鸡血藤总黄酮对猪圆环病毒2型感染小鼠脾脏氧化应激的影响

试验旨在探讨鸡血藤总黄酮（TFSD）对猪圆环病毒2型（PCV2）感染小鼠脾脏氧化应激的影响。将70只昆明小鼠随机分为7组,对照组、TFSD组（100 mg/kg体重）、PCV2组、PCV2＋维生素C （VC）组、PCV2＋不同浓度TFSD （25、50和100 mg/kg体重）组,每组10只,连续3 d采用灌胃和腹腔注射PCV2病毒液的方法建立小鼠氧化应激模型,第4~6天每天按上述分别灌胃给予生理盐水、VC或TFSD。第7天剖杀小鼠,取脾脏分析黄嘌呤氧化酶（XOD）、髓过氧化物酶（MPO）和超氧化物歧化酶（SOD）活力,并检测还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）水平,计算GSH/GSSH。结果显示,PCV2感染小鼠后,脾脏中XOD与MPO的活力及GSSG水平显著上升（P＜0.05）,SOD活力、GSH水平及GSH/GSSG显著下降（P＜0.05）。TFSD处理小鼠脾脏的SOD活力、GSH水平和GSH/GSSG比值均显著高于PCV2组（P＜0.05）,而XOD、MPO活力和GSSG水平则显著低于PCV2组（P＜0.05）,对PCV2引起的氧化应激相关酶活力与相关分子水平变化的抑制作用优于VC。结果表明,鸡血藤总黄酮对PCV2诱导的小鼠脾脏氧化应激有良好的调节作用。     

猪圆环病毒2型诱导小鼠体内免疫细胞氧化胁迫模型的建立

试验旨在建立猪圆环病毒2型（PCV2）诱导的小鼠体内免疫细胞氧化胁迫模型。筛选PCV2感染剂量及感染时间,采用腹腔注射、滴鼻和灌胃3种途径联合方式于第1、2、3 天或第1、3、5、7天给予昆明系小鼠感染PCV2病毒原液或10^－1 PCV2病毒液,分别于感染后7、14、21 d剖杀小鼠,测定活性氧（ROS）、总谷胱甘肽（T-GSH）、还原型谷胱甘肽（GSH）、氧化型谷胱甘肽（GSSG）水平及黄嘌呤氧化酶（XOD）、髓过氧化物酶（MPO）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性,探讨PCV2感染时间与活性氧水平变化的关系,建立免疫细胞氧化胁迫动物模型。结果显示,第1、2、3天每天经3种途径联合感染PCV2病毒原液,1 mL/只,为后续试验感染最佳方案。PCV2感染小鼠3个时间点细胞内ROS水平较空白对照组均极显著升高（P < 0.01）,感染后7、14 d GSH水平显著降低（P < 0.05）;感染后7 d GSSG水平极显著高于空白对照组（P < 0.01）;感染后7 d T-GSH水平显著低于空白对照组（P < 0.05）,感染后14 d T-GSH水平极显著低于空白对照组（P < 0.01）。感染后7 d脾脏XOD、MPO、iNOS活性与空白对照组相比均存在显著差异（P < 0.05）。结果表明,PCV2成功感染小鼠,试验感染方案为第1、2、3 天每天经3种途径联合感染PCV2病毒原液,1 mL/只,且用PCV2病毒原液感染7 d是建立小鼠体内免疫细胞氧化胁迫模型的最佳条件。     

Establishment of Model for Oxidative Stress in Mice Immune Cells Induced by PCV2 in vivo

