走马胎离体培养及植株再生

以走马胎幼嫩叶片为外植体,研究不同培养基对走马胎叶片愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖及生根培养的影响。结果表明:叶片在MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 1.0mg·L~(-1)培养基上诱导产生的愈伤组织最适合用于进行分化和增殖;愈伤组织分化不定芽的最适培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),分化率高达88.9%;壮苗培养基为MS+6-BA0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+10%椰子水(CW);最适的生根培养基为MS+NAA0.1mg·L~(-1)+IBA 1.0mg·L~(-1),生根率达100%,根系发达,植株生长健壮。经生根培养及练苗,走马胎的假植成活率达85%。     

朱顶红无菌苗叶片高效再生体系

以朱顶红(Hippeastrum vittatum)叶片为外植体进行离体培养,具有取材方便、试材充足、成本低等优势,但叶片诱导再生率极低,是朱顶红离体培养的一大难题。本试验中分别以‘花孔雀’和‘黑天鹅’朱顶红无菌苗叶片为外植体,探究了不同植物生长调节剂和不同取材部位对不定芽诱导和继代增殖的影响。结果表明:最佳外植体为MS培养基中培养10 d形成的幼嫩叶片基部(0.5 cm),在光照16h·d~(-1)(光照强度36μmol·m~(-2)·s~(-1))下,不定芽诱导的最适培养基为MS+2 mg·L~(-1) 6-BA+1 mg·L~(-1) NAA+2 mg·L~(-1) TDZ,两个品种的不定芽均以间接途径发生,其中‘花孔雀’在培养40 d后形成愈伤组织,55 d形成不定芽,诱导率可达69.44%;‘黑天鹅’在培养45d后形成愈伤组织,65d形成不定芽,诱导率达到66.67%;最适体细胞胚诱导培养基为MS+2 mg·L~(-1) 6-BA+1 mg·L~(-1) PIC,‘花孔雀’和‘黑天鹅’的诱导率分别达到66.67%和63.89%;最佳不定芽增殖培养基为MS+2 mg·L~(-1) 6-BA+1 mg·L~(-1) NAA+1mg·L~(-1) TDZ,‘花孔雀’和‘黑天鹅’的增殖系数分别达到4.67和3.46;在不添加植物生长调节剂的MS培养基中进行生根培养,30 d后两个品种的生根率均达到100%;将生根培养30 d的小植株转移至室温条件下放置3 d,摘去封口膜再驯化3 d后,移栽至经高温消毒的草炭︰蛭石(体积比)为1︰1的基质中,成活率达到100%。     

无核君迁子离体叶片的植株再生

以"赞圆无核"君迁子组培苗叶片为试材,研究了基本培养基类型、植物生长调节物质浓度和暗期处理对离体叶片不定芽再生的影响,并获得了完整的再生植株。结果表明:最适宜的基本培养基为MS(1/2N),最佳的生长调节剂组合为5.0mg·L~(-1) ZT+0.10mg·L~(-1) IAA,其愈伤组织诱导率、不定芽形成率及平均出芽数分别达到99.1%、87.3%和5.4个;暗培养4周,再转为光下培养2周效果最佳;将叶片再生植物转入(1/2N)MS+0.5mg·L~(-1) ZT+0.01mg·L~(-1) IAA培养基中继代培养,以1/2MS+1.0mg·L~(-1) IAA+20g·L~(-1)蔗糖+7g·L~(-1)琼脂培养基诱导生根,生根率60.5%;生根苗大田移栽成活率63%。     

“红阳”猕猴桃外植体不定芽诱导及生根培养激素配方筛选

为开发"红阳"猕猴桃离体快繁技术,以"红阳"猕猴桃茎段萌发的嫩芽为材料,经消毒后进行离体培养获取无菌苗,取无菌苗叶片和叶柄进行了不定芽诱导与生根培养的激素配方筛选试验。结果表明,"红阳"猕猴桃叶片最适宜的不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.1 mg/L,不定芽再生率为77.78%;叶柄最适宜的不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.2 mg/L,不定芽再生率为70.00%;最适宜的生根培养基配方为1/2MS+IBA 0.7 mg/L,生根率为67.50%。     

