草酸青霉菌HB1发酵液对三种蔬菜种子及幼苗的促生作用

以草酸青霉菌HB1发酵液为研究对象,通过发芽试验,探究其对黄瓜、辣椒及白菜3种蔬菜种子发芽率、幼苗生长及其根耐性指数的影响,以期为设施蔬菜的高质量育苗提供参考依据。结果表明:草酸青霉菌HB1发酵液稀释106倍用于处理黄瓜和辣椒种子,促生的各指标达到最高,其中发芽率分别达到100.00%、98.67%,是对照的1.18、1.05倍。相对幼苗高度和根耐性指数分别为194.43%、173.72%和125.62%、104.90%;稀释107倍的发酵液用于处理白菜种子,各促生指标达到最高,其中发芽率为92.00%,是对照的1.01倍。相对幼苗高度和根耐性指数分别为140.50%和144.45%。综合分析,草酸青霉菌HB1发酵液较低浓度稀释液有助于提高种子的发芽率,促进蔬菜幼苗的生长;在草酸青霉菌HB1发酵液稀释10~6倍处理下,黄瓜和辣椒种子生长最好;在发酵液稀释107倍处理下,白菜种子生长最好。     

枯草芽孢杆菌B29菌株防治黄瓜枯萎病的田间效果及安全性评价初报

B29菌株是自黄瓜根围土壤中分离到的一株拮抗枯草芽孢杆菌菌株,一年两季4点田间小区试验表明：B29菌株100、250、500倍稀释菌液对黄瓜枯萎病的防效分别为70.3 %～88.2 %、62.3 %～85.9 %和54.7 %～80.6 %;经两年田间大区示范,B29菌株对黄瓜枯萎病防效达84.9 %,增产12.57 %;同时测定了枯草芽孢杆菌菌剂对大鼠急性经口、经皮毒性,LD₅₀均大于5 000 mg•kg^-1;对主要作物的安全性测定结果表明,B29菌株对黄瓜、番茄、菜豆、籽用南瓜4种主要蔬菜作物种子的出苗和幼苗生长发育没有不良影响。     

黄瓜枯萎病拮抗芽孢杆菌A7-3-14的筛选及鉴定

以从敦煌地区盐碱土壤中分离获得的19株细菌为试材,采用平板对峙法和菌丝生长速率法进行筛选,通过菌株形态特征、生理生化试验和16S rDNA序列分析进行鉴定,并采用盆栽试验测定所筛选的拮抗菌,研究了其对黄瓜枯萎病病原菌Fusarium oxysporum的防效,以期得到对黄瓜枯萎病病原菌具有较强拮抗作用的芽孢杆菌。结果表明:从敦煌地区盐碱地土壤中共分离出19株拮抗细菌,其中菌株A7-3-14拮抗作用最强,抑制率为79.22%,菌株鉴定为内生芽孢杆菌Bacillus endophyticus,盆栽防效结果表明该菌株发酵液对黄瓜枯萎病具有显著的防治效果,其处理后的黄瓜苗病情指数为28.14,防治效果达到69.77%。表明分离到的芽孢杆菌菌株A7-3-14可以用于黄瓜枯萎病的生物防治,且具有良好的效果。     

海洋多粘类芽孢杆菌L1-9菌株对黄瓜的促生作用和诱导抗性研究

以黄瓜种子为试材,采用盆栽法研究了L1-9菌株发酵液浸泡黄瓜种子后,对黄瓜幼苗的根长、须根数、黄瓜枯萎病发生的影响,并测定了黄瓜根组织的过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物歧化酶(SOD)和多酚氧化酶(PPO)4种防御酶的酶活性变化。结果表明:L1-9菌株发酵液浸泡黄瓜种子,可促进黄瓜须根的增加和根伸长,对黄瓜枯萎病具有明显的防治效果;浸种处理后黄瓜幼苗根部PAL、POD、PPO、SOD 4种酶活性明显高于对照,4种酶活性高峰时期不同,表明L1-9菌株发酵液浸泡种子能够明显诱导黄瓜对枯萎病的抗性。     