The aim of this experiment was to establish the oxidative stress model of immune cells in mice induced by PCV2. Optimal infection titer and time of PCV2 were selected. On the 1st,2nd and 3rd day or 1st, 3rd,5th and 7th day,Kunming mice were treated with 10⁰ PCV2 or 10^-1 PCV2 by 3 ways (intraperitoneal injection, intranasal administration and intragastrical administration). 7, 14, 21 d post administration, we killed the mice. Reactive oxygen species (ROS),total glutathione (T-GSH),reduced glutathione (GSH),oxidized glutathione (GSSG) levels and xanthine oxidase (XOD), myeloperoxidase (MPO) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) activity were determined to investigate the relationship between the infection time point and the change of ROS level after PCV2 infection. Thus to establish mice immune cells oxidative stress model. The results showed that infection with 10⁰ PCV2 virus in 3 ways every day both at day 1, 2, 3 and 1 mL per mouse was the best program for the follow-up experiment. The intracellular level of ROS of mice infected with PCV2 was extremely significantly increased both at 7, 14 and 21 d (P < 0.01);7 and 14 d post infection, GSH level of PCV2 infected mice had significant difference compared with that of control group (P < 0.05). 7 d after infection, GSSG level was extremely significantly higher than that of control group (P < 0.01); 7 d after infection, T-GSH level was significantly lower than that of control group (P < 0.05), T-GSH was extremely significantly lower than that of control group at 14 d post infection (P < 0.01). XOD, MPO and iNOS activity between PCV2 infection group and blank control group were significantly different at 7 d post infection (P < 0.05). It suggested that PCV2 successfully infected mice, experimental infection programme was Kunming mice were treated with 10⁰ PCV2 by three ways (intraperitoneal injection, intranasal administration and intragastrical administration) both at the 1st,2nd and 3rd day of the experiment.The best condition to establish the oxidative stress model of immune cells in mice was using 10⁰ PCV2 to infect for 7 days.     

西番莲多糖提取物对猪圆环病毒2型感染RAW264.7细胞氧化应激的影响

为研究西番莲多糖提取物（Passiflora edulis polysaccharide extract，PEPE）对猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2，PCV2）感染RAW264.7细胞氧化应激相关因子的影响，本试验探讨了PEPE对氧化应激的调节作用。在96孔细胞培养板中每孔加入100 μL浓度为1×10⁶个/mL的RAW264.7细胞，分别设细胞对照组、PEPE组（25、50、100、200、400、800和1 600 μg/mL），分别于培养箱培养24和48 h，用MTT法检测细胞活性，筛选PEPE的药物安全浓度范围。试验分为以下6个组：细胞对照组、病毒组、PEPE高（400 μg/mL）、中（200 μg/mL）、低（100 μg/mL）剂量组及维生素C组，其中细胞对照组加入含10% FBS的DMEM培养液，其余组加入PCV2病毒液，孵育2 h后在PEPE组加入对应浓度的PEPE溶液，VC组加入配制好的VC溶液，细胞对照组和病毒组加入含10% FBS的DMEM培养液，培养48 h，同样用MTT法检测细胞活性，以研究PEPE对PCV2感染RAW264.7细胞活性的影响。按照上述6个试验组分组，处理同上，将细胞培养12 h，收集样品用于检测氧化应激相关因子水平。用Griess法和DCFH-DA荧光探针分别检测RAW264.7细胞上清中NO含量和细胞内活性氧（ROS）水平、OPT荧光法检测细胞内还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量，化学发光法检测细胞内黄嘌呤氧化酶（XOD）、髓过氧化物酶（MPO）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活力。结果显示，PEPE对RAW264.7细胞的安全浓度范围为25~400 μg/mL。PCV2感染RAW264.7细胞后，细胞活性显著降低（P<0.05），而不同浓度PEPE处理组均能提高细胞活性。RAW264.7细胞被PCV2感染后，细胞分泌NO、ROS水平，GSSG含量及XOD、MPO和iNOS活性显著升高（P<0.05），感染细胞GSH含量显著降低（P<0.05）；PEPE作用于PCV2感染的RAW264.7细胞，显著降低感染细胞NO、ROS水平、GSSG含量及XOD、MPO和iNOS活性（P<0.05），100 μg/mL PEPE处理组细胞GSH水平显著升高（P<0.05）。本试验结果表明，PEPE能提高PCV2感染RAW264.7细胞的抗氧化能力，有利于缓解病毒感染所致氧化应激。     

猪圆环病毒2型诱导3D4/2细胞氧化应激模型的建立

通过研究不同浓度猪圆环病毒2型(PCV2)对体外感染3D4/2细胞产生氧化应激水平的影响,来确定建立PCV2体外诱导3D4/2细胞氧化胁迫模型的条件。以5个不同浓度PCV2感染组(100、10-1、10-2、10-3、10-4)作用于3D4/2细胞2h,弃去病毒液,加入含100mL/L胎牛血清1640培养液后继续培养,于4、8、12、24、48h分别收集细胞上清液或细胞,测定NO、ROS、GSH、GSSG、XOD、MPO和iNOS等指标。10-1PCV2感染3D4/2细胞24h、48h后显著升高细胞NO水平,感染4h~24h显著升高细胞ROS水平,降低细胞GSH水平和GSH/GSSG比值;10-1 PCV2感染3D4/2细胞4h、8h显著升高细胞GSSG水平;10-1PCV2感染3D4/2细胞4、8、12、24h均能显著升高细胞XOD、MPO、iNOS活力,提示10-1PCV2感染3D4/2细胞一定程度上改变了细胞氧化还原状态,诱导了细胞产生氧化应激,而病毒感染后48h未检测到PCV2核酸。表明PCV2感染后4h~24h能诱发3D4/2细胞氧化应激,选择10-1PCV2作为氧化应激模型的感染剂量。     

