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转无毒基因马铃薯抗晚疫病的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
晚疫病菌(Phytophthora
infestans)引起的马铃薯晚疫病是危害全球马铃薯生产的严重病害.通过基因工程方法把外源基因导入植物体内以增强抗病性被证明是一条行之有效的途径.应用植物基因工程技术将具有能激活植物自身防御系统的无毒基因与适合于植物背景、非专一性的病原物诱导启动子组合成嵌合基因构建到植物表达载体中.通过农杆菌或基因枪的介导转化植物,可筛选出高效广谱的抗真菌和细菌病害的转基因植株.本研究从病原细菌Pseudomonas
syringae PV.tomato中获得的无毒基因avrD(0*93kb)和从病原真菌Phytophthora
parasitica中获得的无毒基因Elicitin(0.294kb)分别与非专一性病原物诱导启动子Pill和BG组成含2个嵌合基因(Pill-avrD,BG-Elicitin)的植物表达载体pYH144和pYHEt.通过农杆菌LBA4404介导转化马铃薯,其中用pYH144载体转化2个品种(克新1号,2号),用pYHEt载体转化3个品种(Desiree,克新2号,4号),通过组织培养分别获得潮霉素(HygromycinB)标记的转基因马铃薯试管苗.将转基因试管苗扩繁,应用马铃薯脱毒微型种薯生产技术获得转无毒基因微型薯,在温室(15~25℃和湿度高)条件下,观察转无毒基因马铃薯植株中对晚疫病菌自然感染的抗性.1998年和1999年(每年的3-5月)的温室试验初步表明用avrD和elicitin基因分别转化的转无毒基因马铃薯植株都具有较明显的对晚疫病菌侵染的抗性,大部分转基因植株不表现或表现轻微的感病症状,对照植株(未转化)则表现明显的感病症状.转基因植株生长正常,且在感染后期(恢复期)生长良好.对照植株在恢复期生长弱和缓慢.在获得较多数量的转无毒基因马铃薯微型种薯的时候,将进行人工接种晚疫病菌和田间种植试验,从中筛选出抗真菌病和细菌病的转基因马铃薯株系. 相似文献
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表达葡萄糖氧化酶基因抗晚疫病马铃薯的培育 总被引:7,自引:0,他引:7
葡萄糖氧化酶催化分子氧氧化b-D葡萄糖产生葡萄糖酸和H2O2。产生H2O2和其它活性氧物质是植物对病原体侵入的防御反应。实验证明H2O2水平升高不仅可诱发细胞过敏坏死反应,而且还能激活抗病基因表达如植物抗毒素及诱导病原相关蛋白(PR)等基因的表达。通过农杆菌介导将来自黑麴霉(Aspergillus niger)的葡萄糖氧化酶基因转入2个马铃薯重要栽培品种大西洋(Atlantic)和夏普蒂(Shepody)中获得23个转基因株系,其中75%为Kan抗性植株。在23个转基因株系中有16个株系可用PCR扩增出目的基因。进一步用核酸斑点杂交选出13个杂交阳性株系。转基因植物总DNA的Southem blot分析表明,GO基因已整合到马铃薯四倍体基因组中,转基因大西洋植株中目的基因为2-4个拷贝,而夏普蒂转基因植株中为1个拷贝。将转基因植株离体叶妆种呼和浩特地区流行的Phytophthoro infestans的复合生理小种1,3,4孢子。结果表明,和未转基因对照组相比转基因植株病斑出现时间晚,病斑扩展速度慢,发病程度轻,感病叶片少。总体上表现出较明显抗病性。转基因大西洋中抗性株系多于夏普蒂。转基因马铃薯植株体内H2O2含量测定表明,转基因马铃薯植株的根系和叶片在KI-淀粉培养基上数天后变为蓝色,而未转基因对照植株的根系和叶片变化不明显。试验表明,转基因马铃薯植株对晚疫病的抗性和体风H2O2含量水平呈正相关。还对马铃薯转化中再生小植株诱导,转基因植株中GO基因拷贝数,对晚疫病抗性的鉴定以及表达葡萄糖氧化酶基因的转基因马铃薯产生抗性的机理等问题进行了讨论。 相似文献
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为筛选适宜威宁生态气候条件、较抗马铃薯晚疫病的品种,选择12个品种进行对比试验,中抗晚疫病且产量高于对照威芋3号的3个品种分别是会-2产量42.38t/hm2,比对照增产27.15%;3810产量37.60t/hm2,较对照增产12.81%;威芋4号产量34.57t/hm2,比对照增产3.72%。其余品种均较对照减产,且感晚疫病。 相似文献
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[目的]筛选出适合大方县气候特点且具有较好的晚疫病抗性和丰产性的马铃薯品种,为其在大方县的推广提供依据。[方法]2012~2014年对大方县6个马铃薯主栽品种(威芋3号、威芋5号、会-2号、宣薯2号、毕引1号、米拉)进行晚疫病抗性监测。[结果]威芋5号、毕引1号和会-2号的抗性表现为中抗(MR),比较稳定,且丰产性最好;宣薯2号和威芋3号均表现为中感(MS),丰产性一般。[结论]威芋5号、毕引1号和会-2号适宜大方县气候特点,具有较好的抗性和丰产性,适合在大方县推广种植。 相似文献
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马铃薯晚疫病病菌对瑞毒霉抗性的研究 总被引:6,自引:1,他引:6
