乳腺康注射液的药效学研究

试验旨在研究乳腺康注射液体内外药效。体外药效采用牛津杯法对其进行体外抑菌活性研究;体内药效采用热板法及醋酸致小鼠扭体的镇痛模型、二甲苯及鸡蛋清致炎模型、2,4-二硝基酚及干酵母致大鼠发热6种经典药理模型,对乳腺康注射液进行镇痛、抗炎、解热的药效研究。结果显示,乳腺康注射液对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌有较显著的体外抑制作用,中、高剂量能极显著提高小鼠痛阈值,极显著减少醋酸所致扭体次数（P<0.01）,中剂量组能显著降低二甲苯致小鼠耳肿胀度及鸡蛋清致小鼠足跖肿胀度（P<0.05）,中、高剂量组对2,4-二硝基酚引起的发热在1.5~2.0及3.0~3.5 h有显著的解热作用（P<0.05）,对干酵母所引起的大鼠发热在1.0~3.5 h有显著的解热作用（P<0.05）。结果表明,乳腺康注射液能明显抑制大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的活性,且具有显著的镇痛抗炎解热作用。     

Study on Quality Standard of Ruxiankang Injection

The aim of this study was to establish the quality standard of Ruxiankang (RXK) injection. According to the relevant requirements of the Chinese Pharmacopoeia (2015 edition), TLC identification,related substances examination and heavy metal examination method of RXK injection were established and the limits were determined. HPLC method was used to establish the content determination method of liquiritin, ammonium glycyrrhizinate, hesperidin and caffeic acid, and determined the limit. The specificity of Glycyrrhizae Radix et Rhizoma, Citri Reticulatae Pericarpium and Taraxaci Herba was strong. Liquiritin in 0.0459 to 0.7340 μg, ammonium glycyrrhizate in 0.0661 to 1.0580 μg, hesperidin in 0.0592 to 0.9470 μg, caffeic acid in the 0.0384 to 0.6140 μg concentration showed a good linear relationship with peak area. The correlation coefficients were 0.997,0.9990,0.9999 and 1.000,respectively. The average recoveries were 101.25%, 99.87%, 98.39% and 103.49%,respectively. The RSD values were 4.82%, 3.63%, 2.94% and 0.85%,respectively. The contents of liquiritin, ammonium glycyrrhizinate, hesperidin and caffeic acid of RXK injection were not less than 88.90, 138.48, 136.50 and 21.54 μg/mL,respectively. According to the maximum daily dose of RXK injection, Pb,Cd, As, Hg and Cu should not exceed 23,3,6,2 and 150 μg, respectively. The quality standard established in this study could provide reference for controlling the quality of RXK injection.     

乳腺康注射液质量标准研究

本研究旨在建立乳腺康注射液质量标准。按照《中国药典》（2015版）相关要求,分别建立乳腺康注射液中甘草、青皮、蒲公英的薄层色谱定性鉴别和重金属的检查方法并规定限度,采用HPLC法建立甘草苷、甘草酸铵、橙皮苷及咖啡酸的含量测定方法并规定限度。结果表明,甘草、青皮、蒲公英的定性鉴别专属性强;甘草苷在0.0459~0.7340 μg,甘草酸铵在0.0661~1.0580 μg,橙皮苷在0.0592~0.9470 μg,咖啡酸在0.0384~0.6140 μg浓度与峰面积呈良好的线性关系;相关系数r分别为0.997、0.9990、0.9999、1.000;甘草苷、甘草酸铵、橙皮苷及咖啡酸的平均加样回收率分别为101.25%、99.87%、98.39%、103.49%,相对标准偏差（RSD）值分别为4.82%、3.63%、2.94%、0.85%;乳腺康注射液中含甘草苷、甘草酸铵、橙皮苷及咖啡酸分别不低于88.90、138.48、136.50、21.54 μg/mL;按乳腺康注射液每日最大使用剂量计算,铅、镉、砷、汞、铜分别不得超过23、3、6、2及150 μg。本研究建立的质量标准可为控制乳腺康注射液的质量提供参考。     