二氧化氯对黄瓜枯萎病的防治效果及黄瓜生长的影响

本试验研究了安全杀菌剂二氧化氯对黄瓜枯萎病的防治效果及防病机理,同时还研究了二氧化氯对黄瓜发芽和幼苗生长影响。结果表明：二氧化氯处理土壤可有效的防治黄瓜枯萎病,二氧化氯浓度越高,防病效果越好。其防病机理为对土壤微生物及黄瓜枯萎病病原菌具有极强的杀灭作用。在二氧化氯低浓度时直接浸种处理对种子发芽率、种子活力指数及芽质量均无抑制作用,但浓度过高则表现出抑制作用,直接浸种处理对幼芽的抑制浓度高于种子催芽后再浸泡处理。先用二氧化氯处理土壤再播种,即使处理浓度达500 mg?L-1对黄瓜幼苗的生长也无不良作用,且该浓度对黄瓜枯萎病的防治效果达96.4%以上。     

不同浓度枯草芽孢杆菌水剂对黄瓜枯萎病的防治效果

采用田间试验方法，研究不同浓度枯草芽孢杆菌水剂（AS）对黄瓜枯萎病的田间防治效果及对黄瓜生长和产量的影响。两年试验结果表明，8.3×109 cfu?L-1枯草芽孢杆菌AS对黄瓜枯萎病的防治效果最好，分别为81.8%和77.5%，明显高于5.0×109 cfu?L-1和3.1×109 cfu?L-1枯草芽孢杆菌AS的防治效果，但与50%多菌灵可湿性粉剂（WP）处理无显著差异|枯草芽孢杆菌AS对黄瓜生长无不良影响且具有一定的增产效果，与清水处理相比，2008年和2009年8.3×109 cfu?L-1枯草芽孢杆菌AS处理的增产率分别为5.8%和10.0%。     

黄瓜枯萎病菌的分离纯化及药剂筛选

以感黄瓜枯萎病的病株为试材,采用组织分离法对其病原菌进行分离和形态观察;采用生长速率法,研究测定了12种化学药剂对黄瓜枯萎病菌的毒力;并通过盆栽试验测定了室内抑制效果较好的7种化学药剂对黄瓜枯萎病的防治效果。结果表明:经鉴定,感黄瓜枯萎病病菌为尖镰孢菌(Fusarium oxysporum);抑菌效果最好的是36%噁霉·福美双可湿性粉剂1 000倍液,抑制率为93.92%,其次是10%苯醚甲环唑水分散粒剂1 500倍液、62.5%精甲·咯菌腈悬浮剂1 500倍液和99%恶霉灵粉剂3 000倍液,抑制率分别为85.48%、81.20%和80.45%;80%嘧霉胺水分散粒剂1 500倍液、99%恶霉灵粉剂3 000倍液和32.5%苯甲·嘧菌酯悬浮剂1 500倍液对黄瓜枯萎病的防治效果为79.48%~93.61%,可作为土壤处理剂防治黄瓜枯萎病,而且对黄瓜安全无害,具有较好的应用前景。     

3株芽孢杆菌及其混合发酵液对西瓜幼苗生长的影响

为探究芽孢杆菌发酵液对西瓜幼苗生长的影响,提高西瓜幼苗质量,以西瓜品种早佳(8424)为材料,研究不同浓度的3株芽孢杆菌(解淀粉芽孢杆菌sj1606,贝莱斯芽孢杆菌sj1616,枯草芽孢杆菌sj1701)及其混合发酵液对西瓜幼苗生长及生理特性的影响。结果表明,不同芽孢杆菌发酵液均能促进西瓜幼苗的生长发育,其中混合发酵液D4(250 mL·L^-1)处理的西瓜幼苗株高和鲜质量较对照(蒸馏水)分别提高了23.27%和21.89%,叶绿素含量相比对照提高了49.66%,解淀粉芽孢杆菌sj1606中A4(250 m L·L^-1)处理的过氧化氢酶活性最高,达到243.83 mg·g^-1·min^-1。通过隶属函数的综合指标分析得出,混合发酵液D4处理的西瓜幼苗生长优势最为明显。     