鸡血藤总黄酮对环磷酰胺所致小鼠肝损伤的保护作用

目的 研究鸡血藤总黄酮对环磷酰胺所致小鼠肝损伤的保护作用。方法 将60只昆明系小鼠随机分为6组,每组10只,试验周期为7 d。对照组小鼠试验全程给予生理盐水。环磷酰胺（CTX）组小鼠1~4 d灌胃给予生理盐水;5~7 d腹腔注射80 mg/（kg·BW）CTX,每天给药1次。鸡血藤总黄酮（TFSD）100组、CTX+TFSD25组、CTX+TFSD50组、CTX+TFSD100组小鼠1~7 d分别灌胃给予100、25、50、100 mg/（kg·BW）TFSD,每天给药1次;试验5~7 d除TFSD100组小鼠腹腔注射生理盐水外,其余试验组腹腔注射80 mg/（kg·BW）CTX,每天给药1次。试验结束后对各组小鼠进行眼球采血及剖检;检测肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）、髓过氧化物酶（MPO）、黄嘌呤氧化酶（XOD）以及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力,测定血清中谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）和碱性磷酸酶（ALP）活力,检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）和白介素-1β（IL-1β）含量。结果 环磷酰胺可显著（P<0.05）降低小鼠肝脏中SOD、GSH-Px以及血清中ALT活力,显著（P<0.05）升高肝脏中XOD与MPO活力、血清中ALP活力以及炎症细胞因子IL-1β和IL-6释放水平。25、50、100 mg/（kg·BW）的TFSD处理均可显著（P<0.05）抑制由CTX引起的SOD活力降低,25 mg/（kg·BW）的TFSD处理可显著（P<0.05）提高CTX处理小鼠的GSH-Px活力;50 mg/（kg·BW）的TFSD处理可显著（P<0.05）抑制由CTX引起的XOD和MPO活力升高,且可显著（P<0.05）降低CTX处理小鼠血清中的AST活力;25、50、100 mg/（kg·BW）的TFSD处理可显著（P<0.05）抑制由CTX引起的血清中ALP活力升高,同时降低ALT活力。25、50、100 mg/（kg·BW）的TFSD处理均可显著（P<0.05）抑制由CTX引起的IL-1β水平升高。结论 鸡血藤总黄酮可通过调节小鼠炎症因子释放以及肝组织中氧化还原酶水平对环磷酰胺所致肝损伤提供保护,推荐剂量为25 mg/（kg·BW）。     