枣离体叶片高效再生植株的研究

 以‘黄骅冬枣’组培苗叶片为试材, 研究了叶片幼嫩程度、叶片来源、组培苗状态以及植物生长调节剂等对离体叶片诱导不定芽再生的影响, 并获得了完整的再生植株。结果表明, 以未生根组培苗中上部叶片再生效果较好; TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于BA; 离体叶片在MS + TDZ 1.0 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中诱导培养28 d后, 转入MS + IBA 0.1 mg·L ^{- 1} + GA₃ 0.05 mg·L ^{- 1}培养基中二次培养, 叶片再生效果最好, 再生率可达92.45%。将叶片再生植株转入MS +BA 1.0 mg·L ^{- 1} + KT0.5 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中继代增殖培养, 增殖系数达3.64。以1 /2MS + IAA 1.0 mg·L ^{- 1}培养基诱导生根, 生根率87.1%。生根苗大田移栽成活率达到57%。     

翠菊‘花束绯红’叶片的植株再生体系建立

以翠菊‘花束绯红’无菌苗为材料,研究了植物生长调节剂浓度及组合、光照条件、不同附加物对叶片及其愈伤组织再生植株的影响。结果表明:(1)在光照培养条件下,诱导翠菊叶片不定芽形成的最适培养基为MS+6-BA3.0mg·L-1+IBA1.0mg·L-1,诱导率为56.7%,平均不定芽数为3.3;(2)黑暗培养不利于叶片不定芽的分化,但促进叶片愈伤组织的形成;(3)培养基中分别添加脯氨酸、水解酪蛋白和NH4NO3等均能明显促进愈伤组织不定芽的诱导,最适培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+脯氨酸300mg·L-1,诱导率为82.8%,平均不定芽数为4.5;(4)不定芽移到幼苗生根培养基(1/2MS+IBA0.1mg·L-1)上,生根率为89.1%,移栽后成活率达89.3%。     

不同倍性葡萄品种的快繁效率差异分析

以四倍体"玫瑰香"、四倍体"巨玫"、二倍体"玫瑰香"3种不同倍性的葡萄品种为试材,采用组培快繁技术,研究了采样时间、启动继代培养、生根诱导、练苗移栽等过程对快繁效率的影响,以期为优良葡萄品种的快速繁殖提供参考依据。结果表明:最适田间取样时间为5月中旬,诱导和继代最适培养基分别如下。改良MS+6-BA 1.1mg·L~(-1);改良MS+6-BA 1.1mg·L~(-1)+KT 0.5mg·L~(-1),在相同培养条件下,四倍体"玫瑰香"和四倍体"巨玫"不定芽增殖倍数高于二倍体"玫瑰香",在生根培养过程中二倍体"玫瑰香"表现出优于四倍体"玫瑰香"及四倍体"巨玫"的生根能力,最适生根培养基分别为1/2MS+NAA0.30mg·L~(-1)、1/2MS+IAA 0.50mg·L~(-1)和1/2MS+IBA 0.10mg·L~(-1),练苗最适基质为蛭石∶泥炭(1∶1)的混合基质,成活率可达90%以上。     

富花青素紫色番茄组织培养再生体系的建立

以樱桃型紫色番茄"砚紫1号"种子为试材,通过无菌处理获得无菌苗,用无菌苗的幼嫩子叶为外植体,研究了诱导愈伤组织分化及生根情况,以期建立高效的离体培养再生体系。结果表明:紫色番茄无菌苗子叶在MS+IAA 0.1mg·L~(-1)+6-BA 0.5mg·L~(-1)培养基条件下的愈伤组织诱导状态最佳;将愈伤组织进行暗培养处理,可诱导愈伤产生不定芽,其中最佳的培养基条件是MS+NAA 0.01mg·L~(-1)+6-BA 2.0mg·L~(-1);诱导再生的不定芽经过2周光培养接种至MS+NAA 0.05mg·L~(-1)培养基中,诱导生根良好,可获得完整的再生植株。     

