抗氧化剂对马精子低温及冷冻保存效果的影响

试验旨在研究不同抗氧化剂对马精子低温保存及冷冻效果的影响。选取6匹英纯血种公马作为试验动物,以INRA82液作为基础稀释液（对照组）,分别添加谷氨酰胺（0.015 g/mL）、甘氨酸（0.019 g/mL）、半胱氨酸（0.024 g/mL）、甲硫氨酸（0.015 g/mL）、牛磺酸（0.063 g/mL）、维生素C（0.4 mg/mL）、维生素E（0.5 mg/mL）、褪黑素（0.001 mg/mL）制备成含有不同抗氧化剂的低温保存和冷冻保存稀释液,将浓缩处理后的马精子分别置于上述稀释液中保存或冷冻,检测低温保存48 h后精子运动参数,评价抗氧化剂对精子低温保存的影响;检测精子冻融后运动参数、精子质膜完整性、线粒体膜电势及顶体完整性,评价抗氧化剂对精子冷冻效果的影响。结果表明,精子低温保存48 h后,添加牛磺酸组活精子比例和前向运动精子比例显著高于对照组（P<0.05）,添加维生素C组前向运动精子比例显著高于对照组（P<0.05）。冷冻解冻后结果表明,添加不同抗氧化剂没有改善精子冻融后活精子比例和前向运动精子比例,但添加甲硫氨酸显著延长了精子体外存活能力（P<0.05）;添加不同抗氧化剂精子质膜完整性与对照组间无显著差异（P>0.05）,但甲硫氨酸和甘氨酸组有高于对照组的趋势;添加维生素E和甲硫氨酸组精子线粒体膜电势显著高于对照组（P<0.05）,不同抗氧化剂组精子顶体完整性与对照组间均无显著差异（P>0.05）。结果提示,低温保存时添加牛磺酸和维生素C可以提高精液低温保存效果;冷冻时添加甲硫氨酸能提高精子质膜完整性和线粒体膜电势,且能够延长精子冻融后的存活时间。     

黄芪多糖对猪精液冷冻保存效果的影响

为了评价黄芪多糖（Astragalus polysaccharides）对外来公猪精液冷冻保存的影响情况,为猪精液冷冻稀释液配方的改良提供理论依据,试验采集美系长白、大约克与杜洛克3种公猪的精液,用添加不同浓度（0、0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.06%）黄芪多糖的冷冻稀释液稀释,0.25 mL塑料细管分装并冷冻,测定解冻后精子活力、畸形率及顶体完整率,并进行相同浓度3种公猪之间和同种公猪不同浓度之间的比较。结果表明,在相同黄芪多糖浓度下,仅杜洛克公猪冻后精子顶体完整率在不添加黄芪多糖时显著高于大约克公猪（P<0.05）,其余均无显著差异（P>0.05）;每种公猪的最佳黄芪多糖添加浓度均为0.04%,在该浓度下精液冻后质量均显著优于对照组（P<0.05）;各种公猪最佳黄芪多糖添加浓度下的精液冻后质量指标之间均无显著差异（P>0.05）。总之,稀释液中添加0.04%黄芪多糖在长白、大约克与杜洛克3种公猪的精液冷冻都可以取得较好的效果。     

抗氧化剂对家畜精液冷冻保存的应用研究进展

 在家畜精液冷冻稀释液中加入抗氧化剂以提高冷冻精液质量的研究受到广泛关注,通过添加抗氧化剂降低精子在冷冻保存过程中的氧化损伤,保护精子质膜、精子顶体和DNA的完整性,提高冷冻-解冻后精子的受精能力。论文针对目前主要的一些抗氧化剂在家畜精液上应用研究的现状,对精子氧化损伤机理和常用抗氧化剂研究进行综述,期望对家畜精液冷冻保存的相关研究提供一定的理论依据和参考。     

稀释液中添加维生素E对绵羊冷冻精液品质的影响

采用两步稀释法 ,在绵羊冷冻精液中添加维生素E ,精液稀释平衡后精子活率 ,试验组 (0 .6 35 )高于对照组(0 .5 75 ) ,但无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;而解冻后 ,试验组活率 (0 .4 35 )极显著高于对照组 (0 .36 5 ) (P <0 .0 1) ;精子顶体总异常率 ,试验组 (33.72 % )极显著低于对照组 (4 4 .35 % ) (P <0 .0 1) ,其中试验组顶体膨胀率和脱落率与对照组分别为 1.2 8% ,2 3.0 8%与 2 .6 8% ,2 8.96 %。添加维生素E可以降低冷冻对精子顶体的损害程度 ,提高精液品质。试验也证明在解冻后保存 1h内 ,精子活率呈现缓慢下降的趋势 ,但 1h后活率急剧下降 ,因而 ,绵羊冻精颗粒解冻后应在 1h内输精完毕     