麦麸阿魏酰低聚糖对敌草快致氧化应激大鼠血浆和组织抗氧化能力的影响

本试验以酿酒酵母和枯草芽孢杆菌作为混合菌种发酵小麦麸皮,通过Amberlite XAD-2柱分离纯化制备麦麸阿魏酰低聚糖(feruloyl oligosaccharides,FOs),探讨麦麸FOs对敌草快(diquat)诱导的大鼠氧化应激是否有缓解作用。试验选用体重相近的断奶雄性大鼠48只,随机分为未攻毒组、攻毒组、攻毒+100 mg/kg BW麦麸FOs组、攻毒+200 mg/kg BW麦麸FOs组、攻毒+300 mg/kg BW麦麸FOs组和攻毒+100 mg/kg BW维生素C组,每组8个重复,每个重复1只鼠,各组大鼠均饲喂相同的商业饲料。麦麸FOs和维生素C配制成水溶液,采用灌胃的方式给予,未攻毒组、攻毒组用生理盐水替代,灌胃体积0.2 mL,连续灌胃15 d。灌胃结束当天,未攻毒组大鼠注射0.3 mL生理盐水,其他5组按0.1 mmol/kg BW的剂量腹腔注射0.3 mL敌草快。敌草快攻毒12 h后取样,分析各组大鼠血浆以及肝脏、肾脏和回肠中总抗氧化能力(T-AOC),过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及谷胱甘肽(GSH)和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)的含量。结果显示:1)通过混菌发酵小麦麸皮制备麦麸FOs,利用Amberlite XAD-2柱进行分离纯化,获得的麦麸FOs浓度为0.059 mmol/g。2)腹腔注射敌草快显著降低大鼠血浆中SOD活性和GSH含量(P0.05),显著降低大鼠肝脏中T-AOC,CAT、GSH-Px活性及GSH含量(P0.05),显著降低大鼠肾脏中T-AOC及CAT、SOD活性(P0.05),显著降低大鼠回肠中T-AOC,CAT、GSH-Px活性及GSH含量(P0.05),并显著提高大鼠血浆和各组织中8-OHd G含量(P0.05)。3)在敌草快引起的氧化应激状态下,灌胃一定剂量的麦麸FOs可以显著提高大鼠血浆中SOD(400 mg/kg BW)、GSH-Px活性(100和200 mg/kg BW)以及GSH含量(100和200 mg/kg BW)(P0.05),显著提高大鼠肝脏中T-AOC(100、200和400 mg/kg BW),CAT(200和400 mg/kg BW)、SOD(100、200和400 mg/kg BW)和GSH-Px活性(100、200和400 mg/kg BW)以及GSH含量(100、200和400 mg/kg BW)(P0.05),显著提高大鼠肾脏中T-AOC(400 mg/kg BW),CAT(200 mg/kg BW)和GSH-Px活性(200和400 mg/kg BW)以及GSH含量(400 mg/kg BW)(P0.05),显著提高大鼠回肠中T-AOC(200 mg/kg BW),SOD(400 mg/kg BW)和GSH-Px活性(100、200和400 mg/kg BW)以及GSH含量(100、200和400 mg/kg BW)(P0.05),显著降低血浆和各组织中8-OHd G含量(血浆、肾脏、回肠:100、200和400 mg/kg BW;肝脏:100 mg/kg BW)(P0.05);且灌胃200、400 mg/kg BW麦麸FOs后,大鼠血浆和组织中部分抗氧化相关指标可恢复到正常生理状态水平。综上所述,本试验制备的麦麸FOs可以通过有效提高大鼠血浆和组织中抗氧酶活性和GSH含量,降低DNA氧化应激代谢产物8-OHd G的含量,有效缓解由敌草快诱导产生的氧化应激。     

枯草芽孢杆菌B1对饲喂高脂饲粮小鼠抗氧化功能的影响

本试验旨在研究枯草芽孢杆菌B1对饲喂高脂饲粮小鼠抗氧化功能的影响。将45只体重相近[(35±1)g]的普通ICR小鼠随机分为对照组(基础饲粮)、高脂组(高脂饲粮)、试验组[添加质量分数为0.1%枯草芽孢杆菌B1的高脂饲粮],每组3个重复,每个重复5只,饲养30 d。观察枯草芽孢杆菌B1对高脂饲粮小鼠肠黏膜、肝脏和血清的抗氧化能力、氧化应激状态的影响。结果表明:1)与对照组相比,高脂组小鼠的肠黏膜总抗氧化能力(T-AOC)显著减少了28.34%(P<0.01),肝脏超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)和硫氧还蛋白还原酶活性分别显著降低了22.91%(P<0.05)、37.35%(P<0.01)、47.47%(P<0.01)和36.42%(P<0.05);血清还原型谷胱甘肽(GSH)含量、GSH-Px和抗超氧阴离子自由基(O2-.)活性分别显著下降了30.73%(P<0.01)、47.26%(P<0.01)和8.02%(P<0.01);肝脏8-羟基脱氧鸟苷(8-OhdG)含量显著增加了67.87%(P<0.01)。2)与高脂组相比,试验组小鼠的肠黏膜T-AOC显著增加了32.44%(P<0.05),肝脏GSH含量和CAT活性分别显著上升了38.27%(P<0.05)和53.01%(P<0.05);血清T-AOC、GSH含量、GSH-Px和抗O2-.活性分别显著提高了10.72%(P<0.05)、38.01%(P<0.05)、51.98%(P<0.01)和13.45%(P<0.01);肝脏丙二醛、8-OHdG含量和黄嘌呤氧化酶活性分别显著下降了16.01%(P<0.05)、37.52%(P<0.01)和16.25%(P<0.05)。由此可见,高脂饲粮降低了小鼠肠黏膜、肝脏和血清的抗氧化功能;添加枯草芽孢杆菌B1对饲喂高脂饲粮小鼠的抗氧化功能具有一定的增强作用,并能减少机体的氧化应激状态,较好地保护组织细胞,免受氧化损伤。     