鸭梨叶片不定芽再生体系的建立

为建立鸭梨(Pyrus bretschneideri Rehd.cv.Yali)叶片不定芽再生体系,采用正交试验设计研究了不同培养基、植物激素和植物生长调节剂的种类及其浓度、蔗糖含量对鸭梨叶片不定芽再生的影响。结果表明,基本培养基是影响叶片不定芽的诱导、继代和生根的关键因素,分别以NN69、MS和1/2MS为宜;IBA是影响叶片不定芽增殖的重要因素;最适诱导培养基为NN69+BA3.0mg·L-1+IAA0.5mg·L-1,再生频率和再生芽数分别为80.00%和1.77;最适增殖培养基为MS+BA1.0mg·L-1+IBA0.5mg·L-1,增殖系数可达2.23;最适继代培养基为MS+BA1.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1,平均苗高4.98cm;最适生根培养基为1/2MS+蔗糖30g·L-1+IBA0.5mg·L-1,生根率和平均根数分别为50.00%和2.04。该再生体系可为鸭梨遗传转化提供有效的受体系统。     

新疆甜瓜“伽师”再生体系的建立

以厚皮甜瓜"伽师"为试材,研究了6-苄氨基嘌呤(6-BA)、硝酸银(AgNO3)对诱导不定芽的影响,建立以子叶为外植体的快速高效再生体系。选取5d的"伽师"无菌苗子叶,在添加了不同浓度6-BA的MSB培养基中诱导不定芽;并且探讨了在最适6-BA浓度的培养基中添加不同浓度AgNO3对诱导不定芽的影响。结果表明:甜瓜子叶外植体接种在MSB+1.5mg·L~(-1) 6-BA诱导分化培养基上,诱导率可达75%;添加不同浓度AgNO3诱导不定芽,以MSB+1.5mg·L~(-1)6-BA+2.0mg·L~(-1) AgNO3最适,诱导率可达65%,产生单芽较多,缩短了再生周期。丛生芽或单生不定芽转至MSB+0.1mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) GA3的培养基中伸长,不定芽均可伸长且生长状况良好;再将单芽转至MSB+0.01mg·L~(-1) NAA培养基进行生根。     

苦瓜下胚轴的离体再生体系

为了建立高频的苦瓜离体再生体系,为苦瓜遗传转化提供技术基础,筛选了最适消毒方法和外植体类型。以MS培养基为基础培养基,添加不同浓度激素组合,筛选最适于苦瓜不定芽诱导、伸长和生根的培养基。最佳的消毒方法为:用水浸泡去壳的种子15 min,在超净工作台中用75%酒精浸泡30 s后再用4%NaClO浸泡6 min,用无菌水冲洗4～5遍,污染率为0,发芽率为98%;最佳的愈伤组织诱导培养基为MS+2.5 mg·L~(-1)6-BA+0.01 mg·L~(-1)IBA,愈伤组织密度为0.79 g·cm~(-3),不定芽的分化率为39%,最佳外植体为下胚轴(12 d),诱导率为41%;最佳的增殖培养基为MS+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.005 mg·L~(-1)IBA;最佳的生根培养基为MS+0.1 mg·L~(-1)IBA,移栽存活率为74%。初步建立了苦瓜离体再生体系。     

野生软枣猕猴桃离体培养体系的建立及优化

以长白山野生软枣猕猴桃茎段作为外植体,采用6-BA配合NAA以及ZT配合NAA 2种组合研究了适于野生软枣猕猴桃离体再生的类型和植物生长调节剂组合,筛选各培养阶段高频、稳定的适宜培养基,建立了野生软枣猕猴桃离体培养快繁体系.结果表明:外植体以侧芽为佳.6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L组合的MS培养基对不定芽分化最为有利,分化率可达95.83％.分化后得到的不定芽在6-BA2.0 mg/L +NAA 0.05 mg/L的MS培养基上平均每外植体分化不定芽数达5.86个.适宜的生根培养基为1/2MS+IBA 0.1mg/L,生根率高达100％.采用2步移栽法进行移栽时,第1次移栽以河沙为基质移栽成活率可达96.67％,第2次移栽成活率98％.     