The Effects of Resveratrol on the Quality of Frozen Sheep Semen

The effects of resveratrol on the quality of frozen-thawed sheep semen were studied in this study.Semen was collected from six Yunnan semi-fine wool sheep using artificial vagina.The semen was diluted with the Optidyl extender supplemented with resveratrol with a concentration of 0,0.1,1,10,or 20 μmol/L,followed by loading into plastic straws and equilibration at a low temperature.Then,the straws were pre-frozen in liquid nitrogen vapor,followed by storage in liquid nitrogen for 30 days.After thawing for 30 seconds in a 37 ℃ water bath,the parameters including sperm motility,acrosome integrity,membrane integrity,distribution of phosphatidylserine (PS) and ROS were measured.The results showed that the post-thaw sperm total motility,progressive motility and the rate of sperm with curved tail were 76.14%±0.97%,43.56%±0.91% and 43.24%±1.68% in the 10 μmol/L resveratrol group,respectively,which were significantly higher than those in the other groups (P<0.05).However,when the concentration of resveratrol in the freezing extender was 20 μmol/L,the post-thaw total motility,progressive motility and the rate of sperm with curved tail were 21.78%±0.79%,25.23%±1.34% and 4.84%±0.68%,respectively,which were significantly lower than those in the other groups (P<0.05).The acrosome integrity of sperm frozen in the 10 μmol/L resveratrol group was best,which was 50.47%±0.91% and significantly higher than the other treatments (P<0.05).The results of PS distribution showed that the percentage of viable sperm in the 10 μmol/L resveratrol group was 46.43%±2.95%,and significantly higher than that in the 20 μmol/L group (31.14%±3.56%,P<0.05),but there was no significant difference with the other groups (P>0.05).In addition,the PS labeling rate of sperm in the 20 μmol/L resveratrol group (39.82%±3.38%) was significantly higher than those of the other groups (P<0.05).In terms of ROS production,this study demonstrated that the rate of viable sperm (ROS and PI were negative) in the 10 μmol/L resveratrol group (63.57%±0.71%) was significantly higher than that of the other groups (P<0.05),while the rate of viable sperm (32.45%±1.42%) in the 20 μmol/L resveratrol group was significantly lower than those of the other groups (P<0.05).In conclusion,the post-thaw quality of sheep semen could be improved after the addition of resveratrol to the freezing extenders,which might be related to the antioxidant properties of resveratrol.But,the cryoprotective effects of resveratrol dependents on its used doses,and the optimal concentration was 10 μmol/L based on this present study.However,excessively high concentration of resveratrol could aggravate cryodamage on sperm.In addition,the protective effects of resveratrol on sheep sperm still needs to be verified by in vitro fertilization and artificial insemination.     

白藜芦醇对绵羊冷冻精液质量的影响

试验旨在研究白藜芦醇对绵羊冷冻精液质量的改善效果。采用假阴道法采集6只云南半细毛羊精液,用含不同浓度（0、0.1、1、10、20 μmol/L）白藜芦醇的Optidyl稀释液稀释后进行细管分装,低温平衡和液氮气相预冻后,在液氮中保存30 d。解冻后测定精子活力、质膜完整性、磷脂酰丝氨酸（PS）分布、顶体完整性和活性氧等指标。结果表明,解冻后10 μmol/L白藜芦醇组精子总活力、直线运动百分率、精子弯尾率分别为76.14%±0.97%、43.56%±0.91%、43.24%±1.68%,均显著高于其他各组（P<0.05）;而20 μmol/L白藜芦醇组精子总活力、直线运动百分率、精子弯尾率分别为21.78%±0.79%、25.23%±1.34%、4.84%±0.68%,均显著低于其他各组（P<0.05）。10 μmol/L白藜芦醇组精子顶体完整性最高,为50.47%±0.91%,显著高于其他各处理组（P<0.05）。PS分布结果表明,10 μmol/L白藜芦醇组正常精子百分率为46.43%±2.95%,显著高于20 μmol/L组（31.14%±3.56%,P<0.05）,与其他各组无显著性差异（P>0.05）。20 μmol/L白藜芦醇组PS标记率（39.82%±3.38%）显著高于其他处理组（P<0.05）。活性氧试验结果表明,10 μmol/L白藜芦醇组正常精子（63.57%±0.71%）显著高于其他各组（P<0.05）;而20 μmol/L白藜芦醇组正常精子（32.45%±1.42%）显著低于其他各组（P<0.05）。综上,在冷冻稀释液中添加白藜芦醇可以改善绵羊冷冻精液品质,这与白藜芦醇的抗氧化特性有关。但是,白藜芦醇的冷冻保护效果具有明显的浓度依赖性,其最佳作用浓度为10 μmol/L,过高浓度的白藜芦醇反而加重精子的冷冻损伤。此外,对于白藜芦醇对绵羊精子的抗冻保护效果仍然需要体外受精或人工授精验证。     