Oxidative Stress and Neutrophil Function in Cats with Chronic Renal Failure

Background: Oxidative stress is an important component in the progression of chronic renal failure (CRF) and neutrophil function may be impaired by oxidative stress. Hypothesis: Cats with CRF have increased oxidative stress and decreased neutrophil function compared with control cats. Animals: Twenty cats with previously diagnosed renal failure were compared with 10 age‐matched control cats. Methods: A biochemical profile, CBC, urinalysis, antioxidant capacity, superoxide dismutase (SOD) enzyme activity, reduced to oxidized glutathione ratio (GSH : GSSG), and neutrophil phagocytosis and oxidative burst were measured. Statistical comparisons (2‐tailed t‐test) were reported as mean ± standard deviation. Results: The CRF cats had significantly higher serum blood urea nitrogen, creatinine, and phosphorus concentrations than control cats, and significantly lower PCV and urine specific gravity than control cats. The GSH : GSSG ratio was significantly higher in the CRF group (177.6 ± 197, 61.7 ± 33; P < .02) whereas the antioxidant capacity was significantly less in the CRF group (0.56 ± 0.21, 0.81 ± 0.13 Trolox units; P < .005). SOD activity was the same in control and CRF cats. Neutrophil oxidative burst after Escherichia coli phagocytosis, measured as an increase in mean fluorescence intensity, was significantly higher in CRF cats than controls (732 ± 253, 524 ± 54; P < .05). Conclusions: The higher GSH : GSSG ratio and lower antioxidant capacity in CRF cats is consistent with activation of antioxidant defense mechanisms. It remains to be determined if supplementation with antioxidants such as SOD beyond the level of control cats would be of benefit in cats with CRF.     

猪圆环病毒Ⅱ型体外诱导3D4/2细胞炎症模型的建立

【目的】通过对猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）体外感染3D4/2细胞浓度、时间与细胞炎症水平进行探讨,建立PCV2体外感染3D4/2细胞炎症反应模型,以期为后期药物调控PCV2诱发3D4/2细胞炎症反应的研究奠定基础。【方法】将3D4/2细胞分为对照组及10⁰、10^-1、10^-2和10^-3 PCV2感染组,每组3个重复。对照组用DMEM培养,各PCV2感染组用不同稀释倍数PCV2液培养,2 h后均更换为含5%胎牛血清（FBS）的DMEM维持液进行培养,培养4、8、12和24 h后分别收集细胞及细胞上清液。采用Griess法检测一氧化氮（NO）水平,DCFH-DA荧光探针法检测活性氧（ROS）水平,酶标法检测还原型谷胱甘肽（GSH）水平,分光光度法检测黄嘌呤氧化酶（XOD）和髓过氧化物酶（MPO）活性,ELISA法测定白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-10、γ干扰素（IFN-γ）、IL-8、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）以及环氧合酶1（COX-1）和COX-2的分泌水平。【结果】10⁰至10^-3 PCV2作用4、8、12和24 h均能够成功感染3D4/2细胞。与对照组相比,10⁰ PCV2在感染3D4/2细胞4、8、12、24 h后ROS水平均极显著升高（P<0.01）,10^-1至10^-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后ROS水平显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）;10⁰至10^-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后,细胞内NO浓度及MPO活性显著提高（P<0.05）,细胞上清液中的IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、IFN-γ、IL-8和MCP-1水平及COX-1活性均显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）,其中10⁰ PCV2感染3D4/2细胞后,各炎症因子水平上升最显著,且随着时间的延长,NO浓度逐渐升高,XOD活性逐渐降低。【结论】PCV2可诱导3D4/2细胞炎症反应,且10⁰ PCV2体外感染3D4/2细胞4~12 h是建立炎症模型的最佳条件。     

鬼臼多糖对免疫功能低下小鼠自由基产生酶活性的影响

采用环磷酰胺腹腔注射(50mg/kg)小鼠建立免疫抑制模型,观察鬼臼多糖(PEP)不同剂量(50,100,200mg/kg和400mg/kg)配合环磷酰胺应用后,对小鼠脾脏中黄嘌呤氧化酶(XOD)、髓过氧化物酶(MPO)及一氧化氮合成酶(NOS)水平的影响。结果表明,PEP能显著降低免疫抑制小鼠脾脏XOD、MPO的活性;对脾脏总NOS活性无显著影响,但400mg/kg多糖可降低小鼠脾脏诱导型NOS活性,提示PEP可通过降低免疫抑制小鼠体内自由基产生酶水平而起到抗氧化作用。     