不同激素对“五彩珍珠”番茄再生体系的影响

以"五彩珍珠"番茄为试材,选取6d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究了不同激素浓度及配比对番茄愈伤组织的诱导、不定芽分化及生根的影响,以建立番茄再生体系。结果表明:诱导"五彩珍珠"番茄愈伤组织的最佳培养基为MS+0.4mg·L~(-1)IAA+2.0mg·L~(-1)6-BA,其子叶的诱导率为100%,下胚轴的诱导率为95%;不定芽分化的最佳培养基为MS+0.2mg·L~(-1) IAA+(1.0~3.0)mg·L~(-1) 6-BA;诱导生根的最佳培养基为1/2MS+0.10mg·L~(-1)NAA。子叶为最佳外植体,其不定芽的分化率及生长情况均优于下胚轴。     

枳椇叶片再生体系的优化研究

以枳椇组培再生苗的叶片为外植体,进行离体培养植株再生研究.结果表明:外植体宜选择叶色浓绿的成熟叶片,诱导愈伤组织和不定芽的最佳培养基为1/2MS+BA2.0 mg/L+IAA 1.0mg/L,诱导率可超过85％,增殖率可超过6.0;最佳生根培养基为1/4MS+NAA 0.1mg/L,添加2％蔗糖,生根率可达95％以上.     

以叶片为外植体的多花黄精组织培养

以叶片为外植体建立多花黄精组织培养快速繁殖技术体系,通过添加不同浓度6-BA、NAA、2,4-D和蔗糖的MS培养基中培养,筛选愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、丛生芽诱导、丛生芽生根诱导的最佳培养基。结果表明:愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA3.0mg·L~(-1)+NAA 4.0 mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),愈伤组织诱导率最高为53.89%,生长情况最好;愈伤组织增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA3.0mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),增殖倍数7.87,生长情况相对最好;丛生芽诱导培养的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 4.0mg·L~(-1),出芽率最高为86.11%,生长情况最好,芽高最大为1.70cm;丛生芽生根诱导的最佳培养基为MS+NAA 1.0mg·L~(-1),生根率最高为66.67%,根数、根长和根粗最好,分别为31.0条、0.46cm和1.100mm。以叶片为外殖体可短时间获得大量多花黄精组培苗,解决种植生产上的种苗短缺问题。     

利用枣离体叶片直接再生完整植株

以冬枣组培苗叶片为材料进行离体再生培养, 通过对再生条件的系统研究, 实现了离体叶片直接再生不定芽并获得完整植株。试验结果表明: 麦芽糖为离体叶片直接再生的适宜碳源; AgNO3可显著提高叶片不定芽再生率和出芽数, 在TDZ 1.0 mg·L - 1 +AgNO3 1.0 mg·L - 1的条件下, 不定芽直接再生率高达97.3% , 出芽数达14.4个。但麦芽糖不适宜继续作为不定芽伸长培养的碳源, 再生的不定芽需在MS+ 蔗糖40 g·L - 1 + 琼脂4 g·L - 1 +BA 1.0 mg·L - 1 + IBA 0.5 mg·L - 1的培养基上进行增殖, 增殖系数为3.2。在IBA1.0 mg·L - 1条件下, 生根率达87.3%。     