小尾寒羊精液保存技术研究

为了充分发挥种公羊的生产潜力,快速扩繁优良群体,本实验以取材方便的小尾寒羊为实验动物,对其精液采用室温、低温和细管法冷冻3种保存方法进行了研究。结果表明:在低温(4±0.5)℃条件下稀释保存小尾寒羊精子,显著优于室温(23±2)℃条件下的保存效果。其中采用II液低温保存绵羊精子的时间和活率(168 h,0.35)显著优于III液(72 h,0.30)I、V液(48 h,0.35)和I液(18 h,0.42)。而采用III液冷冻保存绵羊精液,其解冻后活率(0.532±0.004)极显著高于IV液(0.470±0.003)I、液(0.445±0.004)和II液(0.432±0.012)3种冷冻稀释液(P<0.01)。4种冷冻稀释液冷冻解冻后的精子,均能在室温下6 h内保持0.35以上的活率。     

番茄红素对秦川牛精液冷冻保存及鲜精品质影响

旨在探究番茄红素对秦川牛精液冷冻保存和新鲜精液品质的影响,为番茄红素作为新型精液稀释液添加剂和种公畜日粮添加剂提供依据。本研究采集3头年龄3~5岁健康状况良好秦川种公牛的新鲜精液混合,用0、1、2、3、4 μmol·L^-1浓度的番茄红素稀释液冷冻保存;利用计算机辅助分析仪、低渗肿胀检测法、花生凝集素荧光标记检测法、罗丹明荧光检测法等检测精子的运动性能、顶体完整率、质膜完整性、线粒体活性和抗氧化性能;在秦川种公牛日粮中添加15 mg·kg^-1 BW番茄红素,检测饲喂前后秦川种公牛的新鲜精液品质和血清抗氧化指标。结果表明,在秦川牛精液冷冻保存过程中添加番茄红素可以显著提高冷冻-解冻后精子的活力、顶体完整率、质膜完整性和线粒体活性以及抗氧化酶CAT和GSH-Px酶活性,显著降低精子中MDA含量,且番茄红素的最适添加浓度为2 μmol·L^-1(P<0.05);饲喂15 mg·kg^-1 BW番茄红素后,与饲喂之前相比,秦川种公牛的精子活力显著提高(P<0.05),精子畸形率显著降低(P<0.05),血清中抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px酶活性显著增加(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05)。综上所述,一定浓度的番茄红素对精子在冷冻过程中造成的精子损伤和秦川牛机体应激造成的繁殖性能降低具有良好的保护作用,这可能与番茄红素通过抗氧化作用减少精子在冷冻-解冻过程中的氧化损伤和提高动物机体的抗氧化能力有关。     

甘油和海藻糖对低温保存精液品质的影响

为了研究低温保存下海藻糖和甘油对牛精液品质的影响,本试验选取了宁夏四正生物技术公司的健康荷斯坦种公牛的精液,在低温保存液里分别添加5%的甘油以及0.028mol/L、0.014mol/L、0.0416mol/L的精液保护剂海藻糖为试验组,以不添加试剂的低温保存精液为对照组,对保存不同时间的精液品质进行测定。结果显示添加甘油的试验组精子活力低于对照组,但差异不显著（P〉0.05）。海藻糖浓度为0.0416mol/L组的精子畸形率低于对照组及其他海藻糖组,并且差异显著（P〈0.05）;海藻糖组与对照组精子活力相比,在24h、48h、72h时差异不显著（P〉0.05）;在96h、216h、240h时差异显著（P〈0.05）,其活力下降明显。     