氧化应激通过Fas/FasL信号通路调控奶牛子宫内膜细胞凋亡

胚胎早期死亡及流产严重影响母牛的繁殖性能,造成极大的经济损失。本研究利用不同浓度双氧水(H₂O₂)处理子宫内膜细胞6 h,通过流式细胞仪、酶标仪分别进行细胞内活性氧(ROS)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性以及还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)比值检测,建立子宫内膜细胞氧化应激模型。在此基础上,利用流式细胞仪检测细胞凋亡和生长周期,利用荧光定量RT-PCR和Western blot检测Fas/FasL信号通路关键基因的mRNA和蛋白表达水平,并利用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)抑制子宫内膜细胞中Fas基因表达,进一步验证Fas/FasL凋亡通路是否参与氧化应激诱导的子宫内膜细胞凋亡。所有试验都重复3次以上。结果发现,利用200 μmol·L^-1 H₂O₂处理子宫内膜细胞6 h,细胞内ROS阳性水平急剧增加(P < 0.05),SOD和CAT活性以及GSH与GSSG比值都显著降低(P < 0.05),说明H₂O₂处理对子宫内膜细胞造成氧化应激损伤。在此处理条件下,生长周期中S期比例显著降低(P < 0.05),凋亡比例显著提高(P < 0.05);Fas/FasL凋亡通路中关键基因Fas、Caspase 8和Caspase 3的mRNA表达水平显著升高(P < 0.05);培养液中FasL浓度以及Fas、Caspase 8和Caspase 3蛋白表达水平显著升高(P < 0.05)。进一步研究发现,抑制Fas基因表达在一定程度上降低了氧化应激诱导的细胞凋亡比例以及Fas/FasL凋亡通路中关键基因的表达水平。总之,本研究结果表明,氧化应激通过激活Fas/FasL信号通路促进奶牛子宫内膜细胞凋亡,这为解释氧化应激对子宫内膜细胞的不利影响提供了新的见解。     

蜂王浆冻干粉对衰老小鼠抗氧化能力的影响

试验旨在探讨蜂王浆冻干粉(lyophilized royal jelly,LRZ)对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗氧化作用。以昆明种小鼠为研究对象,按体重随机分为正常对照组、模型对照组和低、中、高剂量（170、340、510 mg/kg）蜂王浆冻干粉组。除正常对照组外,其余各组小鼠每天颈背部皮下注射160 mg/kg D-半乳糖0.2 mL,正常对照组注射等量的生理盐水。试验组小鼠每天灌胃0.3 mL LRZ水溶液,对照组小鼠灌胃等量的蒸馏水,试验期49 d。测定血清、脑和肝脏组织匀浆中超氧化物岐化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）的活力及丙二醛（MDA）的含量。结果表明,D-半乳糖致衰小鼠SOD活力和CAT活力均明显下降,MDA含量明显上升,与正常小鼠比较差异显著(P＜0.05);340、510 mg/kg LRZ可以提高小鼠血清、脑、肝脏组织中的SOD和CAT活性,降低MDA含量,与衰老模型组相比有显著性差异(P＜0.05)。说明LRZ能显著提高亚急性衰老小鼠的抗氧化能力,具有量效关系。     

S-adenosylmethionine (SAMe) in a feline acetaminophen model of oxidative injury

S-adenosylmethionine (SAMe) is reported to have hepatoprotective and antioxidant functions. Acetaminophen (paracetamol) was used to induce oxidative damage in cats, and to then determine the effect of SAMe treatment on erythrocyte morphology, PCV, liver histopathology, thiobarbituate reacting substances (TBARS), reduced glutathione (GSH), and oxidised glutathione (GSSG).Cats receiving acetaminophen had a significant increase in methemoglobin and Heinz body production. A significant effect for the interaction of time and treatment was found for Heinz body production and changes in PCV. No significant changes were found in blood or hepatic TBARS. Blood GSH increased significantly in all cats, while the blood GSH:GSSG ratio tended to increase the most in cats given acetaminophen only. The hepatic GSH:GSSG ratio tended to increase in cats given SAMe and decrease in cats given acetaminophen, but this effect was not significant. SAMe protected erythrocytes from oxidative damage by limiting Heinz body formation and erythrocyte destruction and maybe useful in treating acetaminophen toxicity.     