生物制剂对温室大棚有机黄瓜白粉病的防治效果

比较了枯草芽孢杆菌可湿性粉剂(1×109 cfu/g)和氨基寡糖素对有机黄瓜白粉病的防治效果。试验结果表明,在黄瓜白粉病发病较轻时,连续喷施枯草芽孢杆菌可湿性粉剂200倍液和氨基寡糖素700倍液能较好地控制白粉病的发生,防治效果分别达到87.2%~90.7%和52.5%~91.5%。建议在有机黄瓜未发生白粉病或白粉病病情指数小于10的情况下应用生物制剂进行防控。     

番茄灰霉病生防菌株TL1的分离、鉴定及其生防能力分析

为了筛选对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)具有拮抗作用的菌株,通过平板对峙法从西藏高原土壤中分离筛选到一株具有较好拮抗作用的菌株TL1。形态学观察、生理生化分析以及分子生物学鉴定结果表明,该菌株为马氏类芽孢杆菌(Paenibacillus maysiensis),并具有固氮和溶磷作用。TL1在平板上能显著抑制灰霉病菌菌丝生长,抑菌率为74.32%,且该菌产生的挥发性物质呈现显著抑菌活性。进一步平板抑菌试验表明,TL1菌株对褐斑病菌等6种病原真菌均具有显著抑菌活性,其中对烟草赤星病菌(Alternaria alternata)的抑制率最高(73.48%),对黄瓜褐斑病菌(Corynespora cassiicola)的抑制率最低(57.37%)。TL1菌株能够在番茄果实上定殖并抑制由灰霉病菌引起的腐烂,且可以显著提高番茄种子的萌发率以及促进番茄幼苗生长。     

瓜类枯萎病生防菌WQ-6的筛选鉴定、发酵工艺优化及防效研究

为研发对瓜类枯萎病有防治作用的微生物菌剂，以4种枯萎病菌（黄瓜2种、西瓜1种、甜瓜1种）为供试病原菌，采用平板对峙法结合抑制菌丝生长速率法，从蚯蚓堆肥中筛选到1株对4种病原菌均有显著抑制效果的拮抗细菌WQ-6。鉴定发现，WQ-6为暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）。通过单因素试验和响应面分析法优化培养条件，获得了菌株WQ-6最适的发酵工艺（葡萄糖30 g ? L-1，蛋白胨30 g ? L-1，硫酸镁1 g ? L-1，甘油1 g ? L-1，磷酸氢二钾1.5 g ? L-1，温度32.2 ℃，装液量19.2%，转速236.2 r ? min-1，pH 6.0，接种量4%，培养时间24 h），使得WQ-6发酵液对枯萎病菌的抑菌直径和抑菌率较优化前分别增加了3.52 ~ 10.45 mm和2.28% ~ 32.16%。黄瓜、西瓜和甜瓜种子发芽和盆栽试验表明，菌株WQ-6使接种枯萎病菌的种子发病率降低了32% ~ 68%，发芽率提高了100% ~ 259.6%，植株病情指数下降了20% ~ 34%。此外，菌株WQ-6发酵液复配蚯蚓堆肥浸提液后，与WQ-6发酵液相比，种子的根长、茎长和活力指数显著提高，对病原菌的防治效果提高了6.78% ~ 36.44%。上述结果表明菌株WQ-6对瓜类枯萎病菌有广谱性防效，并具有良好的促根壮秧能力。     

新型生物有机肥防治西瓜枯萎病机理

以解淀粉芽孢杆菌hj1为试材,采用平板对峙培养法测定了hj1的抑菌活性,利用PCR扩增其抗生素合成基因,应用盆栽试验检测其防治西瓜枯萎病的效果。结果表明:菌株hj1可拮抗西瓜枯萎病菌专化型尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporumf.sp.niveum),确定其含有bam与fenB基因,分别为杆菌抗霉素(Bacillomycin)与环状脂肽(Fengycin)的相关合成基因。含菌株hj1的新型生物有机肥(BOF)对西瓜枯萎病防治效果显著,发病率仅为16.8%,病情指数下降到0.9,防治效果达到83.2%;促生效果同样明显,植株株高、鲜质量和干质量在所有处理中均为最高。施用新型生物有机肥还提高了细菌(芽孢杆菌)与放线菌等有益菌的含量,降低了真菌(尖孢镰刀菌)的含量。表明施用含有菌株hj1的新型生物有机肥能有效防治西瓜枯萎病,并促进西瓜植株生长。     