百草圣注射液抗感染作用的试验研究

将大肠杆菌注入小鼠的膀胱后观察药物对细菌上行感染肾脏的抑制作用；家兔静脉注射大肠杆菌内毒素后观察药物对细菌内毒素引起机体发热的影响；采用大鼠足趾类性肿胀模型观察药物对炎性肿胀及机械压迫足趾疼痛的抑制作用。结果百草圣注射液治疗动物感染性疾病的作用机制主要与其清除体内细菌感染和减轻发热，肿胀，疼痛等炎症反应有关。     

SarA调控金黄色葡萄球菌生物被膜形成的研究进展

金黄色葡萄球菌生物被膜的形成是一个多基因和多因子共同调控的过程。葡萄球菌属辅助调节子SarA是金黄色葡萄球菌主要的毒力基因表达调控系统,能直接或间接调控多种生物被膜形成相关基因的表达。本文将对SarA的结构及其调控生物被膜形成的机制作一综述,为深入研究金黄色葡萄球菌的致病机理和开发新的抗生物膜感染策略提供参考。     

The Macroscopic and Microscopic Effects of Intradermal Injection of Crude and Purified Staphylococcal Extracts on Canine Skin

Abstract— Intradermal injection of staphylococcal protein A, and crude extracts of Staphylococcus intermedius and Staphylococcus aureus in normal dogs elicited dose-dependent increases in skin fold thickness. The most concentrated doses of S. inlermedius elicited a significantly greater response than the equivalent dose of S. aureus between 30 min and 4 h after injection (p < 0.05). This may be due to prior sensitisation or may indicate that S. intermedius is more virulent. At all other times and doses there was no significant difference between the two crude staphylococcal extracts. Histological examination indicated that while there were differences between the responses to the three extracts, all three elicited similar epidermal lesions (sub-corneal pustules, spongiosis and hyperplasia) and superficial perivascular dermatitis. A similar pattern of changes has been recorded in canine superficial pyoderma supporting the hypothesis that penetration of staphylococcal products into the dermis is involved in the pathogenesis of the lesions of pyoderma. Résumé— Des injections de Protéine A et d'extraits totaux de Staphylococcus intermedius et Staphylococcus aureus sur des chiens normaux entrainent des augmentations dose dépendantes du pli de peau et de l'érythème. La does plus concentrée de Staphycolococcus intermedius entrainent une réponse plus importante statistiquement significative que la réponse obtenue avec une concentration équivalente de Staphylococcus aureus entre 30 minutes et 4 heures après l'injection (p < 0,05). Ceci peut être due à une sensibilisation antérieure ou peut indiquer que Staphylococcus intermedius est plus virulent. Par contre, il n'existe pas de differences significatives entre les deux types d'extraits staphylocoques totaux à d'autres temps et concentrations. Les lesions histopathologiques montrent que tandis qu'il existe des differences entre les réponses aux trois extraits, tous les trois montrent des lesions épidermiques similaires (pustules sous cornées, spongiose et hyperplasie) et de dermatite périvasculaire superficielle. Des lesions semblables sont observées dans les pyodermites superficielles canines. Ceci conforte l'hypothèse que la penetration des produits staphylococciques dans le derme joue en role dans la pathogénie des lesions de pyodermite. [Mason, I. S., LLOyD, D. H. The macroscopic and microscopic effects of intradermal injection of crude and purified staphylococcal extracts on canine skin (Effects macroscopiques et microscopiques de l'injection intradermique d'extraits totaux et purifies staphylococciques sur la peau du chien.     