饮用天然高钼水诱发的钼中毒耕牛主要生物酶测定

本研究对高钼饮水诱导钼中毒的耕牛及对照牛的血浆及组织（肝脏、肺脏、肾脏、脾脏、心脏、肌肉）中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、黄嘌呤氧化酶（ＸＯＤ）及谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）等３种生物酶活性进行了对比分析测定。结果表明,血浆和组织中ＳＯＤ、ＸＯＤ及ＧＳＨ－ＰＸ均随着钼中毒的加重其活性显著下降。这３种生物酶是钼中毒比较灵敏且相关较大的生化指标,对钼中毒具有一定诊断价值;测定ＳＯＤ。ＸＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ可作为钼中毒监测的重要手段。     

连翘提取物对对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的保护作用

试验旨在探究连翘提取物（FSE）预防性干预对对乙酰氨基酚（acetaminophen,APAP）诱导小鼠肝损伤的保护作用及其潜在作用机制。采用半仿生-生物酶法提取连翘有效成分,使用APAP构建小鼠肝损伤模型。随机将60只雌性昆明小鼠分入正常对照（NC）组、APAP肝损伤模型（LD）组、连翘提取物（FSE）对照组、连翘提取物高剂量（HFSE＋LD）组、连翘提取物中剂量（MFSE＋LD）组和连翘提取物低剂量（LFSE＋LD）组,每组10只。HFSE＋LD组、MFSE＋LD组、LFSE＋LD组分别按每天200、100、50 μg/g灌胃给予连翘提取物,NC组和LD组分别灌胃等量生理盐水,每天2次,连续给药6 d。预防性给药3 d后,腹腔注射APAP,每天1次。末次给药12 h后,试验小鼠眼球采血并快速取出肝脏,检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性,以评价肝损伤程度;检测肝脏匀浆液中还原型谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和过氧化氢（H₂O₂）水平,以评价肝脏氧化应激程度;制作肝脏病理切片,经苏木精伊红（HE）染色后观察肝脏病理变化;采用探针药物法测定肝脏线粒体细胞色素P4502E1（CYP2E1）活性;采用实时荧光定量PCR检测肝脏线粒体CYP2E1 mRNA表达水平;采用Western blotting法检测肝脏CYP2E1蛋白表达情况。结果表明：与NC组相比,LD组小鼠血清中ALT、AST活性均显著增加（P<0.05）;肝脏SOD活性、GSH含量均显著降低（P<0.05）,MDA、H₂O₂含量,CYP2E1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）,成功构建小鼠肝损伤模型。200、100和50 μg/g的连翘提取物可显著降低肝损伤小鼠血清ALT和AST活性（P<0.05）,显著提高肝脏中SOD活性（P<0.05）;200、100 μg/g连翘提取物可显著提高肝脏中GSH水平（P<0.05）,显著降低肝脏中MDA、H₂O₂水平及CYP2E1的mRNA和蛋白表达量（P<0.05）。以上结果表明,连翘提取物可减轻APAP诱导的小鼠肝损伤程度且呈剂量依赖性,其潜在作用机制可能与所含活性物质的抗氧化作用以及对CYP2E1酶活性和表达的抑制有关。     

辣蓼黄酮正丁醇部位对PRV感染3D4/2细胞氧化应激相关因子水平的影响

【目的】探究辣蓼黄酮正丁醇部位(N-butanol fraction of Polygonum hydropiper flavonoids, FNB)对猪伪狂犬病毒(Pseudoabies virus, PRV)体外感染猪肺泡巨噬细胞(3D4/2细胞)氧化应激相关因子的影响,旨在初步分析FNB的抗氧化效果。【方法】采用10^-1至10^-10浓度PRV体外感染猪肾细胞(PK15细胞),计算病毒半数组织培养感染剂量(TCID₅₀);将3D4/2细胞分为BC组、DMSO组、PRV组、FNB 1、FNB2和FNB3组,BC组用DMEM培养液处理,其余各组用感染复数(multiplicity of infection, MOI)=0.1 RPV处理,孵育2 h后,PRV组添加DMEM培养液,DMSO组及FNB1、FNB2、FNB3组分别添加0.05%DMSO及12.5、25、50μg/mL FNB的DMEM培养液。培养4、8、12、24 h后,分别收取各组细胞培养液上清和细胞,通过试剂盒测定细胞培养液上清中一氧化氮(NO)的含量、细...     