‘嘎拉’苹果小孢子来源纯合基因型植株叶片再生体系研究

【目的】建立‘嘎拉’苹果小孢子来源纯合基因型植株高效再生体系,探索一个简单有效的苹果纯合基因型株系叶片外植体诱导再生不定芽的方法。【方法】以‘嘎拉’苹果花药离体培养获得的纯合基因型株系离体叶片为外植体,进行再生培养,检测‘嘎拉’各纯合基因型株系的不定芽再生能力;通过优化植物生长调节剂、叶片预处理和培养方式,建立苹果纯合基因型植株高效再生体系。【结果】苹果纯合基因型株系中双单倍体株系DH2-10的再生率最高,四倍体纯系DH2-15次之,单倍体株系DH2-3再生率较低,三倍体纯系DH2-40在培养中难以再生。不同基因型适宜的激素质量浓度不同,相较于双单倍体株系,四倍体纯系DH2-15在较高细胞分裂素水平再生率较好。再生培养过程中,整叶带伤口的外植体预处理方式优于叶片切块接种的方式,接种苗龄40 d左右的叶片有更好的再生率。【结论】建立了苹果纯合基因型高频高效离体再生体系:双单倍体株系DH2-10在最适再生培养基MS+0.5 mg·L~(-1)IBA+5 mg·L~(-1)6-BA上培养,再生周期为23~35 d,再生系数为7.27,再生率达100%。四倍体纯合基因型株系DH2-15适宜在MS+0.5 mg·L~(-1)IBA+6 mg·L~(-1)6-BA培养基上进行再生培养,再生率为93.33%。建立的再生体系可用于纯合基因型株系的快速增殖和遗传转化。     

华东葡萄白河-35-1器官离体再生体系建立的研究

以华东葡萄株系白河-35-1(Vitis pseudoreticulata clone Baihe-35-1)的茎段和叶片为材料,通过器官发生途径研究了不同激素及浓度处理组合对华东葡萄白河-35-1无菌苗茎段和叶片诱导不定芽的影响。结果表明,通过调整不同的激素浓度组合和选择不同的外植体可以成功诱导出不定芽。较低的激素浓度组合有利于外植体不定芽的再生。所选用的外植体中,茎段比叶片更易诱导出不定芽。诱导出不定芽的最适激素组合为TDZ1mg·L-1+NAA0.05mg·L-1,其中茎段不定芽诱导率为12.8%,叶片不定芽的诱导率为3.3%。将不定芽置于MS基本培养基+0.2mg·L-1IBA培养基上培养,获得了完整植株。     

枇杷属植物野生种的茎段愈伤组织诱导植株再生研究

【目的】建立野生种枇杷茎段愈伤组织诱导植株再生的离体培养技术体系。【方法】以枇杷属植物的2个野生种、1个属间杂交后代为试材,采用茎段为外植体,在不同植物生长调节剂的组合配比培养条件下,开展野生枇杷茎段诱导愈伤组织以及愈伤组织诱导出不定芽的植株再生研究。【结果】最适合野生种枇杷茎段愈伤组织诱导植株再生的培养基配方为:MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+TDZ 0.1 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1),如栎叶枇杷茎段愈伤组织诱导植株再生,其愈伤率、丛芽率和成苗率均达到100%,不定芽数最多可达38.75个;但对于属间杂交后代的石斑木×台湾枇杷最适合茎段愈伤组织诱导植株再生的培养基配方为:MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1),其丛芽率和芽苗数量分别为100%和48个,成苗率也为100%;在众多的生长调节剂中,TDZ对野生枇杷的愈伤组织诱导再分化或脱分化是比较敏感的,高浓度的TDZ虽有利于愈伤组织诱导再分化不定芽,但不利于成苗。【结论】研究得出枇杷属植物以及属间杂交后代茎段愈伤诱导植株再生的共性规律和种间的差异性,建立起枇杷属植物野生种离体再生系统,简化植株再生诱导的步骤和缩短植株再生诱导的时间,能在短时间内产生一定数量的组培苗,为枇杷属种质资源研究积累了新的资料。     

风信子离体快繁技术研究

利用离体快繁技术,以风信子的鳞茎为外植体,添加不同浓度6-BA和NAA进行不定芽的诱导、不定芽的继代和生根培养.结果表明:鳞片的初代最佳诱导培养基为:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,诱导率达到80％；最佳继代培养基为:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L；生根诱导最佳培养基:1/2MS+NAA0.3 mg/L,生根率可达90％.