奶牛乳房中药涂膜剂药理作用研究

对奶牛乳房中药涂膜剂进行药理作用试验,以对其有效性和药效作出评价。以抗炎、解热、镇痛、活血化淤四方面试验研究,对其药效学进行综合分析。抗炎消肿作用试验结果显示:药剂高、中、低剂量组对二甲苯所致的炎症肿胀抑制率分别为59.6%、48.1%和40.3%(P0.05);解热作用试验结果显示:药剂对松节油诱发的哈白兔发热显著抑制(P0.05);镇痛作用试验结果显示:药剂能显著提高小鼠的痛阈值,高、中、低剂量组分别将痛阈值提高为111.95%、93.50%、83.15%(P0.05);活血化淤作用试验结果显示:药剂可明显增加乳房血液微循环,起到活血化瘀作用(P0.05)。建立的数据研究方法客观可行,建立的相应药理评价体系能够充分反应其作用特点。     

利血平增敏法检测恩诺沙星药物残留的研究

目的了解恩诺沙星对金黄色葡萄球菌(金葡菌)的抗菌活性及利血平对其抗菌活性的影响。方法采用对倍稀释浓度琼脂平板法测定抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)值,同法测定利血平对恩诺沙星对金葡菌MIC值的影响。结果利血平可有效增强恩诺沙星的抗菌活性,增大了恩诺沙星抑制金葡菌的抑菌圈直径,提高了恩诺沙星在组织中检测的灵敏度。研究发现利血平加入后中心浓度由0.5ul/ml变为0.0625ul/ml,最低检测限由0.125μg/ml降低到0.015625μg/ml。最低检测限减低了8倍。     

复方蒲公英注射液解热镇痛抗炎作用研究

考察复方蒲公英注射液解热镇痛抗炎效果。解热试验取健康家兔10只,随机分为2组,每只兔背部皮下注射2,4-二硝基苯酚2%水溶液30 mg/kg,待体温升高超过1℃,分别按0.5 mL/kg腹腔注射生理盐水和复方蒲公英注射液,给药后30、60、90、120 min分别测量直肠温度;镇痛试验取昆明系小白鼠50只,随机均分为5组,分别为生理盐水组（0.05mL）、阿司匹林组（4%阿司匹林溶液0.05 mL）、复方蒲公英注射液低（0.05 mL）、中（0.1 mL）、高剂量组（0.2 mL）。连续经口给药3 d,于末次给药30 min后,每只小白鼠腹腔注射0.6%冰醋酸（0.1 mL/10 g）,记录注射致痛剂后20 min内各鼠的扭体次数;抗炎试验取昆明系小白鼠50只,随机分为5组,分别为生理盐水对照组（0.05 mL/10 g）、双黄连组（0.05 mL/10 g）、复方蒲公英低（0.05 mL/10 g）、中（0.1 mL/10 g）、高（0.2 mL/10 g）剂量组。连续腹腔注射给药5 d,在第5天注射后12 h,在小鼠右耳两侧均匀涂以二甲苯0.05 mL,左耳作为对照,2 h后处死,用直径0.5 cm打孔器取其左右耳片,称重,评价药物对二甲苯刺激耳廓的抗炎效果。结果提示,复方蒲公英注射液具有较好的解热抗炎作用,而无明显镇痛作用。     

牛乳金黄色葡萄球菌分离株超抗原肠毒素基因分型研究

为研究牛乳金黄色葡萄球菌 SP-3分离株携带超抗原肠毒素的基因型,设计合成了金黄色葡萄球菌超抗原肠毒素基因 SEA-SEE 及 TSST-1特异性引物,并以其固有基因 femA 和 femB 为阳性对照,以分离菌株 DNA 为模板,经 PCR 扩增菌株携带的毒素基因。结果表明,SP-3分离株和阳性对照菌株均含有femA 和 femB 基因,且牛乳分离株携带 sea、sec、sed 和 tst-14种超抗原肠毒素基因,为开展动物源超抗原毒素基因系统分型及有效防控金黄色葡萄球菌奶牛乳腺炎奠定基础。     