通过研究马铃薯晚疫病菌对瑞毒霉不同抗性菌株,结果表明抗性菌株在转移过程中,其对瑞毒霉的抗性程度不变,在叶片上接种,高抗菌株其病斑面积显著大于较敏感菌株,但它们在侵染频率上没有显著差异。薯块在4℃,12℃,18℃,25℃贮存过程中,在低温条件下,不同敏感菌株在薯块上的存知力没有显著差异,随温度升高,敏感菌株相对抗性菌株有较强存活力,成为下一个季节主要侵染来源。 相似文献
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[目的]明确马铃薯种质资源对晚疫病的抗感性,为在江西省选育推广和合理布局抗病马铃薯品种及对晚疫病进行综合治理提供科学依据.[方法]采用室内离体叶片接种法和田间自然病圃法对35份马铃薯种质材料进行晚疫病抗性鉴定,综合评价参试材料的抗感性.[结果]参试材料中,费乌瑞它、中薯3号、中薯10号、中薯13号、08HE042-2、N157、N108和D692等8份材料在两种试验方法中均表现为高感,而中薯17号、07HE147-4、07HE005-06、D516、07HE169-1和D504等6份材料表现为高抗或抗病.聚类分析结果表明,除08CA0687、中薯5号、中薯11号和D545等4份材料在两种方法中的鉴定结果存在差异外,其余材料的鉴定结果基本一致.[结论]马铃薯离体叶片对晚疫病的抗病性可基本代表成株期的抗病性.07HE147-4、07HE005-06、D516、07HE169-1和D504等高抗或抗病材料可作为马铃薯抗病育种的亲本材料,华薯3号、中薯7号和中薯17号等高抗至中抗晚疫病可在江西省内推广种植. 相似文献
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通过对安定区10个供试马铃薯品种晚疫病抗性调查,庄薯3号和陇薯7号对晚疫病的抗性好,为抗病品种;青薯9号、陇薯10号和丽薯6号为中抗品种。综合考虑各方面因素,建议在安定区大面积推广种植抗晚疫病品种青薯9号。 相似文献
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为了筛选产量高、高抗晚疫病性,适宜在施秉县大面积推广的马铃薯品种,特在适宜马铃薯种植和晚疫病流行的城关镇白塘村,对5个主栽马铃薯品种作田间抗性鉴定。结果表明:中薯3号、威芋3号、会-2号对晚疫病表现为中感,产量在1 000 kg/亩以上,大薯率高,生产上可与其他品种轮换种植。费乌瑞它表现为感病,产量为1 156.3 kg/亩,产量高,生育期短,大薯率高,如生产上大面积种植,需加大晚疫病的监测与防治力度;米拉表现中抗,产量为982.5 kg/亩,产量低、大薯率低,不建议大面积推广种植。 相似文献
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目前研究者大都采用愈伤组织诱导法或水培法进行马铃薯抗性的早期评价,受自然因素影响较大。本试验以无菌试管苗和马铃薯晚疫病菌分泌物为实验材料,建立试管苗室内评价技术体系并通过分泌物接种试验探测其可行性,以便用于早期抗性资源的评价,缩短育种周期。本试验在无菌条件下进行,将健康试管苗植于含有马铃薯晚疫病菌株XH05 5=4分泌物的MS培养基中培养,培养1个月后,调查其生长情况。结果表明:马铃薯试管苗在接种分泌物培养1个月后,处理组试管苗明显矮于空白对照组试管苗。处理组试管苗叶片有褐变现象,同时根的分化受阻。不同品种(系)做同样处理后株高比空白对照组的株高减少的程度不同,可得知不同品种(系)的马铃薯试管苗的抗性不同。因此,用分泌物接种试管苗来进行抗性评价是可行的,有利于进行对抗性资源的早期评价,减少抗病育种的工作量,缩短育种周期。 相似文献
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甘肃省马铃薯晚疫病菌生理小种鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
对2009年采自甘肃省17个地点的63个马铃薯晚疫病菌株进行生理小种类型的鉴定.结果表明:小种4.6.7.11的出现频率达28.57%,出现频率最高,分布最广,是2009年甘肃省马铃薯晚疫病菌株的优势小种.而小种1.3.4.5.6.7.8.10.11含有的毒力基因数目最多,单毒力基因的生理小种只有4号.从生理小种的毒力... 相似文献
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通过对20个马铃薯参试品种的晚疫病品种抗性监测研究试验,旨在筛选出对马铃薯晚疫病抗性强、产量高的品种。试验结果表明,会-2、威芋3号、威芋5号、冀章薯8号、威薯002、X-24、滇薯3号等7个为代表的品种抗性较强,产量较高,可以大面积推广应用;BPHF101、20—4—5、合作88、BP05-003、BP06、滇黔薯6号、滇黔薯23号、20—4—9、宣薯2号等9个品种对马铃薯晚疫病抗性较弱,但产量高,可在马铃薯晚疫病发生较轻的地区搭配使用。2-30和费乌瑞它2个品种对马铃薯晚疫病抗性差,但大、中薯比例高,较均匀,商品性价比高,种植时,需加强马铃薯晚疫病的预警及防控工作。 相似文献
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马铃薯晚疫病是由疫霉引起的一种世界性的流行性和毁灭性病害,每年造成巨大的产量损失.抗性品种培育一直是育种学家追求的目标.常规育种方法具有耗时费力等特点,目前分子植物育种在马铃薯晚疫病抗性育种中被应用或作为辅助应用.综述了马铃薯晚疫病的发生及防治,分子标记技术在马铃薯晚疫病抗性和晚疫病抗性育种中的研究进展,以及马铃薯晚疫... 相似文献
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