GSH对铅胁迫下多年生黑麦草幼苗抗氧化系统的调控

本试验以12周龄的多年生黑麦草（Lolium perenne ‘cuttle’）幼苗为试验材料,用铅（Lead,Pb）,Pb+还原型谷胱甘肽（Glutathione,GSH）和Pb+丁硫氨酸-亚砜亚胺（L-Buthionine-sulfoximine,BSO）处理1周,研究GSH对Pb胁迫下多年生黑麦草抗氧化系统的调控机理,寻求缓解植物Pb胁迫的有效措施。结果表明：Pb胁迫下,外源GSH能够显著提高多年生黑麦草Pb的吸收和转运,增加抗氧化酶超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GPX）和谷胱甘肽还原酶（Glutathione reductase,GR）活性,显著增加抗氧化剂GSH含量及GSH/氧化型谷胱甘肽（Oxidized glutathione,GSSG）比率,提高了植物的还原力。外源GSH也能够显著降低活性氧超氧阴离子（Superoxide anion,O₂^·-）和过氧化氢（Hydrogen peroxide,H₂O₂）的产生量、膜的相对透性（Relative electric conductivity,EC）和丙二醛（Malondialdehyde,MDA）含量,保持了细胞的稳定性,减轻了膜脂的过氧化程度。外源BSO作用基本上与GSH相反。相关分析表明：GSH可通过提高SOD和GPX等抗氧化酶的活性,促进GSSG和GSH的相互转化,降低活性氧产生量,提高植物抵抗逆境胁迫的能力。     

外源一氧化氮供体SNP对NaCl胁迫下黑麦草幼苗叶片抗坏血酸-谷胱甘肽循环的影响

采用营养液栽培,研究了外源一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)对150mmol/LNaCl胁迫下黑麦草幼苗叶片抗坏血酸-谷胱甘肽(ASA-GSH)循环中抗氧化酶活性和抗氧化物质及丙二醛(MDA)和H₂O₂含量的影响。结果表明,正常条件下100μmol/LSNP略微降低了黑麦草幼苗叶片的MDA和H₂O₂含量,NO信号转导途径关键酶鸟苷酸环化酶(GC)抑制剂亚甲基蓝(MB)促进了MDA和H₂O₂水平的提高。NaCl胁迫下,SNP显著缓解了MDA和H₂O₂的积累,提高了抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)和脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性及还原型抗坏血酸(ASA)、谷胱甘肽(GSH)含量,降低脱氢抗坏血酸(DHA)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量,使ASA/DHA和GSH/GSSG提高,却对单脱氢抗坏血酸还原酶(MDAR)活性无显著影响;MB逆转了SNP对NaCl胁迫下MDA、H₂O₂、ASA、GSH、DHA、GSSG含量和APX、GR活性及ASA/DHA和GSH/GSSG的调节作用,对MDAR和DHAR活性无显著影响。由此表明,NO可能通过GC介导参与盐胁迫下黑麦草叶片ASA-GSH循环中APX、GR活性和ASA、GSH含量及ASA/DHA、GSH/GSSH的调节,缓解盐胁迫诱导的氧化伤害,提高植株的耐盐性。     

大豆胰蛋白酶抑制因子对小鼠胰腺氧自由基水平的影响

为研究大豆胰蛋白酶抑制因子对小鼠胰腺氧自由基水平的影响,试验选用36只昆明种雄性小鼠,按体质量随机分为3组。第一组为对照纽,饲喂基础日粮;第二组为试验组,饲喂含有大豆胰蛋白酶抑制因子的基础日粮,第三组为抗氧化剂组,饲喂舍大豆胰蛋白酶抑制因子＋维生素C的日粮。试验期3周,空腹屠宰,眼球采血制备血清,迅速取出胰腺进行氧化和抗氧化指标检测。结果表明,大豆胰蛋白酶抑制因子能显著增加氧自由基水平。与对照组比较,试验组小鼠血清和胰腺的MDA（malondialdehyde,MDA）含量分别显著地增加了98．17％,185．58％,抗超氧阴离子自由基和抑制羟自由基能力被显著降低,TAOC、S013（superoxidedismutase）、CAT和GSH—Px活性被显著减少（P〈0．05）。添加维生素C后,氧化应激被减轻,但氧化指标仍高于对照组。上述结果表明,大豆胰蛋白酶抑制因子能够导致氧化和抗氧化不平衡,从而使其处于氧化应激状态。