10种中草药对金黄色葡萄球菌的体外抗菌试验

采用试管法和平板法,分别测定了10种中草药对临床分离的一株鸡关节炎源性金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),从而为临床预防和治疗鸡金黄色葡萄球菌性关节炎提供理论依据。结果发现,10种单味中草药对临床分离的球菌均有一定的抗菌活性,尤其是黄连、大青叶、艾叶、连翘4 种中草药的体外抗菌效果更明显。     

金黄色葡萄球耐药性的研究及其防制策略

金黄色葡萄球菌是临床上最常见的致病菌之一,可引起鼻腔、口腔黏膜及皮肤和上皮组织的感染,严重的可导致肺炎、败血症甚至死亡。现今金黄色葡萄球菌已经对大部分常用抗生素有耐药性,作者综述了金黄葡萄球菌对抗生素的耐药发展史、耐药机制及对其使用的治疗策略。     

鸡葡萄球菌病的研究进展Ⅱ.鸡葡萄球菌病的诊治和预防

本文综述了鸡葡萄球菌病的几种较为先进的诊断方法和其主要特点以及鸡葡萄球菌疫苗研究进展，同时介绍了鸡的葡萄球菌病治疗和预防效果不佳的原因。     

盐酸血竭素对金黄色葡萄球菌分选酶A活性影响研究

为探究盐酸血竭素(DP)抗金黄色葡萄球菌(S.aureus)分选酶A(SrtA)的活性及机制,本研究利用纤连蛋白黏附试验和细胞侵袭试验,验证DP通过抑制SrtA的活性影响S.aureus黏附于纤连蛋白和降低其对细胞的侵袭能力;利用荧光底物肽实验,测定DP对S.aureus SrtA的抑制作用;利用生物膜试验,观察DP对S.aureus形成生物被膜(BF)的影响能力;利用分子模拟和定点突变方法,分析验证DP对SrtA的活性中心影响作用。结果表明,DP分别在2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL和16μg/mL时,可显著性抑制S.aureus SrtA蛋白的催化活性,且这一抑制作用呈浓度依赖性;DP可以通过影响SrtA的催化活性从而阻碍其表面蛋白锚定于宿主细胞表面,进而降低S.aureus侵袭细胞的能力;DP在8μg/mL和16μg/mL时可以显著降低S.aureus与纤连蛋白结合的能力(p<0.01);DP在2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL和16μg/mL时均可以显著降低S.aureus形成BF的能力;DP可通过与SrtAΔN59中的P30和T105结合而封闭了其活性中心。综上所述,DP可作用于S.aureus毒力因子SrtA,通过抑制SrtA的活性达到减弱其毒力的效果。本研究将为DP抗S.aureus的作用机制提供参考依据。     

Study on Expression and Preliminary Immunocompetence of CIC Protein Containing Molecular Adjuvants

To express CTB-IsdBid-Clfais(CIC) protein and evaluate its immunogenicity, CTB (as a molecular adjuvant) could be tandem linked with IsdBid-Clfais gene by the overlapping PCR method, then CTB-IsdBid-Clfais(CIC) was inserted into pET-32a(+) vector to construct recombinant plasmids pET-32a(+)-CTB-IsdBid-Clfais. The recombinant plasmids pET-32a(+)-CTB-IsdBid-Clfais were transformed into Escherichia coli (E.coli) BL21 to express the CTB-IsdBid-Clfa(CIC) protein, the CIC expression protein and its immune activity were detected by Western blotting and ELISA,respectively. The results showed that the length of CIC gene were 2 072 bp, and CIC was correctly inserted into the pET-32a(+) plasmids, the pET-32a(+)-CTB-IsdBid-Clfais recombinant plasmids were successfully constructed. Western blotting result confirmed that the molecular weight of CIC proteins was 95.9 ku, which were correctly expressed by E.coli BL21 with pET-32a (+)-CTB-IsdBid-Clfais plasmids. ELISA results showed that there was no significant difference among the CIC, IsdBid and Clfais protein groups (P>0.05), and there was extremely significant difference between CIC and BSA protein groups (P<0.01). In conclusion, the pET-32a(+)-CTB-IsdBid-Clfais recombinant plasmids were successfully constructed, CIC proteins were correctly expressed, and were able to react with serum from mice immunized with IsdBid and Clfais,respectively,therefore, CIC proteins had strong immune activity.     

