孢霉引起,且对玉米叶片均具有致病性,其中新月弯孢为优势种,致病力最强。     

基于PCA和BP神经网络的万寿菊黑斑病孢子识别

针对万寿菊黑斑病难于防治的问题,采用基于主成分分析和BP神经网络的识别方法,对万寿菊黑斑病病原菌(Alternaria tagetica)无侵染力和有侵染力的孢子进行精确识别。首先利用图像处理技术对病原菌孢子显微图像进行分割,选取3个颜色特征(R、G和V)、5个形状特征(Hu不变矩中的H2、H3、H4、H5和H6),以及3个纹理特征(R、G、B3个分量的对比度)共11个特征用于病原菌孢子分类识别。为提高识别速度和精度,利用主成分分析法(PCA)对11个特征进行优化和筛选,采用基于L-M算法的BP神经网络对万寿菊黑斑病病原菌的孢子进行分类识别。试验结果表明,经主成分分析后得到的第一、第二主成分能够有效减少BP网络训练时间和提高识别准确率,平均识别准确率达到98%。该方法能够精准识别万寿菊黑斑病病菌有侵染力和无侵染力的孢子。