海藻糖对猪精液冷冻保存效果的影响

在传统的Tris-柠檬酸-葡萄糖稀释液基础上，分别添加25％、50％、75％、100％的海藻糖，研究不同浓度海藻糖对猪精液冷冻后精子质量的影响。结果表明，海藻糖相对于对照TCG稀释液能够显著改善和提高猪精液的冷冻效果，其最佳添加浓度为25％，冷冻-解冻后猪精子活力、活率、线粒体活性、质膜完整性以及顶体完整率均显著提高（P〈0．05），分别达到41．38％、46．34％、44．56％、43．51％和64．09％。海藻糖可以明显抑制精子获能，获能处理前精子获能率仅为3．68％，而获能处理后达到41．82％，有利于促进精子获能。精液稀释液中甘油的适宜添加浓度为2％，海藻糖只有与甘油共同作用，才能在冷冻-解冻过程更加有效地保护精子。猪精子活力、活率、线粒体活性、质膜完整率、顶体完整率等之间存在极显著的正相关关系（P〈0．01），而与获能处理前精子的获能率存在显著的负相关关系（P〈0．05）。     

维生素C对荷斯坦公牛X精子冻后品质的影响

试验旨在研究维生素C（VC）对荷斯坦公牛性控精液冻后品质的的影响。在精液稀释液中分别添加0,2.0,4.0,6.0,8.0 mg/mL的VC进行试验。将装有X精子的细管冻精解冻（37.5 ℃,30 s）后分析0～3 h精子活率及0～4 h质膜完整率和顶体完整率的变化情况。结果表明,当添加量为6.0 mg/mL时,解冻后0 h精子活率与对照无差异显著,解冻后1、2、3 h精子活率与对照组差异显著（P<0.05）。当VC的添加量为4.0 mg/mL时,解冻后0 h时X精子质膜完整率显著高于对照组(P<0.05),解冻后1 h与对照相比差异不显著（P>0.05）,但数值依然高于对照组。解冻后存放2、3、4 h与对照组相比差异显著。添加量为6.0 mg/mL时,解冻后0 h时X精子顶体完整率显著高于对照组(P<0.05),解冻后1、3 h精子顶体完整率与对照组相比差异显著（P<0.05）,2、4 h与对照相比差异不显著（P>0.05）,但顶体完整率高于对照组。在冷冻精液稀释液中VC的适宜添加量为4～6 mg/mL,此浓度下可有效提高荷斯坦公牛X精子解冻后活率、质膜完整率及顶体完整率。     

驴精液冷冻保存技术研究进展

驴的精液冷冻保存技术是在马的基础上逐渐发展起来的,特别在近十年来,有关研究明显增多,在诸多方面取得了积极的成果。文章主要以驴精液冷冻保存技术环节的发展为侧重点,就其研究成果进行了总结。     

二甲基甲酰胺对猪精液冷冻保存效果的影响

用二甲基甲酰胺(DMF)完全替代甘油,比较不同平衡时间和不同DMF添加量对猪精液冷冻保护效果的影响。结果表明,DMF能完全替代甘油,获得较好的冷冻保护效果。最佳平衡时间为90 min,解冻后精子活力为(44.57±0.72)%,显著高于对照组和其他组(P0.05)。当DMF添加量为5%时,冻后精子活力、活率、线粒体活性、顶体完整率和质膜完整率分别为(49.91±0.39)%(、46.51±0.26)%、(47.51±0.52)%(、49.84±0.56)%、(46.30±1.61)%,均显著高于2%、3%、6%DMF添加组(P0.05),但与4%DMF添加组相比,冻后精子活力、活率和质膜完整率差异不显著(P0.05)。本试验结果表明,DMF最适添加量为5%。     