含有分子内佐剂的CIC蛋白表达及免疫活性初步研究

为了研究含有分子内佐剂的CTB-IsdBid-Clfais（CIC）蛋白表达及其免疫活性,试验采用重叠PCR方法将分子内佐剂CTB与IsdBid-Clfais基因串联,并将CTB-IsdBid-Clfais（CIC）插入到表达载体pET-32a（+）中,构建pET-32a（+）-CTB-IsdBid-Clfais重组质粒,将鉴定正确的重组质粒转化到大肠杆菌BL21感受态细胞中表达目的蛋白CIC,利用Western blotting方法对其进行鉴定,并以ELISA方法检测CIC蛋白的免疫活性。结果发现,试验成功扩增了2 072 bp的目的基因CIC,并将CIC正确连接到pET-32a（+）载体上,构建了pET-32a（+）-CTB-IsdBid-Clfais重组质粒;Western blotting结果证实,该重组质粒能够在大肠杆菌BL21感受态细胞中正确表达CIC蛋白,分子质量大小为95.9 ku;ELISA结果显示,CIC试验组与IsdBid、Clfais蛋白组间均无显著差异（P>0.05）,与BSA组间差异极显著（P<0.01）。综上所述,本研究成功构建了pET-32a（+）-CTB-IsdBid-Clfais重组质粒,该质粒在大肠杆菌BL21中成功表达了CIC蛋白,且CIC能与IsdBid、Clfais免疫小鼠血清发生反应,具有较强的免疫活性。     

磺胺二甲嘧啶钠注射液和磺胺间甲氧嘧啶钠注射液细菌内毒素检查方法的改进研究

对磺胺二甲嘧啶钠注射液和磺胺间甲氧嘧啶呐注射液的细菌内毒素检查方法的拟定标准进行了改进,通过固定浓度的盐酸溶液溶解供试品,再使用无热原滤膜过滤的方法排除了干扰。通过上述供试品前处理方法的改进,检验人员无需采用特殊灵敏度的鲎试剂,亦可完全消除干扰作用,增强了标准的可执行性。     

卡巴匹林钙对内毒素致热肉鸡得解热作用研究

采用细菌内毒素致鸡发热模型,研究卡巴匹林钙在鸡体的解热效果。结果发现给鸡口服40 mg/kg和80 mg/kg卡巴匹林钙可溶性粉剂（以卡巴匹林钙计）可以显著降低内毒素引起的鸡只体温升高,其效果优于40 mg/kg阿司匹林。从经济性考虑,建议卡巴匹林钙口服推荐剂量为40 mg/kg。     

氟苯尼考注射液热稳定性的研究

氟苯尼考注射液为氟苯尼考与适宜溶剂制成的灭菌溶液，对其进行热加速稳定性研究，证实本品对热稳定。     

镇跛敏注射液对炎症抑制作用的药效学试验

镇跛敏注射液对各种炎症有无抑制作用进行了药效学的研究。试验采用了巴豆油、琼脂、弗氏完全佐剂致炎及药敏纸片致肉芽肿等试验方法。结果表明，镇跛敏注射液对小白鼠、大白鼠的急性炎症、慢性炎症、免疫性炎症均有显著的抑制作用。试验结果显示，镇跛敏注射液明显优于盐酸普鲁卡因加肾上腺素、盐酸普鲁卡因、盐酸利多卡因注射液对炎症的抑制作用。