黄瓜枯萎病新型抑制蛋白L37的研究

 从土壤中分离到对黄瓜枯萎病病原菌有抑制作用的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) , 发酵产物经DEAE - 纤维素、Sephadex G-100柱层析, 分离到15 kD抑菌蛋白L37, SDS-PAGE显示纯度达到电泳纯, N - 末端氨基酸序列同源性检测结果提示可能是一种新型的抑菌蛋白。蛋白质抑菌结果表明, 对多种病原真菌具有抑制效果, 且对蛋白酶、温度和大部分有机物不敏感, 是稳定的抑菌蛋白。对病原菌菌丝抑制机理研究表明, 抑菌蛋白具有严重扭曲、断裂、阻止生长等抗生效果。应用发酵蛋白产物进行两年大田防效试验表明, 对黄瓜枯萎病防效显著, 最高达到90% , 具有显著提高产量的作用。     

应用枯草芽孢杆菌防治黄瓜枯萎病试验

黄瓜枯萎病是黄瓜生产中的一种主要病害,每年因该病的危害而造成的黄瓜死亡率都在10%左右,个别严重地块达到20%以上,成为影响黄瓜生产发展的重要因素之一.2002年黑龙江省科学院应用微生物研究所培养提取了一种新的微生物防治菌剂--枯草芽孢杆菌AS(以下简称枯草芽孢杆菌,浓度为35亿活芽孢/ml(毫升)).我们引进并试验了应用枯草芽孢杆菌防治黄瓜枯萎病,取得了良好的防治效果,为黄瓜枯萎病的防治探索出了一条新路.     

AM真菌和枯草芽孢杆菌对西瓜枯萎病的防效

以西瓜为试材,采用接种法研究了AM真菌和枯草芽孢杆菌对西瓜植株生长的影响及西瓜枯萎病的防治效果。结果表明:单独接种枯草芽孢杆菌或AM真菌都可以促进西瓜植株的生长发育,且对西瓜枯萎病有较好的防治效果;摩西球囊霉和枯草芽孢杆菌双接种对植株生长发育最有利,植株干、鲜质量及叶片数均不同程度大于其它处理,此组合对西瓜枯萎病防治效果最好,防效为82.1%。     

短小芽孢杆菌对番茄种子萌发及幼苗生长的影响

以"天正粉秀"番茄为试材,对其种子和幼苗进行不同浓度的短小芽孢杆菌NMCC46菌株发酵液浸种、灌根或叶面喷施处理,研究了种子的萌发率、根和芽的长度以及幼苗的株高和株重的生长情况。结果表明:短小芽孢杆菌发酵液对番茄种子萌发、根芽生长及幼苗的株高和株重具有明显的促进作用,其中以50倍稀释液的效果最为显著,而在幼苗施用方式上叶面喷施的效果明显优于灌根和浸种。该研究为该短小芽孢杆菌的进一步应用奠定了良好的基础。     

不同厨余沼液及其稀释倍数对黄瓜和萝卜种子萌发的影响

为探索厨余沼液直接施用的可行性及其适宜施用浓度,比较了来自浙江省湖州市（沼液A）和内蒙古赤峰市（沼液B）的两种厨余沼液原液（稀释倍数为0）及不同稀释倍数（100、250、500、1 000倍）对黄瓜和萝卜种子萌发的影响。结果表明：两种厨余沼液的原液都会抑制种子萌发,但抑制作用随稀释倍数的增加逐渐消失并转化为促进作用。沼液A稀释100倍时,萝卜种子胚根长、活力指数提高;稀释500倍时,提高了萝卜种子的发芽率、发芽势和发芽指数;稀释1 000倍时,黄瓜种子的胚根长、胚芽长、发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数综合效果最好。沼液B稀释100倍时,显著促进了萝卜种子根和芽的生长;稀释250倍时,黄瓜种子发芽率、发芽势和发芽指数较高;稀释1 000倍时,促进了黄瓜种子胚根和胚芽的生长,提高了萝卜种子的发芽率和发芽指数。综上,厨余沼液直接施用会抑制种子萌发,使用时应根据需要选择适宜稀释倍数。     