维生素E对秦川牛冷冻精液的抗氧化保护作用

本试验旨在研究维生素E对秦川牛细管冷冻精液品质和精浆中抗氧化酶活性的影响.在稀释液中分别添加0.00、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 mg·mL~(-1)的维生素E,将细管冻精解冻(37.5℃,30 s)后用伟力精子分析系统分析精子活力和精子顶体完整率等标准参数,并用相关试剂盒测定精浆中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、谷胱甘肽还原酶(GR)和过氧化氢酶(CAT)的活性.结果表明:当维生素E添加量为0.04mg·mL~(-1)时,精子活力与对照组相比差异显著(P<0.05),SOD、GSH、CAT 3种酶活性与对照组相比差异显著(P<0.05).当维生素E的添加量为0.06 mg·mL~(-1)时,冷冻-解冻后精子活力显著高于对照组(P<0.05),顶体完整率极显著高于对照组(P<0.01);GR和CAT酶活性与对照组相比均差异显著(P<0.05).当维生素E的添加量为0.08 mg·mL~(-1)时,精子活力、活率及顶体完整率与对照组相比差异显著(P<0.05),GSH与对照相组比差异极显著(P<0.01),GR及CAT与对照组相比差异显著(P<0.05).在冷冻精液稀释液中添加维生素E可以有效提高冷冻-解冻后秦川牛精液品质及精浆中SOD、CAT、GSH、GR酶的活性,稀释液中维生素E的适宜添加量为0.04～0.08 mg·mL~(-1).     

维生素B12、E和C在家畜精液保存中的应用

家畜精液保存时,向稀释液中添加一定量的维生素B12、E或C,在提高精液品质方面具有重要的作用。精液稀释液中添加维生素B12,具有维持精子顶体完整率,延长精子体外存活时间和提高解冻后的精子活力的作用。维生素E是重要的抗氧化剂,能通过抑制自由基的形成,阻止诱发的膜脂质发生过氧化,从而维持精子顶体膜的完整,提高精子顶体完整率和降低精子畸形率;维生素E还能防止精子发生冷休克,提高冻精解冻后的精子活力,从而提高受精率。维生素C作为抗氧化物质,能有效地防止冷冻精子磷脂发生过氧化,提高解冻后的精子活力,延长精子在体外存活的时间;维生素C的抗氧化作用还表现在能够保护精子细胞中的遗传基因DNA免受氧化破坏。     

影响猪精液液态常温保存的主要因素

人工授精技术的广泛应用,对生猪产业又好又快的发展起到了积极作用。由于现代快递业的飞速发展和猪同期发情技术的成熟,液态保存的精液可以在全球范围实施人工授精。与冷冻保存相比,常温保存有着无可替代的优势,提高良种公猪遗传资源的利用率与猪精液的常温保存技术密不可分。从温度、季节、稀释液添加物质等方面对猪精液液态常温保存进行了综述。     

不同品种、月份、月龄及采精间隔对猪精液品质的影响

为研究不同品种、采精月份、采精月龄和采精间隔等因素对加系公猪精液品质的影响,以及品种、初次采精周龄对精液质量稳定性的影响,本研究以江西某种公猪站79头加系大白猪、长白猪、杜洛克猪种公猪为试验群体,收集2018年12月至2020年12月3 921条精液采集与精液质量数据,通过混合线性模型与方差分析探究各因素对精液量、精液密度、精子活力、总精子数及其稳定性的影响。结果显示,从不同品种对精液质量的影响来看,长白猪精液量和总精子数均高于大白猪、杜洛克猪,但杜洛克猪精液密度高于长白猪、大白猪,杜洛克猪精子活力最低;从不同月份来看,1~3月采精精液密度最高,4~6月采精精子活力最高,10~12月采精精液量和总精子数最高,精液量呈现秋冬多、春夏少的季节变化规律。公猪不同月龄采精,精液质量指标也存在差异,月龄越小精液量越低,但精液密度偏高,精子活力相对较好,在19~24月龄黄金期总精子数最高。不同采精间隔对精液质量有较大影响,采精间隔越长,精液量、精液密度、精子活力和总精子数相对较好,采精间隔为5 d时综合性能最佳,但过长的采精间隔导致精子活力降低。品种影响总精子数稳定性,长白猪、大白猪总精子数稳定性显著优于杜洛克猪（P<0.05）。本研究结果表明,品种、采精月份、采精月龄和采精间隔均会影响公猪精液质量,关注这些因素有助于公猪站制定更完善的生产计划,提高公猪利用率。     