芽孢杆菌对番茄抗枯萎病防御性酶活性的诱导效应

采用根部包裹接种法将多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa SR10)和解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens SR22)接种于番茄幼苗根部,研究其对枯萎病原菌早期侵染条件下番茄防御酶活性的变化。结果表明:接种芽孢杆菌(+Forl)处理25 d后的枯萎病防治效果分别为41.11%和51.11%;早期防御性酶活检测结果显示,与对照相比,接种2株芽孢杆菌后,番茄幼苗的过氧化物酶、多酚氧化酶、超氧化物歧化酶、苯丙氨酸解氨酶、几丁质酶以及β-1,3葡萄糖酶活性均表现出短时间内显著增强随后缓慢降低,酶活高峰时间普遍出现在96~120 h内,酶活增幅达到11%~265%;与单接病原菌处理(Forl)相比,接种芽孢菌SR10(+Forl)和SR22(+.Forl)后PPO酶活性增加了9%和13%,SOD酶活性增加了38%和27%,PLA酶活性增加了23%和27%,β-1,3葡聚糖酶活性增加了15%和26%,几丁质酶活性增加了39%和44%,而POD酶活性变化不明显。表明介导番茄产生诱导系统性抗性来抵御枯萎病菌的侵染是多粘芽孢杆菌SR10和解淀粉芽孢杆菌SR22的重要生防机制之一。     

马铃薯真菌病害拮抗菌株鉴定及初步应用

针对马铃薯真菌病害发生严重、多种病害混合发生、缺乏安全有效防治方法的问题，对前期筛选出的高效拮抗 菌株BA-26 进行分类鉴定，研究其胞外代谢产物的稳定性，明确防病促生作用。通过形态特征、生理生化特性鉴定以及 16S rDNA 序列分析，BA-26 菌株为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens），该菌株对8 种马铃薯病原真菌均表现出 较强的拮抗作用，对茄链格孢菌（Alternaria solani）、茄病镰刀菌（Fusarium solani）、燕麦镰刀菌（Fusarium avenaceum） 的抑菌率大于80%；胞外代谢产物经100 ℃处理30 min、紫外照射8 h、pH 2～10 酸碱处理、蛋白酶处理1 h 后，相对抑菌 率均维持在80% 以上；室内抑菌活性测定结果表明BA-26 滤液对茄病镰刀菌的抑制率为91.3%；盆栽试验中，每盆施用 20 mL 浓度为4.0×10⁹ cfu · mL^-1 的BA-26 发酵液使马铃薯根长、须根数、株高、叶片中叶绿素含量分别显著增加32.07%、 111.94%、48.0%、19.6%。表明解淀粉芽孢杆菌BA-26 对马铃薯真菌病害抑菌谱宽，胞外代谢产物稳定性强，有较强的防病 促生作用，具有开发为马铃薯专用生防菌剂的潜力。     

月季黑斑病病原的分离及防效研究

采用组织分离、稀释纯化的方法,从月季黑斑病病斑上分离出病原,再通过抑菌试验,筛选防治月季黑斑病的有效药剂及合理使用浓度。结果表明:所分离的病原为半知菌亚门盘二孢属的蔷薇盘二孢。提供的7种杀菌剂对月季黑斑病病原均有不同程度的抑菌作用,其中多菌灵、波尔多液和代森锰锌在最低推荐稀释倍数时对病原的抑菌率分别为65.24%、39.57%和12.30%,而苯醚甲环唑、咪鲜胺、叶斑清、灰嘧佳4种药剂的抑菌率均为100%。结合抑菌率和防治成本,对抑菌率为100%的4种药剂进行再稀释,当分别稀释至7 5004、0005、5001、600倍时仍具有良好的抑菌作用。