AMPK激活剂在绵羊精液冷冻保存中的作用研究

旨在研究AMPK激活剂二甲双胍（metformin,Met）和阿卡地新（acadesine,AICAR）对绵羊精液冷冻保存效果的影响。本研究首先在冷冻基础稀释液中分别添加不同浓度（0、100、200、300、400、500 μmol·L^-1）的Met和AICAR,冷冻解冻后根据精子活力、运动性能和结构完整性指标筛选出最佳的添加浓度（400 μmol·L^-1 Met、200 μmol·L^-1 AICAR）;然后分别使用不同的冷冻稀释液（对照组：稀释液;Met组：含400 μmol·L^-1 Met的稀释液;AICAR组：含200 μmol·L^-1 AICAR的稀释液）冷冻精液,解冻后检测精子中AMPK蛋白表达、顶体酶活性、代谢指标、线粒体功能以及抗氧化酶活性。结果表明,稀释液中添加400 μmol·L^-1 Met和200 μmol·L^-1AICAR均可显著提高解冻后精子活力、运动性能及精子结构完整性（P<0.05）,其中400 μmol·L^-1 Met组精子总活力达43.20%,顶体完整率为91%,质膜完整率为46%。与对照组相比,Met组和AICAR组解冻后精子中AMPK磷酸化水平显著升高（P<0.05）;顶体酶活性显著提高（P<0.05）;丙酮酸水平显著下降（P<0.05）,乳酸脱氢酶活性、乳酸以及ATP含量均显著升高（P<0.05）;与对照组相比,Met和AICAR组稀释液更有利于维持线粒体膜电位（P<0.05）,提高ATP酶（P<0.05）以及抗氧化酶的活性（P<0.05）。添加适当浓度的AMPK激活剂可以提高绵羊精液冷冻保存的效果。     

Study on the Role of AMPK Activator in Cryopreservation of Sheep Semen

This study aimed to investigate the effects of AMPK activators metformin (Met) and acadesine (AICAR) on sheep semen cryopreservation. Firstly, Met and AICAR with different concentrations (0, 100, 200, 300, 400, 500 μmol·L^-1) were added into the frozen diluent. After freezing and thawing, the optimal concentration (400 μmol·L^-1 Met, 200 μmol·L^-1 AICAR) were selected based on sperm motility, motion performance and membrane integrity; Secondly, the collected semen was froze using different frozen diluents (control group:diluent; Met group:diluent + 400 μmol·L^-1 Met; AICAR group:diluent + 200 μmol·L^-1 AICAR). After thawing, the sperm AMPK protein expression, acrosomal enzyme activity, metabolic index, mitochondrial function and antioxidant enzyme activity were examined. The results showed that the addition of 400 μmol·L^-1 Met and 200 μmol·L^-1 AICAR could significantly improve sperm motility, motion performance and membrane integrity(P<0.05) after thawing. In 400 μmol·L^-1 Met group, the total sperm motility, acrosome integrity rate and plasma membrane integrity rate were 43.20%, 91% and 46%, respectively. Compared with the control group, the level of AMPK phosphorylation in the sperm of the Met and AICAR groups was significantly increased after thawing (P<0.05), the acrosome enzyme activity of sperm was significantly increased(P<0.05); the pyruvate level was significantly decreased (P<0.05), the lactate dehydrogenase activity, lactic acid content, and ATP content were significantly increased(P<0.05). Compared with the control group, the dilution of Met group and AICAR group was more conducive to maintain mitochondrial membrane potential (P<0.05), increase ATPase and antioxidant enzyme activity (P<0.05). The addition of appropriate concentrations of Met and AICAR could improve semen quality of cryopreservation in sheep.     

聚乙烯吡咯烷酮对公猪精液冷冻的影响

试验旨在评价聚乙烯吡咯烷酮（polyvinylpyrrolidone,PVP）对公猪精液冷冻的影响。试验分为5组,分别为对照组（不添加PVP）和PVP处理组（在冷冻基础液中分别加入0.25%、0.50%、1.00%、2.00% PVP）。采用手握法采集松辽黑猪精液,用5种冷冻基础液稀释,在25 ℃平衡1 h,17 ℃平衡2 h,4 ℃平衡3 h后灌装于0.5 mL细管中,在液氮上方3 cm处熏蒸10 min,保存在液氮罐中30 d后进行检测。样本解冻后分别检测精子活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体活性、DNA完整性、过氧化氢酶（catalase,CAT）活性、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathioneperoxidase,GSH-Px）活性、活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平及丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平。结果显示,与对照组相比,冷冻基础液中添加0.50% PVP显著提高冻融后精子的活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体活性、CAT活性、SOD活性、GSH-Px活性（P<0.05）,显著降低精子ROS和MDA水平（P<0.05）;与对照组相比,添加PVP有利于提高DNA完整性,但差异不显著（P>0.05）。因此,猪精液冷冻基础液中添加PVP可改善冻融后精子质量,添加0.50%效果最佳。